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【一輪學(xué)案】第3單元 細(xì)胞的能量供應(yīng)和利用 微專(zhuān)題2 酶的相關(guān)拓展實(shí)驗(yàn)

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【一輪學(xué)案】第3單元 細(xì)胞的能量供應(yīng)和利用 微專(zhuān)題2 酶的相關(guān)拓展實(shí)驗(yàn)

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微專(zhuān)題2 酶的相關(guān)拓展實(shí)驗(yàn)
1.探究酶的本質(zhì)
(1)試劑檢測(cè)法探究酶的本質(zhì)是否為蛋白質(zhì)
從酶的化學(xué)本質(zhì)上來(lái)講,絕大多數(shù)的酶是蛋白質(zhì),少數(shù)的酶是RNA。在高中教材中常見(jiàn)的一些酶,如淀粉酶、蛋白酶等,其本質(zhì)都是蛋白質(zhì),所以,對(duì)酶本質(zhì)的鑒定的考查常常是變相考查蛋白質(zhì)的鑒定方法。因此,利用雙縮脲試劑可與蛋白質(zhì)產(chǎn)生紫色反應(yīng)的原理設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案即可。
項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組
材料 待測(cè)酶溶液 (等量)已知蛋白液
試劑 分別加入等量的雙縮脲試劑
現(xiàn)象 是否呈現(xiàn)紫色 呈現(xiàn)紫色
結(jié)論 實(shí)驗(yàn)組呈現(xiàn)紫色說(shuō)明該酶的化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì),否則該酶的化學(xué)本質(zhì)不是蛋白質(zhì)
(2)酶解法探究酶的本質(zhì)是否為RNA
酶必須保持正常的結(jié)構(gòu)才能發(fā)揮催化作用,因此可以分別利用蛋白酶和RNA酶處理待鑒定酶,再觀察其功能是否受影響來(lái)確定該酶的本質(zhì),設(shè)計(jì)方案如下:
【典例1】 (2020·中原名校質(zhì)量考評(píng))研究人員從一種野生植物的貯藏根中提取出一種化學(xué)物質(zhì),有人認(rèn)為這是一種能催化葡萄糖分解的酶,有人認(rèn)為這是一種能催化蔗糖分解的酶。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
①寫(xiě)出鑒定此物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是否是蛋白質(zhì)的兩種方法:
第一種鑒定方法:_________________________________________________________。
第二種鑒定方法:__________________________________________________________。
②為了探究此物質(zhì)是催化葡萄糖分解的酶還是催化蔗糖分解的酶,研究人員設(shè)計(jì)了如圖所示的實(shí)驗(yàn)過(guò)程,請(qǐng)預(yù)測(cè)可能的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
水浴加熱后,如果__________________________________________________________,
說(shuō)明該物質(zhì)是能催化蔗糖分解的酶;如果___________________________________________
________________________________________________________________________,
則說(shuō)明該物質(zhì)是能催化葡萄糖分解的酶。
答案 ①用雙縮脲試劑 用蛋白酶處理 ②兩支試管均出現(xiàn)磚紅色沉淀 兩支試管均不出現(xiàn)磚紅色沉淀
解析 ①酶的本質(zhì)大多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是RNA。若要鑒定此物質(zhì)的化學(xué)本質(zhì)是否是蛋白質(zhì),可以用雙縮脲試劑來(lái)鑒定,看是否有紫色反應(yīng);也可以用蛋白酶來(lái)鑒定,看該物質(zhì)是否被水解。②還原性糖可與斐林試劑發(fā)生作用生成磚紅色沉淀,葡萄糖是還原糖,而蔗糖是非還原糖,但蔗糖的分解產(chǎn)物為還原糖。如果兩支試管都出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說(shuō)明該酶不能催化葡萄糖分解而能催化蔗糖分解,故該物質(zhì)是能催化蔗糖分解的酶;如果兩支試管都不出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說(shuō)明蔗糖沒(méi)有分解而葡萄糖被分解,故該物質(zhì)是能催化葡萄糖分解的酶。
2.驗(yàn)證酶的高效性
項(xiàng)目 實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組
材料 等量的同一種底物
試劑 與底物相對(duì)應(yīng)的酶溶液 等量的無(wú)機(jī)催化劑
現(xiàn)象 反應(yīng)速率很快,或反應(yīng)用時(shí)短 反應(yīng)速率緩慢,或反應(yīng)用時(shí)長(zhǎng)
結(jié)論 酶具有高效性
實(shí)例:
3.驗(yàn)證酶的專(zhuān)一性
方案一 酶相同,底物不同
實(shí)驗(yàn)組1 反應(yīng)物1+酶溶液→反應(yīng)物被分解
實(shí)驗(yàn)組2 反應(yīng)物2+等量相同酶溶液→反應(yīng)物不被分解
實(shí)例:
方案二 底物相同,酶不同
實(shí)驗(yàn)組1 反應(yīng)物+酶溶液1→反應(yīng)物被分解
實(shí)驗(yàn)組2 相同反應(yīng)物+等量酶溶液2→反應(yīng)物不被分解
實(shí)例
注 若是用淀粉酶和淀粉、蔗糖(兩種底物)來(lái)探究酶的專(zhuān)一性時(shí),則應(yīng)用斐林試劑作為檢測(cè)試劑,不能選用碘液作為檢測(cè)試劑(碘液不能檢測(cè)蔗糖是否被水解)。
【典例2】 (2020·河南中原聯(lián)盟聯(lián)考)研究人員以HCl溶液和淀粉酶為實(shí)驗(yàn)材料,探究它們對(duì)蛋白質(zhì)和淀粉的催化水解作用,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示(同種底物起始量相同,在反應(yīng)相同時(shí)間后測(cè)得底物剩余量)。有關(guān)分析錯(cuò)誤的是(  )
A.物質(zhì)1、2分別為蛋白質(zhì)和淀粉
B.圖甲、圖乙實(shí)驗(yàn)所用催化劑分別是HCl溶液和淀粉酶
C.該實(shí)驗(yàn)可證明酶具有專(zhuān)一性和高效性
D.該實(shí)驗(yàn)可證明淀粉酶具有降低化學(xué)反應(yīng)活化能的作用
答案 D
解析 圖乙中,物質(zhì)1沒(méi)有水解,物質(zhì)2水解,依據(jù)酶的專(zhuān)一性可知,圖乙利用的催化劑是淀粉酶,則圖中物質(zhì)2是淀粉,物質(zhì)1是蛋白質(zhì),A正確;HCl溶液水解有機(jī)物沒(méi)有專(zhuān)一性,并由分析可知,圖甲、圖乙實(shí)驗(yàn)所用催化劑分別是HCl溶液和淀粉酶,B正確;該實(shí)驗(yàn)利用了“底物不同酶相同”(圖乙)證明了酶具有專(zhuān)一性;由圖甲與乙中物質(zhì)2(淀粉)水解速率對(duì)比可知,酶具有高效性,C正確;該實(shí)驗(yàn)不能證明淀粉酶具有降低化學(xué)反應(yīng)活化能的作用,D錯(cuò)誤。
4.探究酶的最適溫度
(1)設(shè)計(jì)思路
在一定范圍內(nèi),設(shè)計(jì)一系列溫度梯度實(shí)驗(yàn),其他條件相同且適宜,可得出最適溫度的大致范圍,再在此范圍內(nèi)減小梯度,進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn),直至得出最適溫度。
(2)設(shè)計(jì)方案
5.探究酶的最適pH
(1)設(shè)計(jì)思路
在一定范圍內(nèi),設(shè)計(jì)一系列pH梯度實(shí)驗(yàn),其他條件相同且適宜,可得出最適pH的大致范圍,再在此范圍內(nèi)縮小梯度,進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn),直至得出最適pH。
(2)設(shè)計(jì)方案
【典例3】 (2021·重慶高校聯(lián)盟質(zhì)檢)下列是有關(guān)酶的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路,正確的是(  )
A.利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和碘液驗(yàn)證酶的專(zhuān)一性
B.在驗(yàn)證溫度對(duì)淀粉酶活性的影響實(shí)驗(yàn)中,不能選用斐林試劑檢測(cè)還原糖的生成
C.利用胃蛋白酶、蛋清和pH分別為3、7、11的緩沖液驗(yàn)證pH對(duì)酶活性的影響
D.在驗(yàn)證酶的高效性實(shí)驗(yàn)中,可選用FeCl3和過(guò)氧化氫酶分別催化等量H2O2分解,檢測(cè)產(chǎn)生的氣體總量
答案 B
解析 淀粉酶能催化淀粉水解為還原糖,而不能催化蔗糖水解,實(shí)驗(yàn)結(jié)果可用斐林試劑檢測(cè),而不能用碘液,因?yàn)榈庖翰荒軝z測(cè)蔗糖是否水解,A錯(cuò)誤;在驗(yàn)證溫度對(duì)淀粉酶活性的影響時(shí),選擇淀粉作為實(shí)驗(yàn)材料,實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能選用斐林試劑檢測(cè),因?yàn)橛渺沉衷噭z測(cè)還原糖時(shí)需要水浴加熱,會(huì)影響實(shí)驗(yàn),B正確;胃蛋白酶的最適pH為1.5,要利用胃蛋白酶驗(yàn)證pH對(duì)酶活性的影響,設(shè)置的緩沖液pH應(yīng)該在1.5左右,C錯(cuò)誤;驗(yàn)證酶的高效性時(shí),應(yīng)檢測(cè)單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生氣泡的數(shù)量而不是產(chǎn)生的氣體總量,D錯(cuò)誤。
【典例4】 (2020·河南鄭州一模)為了研究溫度對(duì)某種酶活性的影響,設(shè)置三個(gè)實(shí)驗(yàn)組:A組(20 ℃)、B組(40 ℃)和C組(60 ℃),測(cè)定各組在不同反應(yīng)時(shí)間內(nèi)的產(chǎn)物濃度(其他條件相同),結(jié)果如圖。下列分析錯(cuò)誤的是(  )
A.三個(gè)溫度條件下,該酶活性最高的是B組
B.在時(shí)間t1之前,如果A組溫度提高10 ℃,那么A組酶催化反應(yīng)的速率會(huì)加快
C.如果在時(shí)間t2時(shí),向C組反應(yīng)體系中增加2倍量的底物,其他條件保持不變,那么在t3時(shí),C組產(chǎn)物總量不變,原因是60 ℃條件下,t2時(shí)酶已失活
D.如果在時(shí)間t2時(shí),向B組反應(yīng)體系中增加2倍量的該酶,其他條件保持不變,那么在t3時(shí),B組產(chǎn)物總量將增加
答案 D
解析 分析圖中曲線可知,40 ℃條件下(B組)反應(yīng)達(dá)到平衡時(shí)所需的時(shí)間最短,故該條件下酶活性最高,A正確;A組反應(yīng)溫度為20 ℃,低于該酶的最適溫度,故在時(shí)間t1之前,如果A組溫度提高10 ℃,那么A組酶催化反應(yīng)的速率會(huì)加快,B正確;C組的溫度是60 ℃,據(jù)圖可知,t2時(shí)產(chǎn)物濃度不再增加,說(shuō)明此溫度下的酶已經(jīng)失活,即使向反應(yīng)體系中加入底物,在t3時(shí),產(chǎn)物總量也不會(huì)發(fā)生變化,C正確;酶在反應(yīng)中起催化作用,不會(huì)影響生成產(chǎn)物的總量,故向B組反應(yīng)體系中增加2倍量的該酶,B組的反應(yīng)速率會(huì)加快,但產(chǎn)物總量不發(fā)生改變,D錯(cuò)誤。
6.酶活力的測(cè)定方法
(1)概念:酶活力又稱(chēng)酶活性,指酶催化特定化學(xué)反應(yīng)的能力。
(2)檢測(cè)步驟:加入緩沖液→加入底物→加入酶→保溫并計(jì)時(shí)→一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量
(3)測(cè)定方法:通常以單位時(shí)間內(nèi)底物的消耗量或單位時(shí)間內(nèi)產(chǎn)物的生成量來(lái)表示。
例如:檢測(cè)淀粉酶的活力
①通過(guò)測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)麥芽糖的生成量來(lái)檢測(cè)淀粉酶的活力。
②通過(guò)測(cè)定單位時(shí)間內(nèi)淀粉的消耗量來(lái)檢測(cè)淀粉酶的活力。
【典例5】 (2016·全國(guó)卷Ⅰ,3)若除酶外所有試劑已預(yù)保溫,則在測(cè)定酶活力的試驗(yàn)中,下列操作順序合理的是(  )
A.加入酶→加入底物→加入緩沖液→保溫并計(jì)時(shí)→一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量
B.加入底物→加入酶→計(jì)時(shí)→加入緩沖液→保溫→一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量
C.加入緩沖液→加入底物→加入酶→保溫并計(jì)時(shí)→一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量
D.加入底物→計(jì)時(shí)→加入酶→加入緩沖液→保溫→一段時(shí)間后檢測(cè)產(chǎn)物的量
答案 C
解析 依題意可知,該實(shí)驗(yàn)的pH為無(wú)關(guān)變量,為了排除pH的干擾,應(yīng)在酶和底物混合之前加入緩沖液,為酶促反應(yīng)提供穩(wěn)定的pH環(huán)境,C正確。

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