資源簡(jiǎn)介

(共16張PPT)
長(zhǎng)句表達(dá)(六)
生物技術(shù)與工程的概念、原理分析與應(yīng)用
1.(分析原因類)(2021·河北，24)采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘(Cd)在土壤中過(guò)量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理(例如，收集植物組織器官異地妥善儲(chǔ)存)，可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(YCF1)基因?qū)胧茉囍参铮z測(cè)了相關(guān)指標(biāo)。
考題示例
回答下列問題：
(1)進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是_____________。研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料的目的是______
__________________________。
考題示例
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
目的基因在自然界中的擴(kuò)散
避免
(2)已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是____________________
________________________________________________________。相較于草本植物，采用楊樹這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢(shì)在于_______________________________________________________________
____________________________________________(寫出兩點(diǎn)即可)。
考題示例
YCF1可通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水
楊樹具有發(fā)達(dá)的根系和高大的樹冠，更適應(yīng)污染礦區(qū)等不良環(huán)境，同時(shí)可充分吸收土壤中的Cd，木材也方便運(yùn)輸、利用
2.(分析原因類)(2022·河北，23節(jié)選)番茄灰霉病菌嚴(yán)重影響番茄生產(chǎn)，枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生對(duì)多種病原菌具有抑制作用的蛋白質(zhì)。為探究枯草芽孢桿菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：
枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)采用__________(填“靜置”或“搖床震蕩”)培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中抽樣檢測(cè)活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采用______________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計(jì)數(shù)法”)，其原因是___________________________________________________________
__________________________________________________。
考題示例
用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個(gè)菌落都來(lái)自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡直接計(jì)數(shù)法會(huì)將死亡的枯草芽孢桿菌也計(jì)算在內(nèi)
搖床震蕩
稀釋涂布平板法
考題示例
枯草芽孢桿菌為好氧微生物，采用搖床震蕩培養(yǎng)可增大培養(yǎng)液的溶氧量，有利于枯草芽孢桿菌的生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)過(guò)程中要抽樣檢測(cè)活菌數(shù)量，應(yīng)該采用稀釋涂布平板法，用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個(gè)菌落都來(lái)自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡直接計(jì)數(shù)法會(huì)將死亡的酵母菌也計(jì)算在內(nèi)。
此類題目圍繞某一技術(shù)或工程進(jìn)行考查，全面熟悉其原理是解決問題的基礎(chǔ)，尤其是解決基因工程問題時(shí)要帶著分子生物學(xué)思維來(lái)分析作答。
方法突破
1.(2021·廣東，21節(jié)選)中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖)為原料，在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖。
強(qiáng)化訓(xùn)練
因是___________________________________________________________
_____________________________________________ (答出兩點(diǎn)即可)。
回答下列問題：
基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性，研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60 g/L，pH為10，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60 d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原
強(qiáng)化訓(xùn)練
鹽濃度為60 g/L的條件下，其他雜菌因失水過(guò)多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長(zhǎng)繁殖受抑制
2.(2021·全國(guó)甲，38節(jié)選)PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)。為檢測(cè)病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作：①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴(kuò)增DNA片段；④采集病人組織樣本。回答下列問題：
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是指____________________________________
__________________________________________________________________________________。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。
強(qiáng)化訓(xùn)練
一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)
3.(2019·海南，31節(jié)選)人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價(jià)值的蛋白質(zhì)(Y)，該蛋白質(zhì)由一條多肽鏈組成。目前可以利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)Y。回答下列問題：
天然的Y通常需要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱商岣咂錈岱€(wěn)定性，若要根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對(duì)Y進(jìn)行改造以提高其熱穩(wěn)定性，具體思路是___________________________________
______________________________________________________________________。
強(qiáng)化訓(xùn)練
找到第6位氨基酸甲對(duì)應(yīng)的堿基所在的基因位置，參照密碼子表，將第6位氨基酸甲對(duì)應(yīng)的堿基替換為氨基酸乙的堿基
4.(2019·全國(guó)Ⅲ，37節(jié)選)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題：
(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是________________________
_____________。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上_____(填“能夠”或“不能”)生長(zhǎng)，原因是______________________________________。
強(qiáng)化訓(xùn)練
蛋白胨
不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的
最適pH不同
能夠
硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源
(2)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是_________________
_________________________________________。
強(qiáng)化訓(xùn)練
在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征
5.(2018·江蘇，32節(jié)選)為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶，研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因(1 656個(gè)堿基對(duì))，利用基因工程大量制備α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見右圖。請(qǐng)回答下列問題：
強(qiáng)化訓(xùn)練
為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的____端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是_________________
_______________________。
強(qiáng)化訓(xùn)練
5′
使DNA片段能定向
插入表達(dá)載體，減少自連
6.(2022·山東，25節(jié)選)某種類型的白血病由蛋白P引發(fā)，蛋白UBC可使P被蛋白酶識(shí)別并降解，藥物A可通過(guò)影響這一過(guò)程對(duì)該病起到治療作用。為探索藥物A治療該病的機(jī)理，需構(gòu)建重組載體以獲得融合蛋白FLAG－P和FLAG－PΔ。PΔ是缺失特定氨基酸序列的P，F(xiàn)LAG是一種短肽，連接在P或PΔ的氨基端，使融合蛋白能與含有FLAG抗體的介質(zhì)結(jié)合，但不影響P或PΔ的功能。
為構(gòu)建重組載體，需先設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR特異性擴(kuò)增P基因。用于擴(kuò)增P基因的引物需滿足的條件是_____________________________________
_________。
強(qiáng)化訓(xùn)練
能與P基因母鏈的一段堿基序列配對(duì)、短
單鏈核酸長(zhǎng)句表達(dá)(六)　生物技術(shù)與工程的概念、原理分析與應(yīng)用
1．(分析原因類)(2021·河北，24)采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘(Cd)在土壤中過(guò)量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理(例如，收集植物組織器官異地妥善儲(chǔ)存)，可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(YCF1)基因?qū)胧茉囍参铮z測(cè)了相關(guān)指標(biāo)。
回答下列問題：
(1)進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是________________。研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料的目的是_______________________________________________________。
(2)已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是______________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
相較于草本植物，采用楊樹這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢(shì)在于______________
_______________________________________________________________________________
_________________________________________________________________(寫出兩點(diǎn)即可)。
答案　(1)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法　避免目的基因在自然界中的擴(kuò)散　(2)YCF1可通過(guò)主動(dòng)運(yùn)輸將Cd離子運(yùn)到液泡中，提高了細(xì)胞液的濃度，有利于植株吸水　楊樹具有發(fā)達(dá)的根系和高大的樹冠，更適應(yīng)污染礦區(qū)等不良環(huán)境，同時(shí)可充分吸收土壤中的Cd，木材也方便運(yùn)輸、利用
2．(分析原因類)(2022·河北，23節(jié)選)番茄灰霉病菌嚴(yán)重影響番茄生產(chǎn)，枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生對(duì)多種病原菌具有抑制作用的蛋白質(zhì)。為探究枯草芽孢桿菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：
枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)采用__________(填“靜置”或“搖床震蕩”)培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中抽樣檢測(cè)活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采用______________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計(jì)數(shù)法”)，其原因是____________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
答案　搖床震蕩　稀釋涂布平板法　用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個(gè)菌落都來(lái)自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡直接計(jì)數(shù)法會(huì)將死亡的枯草芽孢桿菌也計(jì)算在內(nèi)
解析　枯草芽孢桿菌為好氧微生物，采用搖床震蕩培養(yǎng)可增大培養(yǎng)液的溶氧量，有利于枯草芽孢桿菌的生長(zhǎng)繁殖。培養(yǎng)過(guò)程中要抽樣檢測(cè)活菌數(shù)量，應(yīng)該采用稀釋涂布平板法，用稀釋涂布平板法在培養(yǎng)基上看到的每一個(gè)菌落都來(lái)自一個(gè)活細(xì)胞，而顯微鏡直接計(jì)數(shù)法會(huì)將死亡的酵母菌也計(jì)算在內(nèi)。
此類題目圍繞某一技術(shù)或工程進(jìn)行考查，全面熟悉其原理是解決問題的基礎(chǔ)，尤其是解決基因工程問題時(shí)要帶著分子生物學(xué)思維來(lái)分析作答。
1．(2021·廣東，21節(jié)選)中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖)為原料，在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖。
回答下列問題：
基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性，研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60 g/L，pH為10，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60 d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是________________________________________________________________________
_________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。
答案　鹽濃度為60 g/L的條件下，其他雜菌因失水過(guò)多而死亡；pH為10的條件下，其他雜菌的酶變性失活，生長(zhǎng)繁殖受抑制
2．(2021·全國(guó)甲，38節(jié)選)PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)。為檢測(cè)病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作：①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴(kuò)增DNA片段；④采集病人組織樣本。回答下列問題：
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是指_______________________________________________。該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。
答案　一項(xiàng)根據(jù)DNA半保留復(fù)制的原理，在體外提供參與DNA復(fù)制的各種組分與反應(yīng)條件，對(duì)目的基因的核苷酸序列進(jìn)行大量復(fù)制的技術(shù)
3．(2019·海南，31節(jié)選)人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價(jià)值的蛋白質(zhì)(Y)，該蛋白質(zhì)由一條多肽鏈組成。目前可以利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)Y。回答下列問題：
天然的Y通常需要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱商岣咂錈岱€(wěn)定性，若要根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對(duì)Y進(jìn)行改造以提高其熱穩(wěn)定性，具體思路是_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
答案　找到第6位氨基酸甲對(duì)應(yīng)的堿基所在的基因位置，參照密碼子表，將第6位氨基酸甲對(duì)應(yīng)的堿基替換為氨基酸乙的堿基
4．(2019·全國(guó)Ⅲ，37節(jié)選)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題：
(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是____________________________________。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上________(填“能夠”或“不能”)生長(zhǎng)，原因是______________________________________。
(2)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是___________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
答案　(1)蛋白胨　不同細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖所需的最適pH不同　能夠　硝化細(xì)菌可以利用空氣中的CO2作為碳源　(2)在一定的培養(yǎng)條件下，不同種微生物表現(xiàn)出各自穩(wěn)定的菌落特征
5．(2018·江蘇，32節(jié)選)為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶，研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因(1 656個(gè)堿基對(duì))，利用基因工程大量制備α-淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題：
為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的________端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是_______________________。
答案　5′　使DNA片段能定向插入表達(dá)載體，減少自連
6．(2022·山東，25節(jié)選)某種類型的白血病由蛋白P引發(fā)，蛋白UBC可使P被蛋白酶識(shí)別并降解，藥物A可通過(guò)影響這一過(guò)程對(duì)該病起到治療作用。為探索藥物A治療該病的機(jī)理，需構(gòu)建重組載體以獲得融合蛋白FLAG－P和FLAG－PΔ。PΔ是缺失特定氨基酸序列的P，F(xiàn)LAG是一種短肽，連接在P或PΔ的氨基端，使融合蛋白能與含有FLAG抗體的介質(zhì)結(jié)合，但不影響P或PΔ的功能。
為構(gòu)建重組載體，需先設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR特異性擴(kuò)增P基因。用于擴(kuò)增P基因的引物需滿足的條件是___________________________________________________________________。
答案　能與P基因母鏈的一段堿基序列配對(duì)、短單鏈核酸長(zhǎng)句表達(dá)(六)　生物技術(shù)與工程的概念、原理分析與應(yīng)用
1．(分析原因類)(2021·河北，24)采礦污染和不當(dāng)使用化肥導(dǎo)致重金屬鎘(Cd)在土壤中過(guò)量積累。利用植物修復(fù)技術(shù)將土壤中的Cd富集到植物體內(nèi)，進(jìn)行后續(xù)處理(例如，收集植物組織器官異地妥善儲(chǔ)存)，可降低土壤中Cd的含量。為提高植物對(duì)Cd污染土壤的修復(fù)能力，研究者將酵母液泡Cd轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(YCF1)基因?qū)胧茉囍参铮z測(cè)了相關(guān)指標(biāo)。
回答下列問題：
(1)進(jìn)行前期研究時(shí)，將含有YCF1基因的重組載體導(dǎo)入受試雙子葉植物印度芥菜，采用最多的方法是________________。研究者進(jìn)一步獲得了轉(zhuǎn)YCF1基因的不育楊樹株系，采用不育株系作為實(shí)驗(yàn)材料的目的是_______________________________________________________。
(2)已知YCF1特異定位于轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞的液泡膜上。據(jù)此分析，轉(zhuǎn)基因楊樹比野生型能更好地適應(yīng)高Cd環(huán)境的原因是_____________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
相較于草本植物，采用楊樹這種喬木作為Cd污染土壤修復(fù)植物的優(yōu)勢(shì)在于______________
_______________________________________________________________________________
_________________________________________________________________(寫出兩點(diǎn)即可)。
2．(分析原因類)(2022·河北，23節(jié)選)番茄灰霉病菌嚴(yán)重影響番茄生產(chǎn)，枯草芽孢桿菌可以產(chǎn)生對(duì)多種病原菌具有抑制作用的蛋白質(zhì)。為探究枯草芽孢桿菌能否用于番茄灰霉病的生物防治，研究者設(shè)計(jì)了相關(guān)實(shí)驗(yàn)。回答下列問題：
枯草芽孢桿菌為好氧微生物，液體培養(yǎng)時(shí)應(yīng)采用__________(填“靜置”或“搖床震蕩”)培養(yǎng)。培養(yǎng)過(guò)程中抽樣檢測(cè)活菌數(shù)量時(shí)，應(yīng)采用______________(填“稀釋涂布平板法”或“顯微鏡直接計(jì)數(shù)法”)，其原因是____________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
此類題目圍繞某一技術(shù)或工程進(jìn)行考查，全面熟悉其原理是解決問題的基礎(chǔ)，尤其是解決基因工程問題時(shí)要帶著分子生物學(xué)思維來(lái)分析作答。
1．(2021·廣東，21節(jié)選)中國(guó)科學(xué)家運(yùn)用合成生物學(xué)方法構(gòu)建了一株嗜鹽單胞菌H，以糖蜜(甘蔗榨糖后的廢棄液，含較多蔗糖)為原料，在實(shí)驗(yàn)室發(fā)酵生產(chǎn)PHA等新型高附加值可降解材料，期望提高甘蔗的整體利用價(jià)值。工藝流程如圖。
回答下列問題：
基于菌株H嗜鹽、酸堿耐受能力強(qiáng)等特性，研究人員設(shè)計(jì)了一種不需要滅菌的發(fā)酵系統(tǒng)，其培養(yǎng)基鹽濃度設(shè)為60 g/L，pH為10，菌株H可正常持續(xù)發(fā)酵60 d以上。該系統(tǒng)不需要滅菌的原因是________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_________________________________________________________________(答出兩點(diǎn)即可)。
2．(2021·全國(guó)甲，38節(jié)選)PCR技術(shù)可用于臨床的病原菌檢測(cè)。為檢測(cè)病人是否感染了某種病原菌，醫(yī)生進(jìn)行了相關(guān)操作：①分析PCR擴(kuò)增結(jié)果；②從病人組織樣本中提取DNA；③利用PCR擴(kuò)增DNA片段；④采集病人組織樣本。回答下列問題：
PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)是指____________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
該技術(shù)目前被廣泛地應(yīng)用于疾病診斷等方面。
3．(2019·海南，31節(jié)選)人的T細(xì)胞可以產(chǎn)生某種具有臨床價(jià)值的蛋白質(zhì)(Y)，該蛋白質(zhì)由一條多肽鏈組成。目前可以利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)Y。回答下列問題：
天然的Y通常需要在低溫條件下保存。假設(shè)將Y的第6位氨基酸甲改變?yōu)榘被嵋铱商岣咂錈岱€(wěn)定性，若要根據(jù)蛋白質(zhì)工程的原理對(duì)Y進(jìn)行改造以提高其熱穩(wěn)定性，具體思路是_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
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4．(2019·全國(guó)Ⅲ，37節(jié)選)回答下列與細(xì)菌培養(yǎng)相關(guān)的問題：
(1)在細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中能同時(shí)提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制備培養(yǎng)基時(shí)要根據(jù)所培養(yǎng)細(xì)菌的不同來(lái)調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的pH，其原因是___________________________________________。硝化細(xì)菌在沒有碳源的培養(yǎng)基上________(填“能夠”或“不能”)生長(zhǎng)，原因是______________________________________。
(2)單個(gè)細(xì)菌在平板上會(huì)形成菌落，研究人員通常可根據(jù)菌落的形狀、大小、顏色等特征來(lái)初步區(qū)分不同種的微生物，原因是___________________________________________________
_______________________________________________________________________________。
5．(2018·江蘇，32節(jié)選)為生產(chǎn)具有特定性能的α 淀粉酶，研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α 淀粉酶基因(1 656個(gè)堿基對(duì))，利用基因工程大量制備α 淀粉酶，實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題：
為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接，需在引物的________端加上限制性酶切位點(diǎn)，且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn)，主要目的是_______________________。
6．(2022·山東，25節(jié)選)某種類型的白血病由蛋白P引發(fā)，蛋白UBC可使P被蛋白酶識(shí)別并降解，藥物A可通過(guò)影響這一過(guò)程對(duì)該病起到治療作用。為探索藥物A治療該病的機(jī)理，需構(gòu)建重組載體以獲得融合蛋白FLAG－P和FLAG－PΔ。PΔ是缺失特定氨基酸序列的P，F(xiàn)LAG是一種短肽，連接在P或PΔ的氨基端，使融合蛋白能與含有FLAG抗體的介質(zhì)結(jié)合，但不影響P或PΔ的功能。
為構(gòu)建重組載體，需先設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR特異性擴(kuò)增P基因。用于擴(kuò)增P基因的引物需滿足的條件是___________________________________________________________________。

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