資源簡介

第2節 微生物的培養技術及應用
二、微生物的選擇培養與計數
1. 解釋選擇培養基篩選微生物的原理
2. 土壤中分解尿素的細菌的分離和計數
一、選擇培養基
基礎梳理
1. 實驗室中微生物篩選的基本原理：人為提供有利于 ，同時抑制或阻止其他微生物的生長
2. 選擇培養基的概念：在微生物學中，將 特定種類的微生物生長，同時 或
其他種類微生物生長的培養基，叫選擇培養基
3. 尿素分解菌分解尿素的原理：
1.選擇培養基上生長的微生物=目的菌（ ）
2、 微生物的選擇培養
1. 稀釋涂布平板法的操作步驟：
①
②
③
④
⑤
⑥
2.微生物的培養條件：
三、微生物的數量測定
1.稀釋涂布平板法計數的原理：當樣品的稀釋足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于
2.稀釋涂布平板計數法統計的平板菌落數范圍：
3.稀釋涂布平板法的統計方法：在同一稀釋度下，應至少對 個平板進行重復計數，然后求出平均值
4.稀釋涂布平板計數的特點及原因分析：統計的菌落數往往比活菌的實際數目 ，這是因為兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是 。因此。統計結果一般用
而不是用 來表示
1. 為了保證結果準確，一般選擇菌落數在30～300的平板進行計數
隨堂訓練
1.用稀釋涂布平板法來統計樣品中的活菌數時，通過統計平板上的菌落數就能推測出樣品中的活菌數，原因是( )
A.菌落中的細菌數目是固定的
B.平板上的一個菌落就是一個細菌
C.通過此方法統計的菌落數與活菌的實際數目相同
D.平板上的一個菌落一般來源于樣品稀釋液中的一個活菌
2.下列有關培養基和菌種鑒定的敘述正確的是( )
A.制作固體培養基必須加入的物質是瓊脂
B.可利用液體培養基上菌落的特征來判斷和鑒別細菌的類型
C.菌落的表面光滑與否、有無莢膜是R型和S型菌種鑒定的依據
D.在以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑鑒定尿素分解菌
3.在做分離分解尿素的細菌實驗時，甲同學從對應106培養基上篩選出大約120個菌落，而其他同學只選擇出大約20個菌落。下列有關敘述，出現科學性錯誤的是( )
A.可以將甲同學配制的培養基在不加土樣的情況下進行培養作為空白對照，以證明培養基是否受到污染
B.讓其他同學用與甲同學一樣的土壤進行實驗，如果結果與甲同學一致，則可以證明甲同學無誤
C.甲同學出現這種結果的原因可能是土樣不同，也可能是操作過程出了問題
D.A、B選項的實驗思路都遵循了實驗的對照原則和平行重復原則
4.下圖是研究人員從紅棕壤中篩選高效分解尿素細菌的示意圖,有關敘述錯誤的是( )
A.在配制步驟②、③ 的培養基時,應先調pH值后高壓蒸汽滅菌
B.步驟③ 純化分解尿素的原理是將聚集的細菌分散,可以獲得單細胞菌落
C.步驟③ 采用涂布平板法接種,并需向牛肉膏蛋白胨培養基中加入尿素
D.步驟④ 挑?、?中不同種的菌落分別接種,比較細菌分解尿素的能力
5.可以鑒定出分解尿素的細菌的方法是( )
A.以尿素為唯一氮源的培養基中加入酚紅指示劑
B.以尿素為唯一氮源的培養基中加入二苯胺試劑
C.以尿素為唯一氮源的培養基中加入蘇丹Ⅲ試劑
D.以尿素為唯一氮源的培養基中加入雙縮脲試劑
6.分離土壤中分解尿素的細菌時,對培養基的要求是( )
①加尿素 ②不加尿素 ③加瓊脂 ④不加瓊脂
⑤加葡萄糖 ⑥不加葡萄糖 ⑦加硝酸鹽 ⑧不加硝酸鹽
A.①③⑤⑦ B.①③⑤⑧ C.②④⑥⑧ D.①④⑥⑦
7.日前微博傳言手機細菌比馬桶多。如圖,央視和北京衛視通過實驗展示調查結果?；卮鹣铝邢嚓P問題:
1.該實驗需制備培養基,培養基一般都含有水、碳源、__________。
2.據圖,兩電視臺均采用__________法接種,該方法需要__________(多選).
A.接種環 B.酒精燈 C.移液管 D.涂布器 E.無菌水
3.通過觀察菌落的__________,可知手機屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電臺實驗操作均正確且完全一致,但報道結果截然不同,你認為原因是:__________。
4.按圖操作取樣面積,實驗員測定某手機屏幕的細菌數量,將10菌懸液進行梯度稀釋,分別取0.1稀釋倍數為的樣品液接種到三個培養基上,培養一段時間后,統計菌落數分別為48、50、52,則該手機屏幕的細菌數為__________個/平方厘米。該實驗對照組該如何設置__________。
答案以及解析
1.答案：D
解析：
2.答案：D
解析：
3.答案：D
解析：
4.答案：C
解析：在配制步驟② 、③ 所用的培養基時,應先調pH后高壓蒸汽滅菌,A正確;步驟③ 純化分解尿素細菌的原理是將聚集的細菌分散,可以獲得單細胞菌落,B正確;要篩選出能高效分解尿素的細菌,所選用的培養基要以尿素為唯一氮源,但牛肉膏和蛋白胨中都含有氮,因此步驟③ 所用的培養基不能是牛肉膏蛋白胨培養基,C錯誤;步驟④ 挑?、?中不同種的菌落分別接種,比較細菌分解尿素的能力,D正確。
5.答案：A
解析：A、酚紅指示劑只能用來檢測尿素分解菌，A正確；
B、二苯胺試劑常用來進行DNA的鑒定，B錯誤；
C、蘇丹Ⅲ試劑可以用來檢測脂肪，C錯誤；
D、雙縮脲試劑可以用來檢測蛋白質，D錯誤．
故選：A．
6.答案：B
解析：
7.答案：
1.氮源和無機鹽;
2.稀釋涂布平板; BCDE;
3.形態、大小; 手機的取樣和馬桶的取樣都不相同
4.2×104; 取培養基涂布0.1mL無菌水進行培養
解析：1.微生物培養基的成分一般包括水、碳源、氮源和無機鹽。
2.根據圖形分析,該實驗的接種方法為稀釋涂布平板法,該方法用到的工具有酒精燈、移液管、涂布器、無菌水等。
3.不同的菌落形態、大小不同,圖示兩個電視臺調查的手機屏幕和馬桶按鈕都有多種形態的菌落,即存在多種微生物。兩電視臺實驗操作均正確且完全一致,但報道結果截然不同,可能是因為手機的取樣和馬桶的取樣都不相同。
4.根據提供的數據進行計算,某手機屏幕的細菌數=(48+50+52)÷3×102÷0.1×10÷(5×5)=2×104(個/平方厘米)。
學習目標
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基礎梳理
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2

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