資源簡介

中小學教育資源及組卷應用平臺
第十二單元　生物技術與工程
課前自主預習案2　微生物的培養(yǎng)技術及應用
素能目標★考向?qū)Ш?br/>基礎梳理——系統(tǒng)化
知識點一　 微生物的基本培養(yǎng)技術
1．培養(yǎng)基
2．無菌技術
3．微生物的純培養(yǎng)
（1）概念：由　　　　繁殖所獲得的微生物群體是純培養(yǎng)物，獲得　　　　的過程就是純培養(yǎng)。
（2）過程：包括　　　　、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。
（3）常用方法：　　　　法和　　　　法。
（4）實例——酵母菌的純培養(yǎng)
知識點二　微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)
一、微生物的選擇培養(yǎng)
1．實驗室中微生物篩選的原理
人為提供有利于　　　　生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時　　　　其他微生物的生長。
2．稀釋涂布平板法
將菌液進行一系列的梯度稀釋后，將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進行培養(yǎng)。
（1）系列稀釋操作
移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，試管口和移液管應離火焰1～2 cm處。操作過程如下：
（2）涂布平板操作
序號 圖示 操作
① 取0.1 mL菌液，滴加到　　　　
② 將涂布器浸在盛有　　　　的燒杯中
③ 將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻8～10 s
④ 用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使涂布　　　　
（3）培養(yǎng)：待涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板　　　　，放入30～37 ℃的　　　　中培養(yǎng)1～2 d。
二、微生物的數(shù)量測定
1．稀釋涂布平板法
（1）計數(shù)原理：當樣品的　　　　　　時，培養(yǎng)基表面生長的一個　　　　，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的　　　，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。
（2）計數(shù)標準：為了保證結(jié)果準確，一般選擇菌落數(shù)為　　　　的平板進行計數(shù)。
（3）計數(shù)方法：通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)為 　　　　、適于計數(shù)的平板。在　　　　下，應至少對3個平板進行重復計數(shù)，然后求出　　　　。
（4）當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，統(tǒng)計結(jié)果一般用　　　　來表示。
2．顯微鏡直接計數(shù)法
（1）計數(shù)原理：利用特定的　　　　或　　　　，在顯微鏡下觀察、計數(shù)，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數(shù)量。
（2）優(yōu)點：是一種常用的、　　　　的測定微生物數(shù)量的方法。
（3）缺點：統(tǒng)計的結(jié)果一般是死菌數(shù)和活菌數(shù)的總和。
三、土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)
基能過關——問題化
一、判一判（判斷正誤并找到課本原話）
（一）微生物的基本培養(yǎng)技術
1．微生物在瓊脂固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長，可以形成肉眼可見的菌落。（選擇性必修3 P9正文）（　　）
2．在培養(yǎng)霉菌時，需要將培養(yǎng)基調(diào)至中性或弱堿性。（選擇性必修3 P10正文）（　　）
3．獲得純凈的微生物培養(yǎng)物的關鍵是防止雜菌污染。（選擇性必修3 P10正文）（　　）
4．為了避免周圍環(huán)境中微生物的污染，接種過程中許多操作都應在超凈工作臺并在酒精燈火焰附近進行。（選擇性必修3 P10正文）（　　）
5．由單一個體繁殖所獲得的微生物群體稱為純培養(yǎng)物。獲得純培養(yǎng)物的過程就是純培養(yǎng)。（選擇性必修3 P11正文）（　　）
6．倒平板過程中，將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿并蓋上皿蓋后，立即將培養(yǎng)皿倒置。（選擇性必修3 P12探究·實踐）（　　）
7．培養(yǎng)酵母菌時，可將接種后的平板和一個未接種的平板倒置，放入適宜溫度的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24～48 h。（選擇性必修3 P12探究·實踐）（　　）
（二）微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)
1．菌液的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面會獲得單菌落。（選擇性必修3 P18正文）（　　）
2．適于平板計數(shù)的菌落數(shù)范圍為40～300。（選擇性必修3 P18正文）（　　）
3．稀釋涂布平板法計數(shù)時，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目少。（選擇性必修3 P18正文）（　　）
4．稀釋涂布平板法計數(shù)時，平板上的一個菌落就是一個細菌。（選擇性必修3 P20練習與應用2）（　　）
二、連一連
1．無菌技術的主要方法及適用對象
2．以下幾種選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基及其應用
三、議一議
【教材易漏拾遺】
1．[選擇性必修3 P10正文拓展]消毒和滅菌都能殺死所有的微生物嗎？
2．[選擇性必修3 P12“探究·實踐”]延伸思考：
（1）無菌技術除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么作用？
（2）為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？平板冷凝后，為什么要將平板倒置？
（3）在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？
（4）平板劃線法在做第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？目的是什么？
3．[選擇性必修3 P17圖1－7發(fā)掘]
（1）涂布平板的所有操作為什么都應在火焰附近進行？
（2）如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖，請分析：
①獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是什么？
②某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片，最可能的原因是什么？應當怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象？
4．[選擇性必修3 P18探究·實踐拓展]
（1）分離分解尿素的細菌的選擇培養(yǎng)基配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì)？
（2）為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長？
5．[選擇性必修3 P18正文發(fā)掘]
（1）為什么測定活菌的數(shù)量不能用平板劃線法？
（2）利用稀釋涂布平板法純化分解尿素的細菌時，經(jīng)培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)多種菌落，可能的原因有哪些？
第十二單元　生物技術與工程
課前自主預習案2　微生物的培養(yǎng)技術及應用
基礎梳理——系統(tǒng)化
【知識點一】
1．氮源　無機鹽　液體培養(yǎng)基　鑒別培養(yǎng)基　pH　氧氣
2．化學藥劑消毒法　干熱滅菌　濕熱滅菌　外來雜菌
3．(1)單一個體　純培養(yǎng)物　(2)配制培養(yǎng)基　(3)平板劃線　稀釋涂布平板　(4)高壓蒸汽滅菌　平板劃線　倒置　未接種　
【知識點二】
一、
1．目的菌　抑制或阻止　
2．(2)培養(yǎng)基表面　酒精　均勻　(3)倒置　恒溫培養(yǎng)箱
二、
1．(1)稀釋度足夠高　單菌落　菌落數(shù)　(2)30～300　
(3)30～300　同一稀釋度　平均值　(4)菌落數(shù)　
2．(1)細菌計數(shù)板　血細胞計數(shù)板　(2)快速直觀
三、脲酶　尿素
基能過關——問題化
一、判一判
(一)微生物的基本培養(yǎng)技術
1．√　2.×　3.√　4.√　5.√　6.×　7.√
(二)微生物的選擇培養(yǎng)和計數(shù)
1．√　2.×　3.√　4.×
二、連一連
1.
2.
三、議一議
1．提示：滅菌可殺死處理材料中的全部微生物(包括芽孢和孢子)，而消毒僅殺死部分微生物(一般不包括芽孢和孢子)。
2．提示：(1)還能有效避免操作者自身被微生物感染。
(2)通過灼燒滅菌，可以防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。
平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面濕度也比較高，將平板倒置，既可以防止培養(yǎng)基表面的水分過快地揮發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。
(3)不能。因為空氣中的微生物可能在皿蓋和皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，可能會造成污染。
(4)劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。這樣做的目的是將聚集的菌種逐步稀釋分散以便獲得單個菌落。
3．提示：(1)在酒精燈火焰旁操作可以保證無菌，防止雜菌污染。
(2)①獲得圖A效果的接種方法為稀釋涂布平板法，獲得圖B效果的接種方法為平板劃線法。
②最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時在劃下一區(qū)域前未將接種環(huán)灼燒滅菌；采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃新區(qū)域前先將接種環(huán)灼燒滅菌。
4．提示：(1)碳源是葡萄糖，氮源是尿素。
(2)分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可將尿素分解成氨，從而為微生物提供氮源。
5．提示：(1)由于在所劃的線中，一般只有最后一次劃線的末端才會形成只由一個細菌形成的菌落，而其他一些菌落往往由兩個細菌或多個細菌繁殖而成，而在計數(shù)時一個菌落對應著一個細菌，這樣在劃線所得的平板中，菌落數(shù)目遠低于活菌的實際數(shù)值，所以不能用平板劃線法測定活菌數(shù)量。
(2)出現(xiàn)雜菌污染的可能原因有：培養(yǎng)基制備過程中被雜菌污染；接種過程中，無菌操作不符合要求；系列稀釋時，無菌操作不符合要求等。

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