資源簡介

代生物利技
第一講基因工程
重點難點突破
破
種容易混淆的酶
突破二目的基因的獲取方法
下表中的
成
從部分基因
PCR
文庫中獲取
形成黏性末端或
磷酸二酯鍵
成重組D
連接醇DNA分子片段磷酸二酯鍵
多
蛋白質的
↓反轉錄基酸序列
形成
聚合酶脫氧核苷酸
磷酸二酯鍵
推測
補
水解酶D
磷酸二酯
反轉錄
形成單鏈D
堿基對
組
物起始
典型例題
〈例1[長沙市明德中學測驗]下列
有關酶
環
↓分離
限制酶水解相鄰核苷酸間的化學鍵切
A連接酶
末端堿基互衤
片段連接
C.DNA聚合酶能夠從引物
或RNA
錄酶以一條
專一性強
不存在的
酶只能從引物末端延仲D
根制
解相鄰核苷酸間的化學鍵
程麻
連接起來
操作過程較
存技術要
為模板合成互
麻煩,技術要
過高
訓
典型例題
圖
分子在不同酶的作用下所發生的變化,圖中依次
例2》[泉州市第五中學期中]下圖
示從細菌細胞
表示限制酶
A連接酶、解旋酶作用的
的基因的兩種方法
的是
TIIIE
①②③④
A.甲方法可建立該細菌的基因組文
方法可建立該細
代生物科技專題
C.甲方
脫氧核苷酸為原料
典型例
例3[福建省漳州第一中學測驗]下列
析甲方法是
否轉移成功的方法中,不屬于分子水平的檢測的是
建立該細菌的基
通過害蟲吃棉葉看其是否死
建立該
氧核
物基因組D
為原料,且需要反轉錄酶參
C.轉基因生物
的
探針能否形成雜
用人胰島
過核酸分子雜
的成功表達在
技術從中篩選目的基因,篩選過程
兌法
交,檢目的基因
棉葉看
是否死亡,屬于個體生物學水平的檢測
m③e
探針的應
依據的原理
雜交是指D
在合適的條件下能和
如果對最初的DNA片段進行標記,即成為探
B.圖中的菌落是通過稀釋涂布法獲得的
定
株
從該
篩選到肜
糖素基因
代種群
種方法檢出的
基因植株的比例
破
的是
檢測內容
分子雜交
進入受體細胞
體雜交總蛋白質
質
分子雜交技術
日的基因是否
灑除
抗除草劑
蛋白質
病的接種實驗,以確定是否具有
功能進
經典真題呈現
題型
基因
對重金屬污染的土壤進行生物修復,研究者將
隆的重金屬轉運蛋
3)基因與外源高效
基因工程的敘述,正確的是
A.若受體大腸桿菌含有構建重組質粒時用到的限制性核
該重組質粒進
本并保持結構穩定
B.抗除草劑基因轉入某抗鹽植物獲得
鑒定為抗除草劑抗鹽和抗除草劑不抗鹽。表明
抗鹽性的改
除草劑基因的轉入無關
表
除草劑基因轉入某植物獲得轉基因植株,其DNA檢測均
為檢測獲得的轉基因楊樹苗中是否含有導
含日的基因,抗性鑒定為抗除草劑和不抗除
同時避免內源HMA3基因的干擾,在進行PCR擴增時,應選定是前者表達了抗
D.已知不同分子量D
同
為一條帶。用某種限制性核酸內切酶完全酶切環狀質粒參考答案
代生物科技專題
點難點
解析
酶可在
切
A聚合酶在
分子復制時將脫氧檳苷酸連接成脫氧柲
鏈;
艮制酶切開的硨酸二酯鍵連接
起;解旋
作用是
解開螺旋,為復制或轉錄
模板
錄形成
需要逆轉錄酶
析可知
布法獲得的,B正確;核酸
胞中控制胰高血糖
表達,因
獲得胰高
體外大量擴增
基
轉錄,則
雜交檢
測目
因轉錄產物,含量不一定多
除
則噴灑除草劑檢
除草劑幼苗出現的概率較低
檢出的含目的
經典真
克隆的重金
基因楊樹
和高效啟動子,需
要檢測是否含有高效啟動子序列和HMA3基因
的引物組合
解析
受體大腸桿菌含有構建重組質粒時用
酶,則該酶會
物,獲得了抗除草劑抗鹽
和抗除
鹽
系
詩基
基因,但存
考總
抗除草劑和不抗除
明目的基因
成蛋白質產
基因未轉錄出
或轉錄
未能
答案
胞質基
翻譯成蛋
錯誤;某種限制性
酶切環狀質
膜、細胞壁
狀質
3.【解析
知,兩種限制性核酸內切酶切
密個密個密個密個密個密個密個密個密
DNA分子的不同部位,說明兩種服制性核酸內切酶識別的
對
切產物是
于構建重
知,該DNA片段
TGITGCIGGCITCAIC
酶
處
核酸
酶
作用的是雙
圖中被
酸內切酶大多特異性
被改被
核苷酸序列,但也有少數
性核酸
酶能識
造的造的造的造的
或8個核苷酸序列
溫度周期性變化是
碼密碼密碼密碼
條件。另外
在延伸階段發揮催
變性和復
程不需要酶的
居圖分析
有7個硫基發生了替換,故有第
質粒上的抗生素抗性基因可作為標記基因
碼子發生了硫
換
胰島素A、B肽鏈編
不是抗生素合成基因。D項
碼序列
段短肽編碼序列后不應破壞其正常功能
常表
案
種
酶愈傷組織
過短,其翻譯成的多肽鏈將
)繼代
發根農桿菌轉速
失
確;如果
的短肽編碼序列含有終止密
種類和濃度
的翻譯過程將提前結束,氨基酸數目
從而導致蛋白質失效,B正確;由題干分析可知,加入短肽編
的遺傳多樣性和保證藥材的品質
的是使
肽鏈等比例表達,并不應該改變
林下種植,是利用間種技
析題意可知,從
鏈的氣基酸序列,更不能改變原人胰
的抗原性
DNA復制需妥
聚合酶
知,酚羹化合物誘導發根農
酶切位點
酶切位點
這兩種酶充分
系列基因表達,形成D
性核
酶切重組表達載體后將產生三個短鏈(注意線型的
居植物
培養技術過
被
使葉片
脫分化形成愈傷組織,再
根。(3)剪取毛
的回體培
酸菌為原核生物,沒有細胞核
代培養,培養基
核糖體一種細胞器,再結合題意,所形成的蛋白質最終
農
轉入液體培養基、置于搖床
分析可知,蛋白質在核糖
懸浮培養,遒過控制搖床的轉遠和溫度,調節培養基成分中的
經細胞質基質后,先
胞膜再分布到細胞壁
(5)根據
的種類和濃度,獲得
疫調節基礎知識判
性生
抗
于提取藥用成
噬細胞只有識荊能力,但并
案
雄性原核較大,更容易容納外源D
2)引物
別能力;漿細胞沒有識別能力,其分泌的抗
雖然有特異
能力,但是
因生物中提取蛋白質,用相應的抗體(對抗體進行同位素標構。綜合分析A、B選項正確
進行抗原一抗體雜
果出現雜交帶,表明目的
8.【答案
核酸內切酶和
不發生編碼直鏈
來自精子的雄性原核較大,更容易容納
粉合成酶的堿基
不含啟動子(3)逆轉錄(反轉錄)
因此外源基因能夠容易整合到精子的染色體上,這是提
物是根據
知序列設計合成的(引物能
轉化率的關鍵
對胚胎的性
有效
DNA特異性結合)(4
隹確的方法是
最少,控制合成的直鏈淀粉合成酶
鏈淀粉
囊胚中取出
養層細胞,提取
然后用位于Y染
決定基
硫基作引物,在熱
析】(1)將目的基
建基因表達載體
要限制酶的
目的基因插入載體時
連
板,進行PCR擴增,再用SR
探針檢測擴
連接
載體進入水稻鈿胞并在細胞內維持穩定和表
增產物,與SRY特異
計出現陽性反應者,說明其含有
程叫做轉化
合
酶識別并結合的位點,如果啟動
胚胎
代轉基因小鼠中是否成
合和識別
影響基因
錄水平,在真核生物
達,常用的分子檢瀾方法
編碼蛋白質的序列是基因中編碼區,編碼區
包括啟動
本步驟
中提取蛋白質,用相應的
體子序列,因此直鏈淀粉合成酶的基因堿基序列中不含有啟動
進行同位素標記)進行抗原一抗體雜交,如果出現雜交帶,表
合成直鏈淀粉酶的氨

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