資源簡介

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第1天
1.將目的基因導入細菌細胞、動物細胞、植物細胞常用的方法分別是什么？
提示：將目的基因導入細菌細胞常用感受態細胞法，導入動物細胞常用顯微注射法，導入植物細胞常用農桿菌轉化法。
2.利用PCR技術可以更加精準地檢測受體細胞中是否轉入了目的基因，其簡要步驟是什么？
提示：根據目的基因的序列設計PCR引物，利用待檢DNA為模板進行PCR，再通過電泳或DNA測序技術鑒定PCR產物。
3.什么是核酸分子雜交？什么是核酸探針？
提示：核酸分子雜交是指兩個不同來源核酸單鏈的核苷酸之間堿基互補配對的過程。核酸探針是帶有放射性或熒光標記的具有特定核苷酸序列的DNA或RNA。
4.利用抗原—抗體雜交技術可以檢測目的基因是否表達出相應的蛋白質，其大致過程是什么？
提示：以目的基因表達出的蛋白質為抗原，制備能與其特異性結合的并能被放射性或熒光標記的抗體。如果能探測到目的蛋白，則說明目的基因在受體細胞內成功表達。
5.基因診斷有何用途？主要涉及的技術手段有哪些？
提示：用途：①檢測患者自身攜帶的缺陷基因；②診斷患者是否感染某種病原體。用到的技術手段主要有核酸分子雜交和PCR技術。
6.什么是基因治療？主要針對的是哪些疾病？
提示：基因治療是指向有基因缺陷的細胞中引入正常功能的基因，以糾正或補償基因的缺陷，從而達到治療的目的。基因治療主要針對一些嚴重威脅人類健康的遺傳病，如血友病、惡性腫瘤等。
7.利用哺乳動物的乳腺作為生物反應器生產蛋白質類藥物有哪些優點？
提示：①乳汁可以連續合成；②頻繁采集不會對動物產生危害；③乳汁成分相對簡單、明確，便于藥物的提純。
8.轉基因作物的環境安全性主要體現在哪些方面？
提示：①由于導入新的外源基因，轉基因作物獲得或增強了生存競爭和繁殖能力，使其在很多方面都強于親本或野生種。②在自然條件下，栽培作物種內、栽培作物與其近緣野生種間、栽培作物和雜草之間都有可能發生基因漂移。
9.什么是治療性克隆？我國政府對生殖性克隆人的原則是什么？
提示：治療性克隆是指從克隆胚胎中提取干細胞，然后將之培養成人們所需要的各種人體器官。我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實驗。
10.生物武器有何特點？我國政府對生物武器的態度是什么？
提示：特點：①傳染性；②攜帶和投放相對簡單；③研發門檻低，破壞力巨大；④無差別的殺傷。中國堅決支持禁止生物武器的主張，奉行不發展、不生產、不儲存生物武器的政策，并反對擴散生物武器。
第2天
1.哺乳動物早期胚胎培養液的主要成分有哪些？
提示：無機鹽、有機物、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等。
2.什么是胚胎移植？有何優點？
提示：胚胎移植是指將雌性動物的早期胚胎或通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態相同的其他雌性動物的體內，使之繼續發育為個體的技術。胚胎移植技術可以充分發揮優良母畜的繁殖潛力，還可以在短期內獲得大量目標個體。
3.什么是胚胎分割技術？有何應用價值？
提示：胚胎分割是指借助顯微操作技術將早期胚胎切割成幾等份，再移植到代孕動物子宮中發育，產生同卵多仔后代的技術。應用：①快速繁殖優良種畜；②培養遺傳特性相同的動物群，為科學研究提供實驗動物；③胚胎分割取樣可用于胚胎性別鑒定及遺傳檢測。
4.基因工程的核心是什么？要用到的工具酶有哪些？
提示：基因工程的核心是構建重組的DNA分子，要用到的工具酶有限制性內切核酸酶和DNA連接酶。
5.限制酶的作用是什么？
提示：限制酶能夠識別雙鏈DNA上特定的一小段核苷酸序列，并催化其中特定的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵水解，使得DNA雙鏈在特定的位置斷開。
6.理想的載體應具有哪些特征？常用的載體有哪些？
提示：理想的載體應具有下列特征：①含有復制起點，能夠獨立自主復制并穩定存在；②含有一種或多種限制酶的識別序列，方便外源基因插入載體中；③具有篩選作用的標記基因，以便能夠通過表型鑒別含有載體的細胞。常用的載體有質粒，動、植物病毒及噬菌體。
7.獲取目的基因有哪些常用的方法？
提示：①化學合成法；②借助載體建立基因文庫；③通過聚合酶鏈式反應體外擴增特定的DNA。
8.PCR技術需要什么條件？
提示：①模板：待擴增的DNA分子；②原料：4種脫氧核苷三磷酸，即dNTP；③酶：DNA聚合酶；④引物：在體外根據目的基因的核苷酸序列人工合成的兩段短的單鏈DNA，分別可以與兩條DNA模板鏈復制起始端互補配對成小段雙鏈。
9.PCR過程包括多次循環，每個循環包括哪三個步驟？目的分別是什么？
提示：①變性：模板DNA雙鏈在高溫下(90～95 ℃)氫鍵斷裂，解旋成2條DNA單鏈；②退火：溫度降低(50～60 ℃)后，2個引物分別與各自互補的DNA單鏈結合；③延伸：分別以兩條DNA單鏈為模板，4種脫氧核苷三磷酸為原料，耐高溫的TaqDNA聚合酶在適宜的溫度(約72 ℃)下，以引物與模板形成的小段DNA雙鏈為起點，催化合成一條新的DNA互補鏈。
10.什么是電泳？
提示：電泳是指帶電粒子在電場的作用下，向與其攜帶電荷相反的電極遷移的過程。
第3天
1.動物細胞培養需要哪些條件？
提示：①適宜的溫度(37±0.5 ℃)、濕度、pH和氣體(5%CO2＋95%空氣)條件；②無菌、無毒；③充足的營養物質(水、無機鹽、氨基酸、維生素、糖類、生長因子等)。
2.什么是接觸抑制？
提示：當細胞由于移動而相互靠近發生接觸時，細胞不再移動，接觸區域的細胞膜皺褶樣活動停止，最終細胞分裂停止，這種現象稱為接觸抑制。
3.什么是細胞株和細胞系？
提示：原代培養物經首次傳代成功后即成細胞系，其中能連續培養下去的細胞系稱為連續細胞系或無限細胞系，不能連續培養下去的細胞系稱為有限細胞系。通過一定的選擇或純化方法，從原代培養物或細胞系中獲得的具有特殊性質的細胞稱為細胞株。可以連續多次傳代的細胞株稱為連續細胞株，可傳代次數有限的細胞株稱為有限細胞株。
4.什么是細胞克隆？基本要求是什么？
提示：把一個單細胞從群體中分離出來單獨培養，使之繁衍成一個新的細胞群體的技術，稱為細胞克隆或克隆培養。細胞克隆的最基本要求是：必須保證分離出來的細胞是一個而不是多個，即必須肯定所建成的克隆來源于單個細胞。
5.什么是動物細胞核移植技術？
提示：動物細胞核移植是指將體細胞核移入一個去核的卵母細胞中，并使其發育成動物個體的過程。利用該技術培育出的動物稱為克隆動物。
6.什么是單克隆抗體？有何特點？
提示：由一個B淋巴細胞增殖形成的細胞群所產生的單一型抗體分子就稱為單克隆抗體。單克隆抗體的最大優點是：純度高，可大量制備，在應用時具有特異性強、靈敏度高的特點。
7.單克隆抗體制備過程中往往需要兩次篩選，目的分別是什么？
提示：第一次篩選的目的是為了獲得雜交瘤細胞，第二次篩選是為了獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞。
8.單克隆抗體有何主要用途？
提示：①作為特異性的探針，研究相應抗原蛋白的結構、細胞學分布及功能；②快捷、準確地診斷和治療一些疾病；③運載藥物。
9.胚胎工程常用的技術手段有哪些？
提示：胚胎移植、體外受精、胚胎體外培養、胚胎分割、胚胎干細胞培養等。
10.什么是體外受精？其基本原理是什么？
提示：體外受精是指哺乳動物的精子和卵子在體外人工控制的環境中完成受精過程的技術。它的基本原理是人工模擬體內環境，包括營養、溫度、pH等，使初級卵母細胞發育成熟，同時使精子獲能，最終完成受精作用，并有計劃地保存胚胎等。

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