資源簡介

模塊檢測試卷
(分值：100分)
一、選擇題(本題包括20小題，每小題2.5分，共50分)
1．(2024·浙江臺金七校高二期中)為分離高產醋酸菌菌株，某研究小組配制的培養基配方如下：酵母膏1%、葡萄糖1%、碳酸鈣2%、無水乙醇3%、瓊脂2%。下列敘述錯誤的是(　　)
A．酵母膏可以為醋酸菌提供碳源、氮源及生長因子
B．由于無水乙醇易揮發，因此該培養基應采用過濾方法滅菌
C．無水乙醇可為醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生長
D．可用稀釋涂布平板法接種，并選取培養基上具有較大透明圈的菌落
2．(2024·寧波高二期中)下列關于培養基的說法，正確的是(　　)
A．培養基中含量最高的是碳源
B．用以篩選固氮微生物的培養基，必須具備的特征是以尿素為唯一氮源
C．固體培養基中加入少量水即可制成液體培養基
D．微生物在固體培養基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落
3．(2023·寧波高二調研)獲取純凈的微生物培養物是發酵工程的基礎。下列敘述錯誤的是(　　 )
A．獲取純凈的微生物培養物的關鍵是防止雜菌污染
B．稀釋涂布平板法和顯微鏡計數法是測定微生物數量的常用方法
C．平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常用方法
D．接種于培養基內，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為純培養物
(2024·寧波高二期中)閱讀下列材料，回答第4、5小題。
啤酒是一種含多種氨基酸、低分子糖等物質的低酒精濃度飲料。啤酒花是大麻科葎草屬植物，其雌花序和果穗可用于啤酒釀造，賦予啤酒獨特的香味和苦味等。將適量啤酒花加入過濾后的麥芽汁中，煮沸1小時，使啤酒花中的物質溶出同時能夠殺死雜菌，啤酒花還具有抑菌性作用。紹興是黃酒之鄉，“麥曲酶長，酵米復芳；白梅酒釀，伴淋寒香；壓濾瓊漿，煎煮陳藏”是對紹興黃酒精致復雜釀造工藝的描述。在黃酒的主發酵過程中，“開耙”(攪拌)是極為關鍵的一步。
4．根據上述材料判斷，下列說法錯誤的是(　　)
A．為研究啤酒花的抑菌作用，在LB固體培養基中添加不同濃度的啤酒花提取液，經滅菌后制成平板，采用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌后置于CO2培養箱中培養24小時，觀察并比較菌落數量及生長情況
B．啤酒釀造過程中起主要作用的微生物是酵母菌，該微生物與乳酸菌在結構上存在明顯區別
C．從物理特征看，工業釀酒的培養基屬于液體培養基
D．發酵過程中發酵罐內的泡沫先逐漸增多后減少，泡沫減少的主要原因是酵母菌細胞呼吸產生的CO2減少
5．根據上述材料判斷，下列相關敘述錯誤的是(　　)
A．接種麥曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒釀”菌種發酵
B．煎煮的目的是除去發酵產品中的雜菌，利于酵母菌繁殖
C．陳藏有利于黃酒中醇與酸發生酯化反應，使酒更加芳香
D．“開耙”(攪拌)是送入氧氣、排出二氧化碳，讓酵母菌進行需氧呼吸，增加酵母菌的數量，使其成為優勢菌種
6．(2024·浙江五校聯盟高二期中)如圖為“能分解尿素的微生物的分離與計數”實驗中樣品稀釋示意圖，據圖分析正確的是(　　)
A．獲取土壤樣品要遵循無菌操作原則，故土壤樣品要進行高壓滅菌
B．實驗的合理順序為稱量→溶解→滅菌→調pH→倒平板→接種土壤樣本→菌落計數
C．為防止雜菌污染，需在酒精燈火焰附近進行接種
D．5號試管的結果表明每克土壤中的菌體數為1.7×108個
7．下列關于植物組織培養的敘述，正確的是(　　)
A．體細胞胚、芽可用于制作人工種子
B．菊花莖段在生根培養基上獲得叢狀苗，然后再進行分株培養
C．植物愈傷組織培養中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞
D．愈傷組織發育成胚狀體的過程是器官發生途徑
8．(2024·浙江臺金七校高二期中)狼爪瓦松是一種具有觀賞價值的二倍體野生花卉，其細胞中的黃酮類化合物可入藥。為滿足狼爪瓦松市場化需求，某科研小組利用植物細胞工程等技術手段，進行狼爪瓦松的擴大培養，具體過程如圖所示(其中序號代表相應的處理過程)。下列有關分析正確的是(　　)
A．過程①前用無水乙醇對植株甲進行消毒，以保證外植體不被污染
B．過程③需要先在生長素和細胞分裂素的比值高的培養基中培養
C．過程⑥利用愈傷組織分裂能力強的特點進行細胞培養可獲得大量黃酮類化合物
D．除了植株丙，植物乙、丁細胞核遺傳物質與植株甲相同，屬于同一物種
9．(2023·麗水高二期末)植物組織培養在植物生產領域有著廣泛的應用。下列敘述錯誤的是(　　)
A. 初代培養物培養至一定時間可進行繼代培養
B．從植物生長點取外植體進行組織培養可獲得脫毒植株
C．生產人工種子的體細胞胚一定是由愈傷組織分化而來
D．利用發酵罐大規模培養植物細胞可用于細胞代謝產物的生產
10．(2024·嘉興高二期中)如圖為動物成纖維細胞的培養過程示意圖。下列敘述正確的是(　　)
A．步驟①的操作不需要在無菌環境中進行操作
B．步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質使細胞分離
C．步驟③中細胞會在培養瓶底部呈現單層生長
D．步驟④培養過程中不會發生遺傳物質改變
11．(2023·嘉興高二質檢)鼠源單克隆抗體制備的基本過程如圖所示。下列關于鼠源單克隆抗體制備的敘述，錯誤的是(　　)
A．小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，以提高相應B淋巴細胞的數量
B．在HAT培養基上能生長的細胞不一定能產生所需的抗體
C．克隆化培養過程中篩選抗體檢驗陽性的細胞以進行大規模培養
D．可將雜交瘤細胞注入小鼠血液中實現單克隆抗體的大規模生產
12．(2024·嘉興高二月考)我國科學家利用基因編輯技術獲得1只生物節律核心基因BMAL1“敲除”的獼猴，取其成纖維細胞與去核的卵母細胞融合形成重構胚，發育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，最終獲得5只克隆獼猴。下列敘述錯誤的是(　　)
A．克隆猴基因組成差異小，作為實驗動物便于研究
B．受精卵經基因編輯后形成的胚胎可發育為克隆猴
C．可用電脈沖誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合
D．克隆猴的獲得體現了動物體細胞的細胞核具有全能性
13．(2023·金華高二期末)如圖為雜交瘤細胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT－)，在HAT篩選培養液中不能正常合成DNA，無法生長。B淋巴細胞(HGPRT＋)能在HAT篩選培養液中正常生長。下列敘述正確的是(　　)
A．從HAT培養液中獲得的抗體即為單克隆抗體
B．仙臺病毒處理可使細胞膜發生一定程度的損傷，進而促進細胞融合
C．在HAT培養液中能長期存活的細胞具有特異性強、靈敏度高的特點
D．多個B淋巴細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養液中死亡的原因是不能合成DNA
14．下列關于“核酸探針”的敘述，錯誤的是(　　)
A．核酸探針既可以檢測某一特定的DNA，也可檢測RNA
B．核酸探針是一小段具有特定核苷酸序列的單鏈核酸序列
C．核酸探針既可以檢測核酸分子，又可以檢測特定的蛋白質
D．核酸探針以單鏈形式發揮作用，其放射性和熒光標記便于檢測
15．下列關于基因文庫的說法，錯誤的是(　　)
A．基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫
B．cDNA文庫含有某種生物的部分基因
C．cDNA文庫中的基因不含內含子，含有啟動子
D．同種生物的cDNA文庫中基因數量較基因組文庫少
16．如圖是某基因工程中構建重組質粒的過程示意圖，載體質粒具有四環素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。轉化大腸桿菌后，采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A、B、C、D四種菌落，其生長情況如表所示(注：“＋”代表生長，“－”代表不生長)。根據表中結果判斷，含有重組質粒的菌落是(　　)
平板類型 菌落類型 無抗生素 氨芐青霉素 四環素 氨芐青霉素＋四環素
菌落A ＋ ＋ ＋ ＋
菌落B ＋ ＋ － －
菌落C ＋ － － －
菌落D ＋ － ＋ －
A.菌落A B．菌落B C．菌落C D．菌落D
17．(2024·嘉興高二聯考)染色質是由一定長度的核小體為基本單位構成的。將大鼠肝細胞中分離出的染色質用非特異性核酸酶水解后去除染色質蛋白，對得到的DNA片段進行凝膠電泳，結果如圖所示。若先將染色質中的蛋白質去除后用同樣的非特異性核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段。據此分析，下列有關敘述錯誤的是(　　)
A．凝膠中的DNA分子通過染色可以被檢測出來
B．染色質中的蛋白質可能對DNA具有保護作用
C．構成核小體的基本單位是脫氧核糖核苷酸
D．在凝膠中，DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象等有關
18．(2024·金華高二質檢)將某轉基因植株(導入了抗除草劑基因G)連續自交后獲得后代群體。為檢測該群體中含G基因植株的比例，用4種方法分別進行檢測，預測所得結果最低的是(　　)
選項 檢測方法 檢測對象 檢出的含G基 因植株的比例
A PCR技術 G基因 x1
B 核酸分子雜交 G基因轉錄產物 x2
C 抗原－抗體雜交 G基因編碼的蛋白質 x3
D 噴灑除草劑 幼苗對除草劑的抗性 x4
19.(2023·湖州高二階段檢測)實時熒光定量PCR可用于對樣品中特定DNA序列進行定量分析。將熒光標記的Taq man探針與待測樣本DNA混合，當探針完整時，不產生熒光。在PCR過程中，與目的基因結合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，在特定光的激發下R發出熒光，隨著循環次數的增加，熒光信號強度增加，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值(達到熒光閾值所經歷的循環次數)。下列相關敘述正確的是(　　)
　
A．熒光基因R連接在探針的3′端
B．該反應體系中并未加入ATP，所以新鏈的合成不需要消耗能量
C．Taq DNA聚合酶在該反應中的作用是合成磷酸二酯鍵
D．Ct值越小，說明樣品中特定DNA序列的含量越多
20．生物技術的發展給人類帶來諸多好處的同時，也引發了許多關于生物技術安全與倫理問題的擔憂。下列觀點中合理的是(　　)
A．轉基因生物的研究和應用均需要進行安全性評價后才能進行
B．通過試管嬰兒無性生殖技術可解決不孕不育問題
C．應反對一切形式的針對人類細胞的克隆研究
D．可以通過微生物改造研究生物武器，提高國防實力
二、非選擇題(本題包括5小題，共50分)
21．(每空1分，共8分)(2024·寧波高二期中)益生菌是一類能改變宿主某一部位菌群組成且對宿主有益的活性微生物，常見的益生菌有酵母菌、乳酸菌等。回答下列問題：
(1)對氧氣的需求方面，與醋酸菌相比，乳酸菌的特點是____________________________；乳酸菌和酵母菌在細胞結構方面的主要區別是_____________________________________。
(2)乳酸菌常用于泡菜制作，制作過程中會用清水和食鹽配制質量百分比為5%～20%的鹽水，并將鹽水煮沸，煮沸的目的是_________________________________________________
___________________________________________________________________________。
(3)培養乳酸菌時，對泡菜汁進行系列梯度稀釋的目的是___________________________。培養乳酸菌時，培養基上形成的菌落并非全是乳酸菌菌落，為初步判斷菌種類型，還需要觀察培養基上菌落的________________等特征。配制好的培養基通常可以使用__________________法滅菌。
(4)某生物興趣小組為測定泡菜水中的乳酸菌含量，利用顯微鏡直接計數，結果往往偏大，原因可能是________________________________________________________________。
(5)進行銷售的泡菜食品還需要進行食品衛生微生物學檢驗，如對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等微生物進行培養和計數，該過程中所用到的接種方法是__________________。
22．(9分)通過動物細胞融合技術可以制備雜交瘤細胞，對健康的實驗小鼠進行腹腔內免疫，一周后取小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養基進行篩選。
(1)(1分)動物細胞融合一般用__________________進行生物誘導。
(2)(1分)正常細胞合成DNA有兩條途徑：a通路和b通路。骨髓瘤細胞是DNA合成b通路的缺陷型細胞株，讓B淋巴細胞與其融合，再在加入DNA合成a通路阻斷劑(氨基蝶呤)的培養液中培養，這種培養會產生以下哪些效果________(多選)。
A．促進細胞融合 B．淘汰B淋巴細胞
C．淘汰骨髓瘤細胞 D．阻斷雜交細胞DNA合成
(3)經選擇培養的雜交瘤細胞，還需要進行____________________和抗體檢測，經多次篩選，可獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞。
(4)(5分)雜交瘤細胞體外培養過程________(填“是”或“否”)需要添加血清。試分析原因：________________________________________________________________________，
通過雜交瘤細胞獲得的單克隆抗體的最大優點是______________________________
________________________________________________________________________。
23．(15分)(2024·浙江高二期中)豬藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)，由動脈炎病毒科中的豬繁殖與呼吸綜合征病毒(簡稱藍病毒)引起。患病動物主要表現為繁殖障礙、呼吸困難、耳朵藍紫。母豬感染該病毒后會在妊娠晚期流產，為培育抗藍病毒的轉基因豬，工作人員根據哺乳動物受精作用和早期胚胎的發育過程提出了解決方案(如圖)。請回答下列問題：
(1)(3分)B豬體細胞在培養瓶中培養時，要保證培養液無菌、無毒，常在培養液中加入____________，另外還需定期更換培養液，以防止________________________________對細胞自身造成的傷害。培養到一定程度后，還需用__________________處理后分裝到多個培養瓶中進行傳代培養。
(2)由于目的基因不能直接導入受體細胞，因此需要構建基因表達載體，該過程需要用的酶有_________________________________。常采用雙酶切法處理含目的基因的DNA片段和載體，其優點是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)(4分)通過步驟①的技術手段______________得到甲，培養至乙______________，然后移植到同種的、______________________的C豬體內，由于C豬對乙不發生______________，從而為胚胎在受體內的存活提供了可能。
(4)(4分)利用________________________技術檢驗D豬是否產生相應的抗體。該抗體也可使用雜交瘤技術來制備，通常情況下，雜交瘤細胞是由經培養的骨髓瘤細胞和________________________________________________________________________
細胞融合獲得的，與誘導植物原生質體融合方法不同的是____________________________。
24．(每空1分，共10分)(2023·金華高二期末)甜玉米與普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的轉化速度較慢，含可溶性糖量高，汁多質脆，富含多種維生素。為了使甜玉米更富有生產應用價值，科研人員通過轉基因技術培育出了超量表達P蛋白的轉基因甜玉米。在超量表達P基因載體的構建中，所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖所示。(注：強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段；BamH Ⅰ、Hind Ⅲ、EcoR Ⅰ、Not Ⅰ、Sac Ⅰ代表不同的限制酶；T－DNA是農桿菌的Ti質粒上的DNA片段。)
(1)為了特異性擴增P基因序列，可采用__________技術，一般要加入的原料為____________。
(2)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，能被______________識別并結合，驅動基因的持續轉錄。
(3)構建能超量表達P基因的載體，需選用______________限制酶的組合和DNA連接酶。將重組Ti質粒轉入農桿菌，需先將農桿菌用________處理。
(4)將玉米愈傷組織經農桿菌液浸泡，超量表達P基因會隨T－DNA______________________，從而獲得轉基因植物細胞。繼而進行植物組織培養，培養基中需加入__________進行篩選，篩選出的愈傷組織經______過程形成叢芽，然后在__________(填激素名稱)較多的培養基上形成根，最終獲得多個玉米株系。發現某株系的P蛋白表達量較低，請對該現象作出合理的解釋：________________________________________________________________________。
25．(8分)如圖表示畜牧業生產上培育某種優良種牛的兩種方法，請分析回答下列有關問題：
(1)(1分)過程①技術為________________________。
(2)(2分)過程②常用________________激素處理，目的是使B牛________________。
(3)(2分)自然條件下，A牛的精子必須在B牛的生殖道中經過相應的生理變化后，才能與B牛的卵細胞結合，完成受精作用，這個過程叫作________。完成受精的實質是__________。
(4)(3分)方法Ⅰ和方法Ⅱ培育優良種牛的本質區別是_________________________________。
答案精析
1．B　[培養基可在高壓滅菌后加入無水乙醇，B錯誤；無水乙醇為含碳有機物，可為醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生長，C正確；醋酸和碳酸鈣反應會出現透明圈，故首先需要進行醋酸菌的初步篩選，通常選擇透明圈較大且生長良好的單菌落，D正確。]
2．D　[培養基中含量最高的是水，A錯誤；固氮微生物是一類能夠還原分子態氮為氨態氮的微生物，用以篩選固氮微生物的培養基應不含氮源，B錯誤；固體培養基中含有凝固劑，即使加入少量水也無法制成液體培養基，C錯誤；微生物在固體培養基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落，根據菌落特征可鑒定、篩選不同微生物，D正確。]
3．D　[純培養物是由單一個體繁殖所獲得的微生物群體，含特定種類微生物的群體不一定是由單一個體繁殖而來，D錯誤。]
4．A　[大腸桿菌是兼性厭氧菌，不需要在CO2培養箱中培養，A錯誤；酵母菌是真核細胞生物，乳酸菌是原核細胞生物，所以二者在結構上存在明顯區別，B正確；從物理特征看，工業釀酒的培養基屬于液體培養基，因為液體培養基能讓菌種與培養液充分接觸獲得更多的營養，從而獲得高品質的發酵產品，C正確；在發酵初期，酵母菌活性強，產生大量的CO2，導致泡沫逐漸增多，然而，隨著發酵的進行，多種因素造成酵母菌細胞呼吸產生的CO2減少，從而導致泡沫減少，D正確。]
5．B　[淀粉屬于生物大分子物質，水解為小分子糖有利于發酵過程中酵母菌對糖類的利用，A正確；煎煮是進行消毒，除去發酵產品中的酵母菌等微生物，利于儲藏，B錯誤；陳藏是將榨出的酒放入罐內存放，有利于黃酒中醇與酸發生酯化反應，使酒更加芳香，C正確。]
6．C　[高壓滅菌會殺死微生物，因此土壤樣品不能高壓滅菌，A錯誤；培養基配制過程中，調pH在滅菌之前完成，B錯誤；用稀釋涂布平板法接種時，要在酒精燈火焰附近操作，防止雜菌的污染，C正確；5號試管的結果表明每克土壤中的菌體數為(168＋175＋167)/3÷0.1×106＝1.7×109(個)，D錯誤。]
7．A　[菊花莖段在生芽培養基中生長的叢狀苗分株后，在無菌條件下再轉入生根培養基中，B錯誤；植物細胞融合時必須先去除細胞壁，然后再加入誘導劑才能促使細胞融合，所以在愈傷組織培養中直接加入細胞融合的誘導劑，不能導致細胞融合，無法獲得染色體加倍的細胞，C錯誤；愈傷組織發育成胚狀體的過程是體細胞胚發生途徑，D錯誤。]
8．C　[生長素和細胞分裂素的比值高時有利于生根，比值低時有利于生芽，過程③需要先生芽再生根，B錯誤；利用植物細胞培養進行細胞產物的工廠化生產可以獲得目標產物，過程⑥利用愈傷組織分裂能力強的特點進行細胞培養可獲得大量黃酮類化合物，C正確；植株丙經歷了誘變處理，發生了基因突變，遺傳物質與植株甲不同；植株乙是通過植物組織培養過程獲得的，屬于無性繁殖，基因型不變，和植株甲細胞核遺傳物質相同；植物丁是將原生質體進行了融合，則遺傳物質翻倍，與植株甲不相同，D錯誤。]
9．C　[植物生長點附近的病毒濃度很低甚至無病毒，從植物生長點取外植體進行組織培養可獲得脫毒植株，B正確；生產人工種子的體細胞胚不一定都是由愈傷組織分化而來，如在外植體上直接分化出，C錯誤。]
10．C　[為防止細菌污染，培養過程中的各種操作都需要在無菌環境中進行，A錯誤；用胰蛋白酶溶解細胞間物質使細胞分離，B錯誤；由于細胞之間有接觸抑制的特性，一般的正常細胞并不重疊于其他細胞之上，而是單層生長，C正確。]
11．D　[可將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔中，在小鼠腹腔中增殖，從腹水中提取單克隆抗體，實現單克隆抗體的大規模生產，D錯誤。]
12．B　[受精卵經基因編輯后形成的胚胎發育成的個體不能叫作克隆猴，克隆猴是通過核移植后發育而成的，B錯誤。]
13．B　[在HAT培養液中篩選出來的是雜交瘤細胞，可能有多種類型，因此后續還需要對這些雜交瘤細胞進行單一抗體檢測，進而篩選出能產生特定抗體的雜交瘤細胞，可見從HAT培養液中獲得的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；仙臺病毒處理可使細胞膜發生一定程度的損傷，進而促進細胞融合，據此可用滅活的仙臺病毒作為促融劑，B正確；在HAT培養液中能長期存活的細胞為雜交瘤細胞，這些細胞可能產生多種類型的抗體，因而不具有特異性強、靈敏度高的特點，C錯誤；多個B淋巴細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養液中死亡的原因是不能無限增殖，D錯誤。]
14．C　[核酸探針是通過堿基互補配對與目標物結合的，所以無法檢測蛋白質，C錯誤。]
15．C　[由于基因轉錄過程中，不轉錄啟動子序列，內含子序列轉錄下來后在RNA成熟的過程中被剪切掉，所以由mRNA逆轉錄形成的cDNA文庫中的基因不含內含子和啟動子，C錯誤。]
16．B　[分析題圖可知，構建重組質粒時，目的基因插入四環素抗性基因(tetr)中間，破壞了四環素抗性基因(tetr)，氨芐青霉素抗性基因(ampr)沒有被破壞。因此含有重組質粒的菌落在添加了四環素的培養基中不能生長，而在添加了氨芐青霉素的培養基中能生長，故選B。]
17．C　[由圖可知，染色質用核酸酶處理后，得到的是部分水解的染色質，但若先將染色質中的蛋白質去除后用核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段，說明染色質中的蛋白質可能對DNA具有保護作用，B正確；染色質是由一定長度的核小體為基本單位構成的，核小體的組成成分是蛋白質和DNA，其基本單位是脫氧核糖核苷酸和氨基酸，C錯誤。]
18．D　[PCR技術可以用來鑒定受體細胞中是否導入目的基因；導入受體細胞中的目的基因不一定完成轉錄，則用核酸分子雜交檢測目的基因轉錄產物含量一般比目的基因少；導入受體細胞中的目的基因雖然完成轉錄但不一定成功翻譯，則檢測目的基因翻譯產物一般比轉錄產物含量少；即使目的基因表達出相應蛋白質，植株也不一定能表現出相應抗性，所以檢測出含G基因植株的比例由高到低依次為x1、x2、x3、x4。]
19．D　[引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸，從圖中引物1的方向可以分析出，熒光基因R連接在探針5′端，A錯誤；該反應體系中并未加入ATP，但新鏈的合成需要消耗能量，B錯誤；在該反應中Taq DNA聚合酶有兩個作用，一是形成子鏈的磷酸二酯鍵，二是水解探針，破壞磷酸二酯鍵，C錯誤；Ct值越小，即達到閾值所經歷的循環次數越少，說明樣品中特定DNA序列的含量越多，D正確。]
20．A　[試管嬰兒是通過體外受精的有性生殖技術，B不合理；生物武器具有致病性強、攻擊范圍廣等特點，世界各國都應抵制，D不合理。]
21．(1)不需要氧氣　乳酸菌不具有成形的細胞核　(2)殺滅雜菌，同時可去除部分溶解氧　(3)保證每個菌落都是由一個單細胞繁殖而來(答出為了獲得單菌落即可)　形狀、大小、顏色　高壓滅菌　(4)利用顯微鏡直接計數時不能區分活菌和死菌　(5)稀釋涂布平板法
22．(1)滅活的病毒　(2)BC　(3)克隆化培養　(4)是　人們對動物細胞所需要的營養物質沒有完全搞清楚　純度高，可大量制備，在應用時特異性強、靈敏度高
解析　(2)動物細胞融合方法有物理法、化學法(聚乙二醇)、生物法(滅活的病毒)，而該培養對細胞融合沒有影響，A不符合題意；B淋巴細胞的復制次數有限，不能在培養基上長期存活，該培養基能淘汰B淋巴細胞，B符合題意；骨髓瘤細胞是b通路缺陷型細胞株，剩下的a通路被阻斷，不能合成DNA，該培養基能淘汰骨髓瘤細胞，C符合題意；加入DNA合成a通路阻斷劑后，雜交細胞還具有b通路，因此不能阻斷雜交細胞DNA合成，D不符合題意。
23．(1)抗生素　細胞代謝產生的有毒物質　胰蛋白酶
(2)限制酶、DNA連接酶　防止目的基因和載體發生自身環化或反向連接　(3)核移植　囊胚　生理狀態相同　免疫排斥　(4)抗原—抗體雜交　經藍病毒抗原(外殼蛋白)免疫的B淋巴　滅活的(仙臺)病毒誘導
24．(1)PCR　 四種脫氧核苷三磷酸(dNTP)　(2)RNA聚合酶　(3)BamH Ⅰ和Sac Ⅰ　CaCl2溶液　(4)整合到玉米細胞的染色體DNA中　潮霉素　再分化　生長素
該株系玉米中可能沒有導入目的基因或目的基因未表達
解析　(2)啟動子位于基因的“上游”，有RNA聚合酶結合的位點，控制轉錄的開始，因而強啟動子能被RNA聚合酶識別并結合，驅動基因的持續轉錄。(3)在構建基因表達載體時，要想使P基因在玉米植株中超量表達，切割目的基因時需要把強啟動子和P基因連在一起切割下來，因此需要用到限制酶BamH Ⅰ切割，限制酶EcoRⅠ和NotⅠ會破壞目的基因，因此應選用的限制酶是BamH Ⅰ和Sac Ⅰ。將重組Ti質粒轉入農桿菌時，可以用CaCl2溶液處理農桿菌使之成為感受態細胞，易于重組Ti質粒導入。(4)由題圖可知，潮霉素抗性基因位于Ti質粒的T－DNA，可以隨T－DNA整合到玉米細胞的染色體DNA中，所以將農桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進行植物組織培養，培養基中需加入潮霉素進行篩選，篩選出的愈傷組織可再分化形成叢芽，然后在生長素較多的培養基上形成根，最終獲得多個轉基因玉米株系。蛋白質的表達量與基因的表達有關，故P蛋白表達量較低的原因可能是該株系玉米中沒有導入目的基因或者目的基因沒有表達。
25．(1)動物體細胞核移植技術　(2)促性腺　超數排卵　(3)精子獲能　雌、雄原核的融合　(4)方法Ⅰ的培育為有性生殖過程，方法Ⅱ的培育為無性生殖過程(共69張PPT)
模塊檢測試卷
1.(2024·浙江臺金七校高二期中)為分離高產醋酸菌菌株，某研究小組配制的培養基配方如下：酵母膏1%、葡萄糖1%、碳酸鈣2%、無水乙醇3%、瓊脂2%。下列敘述錯誤的是
A.酵母膏可以為醋酸菌提供碳源、氮源及生長因子
B.由于無水乙醇易揮發，因此該培養基應采用過濾方法滅菌
C.無水乙醇可為醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生長
D.可用稀釋涂布平板法接種，并選取培養基上具有較大透明圈的菌落
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培養基可在高壓滅菌后加入無水乙醇，B錯誤；
無水乙醇為含碳有機物，可為醋酸菌提供碳源，并抑制某些微生物的生長，C正確；
醋酸和碳酸鈣反應會出現透明圈，故首先需要進行醋酸菌的初步篩選，通常選擇透明圈較大且生長良好的單菌落，D正確。
2.(2024·寧波高二期中)下列關于培養基的說法，正確的是
A.培養基中含量最高的是碳源
B.用以篩選固氮微生物的培養基，必須具備的特征是以尿素為唯一氮源
C.固體培養基中加入少量水即可制成液體培養基
D.微生物在固體培養基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落
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培養基中含量最高的是水，A錯誤；
固氮微生物是一類能夠還原分子態氮為氨態氮的微生物，用以篩選固氮微生物的培養基應不含氮源，B錯誤；
固體培養基中含有凝固劑，即使加入少量水也無法制成液體培養基，C錯誤；
微生物在固體培養基上生長時，可以形成肉眼可見的菌落，根據菌落特征可鑒定、篩選不同微生物，D正確。
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3.(2023·寧波高二調研)獲取純凈的微生物培養物是發酵工程的基礎。下列敘述錯誤的是
A.獲取純凈的微生物培養物的關鍵是防止雜菌污染
B.稀釋涂布平板法和顯微鏡計數法是測定微生物數量的常用方法
C.平板劃線法和稀釋涂布平板法是實驗室中進行微生物分離和純化的常
用方法
D.接種于培養基內，在合適條件下形成的含特定種類微生物的群體稱為
純培養物
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純培養物是由單一個體繁殖所獲得的微生物群體，含特定種類微生物的群體不一定是由單一個體繁殖而來，D錯誤。
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(2024·寧波高二期中)閱讀下列材料，回答第4、5小題。
啤酒是一種含多種氨基酸、低分子糖等物質的低酒精濃度飲料。啤酒花是大麻科葎草屬植物，其雌花序和果穗可用于啤酒釀造，賦予啤酒獨特的香味和苦味等。將適量啤酒花加入過濾后的麥芽汁中，煮沸1小時，使啤酒花中的物質溶出同時能夠殺死雜菌，啤酒花還具有抑菌性作用。紹興是黃酒之鄉，“麥曲酶長，酵米復芳；白梅酒釀，伴淋寒香；壓濾瓊漿，煎煮陳藏”是對紹興黃酒精致復雜釀造工藝的描述。在黃酒的主發酵過程中，“開耙”(攪拌)是極為關鍵的一步。
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4.根據上述材料判斷，下列說法錯誤的是
A.為研究啤酒花的抑菌作用，在LB固體培養基中添加不同濃度的啤酒花
提取液，經滅菌后制成平板，采用稀釋涂布平板法接種大腸桿菌后置
于CO2培養箱中培養24小時，觀察并比較菌落數量及生長情況
B.啤酒釀造過程中起主要作用的微生物是酵母菌，該微生物與乳酸菌在
結構上存在明顯區別
C.從物理特征看，工業釀酒的培養基屬于液體培養基
D.發酵過程中發酵罐內的泡沫先逐漸增多后減少，泡沫減少的主要原因
是酵母菌細胞呼吸產生的CO2減少
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大腸桿菌是兼性厭氧菌，不需要在CO2培養箱中培養，A錯誤；
酵母菌是真核細胞生物，乳酸菌是原核細胞生物，所以二者在結構上存在明顯區別，B正確；
從物理特征看，工業釀酒的培養基屬于液體培養基，因為液體培養基能讓菌種與培養液充分接觸獲得更多的營養，從而獲得高品質的發酵產品，C正確；
在發酵初期，酵母菌活性強，產生大量的CO2，導致泡沫逐漸增多，然而，隨著發酵的進行，多種因素造成酵母菌細胞呼吸產生的CO2減少，從而導致泡沫減少，D正確。
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5.根據上述材料判斷，下列相關敘述錯誤的是
A.接種麥曲有利于淀粉的糖化，有利于“酒釀”菌種發酵
B.煎煮的目的是除去發酵產品中的雜菌，利于酵母菌繁殖
C.陳藏有利于黃酒中醇與酸發生酯化反應，使酒更加芳香
D.“開耙”(攪拌)是送入氧氣、排出二氧化碳，讓酵母菌進行需氧呼吸，
增加酵母菌的數量，使其成為優勢菌種
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淀粉屬于生物大分子物質，水解為小分子糖有利于發酵過程中酵母菌對糖類的利用，A正確；
煎煮是進行消毒，除去發酵產品中的酵母菌等微生物，利于儲藏，B錯誤；
陳藏是將榨出的酒放入罐內存放，有利于黃酒中醇與酸發生酯化反應，使酒更加芳香，C正確。
6.(2024·浙江五校聯盟高二期中)如圖為“能分解尿素的微生物的分離與計數”實驗中樣品稀釋示意圖，據圖分析正確的是
A.獲取土壤樣品要遵循無菌操作原則，故土
壤樣品要進行高壓滅菌
B.實驗的合理順序為稱量→溶解→滅菌→調
pH→倒平板→接種土壤樣本→菌落計數
C.為防止雜菌污染，需在酒精燈火焰附近進行接種
D.5號試管的結果表明每克土壤中的菌體數為1.7×108個
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高壓滅菌會殺死微生物，因此土壤樣品
不能高壓滅菌，A錯誤；
培養基配制過程中，調pH在滅菌之前完
成，B錯誤；
用稀釋涂布平板法接種時，要在酒精燈火焰附近操作，防止雜菌的污染，C正確；
5號試管的結果表明每克土壤中的菌體數為(168＋175＋167)/3÷0.1× 106＝1.7×109(個)，D錯誤。
7.下列關于植物組織培養的敘述，正確的是
A.體細胞胚、芽可用于制作人工種子
B.菊花莖段在生根培養基上獲得叢狀苗，然后再進行分株培養
C.植物愈傷組織培養中加入細胞融合的誘導劑，可獲得染色體加倍的細胞
D.愈傷組織發育成胚狀體的過程是器官發生途徑
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菊花莖段在生芽培養基中生長的叢狀苗分株后，在無菌條件下再轉入生根培養基中，B錯誤；
植物細胞融合時必須先去除細胞壁，然后再加入誘導劑才能促使細胞融合，所以在愈傷組織培養中直接加入細胞融合的誘導劑，不能導致細胞融合，無法獲得染色體加倍的細胞，C錯誤；
愈傷組織發育成胚狀體的過程是體細胞胚發生途徑，D錯誤。
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8.(2024·浙江臺金七校高二期中)狼爪瓦松是一種具有觀賞價值的二倍體野生花卉，其細胞中的黃酮類化合物可入藥。為滿足狼爪瓦松市場化需求，某科研小組利用植物細胞工程等技術手段，進行狼爪瓦松的擴大培養，具體過程如圖所示(其中序號代表相應的處理過程)。下列有關分析正確的是
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A.過程①前用無水乙醇對植株甲進行消毒，以保證外植體不被污染
B.過程③需要先在生長素和細胞分裂素的比值高的培養基中培養
C.過程⑥利用愈傷組織分裂能力強的特點進行細胞培養可獲得大量黃酮
類化合物
D.除了植株丙，植物乙、丁細胞核遺傳物質與植株甲相同，屬于同一物種
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生長素和細胞分裂素的比
值高時有利于生根，比值
低時有利于生芽，過程③
需要先生芽再生根，B錯誤；
利用植物細胞培養進行細胞產物的工廠化生產可以獲得目標產物，過程⑥利用愈傷組織分裂能力強的特點進行細胞培養可獲得大量黃酮類化合物，C正確；
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植株丙經歷了誘變處理，發生了基因突變，遺傳物質與植株甲不同；植株乙是通過植物組織培養過程獲得的，屬于無性繁殖，基因型不變，和植株甲細胞核遺傳物質相同；植物丁是將原生質體進行了融合，則遺傳物質翻倍，與植株甲不相同，D錯誤。
9.(2023·麗水高二期末)植物組織培養在植物生產領域有著廣泛的應用。下列敘述錯誤的是
A. 初代培養物培養至一定時間可進行繼代培養
B.從植物生長點取外植體進行組織培養可獲得脫毒植株
C.生產人工種子的體細胞胚一定是由愈傷組織分化而來
D.利用發酵罐大規模培養植物細胞可用于細胞代謝產物的生產
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植物生長點附近的病毒濃度很低甚至無病毒，從植物生長點取外植體進行組織培養可獲得脫毒植株，B正確；
生產人工種子的體細胞胚不一定都是由愈傷組織分化而來，如在外植體上直接分化出，C錯誤。
10.(2024·嘉興高二期中)如圖為動物成纖維細胞的培養過程示意圖。下列敘述正確的是
A.步驟①的操作不需要在無菌環境中進行操作
B.步驟②中用鹽酸溶解細胞間物質使細胞分離
C.步驟③中細胞會在培養瓶底部呈現單層生長
D.步驟④培養過程中不會發生遺傳物質改變
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為防止細菌污染，培養過程中的各種操作都需要在無菌環境中進行，A錯誤；
用胰蛋白酶溶解細胞間物質使細胞分離，B錯誤；
由于細胞之間有接觸抑制的特性，一般的正常細胞并不重疊于其他細胞之上，而是單層生長，C正確。
11.(2023·嘉興高二質檢)鼠源單克隆抗體制備的基本過程如圖所示。下列關于鼠源單克隆抗體制備的敘述，錯誤的是
A.小鼠通常需要多次注射同種抗原蛋白，
以提高相應B淋巴細胞的數量
B.在HAT培養基上能生長的細胞不一定
能產生所需的抗體
C.克隆化培養過程中篩選抗體檢驗陽性的細胞以進行大規模培養
D.可將雜交瘤細胞注入小鼠血液中實現單克隆抗體的大規模生產
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可將雜交瘤細胞注入小鼠腹腔中，在小鼠腹腔中增殖，從腹水中提取單克隆抗體，實現單克隆抗體的大規模生產，D錯誤。
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12.(2024·嘉興高二月考)我國科學家利用基因編輯技術獲得1只生物節律核心基因BMAL1“敲除”的獼猴，取其成纖維細胞與去核的卵母細胞融合形成重構胚，發育形成的早期胚胎植入代孕雌猴，最終獲得5只克隆獼猴。下列敘述錯誤的是
A.克隆猴基因組成差異小，作為實驗動物便于研究
B.受精卵經基因編輯后形成的胚胎可發育為克隆猴
C.可用電脈沖誘導去核卵母細胞和成纖維細胞融合
D.克隆猴的獲得體現了動物體細胞的細胞核具有全能性
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受精卵經基因編輯后形成的胚胎發育成的個體不能叫作克隆猴，克隆猴是通過核移植后發育而成的，B錯誤。
13.(2023·金華高二期末)如圖為雜交瘤細胞的制備及初步篩選示意圖。骨髓瘤細胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT－)，在HAT篩選培養液中不能正常合成DNA，無法生長。B淋巴細胞(HGPRT＋)能
在HAT篩選培養液中正常生長。下列敘述正確的是
A.從HAT培養液中獲得的抗體即為單克隆抗體
B.仙臺病毒處理可使細胞膜發生一定程度的損傷，
進而促進細胞融合
C.在HAT培養液中能長期存活的細胞具有特異性強、靈敏度高的特點
D.多個B淋巴細胞融合形成的多聚細胞在HAT培養液中死亡的原因是不能合成
DNA
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在HAT培養液中篩選出來的是雜交瘤細胞，可
能有多種類型，因此后續還需要對這些雜交瘤
細胞進行單一抗體檢測，進而篩選出能產生特
定抗體的雜交瘤細胞，可見從HAT培養液中獲
得的抗體不是單克隆抗體，A錯誤；
仙臺病毒處理可使細胞膜發生一定程度的損傷，進而促進細胞融合，據此可用滅活的仙臺病毒作為促融劑，B正確；
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在HAT培養液中能長期存活的細胞為雜交瘤
細胞，這些細胞可能產生多種類型的抗體，
因而不具有特異性強、靈敏度高的特點，C
錯誤；
多個B淋巴細胞融合形成的多聚細胞在HAT
培養液中死亡的原因是不能無限增殖，D錯誤。
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14.下列關于“核酸探針”的敘述，錯誤的是
A.核酸探針既可以檢測某一特定的DNA，也可檢測RNA
B.核酸探針是一小段具有特定核苷酸序列的單鏈核酸序列
C.核酸探針既可以檢測核酸分子，又可以檢測特定的蛋白質
D.核酸探針以單鏈形式發揮作用，其放射性和熒光標記便于檢測
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核酸探針是通過堿基互補配對與目標物結合的，所以無法檢測蛋白質，C錯誤。
15.下列關于基因文庫的說法，錯誤的是
A.基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫
B.cDNA文庫含有某種生物的部分基因
C.cDNA文庫中的基因不含內含子，含有啟動子
D.同種生物的cDNA文庫中基因數量較基因組文庫少
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由于基因轉錄過程中，不轉錄啟動子序列，內含子序列轉錄下來后在RNA成熟的過程中被剪切掉，所以由mRNA逆轉錄形成的cDNA文庫中的基因不含內含子和啟動子，C錯誤。
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16.如圖是某基因工程中構建重組質粒的過程示意圖，載體質粒具有四環素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。
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轉化大腸桿菌后，采用含有不同抗生素的平板進行篩選，得到A、B、C、D四種菌落，其生長情況如表所示(注：“＋”代表生長，“－”代表不生長)。
平板類型 菌落類型 無抗生素 氨芐青霉素 四環素 氨芐青霉素＋四環素
菌落A ＋ ＋ ＋ ＋
菌落B ＋ ＋ － －
菌落C ＋ － － －
菌落D ＋ － ＋ －
選擇題
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根據表中結果判斷，含有重組質粒的菌落是
A.菌落A B.菌落B
C.菌落C D.菌落D
√
平板類型 菌落類型 無抗生素 氨芐青霉素 四環素 氨芐青霉素＋四環素
菌落A ＋ ＋ ＋ ＋
菌落B ＋ ＋ － －
菌落C ＋ － － －
菌落D ＋ － ＋ －
選擇題
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分析題圖可知，構建重組質粒時，目的
基因插入四環素抗性基因(tetr)中間，破
壞了四環素抗性基因(tetr)，氨芐青霉素
抗性基因(ampr)沒有被破壞。因此含有重組質粒的菌落在添加了四環素的培養基中不能生長，而在添加了氨芐青霉素的培養基中能生長，故選B。
17.(2024·嘉興高二聯考)染色質是由一定
長度的核小體為基本單位構成的。將大
鼠肝細胞中分離出的染色質用非特異性
核酸酶水解后去除染色質蛋白，對得到
的DNA片段進行凝膠電泳，結果如圖所
示。若先將染色質中的蛋白質去除后用同樣的非特異性核酸酶處理，則得到隨機長度的DNA片段。據此分析，下列有關敘述錯誤的是
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選擇題
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A.凝膠中的DNA分子通過染色可以被檢
測出來
B.染色質中的蛋白質可能對DNA具有保
護作用
C.構成核小體的基本單位是脫氧核糖核
苷酸
D.在凝膠中，DNA分子的遷移速率與凝膠濃度、DNA分子的大小和構象
等有關
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選擇題
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√
由圖可知，染色質用核酸酶處理后，
得到的是部分水解的染色質，但若
先將染色質中的蛋白質去除后用核
酸酶處理，則得到隨機長度的DNA
片段，說明染色質中的蛋白質可能對DNA具有保護作用，B正確；
染色質是由一定長度的核小體為基本單位構成的，核小體的組成成分是蛋白質和DNA，其基本單位是脫氧核糖核苷酸和氨基酸，C錯誤。
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選擇題
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18.(2024·金華高二質檢)將某轉基因植株(導入了抗除草劑基因G)連續自交后獲得后代群體。為檢測該群體中含G基因植株的比例，用4種方法分別進行檢測，預測所得結果最低的是
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選擇題
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選項 檢測方法 檢測對象 檢出的含G基因植株的比例
A PCR技術 G基因 x1
B 核酸分子雜交 G基因轉錄產物 x2
C 抗原－抗體雜交 G基因編碼的蛋白質 x3
D 噴灑除草劑 幼苗對除草劑的抗性 x4
√
PCR技術可以用來鑒定受體細胞中是否導入目的基因；導入受體細胞中的目的基因不一定完成轉錄，則用核酸分子雜交檢測目的基因轉錄產物含量一般比目的基因少；導入受體細胞中的目的基因雖然完成轉錄但不一定成功翻譯，則檢測目的基因翻譯產物一般比轉錄產物含量少；即使目的基因表達出相應蛋白質，植株也不一定能表現出相應抗性，所以檢測出含G基因植株的比例由高到低依次為x1、x2、x3、x4。
選擇題
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19.(2023·湖州高二階段檢測)實時熒光定量PCR可用于對樣品中特定DNA序列進行定量分析。將熒光標記的Taq man探針與待測樣本DNA混合，當探針完整時，不產生熒光。在PCR過程中，與目的基因結合的探針被TaqDNA聚合酶水解，R與Q分離后，在特定光的激發下R發出熒光，隨著循環次數的增加，熒光信號強度增加，通過實時檢測熒光信號強度，可得Ct值(達到熒光閾值所經歷的循環次數)。下列相關敘述正確的是
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選擇題
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A.熒光基因R連接在探針的3′端
B.該反應體系中并未加入ATP，所以新鏈的合成
不需要消耗能量
C.Taq DNA聚合酶在該反應中的作用是合成磷
酸二酯鍵
D.Ct值越小，說明樣品中特定DNA序列的含量
越多
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選擇題
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選擇題
引物的作用是使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸，從圖中引物1的方向可以分析出，熒光基因R連接在探針5′端，A錯誤；
該反應體系中并未加入ATP，但新鏈的合成需要消耗能量，B錯誤；
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選擇題
在該反應中Taq DNA聚合酶有兩個作用，一是形成子鏈的磷酸二酯鍵，二是水解探針，破壞磷酸二酯鍵，C錯誤；
Ct值越小，即達到閾值所經歷的循環次數越少，說明樣品中特定DNA序列的含量越多，D正確。
24
25
選擇題
20.生物技術的發展給人類帶來諸多好處的同時，也引發了許多關于生物技術安全與倫理問題的擔憂。下列觀點中合理的是
A.轉基因生物的研究和應用均需要進行安全性評價后才能進行
B.通過試管嬰兒無性生殖技術可解決不孕不育問題
C.應反對一切形式的針對人類細胞的克隆研究
D.可以通過微生物改造研究生物武器，提高國防實力
√
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選擇題
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試管嬰兒是通過體外受精的有性生殖技術，B不合理；
生物武器具有致病性強、攻擊范圍廣等特點，世界各國都應抵制，D不合理。
非選擇題
21.(2024·寧波高二期中)益生菌是一類能改變宿主某一部位菌群組成且對宿主有益的活性微生物，常見的益生菌有酵母菌、乳酸菌等。回答下列問題：
(1)對氧氣的需求方面，與醋酸菌相比，乳酸菌的特點是____________；乳酸菌和酵母菌在細胞結構方面的主要區別是______________________
______。
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不需要氧氣
乳酸菌不具有成形的細
胞核
非選擇題
(2)乳酸菌常用于泡菜制作，制作過程中會用清水和食鹽配制質量百分比為5%～20%的鹽水，并將鹽水煮沸，煮沸的目的是__________________
_________________。
(3)培養乳酸菌時，對泡菜汁進行系列梯度稀釋的目的是______________
__________________________________________________。
培養乳酸菌時，培養基上形成的菌落并非全是乳酸菌菌落，為初步判斷菌種類型，還需要觀察培養基上菌落的__________________等特征。配制好的培養基通常可以使用_________法滅菌。
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殺滅雜菌，同時可
去除部分溶解氧
保證每個菌落都是由一個單細胞繁殖而來(答出為了獲得單菌落即可)
形狀、大小、顏色
高壓滅菌
非選擇題
(4)某生物興趣小組為測定泡菜水中的乳酸菌含量，利用顯微鏡直接計數，結果往往偏大，原因可能是______________________________________
______。
(5)進行銷售的泡菜食品還需要進行食品衛生微生物學檢驗，如對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌等微生物進行培養和計數，該過程中所用到的接種方法是________________。
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利用顯微鏡直接計數時不能區分活菌和
死菌
稀釋涂布平板法
非選擇題
22.通過動物細胞融合技術可以制備雜交瘤細胞，對健康的實驗小鼠進行腹腔內免疫，一周后取小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞融合，再用特定的選擇培養基進行篩選。
(1)動物細胞融合一般用____________進行生物誘導。
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滅活的病毒
非選擇題
(2)正常細胞合成DNA有兩條途徑：a通路和b通路。骨髓瘤細胞是DNA合成b通路的缺陷型細胞株，讓B淋巴細胞與其融合，再在加入DNA合成a通路阻斷劑(氨基蝶呤)的培養液中培養，這種培養會產生以下哪些效果____
(多選)。
A.促進細胞融合 B.淘汰B淋巴細胞
C.淘汰骨髓瘤細胞 D.阻斷雜交細胞DNA合成
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BC
非選擇題
動物細胞融合方法有物理法、化學法(聚乙二醇)、生物法(滅活的病毒)，而該培養對細胞融合沒有影響，A不符合題意；
B淋巴細胞的復制次數有限，不能在培養基上長期存活，該培養基能淘汰B淋巴細胞，B符合題意；
骨髓瘤細胞是b通路缺陷型細胞株，剩下的a通路被阻斷，不能合成DNA，該培養基能淘汰骨髓瘤細胞，C符合題意；
加入DNA合成a通路阻斷劑后，雜交細胞還具有b通路，因此不能阻斷雜交細胞DNA合成，D不符合題意。
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非選擇題
(3)經選擇培養的雜交瘤細胞，還需要進行____________和抗體檢測，經多次篩選，可獲得足夠數量的能分泌所需抗體的細胞。
(4)雜交瘤細胞體外培養過程_____(填“是”或“否”)需要添加血清。試分析原因：______________________________________________，通過雜交瘤細胞獲得的單克隆抗體的最大優點是_________________________
_________________________。
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克隆化培養
是
人們對動物細胞所需要的營養物質沒有完全搞清楚
純度高，可大量制備，在應用時特異性強、靈敏度高
非選擇題
23.(2024·浙江高二期中)豬藍耳病又稱豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)，由動脈炎病毒科中的豬繁殖與呼吸綜合征病毒(簡稱藍病毒)引起。患病動物主要表現為繁殖障礙、呼吸困難、耳朵藍紫。母豬感染該病毒后會在妊娠晚期流產，為培育抗藍病毒的轉基因豬，工作人員根據哺乳動物受精作用和早期胚胎的發育過程提出了解決方案(如圖)。請回答下列問題：
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非選擇題
(1)B豬體細胞在培養瓶中培養時，要保證培養液無菌、無毒，常在培養液中加入________，另外還需定期更換培養液，以防止_______________
__________對細胞自身造成的傷害。培養到一定程度后，還需用_______
______處理后分裝到多個培養瓶中進行傳代培養。
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抗生素
細胞代謝產生的
有毒物質
胰蛋
白酶
非選擇題
(2)由于目的基因不能直接導入受體細胞，因此需要構建基因表達載體，該過程需要用的酶有_____________________。常采用雙酶切法處理含目的基因的DNA片段和載體，其優點是_______________________________
______________。
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限制酶、DNA連接酶
防止目的基因和載體發生自身環化或反向連接
非選擇題
(3)通過步驟①的技術手段________得到甲，培養至乙______，然后移植到同種的、______________的C豬體內，由于C豬對乙不發生__________，從而為胚胎在受體內的存活提供了可能。
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核移植
囊胚
生理狀態相同
免疫排斥
非選擇題
(4)利用________________技術檢驗D豬是否產生相應的抗體。該抗體也可使用雜交瘤技術來制備，通常情況下，雜交瘤細胞是由經培養的骨髓瘤細胞和___________________________________細胞融合獲得的，與誘導植物原生質體融合方法不同的是______________________。
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抗原—抗體雜交
經藍病毒抗原(外殼蛋白)免疫的B淋巴
滅活的(仙臺)病毒誘導
非選擇題
24.(2023·金華高二期末)甜玉米與普通玉米
相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的轉化速
度較慢，含可溶性糖量高，汁多質脆，富
含多種維生素。為了使甜玉米更富有生產
應用價值，科研人員通過轉基因技術培育出了超量表達P蛋白的轉基因甜玉米。在超量表達P基因載體的構建中，所用DNA片段和Ti質粒的酶切位點如圖所示。(注：強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段；BamHⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ、NotⅠ、SacⅠ代表不同的限制酶；T－DNA是農桿菌的Ti質粒上的DNA片段。)
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非選擇題
(1)為了特異性擴增P基因序列，可采用______技術，一般要加入的原料為__________________________。
(2)強啟動子是一段有特殊結構的DNA片段，能被____________識別并結合，驅動基因的持續轉錄。
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PCR
四種脫氧核苷三磷酸(dNTP)
RNA聚合酶
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啟動子位于基因的“上游”，有RNA聚合酶結合的位點，控制轉錄的開始，因而強啟動子能被RNA聚合酶識別并結合，驅動基因的持續轉錄。
非選擇題
(3)構建能超量表達P基因的載體，需選用________________限制酶的組合和DNA連接酶。將重組Ti質粒轉入農桿菌，需先將農桿菌用__________處理。
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BamHⅠ和SacⅠ
CaCl2溶液
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在構建基因表達載體時，要想使P基
因在玉米植株中超量表達，切割目
的基因時需要把強啟動子和P基因連
在一起切割下來，因此需要用到限
制酶BamHⅠ切割，限制酶EcoRⅠ和NotⅠ會破壞目的基因，因此應選用的限制酶是BamHⅠ和SacⅠ。將重組Ti質粒轉入農桿菌時，可以用CaCl2溶液處理農桿菌使之成為感受態細胞，易于重組Ti質粒導入。
非選擇題
(4)將玉米愈傷組織經農桿菌液浸泡，超
量表達P基因會隨T－DNA___________
____________________，從而獲得轉基
因植物細胞。繼而進行植物組織培養，
培養基中需加入________進行篩選，篩選出的愈傷組織經________過程形成叢芽，然后在________(填激素名稱)較多的培養基上形成根，最終獲得多個玉米株系。發現某株系的P蛋白表達量較低，請對該現象作出合理的解釋：__________________________________________________。
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整合到玉米
細胞的染色體DNA中
潮霉素
再分化
生長素
該株系玉米中可能沒有導入目的基因或目的基因未表達
非選擇題
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由題圖可知，潮霉素抗性基因位于Ti質
粒的T－DNA，可以隨T－DNA整合到
玉米細胞的染色體DNA中，所以將農桿
菌浸泡過的玉米愈傷組織進行植物組織
培養，培養基中需加入潮霉素進行篩選，篩選出的愈傷組織可再分化形成叢芽，然后在生長素較多的培養基上形成根，最終獲得多個轉基因玉米株系。蛋白質的表達量與基因的表達有關，故P蛋白表達量較低的原因可能是該株系玉米中沒有導入目的基因或者目的基因沒有表達。
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25.如圖表示畜牧業生產上培育某種優良種牛的兩種方法，請分析回答下列有關問題：
(1)過程①技術為______________________。
(2)過程②常用________激素處理，目的是使B牛__________。
動物體細胞核移植技術
促性腺
超數排卵
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(3)自然條件下，A牛的精子必須在B牛的生殖道中經過相應的生理變化后，才能與B牛的卵細胞結合，完成受精作用，這個過程叫作_________。完成受精的實質是__________________。
(4)方法Ⅰ和方法Ⅱ培育優良種牛的本質區別是______________________
____________________________________。
精子獲能
雌、雄原核的融合
方法Ⅰ的培育為有性生
殖過程，方法Ⅱ的培育為無性生殖過程

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