資源簡介

專題9　發酵工程
微專題2　微生物的培養技術及應用
1.微生物培養中的無菌操作技術
①生物消毒法是指利用生物或其代謝產物除去環境中的部分微生物的方法。
②消毒、滅菌后，要注意避免已處理的材料用具與周圍物品接觸而造成污染。
2.兩種純化細菌方法的比較
3.微生物分離與計數的兩個實例
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1.(2021·山東卷，14)解脂菌能利用分泌的脂肪酶將脂肪分解成脂肪酸和甘油并吸收利用。脂肪酸會使醇溶青瓊脂平板變為深藍色。將不能直接吸收脂肪的甲、乙兩種菌分別等量接種在醇溶青瓊脂平板上培養。甲菌菌落周圍呈現深藍色，乙菌菌落周圍不變色。下列說法錯誤的是(　　)
A.甲菌屬于解脂菌
B.實驗中所用培養基以脂肪為唯一碳源
C.可將兩種菌分別接種在同一平板的不同區域進行對比
D.該平板可用來比較解脂菌分泌脂肪酶的能力
答案　B
解析　根據題意，甲、乙兩種菌分別接種在醇溶青瓊脂平板上，二者都能生存，甲周圍呈現深藍色，說明培養基的脂肪被分解為脂肪酸，使平板呈現深藍色，脂肪的分解需要脂肪酶的催化，說明甲能夠分泌脂肪酶，屬于解脂菌，A正確；乙周圍不變色，說明乙不能分泌脂肪酶分解脂肪，沒有脂肪酸的產生，不能利用脂肪，但由于乙能在該培養基上生存，說明該培養基中除了脂肪作為碳源外，還存在別的碳源，否則乙不能在該培養基上生存，B錯誤；為了便于比較結果，可以將兩種菌接種到同一平板的不同區域，C正確；菌落周圍深藍色的直徑越大，說明解脂菌分泌脂肪酶的能力越強，D正確。
2.(2022·江蘇徐州調研)為了觀察手掌上附著的微生物，某小組成員將自己的手掌在配制的牛肉膏蛋白胨固體培養基上輕輕按壓后，蓋上培養皿蓋，將平板倒置放在恒溫培養箱中培養48 h，結果如圖所示。下列說法錯誤的是(　　)
A.配制的培養基經高壓蒸汽滅菌后，還要調節pH才能用于接種
B.待高溫滅菌后的培養基冷卻至50 ℃左右后，再進行倒平板
C.在超凈工作臺上和酒精燈火焰旁進行操作，是為了防止雜菌污染
D.手掌上的某些微生物在該培養基上并沒有生長繁殖形成菌落
答案　A
解析　制備培養基時先調節pH，再滅菌，A錯誤；等高溫滅菌后的培養基冷卻至50 ℃左右時，在酒精燈火焰附近倒平板，B正確；為了避免周圍環境中微生物的污染，許多操作都應在超凈工作臺上和酒精燈火焰旁進行，C正確；手掌上附著的病毒不能在該培養基上生長，D正確。
3.(2022·江蘇蘇錫常鎮四市一調，14)微生物的計數方法有多種，下列有關敘述錯誤的是(　　)
A.用濾膜法測定飲用水中大腸桿菌數目時，需利用鑒別培養基培養后計數
B.用平板劃線法和稀釋涂布平板法進行微生物計數時，結果往往比實際少
C.用血細胞計數板進行微生物顯微計數時，高倍鏡下觀察不到完整的計數室
D.用已知密度紅細胞懸液對待測菌液以比例計數法計數時，兩種液體需混合均勻
答案　B
解析　測定飲用水中大腸桿菌的數目可取一定量的飲用水，之后按一定倍數稀釋，再用加入伊紅－亞甲藍的鑒別培養基培養，取深紫色金屬光澤菌落進行計數，A正確；微生物接種到固體培養基常用的方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法接種可以形成單菌落，所以常用來進行微生物的計數，平板培養基上長出一個菌落就代表原待測樣品中一個微生物個體，由于有時候一個菌落是由多個細胞連在一起形成的，因此導致計數偏小；平板劃線法常用來篩選分離微生物，不用于計數，B錯誤；用血細胞計數板進行微生物顯微計數時，高倍鏡下觀察不到完整的計數室，C正確；將已知顆粒(如霉菌孢子或紅細胞)濃度的液體與一待測細胞濃度的菌液按一定比例均勻混合，在顯微鏡視野中數出各自的數目，即可得未知菌液的細胞濃度，D正確。

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