資源簡(jiǎn)介

第33講　細(xì)胞工程
課程內(nèi)容 核心素養(yǎng)——提考能
1.簡(jiǎn)述植物的組織培養(yǎng)2.利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育菊花或其他植物幼苗，并進(jìn)行栽培3.簡(jiǎn)述動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆4.收集單克隆抗體在臨床上實(shí)際應(yīng)用的資料，并進(jìn)行交流分享5.舉例說出細(xì)胞融合與單克隆抗體制備 科學(xué)思維 建立植物細(xì)胞工程和單克隆抗體制備基本流程模型
科學(xué)探究 細(xì)胞工程的應(yīng)用
社會(huì)責(zé)任 植物組織培養(yǎng)在生產(chǎn)生活中的應(yīng)用，克隆動(dòng)物及對(duì)人類社會(huì)可能的影響
考點(diǎn)一　植物細(xì)胞工程
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1.細(xì)胞工程
(1)原理：細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)。
(2)操作水平：細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平。
(3)目的：按照人的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品。
2.植物細(xì)胞的全能性
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3.植物組織培養(yǎng)技術(shù)
(1)原理：植物細(xì)胞具有全能性。
(2)過程：
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(3)培養(yǎng)條件：
①無菌：培養(yǎng)基滅菌、培養(yǎng)材料和培養(yǎng)器械消毒。
②固體培養(yǎng)基：大多由無機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、激素、瓊脂四部分組成。
③光照：脫分化階段不需要光照。
④激素調(diào)控：培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例調(diào)控組織培養(yǎng)進(jìn)程。
(4)實(shí)例：菊花的組織培養(yǎng)過程
①選材：一般選擇未開花植株的莖上部新生的側(cè)枝。
②培養(yǎng)基：常用MS培養(yǎng)基，其主要成分有大量元素、微量元素、有機(jī)物，常需要添加植物激素。
③實(shí)驗(yàn)操作過程
　↓
接種：始終在酒精燈火焰旁進(jìn)行，對(duì)接種工具要用火焰灼燒滅菌，將菊花莖段插入培養(yǎng)基中時(shí)注意不要倒插
　↓
培養(yǎng)與移栽：在18～22 ℃的無菌箱中培養(yǎng)，得到試管苗后進(jìn)行移栽
4.植物體細(xì)胞雜交技術(shù)
(1)概念：將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。
(2)原理：體細(xì)胞雜交利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，雜種細(xì)胞培育成雜種植株利用了植物細(xì)胞的全能性。
(3)過程
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(4)意義：克服不同種生物遠(yuǎn)緣雜交的不親和性。
5.植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用
(1)植物繁殖的新途徑
①微型繁殖：用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù)。
特點(diǎn)
②作物脫毒技術(shù)：選取作物無毒組織(如莖尖)進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得脫毒苗的技術(shù)。
③人工種子：以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子。
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(2)作物新品種的培育
①單倍體育種
a.實(shí)質(zhì)：花藥離體培養(yǎng)過程就是植物組織培養(yǎng)過程。
b.流程：花藥單倍體幼苗純合子。
c.優(yōu)點(diǎn)：后代不發(fā)生性狀分離，都是純合子，能夠穩(wěn)定遺傳，明顯縮短了育種年限。
②突變體的利用：在植物組織培養(yǎng)過程中，由于培養(yǎng)細(xì)胞一直處于不斷的分生狀態(tài)，因此容易受到培養(yǎng)條件和外界壓力(如射線、化學(xué)物質(zhì)等)的影響而發(fā)生突變。從這些產(chǎn)生突變的個(gè)體中可以篩選出對(duì)人們有用的突變體，進(jìn)而培育成新品種。
(3)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)
①細(xì)胞產(chǎn)物：蛋白質(zhì)、脂肪、糖類、藥物、香料、生物堿等
②培養(yǎng)階段：愈傷組織階段
③技術(shù)基礎(chǔ)：植物組織培養(yǎng)技術(shù)
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1.植物組織培養(yǎng)的關(guān)鍵
(1)條件：離體，一定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，激素(生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素)等。
(2)培養(yǎng)基狀態(tài)：固體培養(yǎng)基(需再分化生根培養(yǎng)基及生芽培養(yǎng)基)
(3)體內(nèi)細(xì)胞未表現(xiàn)全能性的原因：基因的表達(dá)具有選擇性。
(4)光照的應(yīng)用
脫分化階段不需要給予光照，再分化階段需要給予光照，以利于葉綠素的形成。
2.植物激素在植物組織培養(yǎng)中的作用
生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的比值 作用效果
比值高時(shí) 促進(jìn)根分化、抑制芽形成
比值低時(shí) 促進(jìn)芽分化、抑制根形成
比值適中 促進(jìn)愈傷組織形成
3.雜種植物遺傳物質(zhì)的變化
(1)遺傳特性：雜種植株中含有兩種植物的遺傳物質(zhì)，故雜種植株具備兩種植物的遺傳特性。
(2)染色體組數(shù)
①染色體組數(shù)＝兩種植物體細(xì)胞內(nèi)染色體組數(shù)之和。
②植物體細(xì)胞雜交形成的雜種植株，有幾個(gè)染色體組就稱為幾倍體，屬于異源多倍體，變異類型屬于染色體變異。
③若一植物細(xì)胞含有2x條染色體，2個(gè)染色體組，基因型為Aabb，另一植物細(xì)胞含有2y條染色體，2個(gè)染色體組，基因型為ccDd，則新植株應(yīng)為異源四倍體，其體細(xì)胞中染色體為(2x＋2y)條，4個(gè)染色體組，基因型為AabbccDd。
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(1)(人教版選修三P36“小知識(shí)”)固體培養(yǎng)基大多數(shù)都是由無機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分、激素、瓊脂四部分組成。
(2)(人教版選修三P40“小知識(shí)”)化學(xué)誘變一般是利用一些化學(xué)誘變劑進(jìn)行處理。常見的有甲基磺酸乙酯(EMS)和疊氮化鈉(SA)等。物理誘變一般采用電離輻射處理。電離輻射主要包括γ射線、β射線、中子等。
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1.(2018·4月浙江選考節(jié)選)取田間不同品種水稻的幼胚，先進(jìn)行　　　　，然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)，幼胚發(fā)生　　　　形成愈傷組織，并進(jìn)行繼代培養(yǎng)。用含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染愈傷組織，再培養(yǎng)愈傷組織，以便獲得抗蟲的轉(zhuǎn)基因水稻。影響愈傷組織能否成功再生出植株的因素有：培養(yǎng)條件如光、溫度、培養(yǎng)基配方如植物激素配比、以及_________________________________________________
_____________________________________________________________________
(答出2點(diǎn)即可)。
解析　不同種類植物或同種植物的不同基因型個(gè)體之間存在遺傳的差異，細(xì)胞全能性的表達(dá)程度大小不同，小麥水稻等作物在多次繼代培養(yǎng)后，會(huì)喪失細(xì)胞全能性的表達(dá)能力。
答案　消毒　脫分化　水稻的基因型、愈傷組織繼代的次數(shù)
2.(2017·海南卷，31)甲、乙兩名同學(xué)分別以某種植物的綠色葉片和白色花瓣為材料，利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖該植物。回答下列問題：
(1)以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進(jìn)行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是________________________________________________
____________________________________________________________________。
(2)甲、乙同學(xué)在誘導(dǎo)愈傷組織所用的培養(yǎng)基中，均加入一定量的蔗糖，蔗糖水解后可得到　　　　。若要用細(xì)胞作為材料進(jìn)行培養(yǎng)獲得幼苗，該細(xì)胞應(yīng)具備的條件是　　　　　　　　(填“具有完整的細(xì)胞核”“具有葉綠體”或“已轉(zhuǎn)入抗性基因”)。
(3)圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是　　　　　　　　　　　　　　。A中的愈傷組織是葉肉細(xì)胞經(jīng)　　　　形成的。
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(4)若該種植物是一種雜合子的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時(shí)，　　　　(填“能”或“不能”)采用經(jīng)減數(shù)分裂得到的花粉粒作為外植體，原因是______________________
____________________________________________________________________。
解析　(1)利用綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)的原理是高度分化了的植物細(xì)胞仍具有全能性。
(2)蔗糖屬于二糖，其單位是一分子果糖和一分子葡萄糖，具有完整細(xì)胞核的植物細(xì)胞才具有全能性。
(3)在組織培養(yǎng)過程中，常需要添加的兩種植物激素為細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素，由葉肉細(xì)胞形成愈傷組織的過程為脫分化。
(4)雜合子經(jīng)減數(shù)分裂形成不同基因型的花粉，若用花粉離體培養(yǎng)，所得到的個(gè)體基因型與原植株不同。
答案　(1)綠色葉片和白色花瓣的細(xì)胞具有全能性，在一定條件下能發(fā)育成完整的植株
(2)葡萄糖、果糖　具有完整的細(xì)胞核
(3)細(xì)胞分裂素、生長(zhǎng)素　脫分化
(4)不能　對(duì)雜合子的植株來說，其體細(xì)胞的基因型相同，而花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同。用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的花卉基因型不同于原植株
考點(diǎn)二　動(dòng)物細(xì)胞工程
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1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)
(1)地位：動(dòng)物細(xì)胞工程常用的技術(shù)手段有動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合等。其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。
(2)培養(yǎng)過程
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(3)培養(yǎng)條件
①無菌、無毒環(huán)境
②營(yíng)養(yǎng)：除糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素之外通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
③適宜的溫度：36.5 ℃±0.5 ℃；適宜的pH：7.2～7.4。
④氣體環(huán)境
2.動(dòng)物體細(xì)胞克隆技術(shù)(核移植技術(shù))
(1)原理：動(dòng)物細(xì)胞核具有全能性。
(2)核移植分類：胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植。
(3)核移植過程(以克隆高產(chǎn)奶牛為例)
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(4)應(yīng)用：①加速家畜遺傳改良進(jìn)程，促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育。②保護(hù)瀕危物種。③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白。④作為異種移植的供體。⑤用于組織器官的移植。
3.動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備
(1)動(dòng)物細(xì)胞融合
①原理：細(xì)胞膜的流動(dòng)性。
②融合方法：聚乙二醇(PEG)、滅活的病毒、電激等。
③意義：突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能，也為制造單克隆抗體開辟了新途徑。
(2)單克隆抗體
①制備過程
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②優(yōu)點(diǎn)：特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備。
③用途：作為診斷試劑；用于治療疾病和運(yùn)載藥物。
4.胚胎干細(xì)胞(ES或EK細(xì)胞)
(1)來源：早期胚胎或原始性腺。
(2)特點(diǎn)：形態(tài)上，體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；功能上，具有發(fā)育的全能性；體外培養(yǎng)條件下可以增殖而不分化。
(3)培養(yǎng)過程
(4)應(yīng)用
①治療人類的某些頑癥
②培育人造組織器官
③研究體外細(xì)胞分化的理想材料
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1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與動(dòng)物體細(xì)胞核移植的比較
項(xiàng)目 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 動(dòng)物體細(xì)胞核移植
原理 細(xì)胞增殖 動(dòng)物細(xì)胞核的全能性
過程 INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\943a.tif" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\943a.tif" \* MERGEFORMATINET
結(jié)果 獲得細(xì)胞群 獲得與供體遺傳物質(zhì)基本相同的個(gè)體
2.核移植產(chǎn)生的克隆動(dòng)物與提供細(xì)胞核的親本可能不同的3個(gè)原因
①克隆動(dòng)物細(xì)胞質(zhì)基因來源于另一個(gè)親本，與植物組織培養(yǎng)不同(來自一個(gè)親本)，即克隆動(dòng)物遺傳物質(zhì)來自兩個(gè)親本。②在發(fā)育過程中可能發(fā)生基因突變、染色體變異導(dǎo)致性狀改變。③外界環(huán)境條件的影響引起不可遺傳的變異。
INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\深挖教材.tif" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\深挖教材.tif" \* MERGEFORMATINET
1.(人教版選修三P37、P52拓展)動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交有何不同？
提示　主要有三點(diǎn)不同：①融合前的處理不同：植物體細(xì)胞雜交用纖維素酶和果膠酶去掉細(xì)胞壁，制備原生質(zhì)體才能融合，而動(dòng)物細(xì)胞可以直接融合。
②誘導(dǎo)方式不同：動(dòng)物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)方式是用滅活的病毒處理。
③目的不同：植物體細(xì)胞雜交的目的是為了培育雜種植株，動(dòng)物細(xì)胞融合只是為了獲得雜種細(xì)胞。
2.(人教版選修三P48圖2－21)動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)為何選用去核卵(母)細(xì)胞？
提示　①此類細(xì)胞體積大，易于操作；②卵黃多，可為發(fā)育提供充足的營(yíng)養(yǎng)；
③卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中存在激發(fā)細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)。
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1.(2018·全國(guó)卷Ⅲ，38)[生物——選修3：現(xiàn)代生物科技專題]
2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道，中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆，獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”。回答下列問題：
(1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程，核移植是指　　　　　　　　。通過核移植方法獲得的克隆猴，與核供體相比，克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目
　　　　(填“減半”“加倍”或“不變”)。
(2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度　　　　(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植，其原因是　　　　　　　　。
(3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中，若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體，通常，所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目　　　　(填“相同”或“不同”)，性染色體組合　　　　(填“相同”或“不同”)。
解析　(1)動(dòng)物核移植是將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核，移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為克隆動(dòng)物，與核供體相比，其細(xì)胞的染色體數(shù)目不變。(2)由于動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)其全能性相對(duì)容易，而動(dòng)物體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性十分困難，所以，胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度明顯低于體細(xì)胞核移植。(3)哺乳動(dòng)物雌性和雄性個(gè)體的體細(xì)胞中常染色體數(shù)目相同，所以分別以雌性和雄性個(gè)體的體細(xì)胞為供體，克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同，但其性染色體組合不同。
答案　(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核，移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中　不變
(2)小于　胚胎細(xì)胞分化程度低，恢復(fù)全能性相對(duì)容易
(3)相同　不同
2.(2018·山東重點(diǎn)高中模擬)抗人T淋巴細(xì)胞CD3抗原單克隆抗體主要用于治療和預(yù)防腎臟等器官移植病人的急性排斥反應(yīng)。如圖是該抗體的研發(fā)和生產(chǎn)流程。請(qǐng)回答：
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(1)圖中甲是　　　　細(xì)胞，乙是　　　　細(xì)胞。
(2)①過程需要加入　　　　誘導(dǎo)細(xì)胞融合，之后需用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，目的是除去其他細(xì)胞，保留　　　　細(xì)胞。經(jīng)上述篩選獲得的細(xì)胞產(chǎn)生的抗體還不是單克隆抗體，這是因?yàn)椤　　　　　　　　　　　　　　　　＝?jīng)克隆化培養(yǎng)后，利用抗體能與　　　　分子特異性結(jié)合的原理，再次篩選得到能分泌所需抗體的細(xì)胞。
(3)②表示將丁細(xì)胞注射到小鼠　　　　內(nèi)，之后從相應(yīng)液體中提取該單克隆抗體。該單克隆抗體能夠治療和預(yù)防器官移植時(shí)的排斥反應(yīng)，這　　　　(填“能”或“不能”)證明免疫排斥主要是細(xì)胞免疫引起的。
解析　(1)要獲得抗人T淋巴細(xì)胞CD3抗原單克隆抗體，需要向小鼠體內(nèi)注射的抗原是人T淋巴細(xì)胞；從小鼠體內(nèi)提取的是在接受特定抗原(人T淋巴細(xì)胞)刺激后形成的B淋巴細(xì)胞。(2)動(dòng)物細(xì)胞融合的誘導(dǎo)物是聚乙二醇(PEG)或滅活的病毒，誘導(dǎo)細(xì)胞融合之后需用特定的選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行第一次篩選，目的是在除去其他細(xì)胞的同時(shí)保留雜交瘤細(xì)胞。經(jīng)第一次篩選獲得的細(xì)胞產(chǎn)生的抗體還不是單克隆抗體，這是因?yàn)閺男∈笃⑴K內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞不止一種。經(jīng)克隆化培養(yǎng)后，利用該抗體能與CD3分子特異性結(jié)合的原理，再次篩選得到能分泌所需抗體的細(xì)胞。(3)②表示將丁細(xì)胞注射到小鼠腹腔內(nèi)。該單克隆抗體能夠治療和預(yù)防器官移植時(shí)的排斥反應(yīng)，這不能證明免疫排斥主要是細(xì)胞免疫引起的，因?yàn)轶w液免疫和細(xì)胞免疫過程中都有T淋巴細(xì)胞的參與。
答案　人T淋巴(必須答出“人”和“T淋巴”)　B淋巴　(2)聚乙二醇(PEG或滅活的病毒)　雜交瘤　從小鼠脾臟內(nèi)提取的B淋巴細(xì)胞不止一種(雜交瘤細(xì)胞不止一種)　CD3　(3)腹腔　不能
澄清易錯(cuò)易混·強(qiáng)化科學(xué)思維
[易錯(cuò)易混]
易錯(cuò)點(diǎn)1　不清楚植物脫毒苗培養(yǎng)時(shí)選材要求及原理
點(diǎn)撥　由于植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少，所以常采用莖尖利用組織培養(yǎng)技術(shù)獲得脫毒苗。
易錯(cuò)點(diǎn)2　對(duì)植物組織培養(yǎng)的目的和人工種子的實(shí)質(zhì)理解不透
點(diǎn)撥　(1)組織培養(yǎng)的目的不同，培養(yǎng)的階段不同。如：生產(chǎn)細(xì)胞代謝產(chǎn)物，只需培養(yǎng)至愈傷組織時(shí)期；生產(chǎn)人工種子，則需要培養(yǎng)至胚狀體時(shí)期；獲得植株就需培養(yǎng)至幼苗時(shí)期。(2)人工種子是通過無性生殖(植物體細(xì)胞的組織培養(yǎng)技術(shù))形成的，只有一個(gè)親本的性狀；自然種子是有性生殖的產(chǎn)物，具有兩個(gè)親本的性狀。
易錯(cuò)點(diǎn)3　不清楚動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，為何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶
點(diǎn)撥　進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞傳代培養(yǎng)時(shí)用胰蛋白酶分散細(xì)胞，說明細(xì)胞間的物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)。分散細(xì)胞時(shí)不能用胃蛋白酶，因?yàn)槲傅鞍酌缸饔玫倪m宜pH約為1.8。胰蛋白酶作用的適宜pH為7.2～7.8，而多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的適宜pH為7.2～7.4。
易錯(cuò)點(diǎn)4　混淆原代培養(yǎng)與傳代培養(yǎng)
點(diǎn)撥　(1)原代培養(yǎng)：細(xì)胞懸液第一次在瓶中培養(yǎng)，沒有分瓶培養(yǎng)之前的細(xì)胞培養(yǎng)。
(2)傳代培養(yǎng)：原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)、繁殖一定時(shí)間后，由于空間不足或細(xì)胞密度過大導(dǎo)致接觸抑制影響細(xì)胞的生長(zhǎng)，因此需要重新用胰蛋白酶等處理，進(jìn)行分瓶擴(kuò)大培養(yǎng)，即傳代培養(yǎng)。
易錯(cuò)點(diǎn)5　不清楚動(dòng)物細(xì)胞克隆化培養(yǎng)時(shí)為何常選10代以內(nèi)的細(xì)胞，而“瘤細(xì)胞”卻為“50代以后”
點(diǎn)撥　取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳至10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。然而欲獲得“無限增殖”的“瘤細(xì)胞”則往往在“50代以后”，其遺傳物質(zhì)已發(fā)生變化，具“癌變”特性。
[規(guī)范答題]
如圖1是利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育脫毒草莓苗的過程，如圖2是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答：
―→―→
圖1
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圖2
(1)外植體能夠形成幼苗所依據(jù)的原理是__________________________________。
培育脫毒苗時(shí)，一般選取　　　　作為外植體，其依據(jù)是_____________________。
(2)①是脫分化過程，細(xì)胞脫分化是指已經(jīng)分化的細(xì)胞，經(jīng)過誘導(dǎo)后，失去其　　　　　　　　而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只?xì)胞的過程。②是　　　　　　　　過程。
(3)容器A中的動(dòng)物器官或組織首先要進(jìn)行的處理是剪碎，然后用　　　　酶處理，這是為了使細(xì)胞分散開來，這樣做的目的是_____________________________
_____________________________________________________________________。
(4)培養(yǎng)首先在B瓶中進(jìn)行，瓶中的培養(yǎng)液成分有　　　　　　　　　　　　等。在此瓶中培養(yǎng)一段時(shí)間后，有許多細(xì)胞衰老死亡，這是培養(yǎng)到第　　　　代了，到這時(shí)的培養(yǎng)稱為　　　　。
(5)在C瓶中正常培養(yǎng)了一段時(shí)間后，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞全部死亡。原因是_______________
_____________________________________________________________________。
答卷采樣 錯(cuò)因分析
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隨堂·真題&預(yù)測(cè)
1.(2018·高考江蘇卷，8)花藥離體培養(yǎng)是重要的育種手段。如圖是某二倍體植物花藥育種過程的示意圖，下列敘述正確的是(　　)
INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\18GS17.TIF" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\18GS17.TIF" \* MERGEFORMATINET
A.為了防止微生物污染，過程①所用的花藥需在70%乙醇中浸泡30 min
B.過程②的培養(yǎng)基中需添加較高濃度的細(xì)胞分裂素以利于根的分化
C.過程③逐步分化的植株中可篩選獲得純合的二倍體
D.過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到含有蔗糖和多種植物激素的基質(zhì)上
解析　通常將花藥用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡30 s，立即取出，在無菌水中清洗，A錯(cuò)誤；過程②為脫分化形成愈傷組織的過程，所用培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的比例應(yīng)適中，B錯(cuò)誤；過程③為再分化，因用秋水仙素處理了由花藥形成的愈傷組織細(xì)胞，故能篩選獲得純合的二倍體，C正確；過程④應(yīng)將煉苗后的植株移栽到土壤中，D錯(cuò)誤。
答案　C
2.(2018·高考江蘇卷，22)如圖為細(xì)胞融合的示意圖，下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\18GS22.TIF" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\18GS22.TIF" \* MERGEFORMATINET
A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需先去分化再誘導(dǎo)融合
B.a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn)
C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)
D.c細(xì)胞不能同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因
解析　若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞，需要用酶解法去掉細(xì)胞壁后再誘導(dǎo)融合，融合完成后的細(xì)胞再經(jīng)脫分化和再分化培養(yǎng)，A錯(cuò)誤；a細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要借助物理、化學(xué)等方法處理后才能實(shí)現(xiàn)，B正確；c細(xì)胞的形成要經(jīng)過細(xì)胞膜的融合，與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān)，C正確；c細(xì)胞內(nèi)有a、b兩細(xì)胞的遺傳物質(zhì)，但不能同時(shí)表達(dá)a、b細(xì)胞中的所有基因，D正確。
答案　A
3.(2015·江蘇卷，20)下圖為制備人工種子部分流程示意圖，下列敘述正確的是(　　)
INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\G242.TIF" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\G242.TIF" \* MERGEFORMATINET
A.胚狀體是外植體在培養(yǎng)基上脫分化形成的一團(tuán)愈傷組織
B.該過程以海藻酸鈉作為營(yíng)養(yǎng)成分，以CaCl2溶液作為凝固劑
C.可在海藻酸鈉溶液中添加蔗糖，為胚狀體提供碳源
D.包埋胚狀體的凝膠珠能夠隔絕空氣，有利于人工種子的儲(chǔ)藏
解析　本題主要考查植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用及固定化細(xì)胞的制備過程。胚狀體是愈傷組織在分化培養(yǎng)基上形成的，A錯(cuò)誤；海藻酸鈉用于制作人工種皮，不提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，B錯(cuò)誤；為保持胚狀體的活性，包埋胚狀體的凝膠珠應(yīng)適當(dāng)透氣，D錯(cuò)誤。
答案　C
4.(2016·全國(guó)卷Ⅱ，40)下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動(dòng)物(二倍體)的流程。
回答下列問題：
(1)圖中A表示正常細(xì)胞核，染色體數(shù)為2n，則其性染色體的組成可為　　　　。過程①表示去除細(xì)胞核，該過程一般要在卵母細(xì)胞培養(yǎng)至適當(dāng)時(shí)期再進(jìn)行，去核時(shí)常采用　　　　的方法。②代表的過程是　　　　。
(2)經(jīng)過多次傳代后，供體細(xì)胞中　　　　的穩(wěn)定性會(huì)降低。因此，選材時(shí)必須關(guān)注傳代次數(shù)。
(3)若獲得的克隆動(dòng)物與供體動(dòng)物性狀不完全相同，從遺傳物質(zhì)的角度分析其原因是___________________________________________________________________。
(4)與克隆羊“多莉(利)”培養(yǎng)成功一樣，其他克隆動(dòng)物的成功獲得也證明了____________________________________________________________________。
解析　(1)提供體細(xì)胞的供體可能為雌性，也可能為雄性，因此圖中A(正常細(xì)胞核)的性染色體組成為XX或XY。常采用顯微操作去核法來去除卵母細(xì)胞的細(xì)胞核。②過程表示將早期胚胎移入受體，其過程為胚胎移植。(2)取供體動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，因?yàn)?0代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型，保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。超過10代繼續(xù)培養(yǎng)，則其遺傳物質(zhì)(或核型)的穩(wěn)定性會(huì)降低。(3)克隆動(dòng)物的細(xì)胞核基因來自供體，因此大部分性狀與供體相同，但細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體(或提供卵母細(xì)胞的個(gè)體)，即卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響，這就決定了克隆動(dòng)物的性狀與供體不完全相同。(4)克隆動(dòng)物的培育采用的是核移植技術(shù)，核移植技術(shù)的原理是：已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性。
答案　(1)XX或XY　顯微操作(去核法)　胚胎移植　(2)遺傳物質(zhì)　(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會(huì)對(duì)克隆動(dòng)物的性狀產(chǎn)生影響　(4)已經(jīng)分化的動(dòng)物體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性
5.(2020·高考預(yù)測(cè))如圖是制備乙肝病毒表面抗體的流程圖。請(qǐng)回答下列問題：
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(1)圖中細(xì)胞Ⅰ的名稱為　　　　，其與骨髓瘤細(xì)胞融合所依據(jù)的基本原理是_____________________________________________________________________。
(2)在圖示流程中至少需要進(jìn)行兩次篩選，其中第一次篩選的目的是　　　　　　　　：第二次篩選的目的是_______________________________
____________________________________________________________________。
(3)制備得到的單克隆抗體可用于乙肝的免疫治療，其所利用的免疫學(xué)原理是_____________________________________________________________________。
(4)干擾素屬于淋巴因子，由效應(yīng)T細(xì)胞產(chǎn)生，并以　　　　的方式釋放到細(xì)胞外。某同學(xué)聯(lián)想到單克隆抗體的制備過程，提出用效應(yīng)T細(xì)胞代替細(xì)胞Ⅰ，從而獲得單克隆干擾素的設(shè)想，你認(rèn)為該方法是否可行？并說明理由　　　　　　　　　。
解析　(1)用抗原刺激小鼠使之產(chǎn)生特異性免疫反應(yīng)，從小鼠體內(nèi)提取B淋巴細(xì)胞，B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合成雜交瘤細(xì)胞。細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜具有一定的流動(dòng)性。(2)兩次篩選中第一次篩選是獲得雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選是從雜交瘤細(xì)胞中獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。(3)單克隆抗體具有與抗原結(jié)合的特異性強(qiáng)、靈敏度高的特點(diǎn)，可用于乙肝的免疫治療。(4)干擾素的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì)，效應(yīng)T細(xì)胞以胞吐的方式將之分泌到細(xì)胞外；效應(yīng)T細(xì)胞是T細(xì)胞接受抗原刺激后，經(jīng)過增殖、分化形成的細(xì)胞，具有釋放淋巴因子的功能，因此可依據(jù)單克隆抗體的制備過程，用效應(yīng)T細(xì)胞代替細(xì)胞Ⅰ，從而獲得單克隆干擾素。
答案　(1)B淋巴細(xì)胞(或漿細(xì)胞)　細(xì)胞膜(具有一定)的流動(dòng)性　(2)獲得雜交瘤細(xì)胞　獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞　(3)抗原和抗體的特異性結(jié)合(或單克隆抗體與抗原結(jié)合的特異性強(qiáng))　(4)胞吐　不可行，因?yàn)樾?yīng)T細(xì)胞能與骨髓瘤結(jié)合，使骨髓細(xì)胞裂解
(時(shí)間：35分鐘)
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1.某興趣小組擬用組織培養(yǎng)繁殖一種名貴花卉，其技術(shù)路線為“取材→消毒→愈傷組織培養(yǎng)→出芽→生根→移栽”。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A.消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)細(xì)胞的傷害
B.在愈傷組織培養(yǎng)中加入細(xì)胞融合的誘導(dǎo)劑，可獲得染色體加倍的細(xì)胞
C.出芽是細(xì)胞再分化的結(jié)果，受基因選擇性表達(dá)的調(diào)控
D.生根時(shí)，培養(yǎng)基通常應(yīng)含α－萘乙酸等生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑
解析　植物組織培養(yǎng)中消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對(duì)培養(yǎng)材料的傷害，A正確；植物體細(xì)胞的雜交需先除去細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，再在細(xì)胞融合誘導(dǎo)劑作用下獲得染色體加倍的細(xì)胞，B錯(cuò)誤；細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C正確；植物組織培養(yǎng)過程中，生根階段的培養(yǎng)基中通常應(yīng)含有生長(zhǎng)素類調(diào)節(jié)劑，D正確。
答案　B
2.(2018·濟(jì)南調(diào)研)如圖是通過植物細(xì)胞工程技術(shù)獲得紫杉醇的途徑，下列敘述正確的是(　　)
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A.該途徑依據(jù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性
B.過程①需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例
C.經(jīng)過程①細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)未發(fā)生變化
D.過程③需使用固體培養(yǎng)基，有利于細(xì)胞增殖
解析　細(xì)胞全能性以細(xì)胞發(fā)育成個(gè)體為標(biāo)志，而圖中并沒有形成完整植物體，A錯(cuò)誤；過程①是脫分化，而決定植物脫分化和再分化的關(guān)鍵因素是培養(yǎng)基中植物激素的種類和比例，因此該過程需控制好培養(yǎng)基中植物激素的比例，B正確；過程①是脫分化，經(jīng)該過程細(xì)胞的形態(tài)和結(jié)構(gòu)發(fā)生了變化，成為高度液泡化的薄壁細(xì)胞，C錯(cuò)誤；過程③需使用液體培養(yǎng)基，有利于細(xì)胞增殖，D錯(cuò)誤。
答案　B
3.(2019·煙臺(tái)市調(diào)研)如圖是某克隆羊培育過程模式圖，試分析獲得該克隆羊的生殖方式、該克隆羊的基因型以及該克隆羊發(fā)育成熟時(shí)所分泌的性激素依次是(　　)
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A.無性生殖、Aa、雌性激素 B.無性生殖、aa、雄性激素
C.有性生殖、aa、雄性激素 D.有性生殖、AA、雌性激素
解析　克隆羊是利用了細(xì)胞核移植技術(shù)，其生殖方式為無性生殖；該克隆羊繼承了B羊的全部的細(xì)胞核基因和A羊的細(xì)胞質(zhì)基因，因此其基因型為aa；由于B羊?yàn)樾坌裕虼嗽摽寺⊙蛞酁樾坌裕试摽寺⊙虬l(fā)育成熟時(shí)分泌的性激素是雄性激素，故B正確。
答案　B
4.下列有關(guān)細(xì)胞工程的敘述，正確的是(　　)
A.PEG是促細(xì)胞融合劑，可直接誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合
B.用原生質(zhì)體制備人工種子，要防止細(xì)胞破裂
C.骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)免疫處理，可直接獲得單克隆抗體
D.核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體DNA來自供卵母體
解析　PEG是促細(xì)胞融合劑，但植物細(xì)胞不能直接融合，需先去細(xì)胞壁形成原生質(zhì)體才能融合，A錯(cuò)誤；制備人工種子應(yīng)用完整的植物細(xì)胞，不需制備原生質(zhì)體，B錯(cuò)誤；骨髓瘤細(xì)胞不能產(chǎn)生抗體，C錯(cuò)誤；核移植克隆的動(dòng)物，其線粒體來自卵細(xì)胞即線粒體DNA來自供卵母體，D正確。
答案　D
5.用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)制備單克隆抗體，下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是(　　)
A.將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞
B.用氯化鈣作誘導(dǎo)劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合
C.篩選雜交瘤細(xì)胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體
D.該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體
解析　B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導(dǎo)；氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑，氯化鈣的作用是在基因工程中用于提高微生物細(xì)胞壁的通透性，便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物細(xì)胞內(nèi)。
答案　B
6.(2018·山東濟(jì)寧一模)下面兩幅圖是制備單克隆抗體的示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：
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(1)圖1和圖2所示過程中，都必須用到的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)是　　　　　　。用PCR技術(shù)擴(kuò)增無限增殖基因除需要原料、能量、模板外還需要　　　 　和
　　　　　　　　。
(2)圖1中②過程與植物原生質(zhì)體融合的不同之處是用　　　　誘導(dǎo)，圖2中B所示的細(xì)胞特點(diǎn)是　　　　　　　　　　　　。
(3)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞時(shí)應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于　　　　的環(huán)境。抗體在抵抗外來病原體入侵方面具有十分重要的作用，這體現(xiàn)了免疫系統(tǒng)的　　　　功能。
解析　(1)圖1通過動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體，圖2通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)生產(chǎn)單克隆抗體，二者都必須用到動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。用PCR技術(shù)擴(kuò)增無限增殖基因除需要原料、能量、模板外還需要引物和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(或Taq酶)。(2)圖1中②過程為動(dòng)物細(xì)胞融合，與植物原生質(zhì)體融合的不同之處是用滅活的病毒誘導(dǎo)，圖2中B所示的細(xì)胞應(yīng)是含有無限增殖基因的漿細(xì)胞，特點(diǎn)是既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體。
答案　(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　引物　熱穩(wěn)定DNA聚合酶(或Taq酶)　(2)滅活的病毒　既能無限增殖，又能產(chǎn)生特異性抗體　(3)無菌無毒　防衛(wèi)
7.2018年1月25日，《細(xì)胞》雜志報(bào)道了我國(guó)研究人員在世界上率先利用去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA，經(jīng)體細(xì)胞核移植技術(shù)培育出第一批靈長(zhǎng)類動(dòng)物——食蟹猴，作為研究癌癥等人類疾病的動(dòng)物模型。如圖為體細(xì)胞核移植技術(shù)培育食蟹猴的操作過程，請(qǐng)回答：
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(1)2001年，美國(guó)科學(xué)家已經(jīng)培育出胚胎細(xì)胞核移植猴。獲得食蟹猴的體細(xì)胞核移植技術(shù)難度明顯高于胚胎細(xì)胞核移植，原因是______________________________。
(2)進(jìn)行過程①時(shí)，為提供成纖維細(xì)胞培養(yǎng)所需的無菌無毒環(huán)境，應(yīng)進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)措施是　　　　　　　　，其目的是________________________________________。
(3)據(jù)圖分析，過程③是利用　　　　法將成纖維細(xì)胞注入猴去核的MⅡ中期卵母細(xì)胞的　　　　　　　　。
(4)圖中過程⑤的實(shí)質(zhì)是早期胚胎在　　　　條件下空間位置的轉(zhuǎn)移。
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(5)上述實(shí)驗(yàn)的突破之處是使用了去甲基化酶(Kdm4d)的mRNA，在確定其作用時(shí)，研究人員用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)融合細(xì)胞得到A組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，用正常培養(yǎng)液培養(yǎng)注入去甲基化酶(Kdm4d)mRNA的融合細(xì)胞得到B組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。圖中X為融合細(xì)胞發(fā)育成的胚胎數(shù)Y為囊胚數(shù)，Z為內(nèi)細(xì)胞團(tuán)數(shù)，分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知，Kdm4d的mRNA的作用是既能提高　　　　又能提高　　　　。
解析　(1)與胚胎細(xì)胞相比，動(dòng)物體細(xì)胞的分化程度高，恢復(fù)其全能性更難，因此利用體細(xì)胞核移植難度更大。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，其目的是防止代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。(3)過程③是核移植過程，通過顯微注射的方法將供體細(xì)胞注入MⅡ中期卵母細(xì)胞的卵細(xì)胞膜與透明帶之間。
(4)胚胎移植時(shí)要求供體與受體具有相同生理狀態(tài)。(5)從圖中數(shù)據(jù)可知，與A組相比，B組的融合細(xì)胞(注入了Kdm4d的mRNA)發(fā)育成囊胚的成功率和囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率都較高。
答案　(1)體細(xì)胞分化程度高，恢復(fù)其全能性較難　(2)定期更換培養(yǎng)液　防止成纖維細(xì)胞代謝產(chǎn)物的積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害　(3)顯微注射　卵細(xì)胞膜與透明帶之間　(4)相同生理　(5)融合細(xì)胞發(fā)育成囊胚的成功率　囊胚中內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的形成率
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8.下列關(guān)于植物組織培養(yǎng)及其應(yīng)用的敘述，正確的是(　　)
A.離體的植物組織、器官必需經(jīng)過滅菌才能接種到組織培養(yǎng)基中
B.以植物芽尖為材料通過組織培養(yǎng)可以獲得抗毒新品種
C.生長(zhǎng)素、細(xì)胞分裂素的協(xié)同調(diào)節(jié)作用在組織培養(yǎng)中非常重要
D.以人工膜包裹植物愈傷組織和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)可制得人工種子
解析　離體的植物組織、器官必須經(jīng)過消毒才能接種到組織培養(yǎng)基中，滅菌會(huì)殺死細(xì)胞；以莖尖為材料通過組織培養(yǎng)可以獲得脫毒苗，但不是新品種，獲得抗病毒的新品種必須經(jīng)過轉(zhuǎn)基因技術(shù)；以人工薄膜包裹胚狀體等可制得人工種子。
答案　C
9.以某植物的綠色葉片和白色花瓣為材料進(jìn)行植物組織培養(yǎng)，下列相關(guān)敘述正確的是(　　)
A.外植體脫分化形成愈傷組織的過程需要生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和光照
B.綠色葉片和白色花瓣作為外植體，進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗
C.若選用花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)，能獲得與原植株基因型相同的個(gè)體
D.組織培養(yǎng)所選用的外植體細(xì)胞必須有完整的細(xì)胞核和葉綠體
解析　外植體脫分化形成愈傷組織不需要光照；綠色葉片和白色花瓣是細(xì)胞分化的結(jié)果，遺傳物質(zhì)并沒有改變，所以兩者進(jìn)行組織培養(yǎng)均能獲得試管苗；花粉是經(jīng)減數(shù)分裂形成的，花粉粒的基因型與體細(xì)胞的基因型不同，用花粉粒進(jìn)行組織培養(yǎng)得到的植株屬于單倍體，其基因型不同于原植株；植物組織培養(yǎng)的原理是細(xì)胞的全能性，所以所選用的外植體細(xì)胞必須有完整的細(xì)胞核，但不一定要有葉綠體。
答案　B
10.(2018·蘇錫常鎮(zhèn)三模)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，正確的是(　　)
A.接觸抑制的細(xì)胞經(jīng)分散后繼續(xù)培養(yǎng)，細(xì)胞將不再增殖
B.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多是胚胎或幼齡動(dòng)物的組織
C.經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞即可直接生產(chǎn)特定的單克隆抗體
D.常在培養(yǎng)基中添加一定種類和數(shù)量的抗生素以防止培養(yǎng)的細(xì)胞被病毒感染
解析　接觸抑制的細(xì)胞經(jīng)分散后繼續(xù)培養(yǎng)，細(xì)胞可以增殖；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)一般選用胚胎或幼齡動(dòng)物的組織，因?yàn)檫@些細(xì)胞分裂增殖能力強(qiáng)；經(jīng)選擇性培養(yǎng)基篩選出來的雜交瘤細(xì)胞還需要進(jìn)行第二次篩選，即單一抗體陽性檢測(cè)，選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，才可生產(chǎn)特定的單克隆抗體；培養(yǎng)基中添加一定種類和數(shù)量的抗生素是防止培養(yǎng)的細(xì)胞被細(xì)菌感染。
答案　B
11.下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞工程的敘述，正確的是(　　)
A.用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織后，可用培養(yǎng)液將分散的細(xì)胞稀釋制成細(xì)胞懸液
B.少數(shù)細(xì)胞在連續(xù)培養(yǎng)50代后可獲得不死性，是某些基因選擇性表達(dá)的結(jié)果
C.根據(jù)在高倍鏡下觀察到基因突變的比例可推知某化學(xué)藥品的毒性
D.PEG誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合形成的雜種細(xì)胞，經(jīng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)能得到優(yōu)良動(dòng)物個(gè)體
解析　少數(shù)細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)獲得不死性，是某些基因突變的結(jié)果；基因突變?cè)诠鈱W(xué)顯微鏡下看不到；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)不能得到動(dòng)物個(gè)體。
答案　A
12.下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)
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A.過程①注射一種滅活病毒可使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生多種漿細(xì)胞
B.過程②形成的兩兩融合細(xì)胞只有圖中的3種類型
C.過程③采用抗原—抗體反應(yīng)進(jìn)行特定雜交瘤細(xì)胞的篩選
D.過程④獲得的全部雜交瘤細(xì)胞都只能產(chǎn)生同一種抗體
解析　由圖可知，滅活的病毒含多種抗原決定簇，可使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生多種漿細(xì)胞；過程②形成的兩兩融合細(xì)胞除圖中的AD、BD、CD這3種外，還有漿細(xì)胞的兩兩融合(AA、BB、CC、AB、AC、BC)和骨髓瘤細(xì)胞的兩兩融合(DD)；過程③采用抗原—抗體反應(yīng)篩選產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；過程④獲得的全部雜交瘤細(xì)胞都是經(jīng)過單一抗體陽性檢測(cè)過的，都只能產(chǎn)生同一種抗體。
答案　B
13.科學(xué)家采用植物體細(xì)胞雜交的方法，經(jīng)過長(zhǎng)期的實(shí)驗(yàn)，終于得到了“番茄—馬鈴薯”雜種植株，培育過程如圖所示，其中①～⑤表示過程，a～f表示細(xì)胞、組織或植株。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：
INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\954.tif" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\954.tif" \* MERGEFORMATINET
(1)過程①可使用　　　　　　　　酶處理細(xì)胞以除去細(xì)胞壁，過程②常用　　　　作為誘導(dǎo)劑。
(2)d表示的細(xì)胞在適宜條件下培養(yǎng)成“番茄—馬鈴薯”雜種植株，說明該細(xì)胞具有　　　　，其中過程④涉及的分裂方式為　　　　。在植物組織培養(yǎng)過程中，欲培育無病毒的植株，選材時(shí)一般選取植物的　　　　　　。
(3)過程④和過程⑤需要在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行，其目的是避免　　　　的污染。
(4)圖中培育的雜種植株并沒有如科學(xué)家所想像的那樣，地上長(zhǎng)番茄、地下結(jié)馬鈴薯。但這項(xiàng)研究對(duì)于培養(yǎng)作物新品種方面的重大意義在于　　　　　　　　　　。若用傳統(tǒng)的有性雜交方法不能得到“番茄—馬鈴薯”雜種植株，因?yàn)閮烧咧g存在著天然的　　　　。
解析　(1)過程①可使用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，獲得具有活力的原生質(zhì)體；過程②是原生質(zhì)體的融合，常用聚乙二醇(PEG)作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)原生質(zhì)體的融合。(2)將雜種細(xì)胞培育為雜種植株依據(jù)的原理是細(xì)胞的全能性，過程④是脫分化，此過程中的細(xì)胞分裂方式為有絲分裂。植物分生區(qū)附近的病毒極少，甚至無病毒，所以一般選取植物的莖尖或根尖培育無病毒植株。(3)植物組織培養(yǎng)過程中要保持無菌條件，以避免微生物的污染。(4)采用體細(xì)胞雜交技術(shù)得到“番茄—馬鈴薯”雜種植株雖然不能表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性狀，但是克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大了用于雜交的親本組合范圍。番茄與馬鈴薯之間存在著天然的生殖隔離，因此用傳統(tǒng)的有性雜交方法不可能得到二者的雜種后代。
答案　(1)纖維素酶和果膠　聚乙二醇(PEG)　(2)全能性　有絲分裂　莖尖或根尖　(3)微生物　(4)克服了不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大了用于雜交的親本組合范圍　生殖隔離
14.某研究者用抗原(A)分別免疫3只同種小鼠(X、Y和Z)，每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后測(cè)定各小鼠血清抗體的效價(jià)(能檢測(cè)出抗原抗體反應(yīng)的血清最大稀釋倍數(shù))，結(jié)果如圖甲所示；圖乙是單克隆抗體制備流程的簡(jiǎn)明示意圖；
INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\955.tif" \* MERGEFORMAT INCLUDEPICTURE "F:\\課件 勿動(dòng)\\2020版 選考總復(fù)習(xí) 學(xué)生用書 生物（四省市）（魯津京瓊）\\955.tif" \* MERGEFORMATINET
回答下列問題：
(1)制備融合所需的B淋巴細(xì)胞時(shí)，所用免疫小鼠的血清抗體效價(jià)需達(dá)到16 000以上，則小鼠最少需要經(jīng)過　　　　次免疫后才能有符合要求的。達(dá)到要求后的X、Y、Z這3只免疫小鼠中，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞的是　　　　小鼠，理由是　　　　　　　　　　　　。
(2)圖乙中單克隆抗體的制備過程運(yùn)用了　　　　和　　　　 等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)。
(3)圖乙中的過程②誘導(dǎo)融合運(yùn)用的原理是　　　　，該過程中區(qū)別于原生質(zhì)體融合的方法是用　　　　處理。融合后需要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，只有　　　　才能生長(zhǎng)。篩選所得細(xì)胞的特點(diǎn)是________________________________________。
(4)經(jīng)過篩選和克隆化培養(yǎng)得到雜交瘤細(xì)胞后，一般采用體內(nèi)培養(yǎng)和體外培養(yǎng)兩種方式，動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng)對(duì)環(huán)境條件的要求比較高，動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件：　　　　　　　，營(yíng)養(yǎng)，適宜溫度和pH，氣體環(huán)境等。
解析　(1)由圖可知，第四次免疫后X、Y、Z小鼠的血清抗體效價(jià)達(dá)到16 000及其以上，小鼠Y的最高，最適合用于制備B淋巴細(xì)胞。(2)制備單克隆抗體過程中用到了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞融合等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)。(3)誘導(dǎo)細(xì)胞融合運(yùn)用的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性，與誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合不同的是，誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合可用滅活的病毒處理，融合后需要用特定的選擇性培養(yǎng)基篩選，只有融合的雜種細(xì)胞才能生長(zhǎng)。篩選后所得細(xì)胞的特點(diǎn)是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。(4)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足無菌、無毒的環(huán)境，營(yíng)養(yǎng)、適宜溫度和pH氣體環(huán)境等。
答案　(1)四　Y　Y的血清抗體效價(jià)最高　(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)　動(dòng)物細(xì)胞融合
　(3)細(xì)胞膜的流動(dòng)性　滅活的病毒　融合的雜種細(xì)胞　既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體　(4)無菌、無毒的環(huán)境

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