資源簡(jiǎn)介

高二生物
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題目 第一章 發(fā)酵工程 第2節(jié) 微生物的基本培養(yǎng)技術(shù)
學(xué)習(xí)目標(biāo) 1.掌握培養(yǎng)基的作用、分類及營(yíng)養(yǎng)成分。 2.區(qū)分消毒和滅菌,掌握不同物品的消毒和滅菌方法。 3.掌握配制培養(yǎng)基的步驟和倒平板操作的過(guò)程。
一、培養(yǎng)基的配制：
1.什么是培養(yǎng)基？
2.培養(yǎng)基分為哪兩類？各自的定義是？
3.培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成成分是？
4.某些微生物生長(zhǎng)還需要的特殊條件
二、無(wú)菌技術(shù)
獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止　 污染。無(wú)菌技術(shù)應(yīng)圍繞著如何避免雜菌的污染展開(kāi),主要包括:
1.消毒:是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或　 等方法殺死物體表面或內(nèi)部　 微生物。
2.滅菌:是指使用強(qiáng)烈的　 殺死物體　 所有的微生物,包括芽孢和孢子。
歸納拓展
芽孢是某些細(xì)菌生長(zhǎng)到一定階段,在細(xì)胞內(nèi)形成的休眠體。孢子是某些微生物的
繁殖體。
3.常用的消毒和滅菌方法
(1)常用的消毒方法有哪些？
(2)常用的滅菌方法有哪些？
歸納拓展
與煮沸消毒法相比,巴氏消毒法的優(yōu)點(diǎn)是在達(dá)到消毒目的的同時(shí),營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)損失少。三、微生物的純培養(yǎng)——以酵母菌的純培養(yǎng)為例
1.相關(guān)概念
(1)培養(yǎng)物:在微生物學(xué)中,將接種于培養(yǎng)基內(nèi),在合適條件下形成的含 　微生物的群體稱為培養(yǎng)物。
(2)純培養(yǎng)物:由　 繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。
(3)純培養(yǎng):獲得　 的過(guò)程就是純培養(yǎng)。
2.酵母菌的純培養(yǎng)
(1)酵母菌純培養(yǎng)的原理？
(2)方法步驟
a.制備馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基
i.配制培養(yǎng)基
ii.滅菌:培養(yǎng)基需要進(jìn)行　 滅菌,而培養(yǎng)皿需要進(jìn)行　 滅菌。
iii.倒平板:待培養(yǎng)基冷卻至　 ℃左右時(shí),在　 附近倒平板。倒平板的具體操作步驟:第一步,拔出錐形瓶的棉塞。第二步,將瓶口　 通過(guò)火焰。第三步,用拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條　 的縫隙,將培養(yǎng)基(10~20 mL)倒入培養(yǎng)皿,立即蓋上皿蓋。第四步,等待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿　 。
特別提醒
在倒平板的過(guò)程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,那么這個(gè)平
板不能用來(lái)培養(yǎng)微生物,因?yàn)榭諝庵械奈⑸锟赡茉诿笊w與皿底之間的部位滋生。
b.接種和分離酵母菌
通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面　 的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。經(jīng)數(shù)次劃線后培養(yǎng),可以分離得到　 。
平板劃線法操作步驟如下:
c.培養(yǎng)酵母菌
完成平板劃線后,待菌液被培養(yǎng)基吸收,將接種后的平板和　 的平板倒置,放入　 左右(培養(yǎng)溫度因酵母菌種類的不同而稍有差異)的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)　 。
【跟蹤訓(xùn)練】
1.下表是一種培養(yǎng)基的配方,此培養(yǎng)基提供的主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有(　易錯(cuò)　)
牛肉膏 蛋白胨 NaCl 瓊脂 水
0.5 g 1 g 0.5 g 2 g 200 mL
A.3類 B.4類 C.5類 D.6類
2.關(guān)于培養(yǎng)基中滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及O2的需求,下列敘述錯(cuò)誤的是(　深度解析　)
A.培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素
B.培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至堿性
C.培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性
D.培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)需要提供無(wú)氧的條件
3.在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過(guò)消毒和滅菌來(lái)避免雜菌的污染。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是(　　)
A.牛奶的消毒常采用巴氏消毒法
B.密閉空間內(nèi)的空氣常采用紫外線照射消毒
C.玻璃實(shí)驗(yàn)器具可以放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌
D.水廠供應(yīng)的自來(lái)水通常是經(jīng)過(guò)高錳酸鉀消毒的
4.微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染。下列無(wú)菌操作中,錯(cuò)誤的是(　　)
A.對(duì)實(shí)驗(yàn)用的培養(yǎng)基,采用高壓蒸汽滅菌鍋進(jìn)行滅菌
B.對(duì)錐形瓶、塞上棉塞的試管或吸管等,用干熱滅菌箱進(jìn)行滅菌
C.對(duì)操作者的雙手、衣著以及操作空間等,采用紫外線進(jìn)行消毒
D.對(duì)試管口、錐形瓶口等部位,通過(guò)火焰灼燒進(jìn)行滅菌
5.下列有關(guān)酵母菌純培養(yǎng)的敘述,錯(cuò)誤的是　(　　)
A.培養(yǎng)酵母菌的試劑和器具不都進(jìn)行高壓蒸汽滅菌
B.轉(zhuǎn)換劃線角度后需灼燒接種環(huán)再進(jìn)行劃線
C.為了防止污染,接種環(huán)經(jīng)過(guò)火焰滅菌,然后立即快速挑取菌落
D.酵母菌菌種分離使用的是固體培養(yǎng)基
8.下列有關(guān)平板劃線法的操作錯(cuò)誤的是　(　　)
A.將接種環(huán)放在火焰上灼燒
B.將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)液
C.蘸取菌液和劃線要在火焰旁進(jìn)行
D.劃線時(shí)要將最后一次的劃線與第一次的劃線相連
9.有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是(　深度解析　)
A.將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上
B.使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰
C.將培養(yǎng)皿打開(kāi),培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上
D.等待培養(yǎng)基冷卻凝固后,將培養(yǎng)皿倒過(guò)來(lái)放置
10.如圖是微生物平板劃線示意圖,劃線的順序?yàn)?、2、3、4、5,下列操作方法錯(cuò)誤的是(　　)
A.每次劃線操作后要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌
B.劃線操作應(yīng)在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行
C.第3次劃線操作可從第2次開(kāi)始劃出,也可從第1次開(kāi)始
D.在第4次劃線區(qū)域中也可以得到菌落
11.圖1是酵母菌純培養(yǎng)過(guò)程的一些步驟,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問(wèn)題:
　　　　　　　圖1　　　　　　　　　　　　圖2
(1)圖1中所表示的接種方法是 ,請(qǐng)用線條和箭頭在圖2空白圓圈內(nèi)畫(huà)出該方法接種的路徑示意圖。
(2)圖示接種方法的目的是 　。
(3)在進(jìn)行 和　　　 　操作之間要對(duì)用到的培養(yǎng)基作滅菌處理。
(4)滅菌是指 ,對(duì)培養(yǎng)基的滅菌需要在　　　　　　　　　　的條件下維持15~30 min。
參考答案
一、培養(yǎng)基的配制
1.人們按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。
2.液體培養(yǎng)基:不含凝固劑、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基。
固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑(如瓊脂)制成的培養(yǎng)基。瓊脂固體培養(yǎng)基是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一,微生物在其表面或內(nèi)部生長(zhǎng)形成肉眼可見(jiàn)的菌落。
3.營(yíng)養(yǎng)組成:各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源(提供碳元素的物質(zhì))、氮源 (提供氮元素的物質(zhì))和無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。在提供上述幾種主要營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)上,培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如維生素、氨基酸等)以及氧氣的要求。
4.維生素 酸性 中性或弱堿性 無(wú)氧
二、無(wú)菌技術(shù)
雜菌 1. 生物 一部分 2. 理化方法 內(nèi)外
3. （1）a.日常生活中殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢,可用煮沸消毒法,在100 ℃煮沸5~6 min。
b.對(duì)于一些不耐高溫的液體,如牛奶,可用巴氏消毒法,即在62~65 ℃消毒30 min或80~90 ℃處理30 s~1 min。
c.人們也常使用化學(xué)藥物進(jìn)行消毒,如酒精擦拭雙手、用氯氣消毒水源等。
d.接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)在使用前進(jìn)行紫外線消毒,在照射前,適量噴灑石炭酸或煤酚皂溶液等消毒液,可加強(qiáng)消毒效果
（2）a.涂布器、接種環(huán)、接種針或其他金屬用具,可進(jìn)行灼燒滅菌。
b.耐高溫的和需要保持干燥的物品可進(jìn)行干熱滅菌,即將滅菌物品放入密閉容器如干熱滅菌箱,在160~170 ℃的熱空氣中維持2~3 h。
c.濕熱滅菌是一種利用沸水、流通蒸汽或高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。其中高壓蒸汽滅菌的效果最好,一般在壓力為100kPa、溫度為121℃的條件下,維持15~30min來(lái)滅菌。
三、微生物的純培養(yǎng)——以酵母菌的純培養(yǎng)為例
1.（1）特定種類（2）單一個(gè)體 （3）純培養(yǎng)物
2.（1）分散的微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部可以繁殖形成肉眼可見(jiàn)的、有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體,這就是菌落 。采用平板劃線法和稀釋涂布平板法能將單個(gè)微生物分散在固體培養(yǎng)基上,之后經(jīng)培養(yǎng)得到的單菌落一般是由單個(gè)微生物繁殖形成的純培養(yǎng)物。
(2)a. 高壓蒸汽 干熱 50 酒精燈火焰 迅速 稍大于瓶口 倒過(guò)來(lái)放置
b. 連續(xù)劃線 單菌落 火焰旁 棉塞 火焰 冷卻 火焰 不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基 末端 第一次
c. 一個(gè)未接種 28 ℃ 24~48 h
【跟蹤訓(xùn)練】
1-5 C B D C C 6-8 D C C
9. (1)平板劃線法
(2)分離、純化酵母菌,得到單個(gè)菌落　(3)調(diào)pH　倒平板　(4)使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子　壓力為100 kPa、溫度為121 ℃

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