資源簡(jiǎn)介

中小學(xué)教育資源及組卷應(yīng)用平臺(tái)
第35講　植物細(xì)胞工程
[課程導(dǎo)學(xué)]
內(nèi)容要求 4.1.植物細(xì)胞工程包括組織培養(yǎng)和體細(xì)胞雜交等技術(shù)。
與舊教材對(duì)比 增：①玉米單倍體育種流程圖；②外植體；③初、次生代謝概念。刪：①人工種子；②植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在組織培養(yǎng)中的作用。改：①細(xì)胞全能性的概念；②胡蘿卜組織培養(yǎng)改為菊花組織培養(yǎng)。
考點(diǎn)一　植物組織培養(yǎng)技術(shù)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
1．細(xì)胞工程的概念
2．細(xì)胞的全能性
　植物細(xì)胞具有全能性的原因
一般生物體的每一個(gè)細(xì)胞都含有該物種所特有的全套遺傳信息，即都有發(fā)育成完整個(gè)體所必需的全部遺傳信息。
3．植物組織培養(yǎng)技術(shù)
(1)條件和結(jié)果
　植物組織培養(yǎng)中所需的碳源一般為蔗糖，少數(shù)為葡萄糖和果糖，原因是蔗糖既可提供充足的碳源，又可維持相對(duì)適中的滲透壓，而葡萄糖和果糖在與蔗糖提供相同數(shù)量碳源的前提下，其造成的滲透壓可能過高。
(2)培養(yǎng)過程：接種外植體誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)生芽、生根―→完整植株。
①脫分化：已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過脫分化，即失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程。
②再分化：愈傷組織重新分化成芽、根等器官。
　由愈傷組織進(jìn)行細(xì)胞分化時(shí)，一般要先誘導(dǎo)其生芽，然后誘導(dǎo)其生根，可通過控制培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例來(lái)實(shí)現(xiàn)。
4．植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
(1)概念：將不同來(lái)源的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新植物體的技術(shù)。
(2)操作流程
　植物體細(xì)胞雜交屬于無(wú)性生殖。
(3)意義
植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在打破生殖隔離，實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)緣雜交育種，培育植物新品種等方面展示出獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。
(1)植物的每個(gè)細(xì)胞在植物體內(nèi)和體外都能表現(xiàn)出細(xì)胞的全能性。(　　)
(2)在誘導(dǎo)離體菊花莖段形成幼苗的過程中，不會(huì)發(fā)生細(xì)胞的增殖和分化。(　　)
(3)愈傷組織是外植體通過脫分化和再分化后形成的。(　　)
(4)用纖維素酶和果膠酶水解法獲得的植物原生質(zhì)體失去了全能性。(　　)
(5)再生出細(xì)胞壁是原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志。(　　)
(6)植物體細(xì)胞雜交過程要用到植物組織培養(yǎng)。(　　)
(7)植物組織培養(yǎng)中，培養(yǎng)基中添加蔗糖的目的是提供營(yíng)養(yǎng)和調(diào)節(jié)滲透壓。(　　)
答案：(1)×　(2)×　(3)×　(4)×　(5)√　(6)√　(7)√
1．(選擇性必修3 P36注意)(1)實(shí)驗(yàn)中使用的培養(yǎng)基和所有的器械都要________。接種操作必須在酒精燈火焰旁進(jìn)行，并且每次使用后的器械都要________。
(2)接種時(shí)注意外植體的方向，不要________。
(3)誘導(dǎo)愈傷組織期間一般________光照，在后續(xù)的培養(yǎng)過程中，每日________給予適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照。
提示：(1)滅菌　滅菌　(2)倒插　(3)不需要　需要
2．(選擇性必修3 P38拓展應(yīng)用)為什么“番茄—馬鈴薯”雜種植株沒有如科學(xué)家所想象的那樣，地上結(jié)番茄、地下長(zhǎng)馬鈴薯？________________________________________________________________________。
提示：主要原因是生物基因的表達(dá)不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，所以“番茄—馬鈴薯”雜種植株的細(xì)胞中雖然具備兩個(gè)物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物質(zhì)的表達(dá)相互干擾，不能像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達(dá)
3．(選擇性必修3 P116附錄1)(1)誘導(dǎo)菊花愈傷組織的培養(yǎng)基：在MS培養(yǎng)基中加入________(芐基腺嘌呤)和________(萘乙酸)，質(zhì)量濃度均為0.5 mg/L。
(2)誘導(dǎo)菊花生芽的培養(yǎng)基：在MS培養(yǎng)基中加入BA和NAA，質(zhì)量濃度分別為2～3 mg/L和0.02～0.3 mg/L。
(3)誘導(dǎo)菊花生根的培養(yǎng)基：將上述MS培養(yǎng)基中NH4NO3、KNO3、KH2PO4、MgSO4·7H2O和CaCl2·2H2O的用量減半，并添加________或________(吲哚乙酸)，質(zhì)量濃度均為0.1 mg/L。
提示：(1)BA　NAA　(3)NAA　IAA
1．不同細(xì)胞的全能性比較
(1)體細(xì)胞全能性：分化程度低的>分化程度高的；細(xì)胞分裂能力強(qiáng)的>細(xì)胞分裂能力弱的。
(2)不同細(xì)胞的全能性：受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞。
(3)不同生物的細(xì)胞全能性：植物細(xì)胞>動(dòng)物細(xì)胞。
(4)全能性與細(xì)胞分化的關(guān)系：一般情況下，隨著細(xì)胞分化程度的不斷提高，細(xì)胞的全能性逐漸降低。
2．植物激素對(duì)植物組織培養(yǎng)的影響
(1)按照不同的順序使用這兩類激素，會(huì)得到不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
使用順序 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
先使用生長(zhǎng)素，后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化
先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素 細(xì)胞既分裂也分化
同時(shí)使用 分化頻率提高
簡(jiǎn)記：先“生”分裂不分化，后“生”分裂又分化，同“使”分化頻率高
(2)當(dāng)同時(shí)使用這兩類激素時(shí)，兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向
生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素 植物細(xì)胞的發(fā)育方向
比值高 有利于根的分化、抑制芽的形成
比值低 有利于芽的分化、抑制根的形成
比值適中 促進(jìn)愈傷組織的形成
簡(jiǎn)記：“高”根，“低”芽，“中”愈傷
3.植物體細(xì)胞雜交與植物有性雜交中遺傳物質(zhì)的變化
設(shè)白菜細(xì)胞含2x條染色體，2個(gè)染色體組；甘藍(lán)細(xì)胞含2y條染色體，2個(gè)染色體組。
項(xiàng)目 不同物種體細(xì)胞雜交 不同物種有性雜交 同一物種雜交
過程
子代染色體數(shù)目 2x＋2y x＋y 2x(白菜)或2y(甘藍(lán))
子代染色體組數(shù) 4 2 2
子代是幾倍體 異源四倍體 異源二倍體 同源二倍體
子代是否可育 可育 不可育 可育
繁殖方式 無(wú)性繁殖 有性繁殖 有性繁殖
變異類型 染色體變異 染色體變異 —
突破1 植物組織培養(yǎng)
核心素養(yǎng) 生命觀念
1．(2019·高考江蘇卷)為探究矮牽牛原生質(zhì)體的培養(yǎng)條件和植株再生能力，某研究小組的實(shí)驗(yàn)過程如下圖。下列敘述正確的是(　　)
A．過程①獲得的原生質(zhì)體需懸浮在30%蔗糖溶液中
B．過程②需提高生長(zhǎng)素的比例以促進(jìn)芽的分化
C．過程③需用秋水仙素處理誘導(dǎo)細(xì)胞壁再生
D．原生質(zhì)體雖無(wú)細(xì)胞壁但仍保持細(xì)胞的全能性
答案：D
2．(不定項(xiàng))水竹是單子葉禾本科植物，易管理和培植，干凈而雅致。下圖為通過植物組織培養(yǎng)大量獲得水竹幼苗的過程。下列敘述正確的是(　　)
―→
A．選擇水竹的葉和根尖分生區(qū)作為外植體誘導(dǎo)形成愈傷組織的難度相同
B．愈傷組織是一團(tuán)排列疏松而無(wú)規(guī)則、高度液泡化、有一定形態(tài)和功能的薄壁細(xì)胞
C．①過程為脫分化，②過程為再分化，②過程的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)
D．在水竹植物組織培養(yǎng)過程中，經(jīng)過篩選可能獲得有用的突變體
解析：選CD。植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性，在外植體的選擇上，一般選擇分裂旺盛、帶有分生區(qū)的部位，這樣的外植體分化程度較低，容易誘導(dǎo)形成愈傷組織，A錯(cuò)誤；愈傷組織是高度液泡化，無(wú)定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞組成的排列疏松、無(wú)規(guī)則的組織，B錯(cuò)誤；脫分化是指已經(jīng)分化的細(xì)胞經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能而轉(zhuǎn)變成未分化細(xì)胞的過程，②過程為再分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C正確；植物組織培養(yǎng)過程中，可能獲得突變體，經(jīng)過篩選可能獲得有用的突變體，突變體產(chǎn)生的原因是在培養(yǎng)過程中，細(xì)胞一直處于分裂狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力的影響而產(chǎn)生突變，D正確。
突破2 植物體細(xì)胞雜交
核心素養(yǎng) 生命觀念
3．(2022·大連高三模擬)下圖為植物體細(xì)胞雜交過程，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．上述技術(shù)應(yīng)用的生物學(xué)原理包括細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性
B．若細(xì)胞膜表面只有紅色熒光，則融合的原生質(zhì)體至少由兩個(gè)番茄細(xì)胞形成
C．③過程為脫分化，過程中雜種細(xì)胞失去了其特有的結(jié)構(gòu)和功能
D．當(dāng)細(xì)胞分裂素的效應(yīng)高于生長(zhǎng)素時(shí)，主要誘導(dǎo)根原基的形成
解析：選D。當(dāng)細(xì)胞分裂素的效應(yīng)高于生長(zhǎng)素時(shí)，主要誘導(dǎo)芽原基的形成，D錯(cuò)誤。
考點(diǎn)二　植物細(xì)胞工程的應(yīng)用
1．植物繁殖的新途徑
2．作物新品種的培育
(1)單倍體育種
優(yōu)點(diǎn)：①明顯縮短育種年限；②可獲得純合子，后代不發(fā)生性狀分離，能穩(wěn)定遺傳。
(2)突變體的利用
3．細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)
(1)初生代謝與次生代謝
初生代謝是生物生長(zhǎng)和生存所必需的代謝活動(dòng)，因此在整個(gè)生命過程中它一直進(jìn)行著。初生代謝物有糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和核酸等。次生代謝不是生物生長(zhǎng)所必需的，一般在特定的組織或器官中，并在一定的環(huán)境和時(shí)間條件下才進(jìn)行。
(2)過程
外植體愈傷組織細(xì)胞懸液細(xì)胞產(chǎn)物
　工廠化生產(chǎn)不一定要培養(yǎng)出植物體，一般培養(yǎng)到愈傷組織階段，從培養(yǎng)愈傷組織細(xì)胞的培養(yǎng)液中就可提取細(xì)胞產(chǎn)物。
(1)葡萄的扦插、桃樹的嫁接、石榴的壓條繁殖方式都屬于快速繁殖。(　　)
(2)脫毒苗培育所選的組織培養(yǎng)材料可以來(lái)自植株的任何部位。(　　)
(3)單倍體育種和突變體培育的遺傳學(xué)原理是一致的。(　　)
(4)突變體培育通常是對(duì)植物的愈傷組織進(jìn)行誘變處理，而工廠化生產(chǎn)的細(xì)胞產(chǎn)物也來(lái)自愈傷組織細(xì)胞。(　　)
答案：(1)×　(2)×　(3)×　(4)√
1．(2022·北京高三月考)為培育具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的無(wú)籽柑橘，研究者設(shè)計(jì)如下流程。相關(guān)敘述不正確的是(　　)
A．過程①需使用胰蛋白酶處理
B．實(shí)現(xiàn)過程②依賴膜的流動(dòng)性
C．過程③需應(yīng)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)
D．三倍體植株可產(chǎn)生無(wú)籽柑橘
解析：選A。過程①為利用酶解法去除植物細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，植物細(xì)胞壁的主要成分為纖維素和果膠，故該過程所用酶為纖維素酶和果膠酶，A錯(cuò)誤。
2．紫杉醇是一種生物堿類化合物，是目前已發(fā)現(xiàn)的最優(yōu)秀的天然抗癌藥物。下圖是通過植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的途徑，據(jù)圖回答下列問題：
(1)該途徑________(填“體現(xiàn)”或“不體現(xiàn)”)植物細(xì)胞的全能性，原因是_____________________________________________________________________
________。過程①中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的用量比值應(yīng)________(填“高”“低”或“適中”)。
(2)過程③需使用液體培養(yǎng)基，其優(yōu)點(diǎn)在于____________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)根據(jù)紫杉醇的化學(xué)本質(zhì)，可以判斷有關(guān)基因控制紫杉醇合成的方式是_____________________________________________________________________
________________________。
(4)若通過誘變育種技術(shù)選育紫杉醇含量高的細(xì)胞，可對(duì)圖中的________________進(jìn)行誘變處理，然后進(jìn)行篩選。
答案：(1)不體現(xiàn)　沒有形成完整植物體或分化成其他各種細(xì)胞　適中
(2)使培養(yǎng)細(xì)胞與培養(yǎng)液充分接觸，有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的充分利用
(3)有關(guān)基因通過控制酶的合成控制代謝，進(jìn)而控制紫杉醇的合成
(4)愈傷組織
[原因分析類]
1．在進(jìn)行植物組織培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)時(shí)，要嚴(yán)格控制雜菌污染的原因是____________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：雜菌在培養(yǎng)基上生長(zhǎng)爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，雜菌產(chǎn)生的物質(zhì)影響植物組織的生長(zhǎng)
2．若想利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出馬鈴薯—草莓雜種植株以提高土地的利用率，________(填“能”或“不能”)把兩物種細(xì)胞直接融合，理由是_____________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：不能　植物細(xì)胞外面有一層細(xì)胞壁，阻礙了細(xì)胞間的雜交(融合)
3．光照在培養(yǎng)過程中不作為愈傷組織的能量來(lái)源，原因是____________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：在脫分化形成愈傷組織及愈傷組織的增殖階段，細(xì)胞中均不含葉綠體，無(wú)法利用光照進(jìn)行光合作用
[事實(shí)概述類]
4．[2019·全國(guó)Ⅱ，T38(4)]植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整植株的基本程序是_____________________________________________________________________
________________________________________________________________________(用流程圖表示)。
答案：含目的基因的細(xì)胞愈傷組織小植株
5．[2019·全國(guó)Ⅱ，T38(1)]植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比，這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有___________________________________________________________________
________________________________________________________________________(答出2點(diǎn)即可)。
答案：能保持植物原有的遺傳特性；繁殖速度快
6．紅豆杉因其次生代謝產(chǎn)物紫杉醇的顯著治癌效果而備受關(guān)注。不同有機(jī)溶劑及其組合作為浸提溶劑對(duì)紫杉醇得率的影響如下圖所示。
有機(jī)溶劑名稱
注：1——甲醇；2——乙醇；3——丙酮；4——二氯甲烷；5——乙酸乙酯；6——甲醇 乙醇；7——甲醇 丙酮；8——甲醇 二氯甲烷；9——甲醇 乙酸乙酯；10——乙醇 丙酮；11——乙醇 二氯甲烷；12——乙醇 乙酸乙酯；13——丙酮 二氯甲烷；14——丙酮 乙酸乙酯；15——二氯甲烷 乙酸乙酯。
從溶劑單獨(dú)和混合提取效果的角度分析，可得出的結(jié)論有：_____________________________________________________________________
_________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
答案：①單一溶劑作為提取紫杉醇的浸提溶劑時(shí)，甲醇的提取效果最佳；②溶劑混合浸提時(shí)，乙醇—二氯甲烷作為浸提溶劑提取紫杉醇的效果最好
[體驗(yàn)等級(jí)考]
1．(2021·高考福建卷)科研人員利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育矮牽牛新品種，技術(shù)流程示意圖如下。
下列敘述正確的是(　　)
A．愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞分化形成的
B．獲得的雜種植株都能表現(xiàn)雙親的優(yōu)良性狀
C．可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合和細(xì)胞壁再生
D．用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)體
解析：選D。愈傷組織是幼嫩葉片通過細(xì)胞脫分化形成的，A錯(cuò)誤；由于基因的選擇性表達(dá)和基因間的互作效應(yīng)，獲得的雜種植株不一定能夠表現(xiàn)親本的優(yōu)良性狀，B錯(cuò)誤；可用聚乙二醇誘導(dǎo)原生質(zhì)體甲和乙的融合，但不能誘導(dǎo)細(xì)胞壁的再生，C錯(cuò)誤；由于植物細(xì)胞細(xì)胞壁的成分主要是纖維素和果膠，故可以用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織以獲得原生質(zhì)體，D正確。
2．(2021·高考湖北卷)月季在我國(guó)享有“花中皇后”的美譽(yù)。為了立月季某新品種的快速繁殖體系，以芽體為外植體，在MS培養(yǎng)基中添加不同濃度的6 BA和IBA進(jìn)行芽體增殖實(shí)驗(yàn)，芽分化率(%)結(jié)果如表。
6 BA/(mg·L－1) IBA/(mg·L－1)
0.1 0.2 0.3 0.4 0.5
1.0 31 63 58 49 41
2.0 40 95 76 69 50
3.0 37 75 64 54 41
4.0 25 35 31 30 25
5.0 8 21 12 8 4
關(guān)于上述實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．6 BA濃度大于4.0 mg·L－1時(shí)，芽分化率明顯降低
B．6 BA與IBA的比例為10∶1時(shí)芽分化率均高于其他比例
C．在培養(yǎng)基中同時(shí)添加適量的6 BA和IBA，可促進(jìn)芽分化
D．2.0 mg·L－1 6 BA和0.2 mg·L－1 IBA是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合
解析：選B。據(jù)題表可知，6 BA濃度為從4.0 mg·L－1到5. 0 mg·L－1時(shí)，芽分化率降低非常明顯，故6 BA 濃度大于4.0 mg·L－1時(shí)，芽分化率明顯降低，A正確；據(jù)表可知，當(dāng)6 BA與IBA的比例為10∶1時(shí)，芽分化率為31%、95%、64%、30%、4%，因此6 BA與IBA的比例為10∶1時(shí)，芽分化率不一定都高于其他比例，B錯(cuò)誤；據(jù)表可知，6 BA與IBA的比例會(huì)影響芽的分化率，因此在培養(yǎng)基中同時(shí)添加適量的6 BA和IBA，可促進(jìn)芽分化，C正確；據(jù)表可知，芽分化率為95%是最高的，此時(shí)6 BA和IBA的濃度分別為2.0 mg·L－1、0.2 mg·L－1，是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合，D正確。
3．(不定項(xiàng))(2021·江蘇適應(yīng)性考試模考)栽培蘋果品種以二倍體為主，通過離體培養(yǎng)蘋果成熟胚(2n)，可誘導(dǎo)再生獲得品質(zhì)改良的四倍體蘋果。下列敘述正確的是(　　)
A．可通過低溫或秋水仙素誘導(dǎo)處理獲得四倍體
B．經(jīng)誘導(dǎo)獲得的再生苗都為純合體
C．誘導(dǎo)獲得的植株需經(jīng)染色體倍性鑒定
D．通過二倍體的體細(xì)胞雜交方法也可獲得四倍體植株
解析：選ACD。可通過低溫或秋水仙素處理從而抑制紡錘體的形成使染色體數(shù)目加倍，進(jìn)而獲得四倍體，A正確；若原二倍體植株為雜合子，則經(jīng)誘導(dǎo)獲得的再生苗也是雜合子，B錯(cuò)誤；誘導(dǎo)獲得的植株不一定都能成為四倍體，所以需經(jīng)染色體倍性鑒定，C正確；通過二倍體的體細(xì)胞雜交方法也可獲得四倍體植株，D正確。
4．(2021·重慶選擇考模考)某研究人員設(shè)計(jì)了下列技術(shù)路線，以期獲得甘藍(lán)和蘿卜體細(xì)胞雜交植株。
請(qǐng)回答下列問題：
(1)制備原生質(zhì)體時(shí)，常用兩種酶處理，分別是____________________。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是____________________。原生質(zhì)體融合成功的標(biāo)志是____________________。圖中X是____________________。
(2)為誘導(dǎo)融合體產(chǎn)生不定芽，通常應(yīng)在培養(yǎng)基中加入兩類植物激素，其中起主要作用的是____________________。
(3)若想獲得抗鹽植株，可選用融合原生質(zhì)體作為人工誘變的材料，原因是________________________________，且需在含較高濃度的NaCl培養(yǎng)基中篩選。
答案：(1)纖維素酶和果膠酶　PEG(聚乙二醇)　雜種細(xì)胞再生出細(xì)胞壁　愈傷組織　(2)細(xì)胞分裂素
(3)融合原生質(zhì)體包含了兩個(gè)物種的全部遺傳信息，且具有全能性
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