資源簡介

【果酒和果醋的制作】
一、果酒制作原理
1．原理：果酒的制作離不開 ，它屬于 微生物。在有氧條件下，可以進行 呼吸，大量繁殖，反應式為：_______________________ ______________；在無氧條件下，進行 (或無氧呼吸)，反應式為：_____________________________。
2．條件：溫度是酵母菌生長和發酵的重要條件，繁殖最適溫度為 ，酒精發酵時一般控制在 ℃。
3.菌種來源：


二、果醋制作原理
1．原理：果醋制作離不開 ，它是一種 細菌，對氧氣含量特別敏感，只有當氧氣 時，才能進行旺盛的生理活動。當氧氣、糖源充足時，醋酸菌將葡萄汁中的 分解成 ，其反應式為 ；當缺少糖源時，醋酸菌將 變為乙醛，再將乙醛變為 ，其反應簡式為：____ ____。
2．條件：醋酸菌的最適生長溫度為 ℃，此外還需要充足的 。
3．菌種來源：可從食醋中分離；到生產食醋的工廠或菌種保藏中心購買。
三、實驗設計流程圖
四、關鍵操作步驟
1．材料的選擇與處理：選擇新鮮的葡萄，榨汁前先將葡萄進行沖洗，
2．防止發酵液被污染：榨汁機要清洗干凈，并晾干；發酵裝置要清洗干凈，并用70%的酒精 ；裝入榨好的葡萄汁后， 。
3．控制好發酵條件：將葡萄汁裝入發酵瓶，留大約 的空間。制葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在 ℃，時間控制在 天左右，可通過 對發酵的情況進行及時的監測。制葡萄醋的過程中，將溫度嚴格控制在 ℃，時間控制在 天左右，并注意適時通過充氣口 。
五、結果分析與評價
可通過嗅聞、觀察和品嘗初步鑒定。(可能的結果如下)
酒精發酵 醋酸發酵
氣味和味道 酒味 酸味
氣泡和泡沫 有氣泡和泡沫 無氣泡和泡沫
發酵液狀態 渾濁 渾濁，液面形成白色菌膜
六、課題延伸：
發酵后是否有酒精產生，可用 來檢驗。先在試管中加入2 mL發酵液，再滴入物質的量濃度為3 mol·L－1的 3滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的 溶液3滴，如果有酒精產生，則會觀察到的現象是出現 否則為 色。證明是否產生醋酸，可用pH試紙。
【腐乳的制作】
一、腐乳制作的原理
1．原理：腐乳的發酵有多種微生物的協同作用，其中起主要作用的是 ，它是一種絲狀 ，分布廣泛，生長迅速，具有發達的___________。 等微生物產生的 可以將豆腐中的 分解成小分子的 和 ； 可以將 水解成 和 。通過腌制并配以各種輔料，使蛋白酶作用緩慢，促進其他生化反應，生成腐乳的香氣。 2．菌種來源：自制腐乳利用的菌種來自于 。現代的腐乳生產是在嚴格 的條件下，將優良的 菌種直接接種在豆腐上，這樣可以避免 ，保證產品的質量。
3．條件：溫度應控制在 ，并保持一定 。
二、腐乳制作的實驗流程
讓豆腐長出毛霉―→ ―→ →密封腌制。
三、影響腐乳品質的條件
1．控制好材料的用量
(1)腌制時鹽的用量：鹽的濃度過低，則______________________，可能導致豆腐腐敗變質；鹽的濃度過高，會影響腐乳的口味。
(2)配制鹵湯時，加酒可以 _________________，同時能使腐乳具有獨特的香味，鹵湯中酒精含量應控制在______左右，酒精含量過高，腐乳成熟的時間將會 ____；酒精含量過低，則 ，可能導致豆腐 。 (3)鹵湯中的香辛料既可以調制腐乳的風味，也具有 的作用。
2．防止雜菌污染
(1)現代的腐乳生產是在無菌條件下，使用優良的毛霉菌種接種，以避免雜菌污染，影響腐乳質量。
(2)用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水 。
(3)裝瓶時，操作要迅速小心，放好豆腐，加入鹵湯后，要用膠條密封瓶口。封瓶時，最好將瓶口通過 ，防止瓶口被污染。
【制作泡菜并檢測亞硝酸鹽含量】
一、泡菜的制作
1．泡菜制作的原理
(1)發酵微生物：泡菜的制作離不開 。
(2)分布：在自然界中分布廣泛， 、土壤、植物體表、人和動物的腸道內都有乳酸菌分布。
(3)種類：常見的乳酸菌有 和 。
(4)代謝類型：乳酸菌的新陳代謝類型為 ，在無氧條件下，將葡萄糖分解成 。乳酸桿菌常用于生產 。
反應式為：
2．實驗流程
3．操作注意事項
(1)泡菜壇的選擇標準是火候好、 、無砂眼、 、 ，否則容易引起 。
(2)腌制時要控制腌制的 、 和 的用量。溫度過 、食鹽用量 10%、腌制時間過 ，容易造成細菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量 。一般在腌制10 d后，亞硝酸鹽含量開始 。
二、亞硝酸鹽的檢測
1．亞硝酸鹽
(1)物理性質：亞硝酸鹽為 粉末，易溶于 ，在食品生產中用作食品添加劑(一般用作防腐劑)。
(2)分布：在自然界中，亞硝酸鹽分布廣泛。據統計，蔬菜中亞硝酸鹽的平均含量約為 ，咸菜中亞硝酸鹽的平均含量在 以上，而豆粉中的平均含量可達10 mg/kg。
(3)對人體的影響：膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，但是，當人體攝入的亞硝酸鹽總量達到 時，會中毒；當攝入總量達到 時，會引起死亡。膳食中的絕大部分亞硝酸鹽在人體內以“過客”的形式隨 排出，只有在特定條件下(適宜的pH、溫度和一定的微生物作用)，才會轉變成致癌物質—— 。它具有致癌、致畸等作用。
(4)要求標準：我國衛生標準規定，亞硝酸鹽的殘留量在肉制品中不得超過 ，醬腌菜中不超過 ，而嬰兒奶粉中不得超過 。
2．比色法測定亞硝酸鹽含量的原理
在 條件下，亞硝酸鹽與 發生 反應后，與 鹽結合形成 色染料。將顯色反應后的樣品與已知濃度的 目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽含量。
3．測定步驟
配制溶液→ → → 。
【微生物的實驗室培養】
一、培養基
1．概念：人們按照微生物對 的不同需求，配制出供其 的營養基質稱為培養基。
2．種類：分為 培養基和 培養基。
3．營養構成：各種培養基一般都含有水、 、 和無機鹽，此外還要滿足微生物生長對 、特殊營養物質以及氧氣的要求。
二、無菌技術
1．獲得純凈培養物的關鍵是防止外來 的入侵，具體操作如下：
(1)對實驗操作的 、操作者的衣著和 進行清潔和 。
(2)將用于微生物培養的器皿、 和 等進行 。
(3)為避免周圍環境中微生物的污染，實驗操作應在 附近進行。
(4)實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與_____ ______相接觸。
2．消毒和滅菌
消毒 滅菌
概念 使用較為 的物理或化學方法殺死物體 或 對人體有害的微生物(不包括 ) 使用 的理化因素殺死物體內外_____的微生物(包括_____和 )
常用方法 消毒法、 消毒法、 消毒法、紫外線消毒法 、 、
適用對象 操作空間、液體、雙手等 接種環、接種針、玻璃器皿、培養基等
三、大腸桿菌的純化培養
(一)制備牛肉膏蛋白胨固體培養基的步驟：
1．計算：依據是培養基 的比例。
2．稱量：牛肉膏比較 ，可同 一塊稱取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，稱取時動作要 ，稱后及時蓋上瓶蓋。
3．溶化：牛肉膏和稱量紙＋水取出稱量紙―→加蛋白胨和氯化鈉―→
加 (注意：不斷用玻璃棒攪拌，防止______ ___而導致___ ______)―→補加蒸餾水至100 mL。
4．滅菌
5．倒平板：待培養基冷卻至_____左右時，在 附近倒平板。
(二)純化大腸桿菌
1．方法
①平板劃線法：通過接種環在 培養基表面的操作，將聚集的菌種逐步 到培養基的表面。
②稀釋涂布平板法：將 進行一系列的 ，然后將不同
的菌液分別涂布到瓊脂固體培養基的表面，進行培養。
2．鑒定：將接種后的培養基和一個 的培養基都放入 中，培養12 h和24 h后，分別記錄觀察。
兩種接種方法都是為了將聚集在一起的微生物 ，得到由 繁殖而來的肉眼可見的單個__________。
【土壤中分解尿素的細菌的分離和計數】
一、研究思路
1．篩選菌株
尿素是一種重要的 肥，農作物不能直接吸收利用，而是首先通過土壤中的細菌將尿素分解為 和CO2，才能被植物利用，土壤中的這些細菌之所以能分解尿素，是因為它們能合成 。可以利用這一特點，將其從土壤中篩選出來。
(1)實驗室中微生物篩選的原理：人為提供有利于_____ _生長的條件(包括營養、 、pH等)，同時____ _或 其他微生物生長。
(2)選擇培養基：在微生物學中，將允許 的微生物生長，同時 和 其他種類微生物生長的培養基，稱作選擇培養基。
2．統計菌落數目
(1)常用來統計樣品中 數目的方法是__________ _______。即當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中 。通過統計平板上的 ，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結果準確，一般選擇菌落數在 的平板進行計數。
通常統計出的菌落數比活菌的實際數目 。這是因為
。因此，統計結果一般用 而不是活菌數來表示。
(2) 也是測定微生物數量的常用方法。
(3)細菌的數目還可以通過 法來測定。例如，測定飲水中大腸桿菌的數量，可將 的水用細菌過濾器過濾后，將濾膜放到 培養基上培養，大腸桿菌菌落呈現 色，可以根據培養基上 的數目，計算出水樣中大腸桿菌的數量。在該實驗中至少應取_ __個水樣。
3．設置對照
(1)設置對照的主要目的是排除實驗組中___________對實驗結果的影響，提高實驗結果的 。例如為了排除培養基是否被雜菌污染了，需用______________________________ 作為空白對照。
(2)對照實驗是指除了 的條件外，其他條件都 的實驗，其作用是比照實驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應的結果。
二、實驗設計
實驗設計包括對實驗方案，所需儀器、材料，用具和藥品，具體的 以及時間安排等的綜合考慮和安排。關于土壤中某樣品細菌的分離與計數的實驗操作步驟如下：
1．土壤取樣
土壤微生物約70%～80%為 ，主要分布在距地表 的近 性土壤中。
2．樣品的稀釋
樣品的稀釋程度將直接影響平板上生長的 。由于不同微生物在土壤中含量不同，因此分離不同的微生物要選用不同的稀釋度范圍，以保證獲得_____________ _________、適于計數的平板。一般來說，細菌稀釋度為_____________倍，放線菌稀釋度為 倍，真菌稀釋度為
倍。第一次實驗時，可將稀釋范圍放寬些，以保證能從中選擇出適于計數的平板。
3．微生物的培養與觀察
不同種類的微生物，往往需要不同的培養 和培養 。細菌一般在 ℃培養 d，放線菌一般在25～28 ℃培養5～7 d，霉菌一般在 ℃的溫度下培養 d。
在菌落計數時，每隔24 h統計一次菌落數目。選取____________ 時的記錄作為結果，以防止因_________________而導致遺漏菌落的數目 。
一般來說，在一定的培養條件下(相同的培養基、溫度及培養時間)，同種微生物表現出穩定的菌落特征。菌落的特征包括 等方面。
三、對分離得到的分解尿素細菌的鑒定
在對能分解尿素的細菌進行初步篩選后，還需要借助生物化學的方法對分離的菌種作進一步的鑒定。在細菌分解尿素的化學反應中，細菌合成的_____ _將尿素分解成了___ _。氨會使培養基的堿性 ，pH 。因此，我們可以通過檢測培養基 變化來判斷該化學反應是否發生。在以 為唯一氮源的培養基中加入 指示劑。培養某種細菌后，如果pH升高，指示劑將變 ，說明該細菌能夠 。
【分解纖維素的微生物的分離】
一、纖維素與纖維素酶
1．纖維素的化學組成：纖維素是一種由 首尾相連而成的 化合物，是含量最豐富的 類物質。纖維素能被土壤中某些微生物分解利用，這是因為它們能夠產生 。
2．纖維素的分布： 是自然界中纖維素含量最高的天然產物，此外，木材、作物秸稈等也富含纖維素。
3．纖維素酶的作用：纖維素酶是一種 酶，一般認為它至少包括三種組分
。它催化纖維素分解的過程如下：


二、纖維素分解菌的篩選
1．篩選方法： 法。這種方法能夠通過 直接對微生物進行篩選。
2．篩選原理：剛果紅是一種 ，它可以與像纖維素這樣的多糖物質形成 ，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后，培養基中出現以 為中心的 ，我們可以通過 來篩選纖維素分解菌。
三、實驗設計
1．土壤取樣
采集土樣時，應選擇 的環境。
2．選擇培養
為了增加纖維素分解菌的 ，確保能夠從樣品中分離到所需微生物，可對樣品進行 培養。
將土樣加入裝有 培養基的錐形瓶中，將錐形瓶固定在搖床上，在一定溫度下振蕩培養1～2 d，直至培養液變 。可重復選擇培養。
3．梯度稀釋
4．將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養基上。
常用的剛果紅染色法有兩種，一種是先 ，再 ，另一種是在 時就加入剛果紅。
5．挑選產生 的菌落，一般即為分解纖維素的菌落。
為了確定得到的是纖維素分解菌，還需要進行________________實驗，纖維素酶的發酵方法有 發酵和____ 發酵兩種。纖維素酶測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素所產生的 含量進行定量測定。
【菊花的組織培養】
一、植物組織培養的基本原理
植物細胞具有 。即植物細胞在脫離了原來所在植物體的器官或組織而處于 狀態時，在一定的 、 和其他外界條件的作用下，表現出可以發育成 的能力。
二、植物組織培養的基本過程
1．細胞分化
在植物的個體發育過程中，細胞在形態、結構和生理功能上都會出現 的差異，形成這些差異的過程叫 。
2．過程
三、影響植物組織培養的因素
1．材料的選擇
植物的種類、材料的 和 等都會影響實驗結果。如 和 的組織培養較為容易，而枸杞愈傷組織的芽誘導就比較難。菊花的組織培養，一般選擇 的莖上部新萌生的側枝作材料。
2．培養基
植物組織培養需要適宜的培養基，常用的是 培養基，其主要成分包括： ，如N、P、K、Ca、Mg、S； ，如B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co； ，如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素，以及______等；還常常需要添加 ，如 和 是啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素。
3．植物激素
啟動細胞分裂、脫分化和再分化的關鍵性激素是：_________和 ，二者的 、使用的__________、 等都會影響結果。以生長素和細胞分裂素為例。
4．其他影響因素
pH、溫度、光照等條件是重要因素，pH一般控制在_____左右，溫度控制在________ ℃，每日用日光燈照射___小時。
四、實驗操作
1．制備MS固體培養基
配制好的培養基要進行 。
2．外植體消毒
外植體要先用70%酒精 ，再用0.1% ，最后用
清洗。
3．接種
接種時要始終在 旁進行，對接種工具要 。
4．培養
接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養，培養期間應定期 。
5．移栽
6．栽培
【月季的花藥培養】
一、被子植物的花粉發育
1．被子植物的花粉是在 中由 經過 分裂形成的。
2．被子植物花粉的發育要經歷 時期、 期和
期等階段。
營養細胞在花粉萌發過程中可控制花粉的萌發并提供營養。
二、產生花粉植株的兩種途徑
生根―→移栽
兩種途徑間沒有絕對的界限，主要取決于培養基中 _____ 的種類及其 。
三、影響花藥培養的因素
1．誘導花粉植株成功率高低的主要影響因素是_____________與 。
2．材料的選擇與不同植物、同種植物親本的發育時期，以及花粉發育時期有關。從花藥來看，應當選擇___ _期的花藥；從花粉來看，應當選擇 期的花粉；從花蕾來看，應當選擇 的花蕾。此時期的營養狀態及生理狀態比較好，對離體刺激敏感。此時期之前的花藥， ，極易 ；此時期之后，花瓣已有松動，給材料的 帶來困難。
3．親本植株的生長條件、材料的 以及 等對誘導成功率都有一定影響。
四、實驗操作
1．材料的選擇
選擇花藥時一般通過 來確定花粉發育時期，此時需要對花粉 進行染色，最常用的方法是_________法和焙花青—鉻釩法，它們分別可以將細胞核染成 色和 。
2．材料的消毒
通常先將花蕾用體積分數為 浸泡大約30 s，立即取出，在 中清洗。取出后用 吸干花蕾表面的水分，再用質量分數為 溶液消毒，最后用無菌水沖洗3～5次。目的是 。
3．接種和培養
(1)剝離花藥：滅菌后的花蕾，要在 條件下除去萼片和花瓣。剝離花藥時，一是要注意盡量____________ (否則接種后容易 )；二是要徹底除去 ，否則不利于 或 的形成。
(2)接種花藥：剝離的花藥要立刻接種到培養基上。每個培養瓶接種 個花藥。
(3)培養：花藥培養利用的培養基是 培養基，pH為 ，溫度為 ℃左右，幼苗形成之前 光照。培養20～30 d后，花藥開裂，長出
或形成_________。前者還要轉移到 上，以便進一步分化出再生植株；后者要盡快將幼小植株 并轉移到新的培養基上。
在花藥培養基中，用量最高的激素是 ；在誘導叢芽或胚狀體培養基中，用量最高的激素是 ；在誘導生根的培養基中，用量最高的激素是 。
(4)通過愈傷組織形成的花粉植株，常常會出現_______________的變化，因而需要鑒定和篩選。
【植物芳香油的提取】
一、植物芳香油的來源
1.天然香料的主要來源是 和 。動物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等，植物芳香油可以從大約50多個科的植物中提取。提取出的植物芳香油具有很強的 ，其組成也比較 ，主要包括 及其 。
二、植物芳香油的提取方法
1.植物芳香油的提取方法有 、 和 等。具體采用哪種方法要根據植物原料的 來決定。
2． 法(常用方法)
(1)原理：利用 將揮發性 的植物芳香油攜帶出來，形成 ，冷卻后，混合物又會重新分出 和 。
(2)分類：根據蒸餾過程中 的位置，可以將水蒸氣蒸餾法劃分為水中蒸餾、 和 。其中，水中蒸餾的方法對于有些原料不適用，如柑橘和檸檬。因為會導致原料 和 等問題。
3．萃取法
植物芳香油不僅 ，而且易溶于 ，如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料，可以考慮使用此法。
(1)方法：將 、 的植物原料用 浸泡，使 溶解于其中。隨后，只需蒸發出 ，就可以獲得純凈的植物芳香油了。
(2)注意事項：用于萃取的有機溶劑必須事先 ，除去 ，否則會影響芳香油的質量。
4． 法：柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用此法。
三、實驗設計
1．玫瑰精油的提取
(1)用途：制作高級香水的主要成分。
(2)性質：化學性質 ，難溶于 ，易溶于____ ____ ，能隨 一同蒸餾。
(3)方法：水蒸氣蒸餾( 蒸餾)。
(4)過程：鮮玫瑰花＋清水―→ 蒸餾―→ 混合物分離 除水玫瑰油。
2．橘皮精油的提取
(1)用途： 、化妝品、 的優質原料。
(2)主要成分： 。
(3)方法：一般采用 。
(4)過程： 浸泡→漂洗→ →過濾→靜置→ →橘皮油。
四、操作提示
1．玫瑰精油的提取中，蒸餾溫度太 、時間太 ，產品品質就比較差。如果要提高品質，就需要 蒸餾的時間。
2．橘皮精油的提取中，橘皮要在 中浸透，這樣壓榨時不會 ，出油率 ，并且壓榨液黏稠度不會太高，過濾時不會 。
【胡蘿卜素的提取】
一、基礎知識
1．胡蘿卜素的性質
胡蘿卜素是 結晶，化學性質比較 ，不溶于 ，微溶于 ，易溶于 等有機溶劑。
2．提取原料：胡蘿卜等蔬菜。
3．提取方法
(1)從 中提取。 (2)從 中獲得。 (3)利用 發酵生產。
二、實驗設計
1．提取方法： 。
2．萃取劑的選擇
(1)有機溶劑
(2)萃取胡蘿卜素的有機溶劑應具有較高的 ，能夠_________胡蘿卜素，并且不與 混溶。
3．影響萃取的因素
萃取的效率主要取決于萃取劑的 和 ，同時還受到 、緊密程度、 、萃取的 和時間等條件的影響。
一般來說，原料顆粒 ，萃取溫度 ，時間 ，需要提取的物質就能充分溶解，萃取效果就好。
萃取的最佳溫度和時間可以通過設置 實驗來摸索。
4．萃取過程的注意事項
(1)萃取過程應避免明火加熱，采用 。
(2)為防止加熱時有機溶劑 ，要在加熱瓶口安裝 。
(3)萃取液的濃縮可直接使用 。
(4)濃縮前要進行 。
(5)在干燥胡蘿卜時，要注意控制溫度，溫度太 、干燥時間太 會導致胡蘿卜素分解。干燥的速度和效果與 、 有關。
5．提取的胡蘿卜素粗品的鑒定： 法。
方法：(1)在18 cm×30 cm濾紙下端距底邊 cm處作一基線。在基線上取A、B、C、D四點。
(2)用最細的注射器針頭分別吸取 mL溶解在石油醚中的 和提取樣品，在 和 點上點樣。
(3)將濾紙卷成圓筒狀，置于裝有1 cm深的石油醚的密封玻璃瓶中。
(4)觀察對比層析帶。
課題5 DNA的粗提取與鑒定
《DNA的粗提取與鑒定》
一、提取DNA的方法
提取生物大分子的基本思路是 。對于DNA的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化學性質方面的差異，提取DNA，去除其他成分。
1）DNA的溶解性 DNA和蛋白質等其他成分在不同濃度的 中溶解度不同，利用這一特點，選擇適當的鹽濃度就能使 充分溶解，而使雜質沉淀，或者相反，以達到分離目的。
此外，DNA不溶于 溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將DNA與蛋白質進一步的分離。
2）DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是對 沒有影響。大多數蛋白質不能忍受60—80oC的高溫，而DNA在 以上才會變性。洗滌劑能夠瓦解 ，但對DNA沒有影響。
3）DNA的鑒定 在 條件下，DNA遇 會被染成 色，因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。
二、實驗設計
1）實驗材料的選取 凡是含有 的生物材料都可以考慮，但是使用 的生物組織，成功的可能性更大。在下面的生物材料中選取適合的實驗材料：
魚卵、豬肝、菜花（花椰菜）、香蕉、雞血、哺乳動物的紅細胞、獼猴桃、洋蔥、豌豆、菠菜、在液體培養基的大腸桿菌
2）破碎細胞，獲取含DNA的濾液 動物細胞的破碎比較容易，以雞血細胞為例，在雞血細胞液中加入一定量的 ，同時用 攪拌，過濾后收集濾液即可。如果實驗材料是植物細胞，需要先用 溶解細胞膜。例如，提取洋蔥的DNA時，在切碎的洋蔥中加入一定的 和 ，進行充分的攪拌和研磨，過濾后收集研磨液。
3）去除濾液中的雜質
4）DNA的析出與鑒定
將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積 、冷卻的 ，靜置 ，溶液中會出現 ，這就是粗提取的DNA。用玻璃棒 攪拌，卷起絲狀物，并用濾紙吸取上面的水分。
取兩支20ml的試管，各加入物質的量濃度為 的NaCl溶液5ml，將絲狀物放入其中一支試管中，用玻璃棒攪拌，使絲狀物溶解。然后，向兩支試管中各加入4ml的
。混合均勻后，將試管置于 中加熱5min，待試管冷卻后，比較兩支試管溶液顏色的變化，看看溶解有DNA的溶液是否變 。
三、操作提示
以血液為實驗材料時，每100ml血液中需要加入3g ，防止 。
加入洗滌劑后，動作要 、 ，否則容易產生大量的泡沫，不利于后續步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時，動作要 ，以免 ，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。
二苯胺試劑要 ，否則會影響鑒定的效果。
四、結果分析與評價
【疑難點撥】
1．為什么加入蒸餾水能使雞血細胞破裂？
答：蒸餾水對于雞血細胞來說是一種低滲液體，水分可以大量進入血細胞內，使血細胞脹裂，再加上攪拌的機械作用，就加速了雞血細胞的破裂(細胞膜和核膜的破裂)，從而釋放出DNA。
2．加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么？
答：洗滌劑是一些離子去污劑，能溶解細胞膜，有利于DNA的釋放；食鹽的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解。
3．如果研磨不充分，會對實驗結果產生怎樣的影響？
答：研磨不充分會使細胞核內的DNA釋放不完全，提取的DNA量變少，影響實驗結果，導致看不到絲狀沉淀物、用二苯胺鑒定不顯示藍色等。
4．此步驟獲得的濾液中可能含有哪些細胞成分？
答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等雜質。
5．為什么反復地溶解與析出DNA，能夠去除雜質？
答：用高鹽濃度的溶液溶解DNA，能除去在高鹽中不能溶解的雜質；用低鹽濃度使DNA析出，能除去溶解在低鹽溶液中的雜質。因此，通過反復溶解與析出DNA，就能夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質。
6．方案二與方案三的原理有什么不同？
答：方案二是利用蛋白酶分解雜質蛋白，從而使提取的DNA與蛋白質分開；方案三利用的是DNA和蛋白質對高溫耐受性的不同，從而使蛋白質變性，與DNA分離。
7. DNA的溶解度與NaCl溶液濃度的關系：
當NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時，隨濃度的升高，DNA的溶解度降低；當NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時，隨濃度升高，DNA的溶解度升高。
8. 制備雞血細胞液時，要在新鮮的雞血中加入檸檬酸鈉的原因
制備雞血細胞液時，要在新鮮的雞血中加入抗凝劑——檸檬酸鈉，防止血液凝固。其原理是檸檬酸鈉能與血漿中Ca2+發生反應，生成檸檬酸鈣絡合物，血漿中游離的Ca2+大大減少，血液便不會凝固，因為雞血紅細胞，白細胞都有細胞核，DNA主要存在于細胞核中，所以在離心或靜置沉淀后，要棄出上層清液——血漿。
9．提取DNA的第一步是材料的選取，其目的是一定要選取DNA含量較高的生物材料，否則會由于實驗過程中或多或少的損失而造成檢測的困難；第二步是DNA的釋放和溶解，這一步是實驗成功與否的關鍵，要盡可能使細胞內的DNA全部溶解；第三步是DNA的純化，即根據DNA的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性，最大限度地將DNA與雜質分開；最后一步是對DNA進行鑒定，這是對整個實驗的結果的檢測。
10．在DNA的析出的步驟中用到玻璃棒攪拌時，注意動作要輕緩，以免加劇DNA分子的斷裂，導致DNA分子不能形成絮狀沉淀。
11．盛放雞血細胞液的容器，最好是塑料容器。雞血細胞破碎以后釋放出的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于細胞內DNA的含量本來就比較少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就會更少。因此，實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管，這樣可以減少提取過程的DNA的損失。

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