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長(zhǎng)春外國(guó)語(yǔ)學(xué)校2024-2025學(xué)年第二學(xué)期第一次月考
高二年級(jí)生物學(xué)試卷
本試卷共12頁(yè)。考試結(jié)束后，將答題卡交回。
注意事項(xiàng)： 1.答題前，考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫清楚，將條形碼準(zhǔn)確粘貼
在考生信息條形碼粘貼區(qū)。
2.選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0.5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。
3.請(qǐng)按照題號(hào)順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無(wú)效。在草稿紙、試題卷上答題無(wú)效。
4.作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。
5.保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。
一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，只有一項(xiàng)是符合題目要求的。
1．陳醋中的川芎嗪是治療血栓等疾病的新型藥物，能活血化瘀并對(duì)已聚集的血小板有解離作用。研究人員為提高陳醋藥用價(jià)值，分別探究了傳統(tǒng)、機(jī)械生產(chǎn)工藝對(duì)川芎嗪含量的影響，結(jié)果如下。下列敘述錯(cuò)誤的是
生產(chǎn)工藝 川芎嗪含量/（mg·L-1）
發(fā)酵后熏醅前 發(fā)酵后進(jìn)行傳統(tǒng)熏醅 （80—90℃4—5d） 發(fā)酵后進(jìn)行機(jī)械熏醅 （110—120℃12—24h）
傳統(tǒng)醋酸發(fā)酵 0.38 3.15 11.18
機(jī)械醋酸發(fā)酵 1.33 4.73 17.63
A．陳醋發(fā)酵過程中需要提供碳源、氮源并通入空氣
B．傳統(tǒng)熏醅時(shí)提高熏醅的溫度可以提高川芎嗪的產(chǎn)量
C．受皮外傷的患者在傷口愈合期間建議減少對(duì)陳醋的食用
D．選用機(jī)械醋酸發(fā)酵和機(jī)械熏醅方式釀造的食醋藥用價(jià)值更高
2．乳酸菌發(fā)酵在畜牧養(yǎng)殖中應(yīng)用廣泛，飼料行業(yè)因?yàn)槿樗峋闹T多優(yōu)點(diǎn)開發(fā)出了乳酸菌添加劑用于青貯飼料發(fā)酵。關(guān)于乳酸菌下列說(shuō)法正確的是
A．一個(gè)泡菜壇中的所有乳酸菌構(gòu)成一個(gè)種群
B．泡菜制作過程中，泡菜壇偶爾會(huì)發(fā)出“咕嚕”的聲音是因?yàn)槿樗峋l(fā)酵過程中產(chǎn)生了CO2
C．培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基只需要含有碳源、氮源、水和無(wú)機(jī)鹽
D．在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動(dòng)物食用后還能提高免疫力
3．果酒的家庭制作與啤酒的工業(yè)化生產(chǎn)相比，共同點(diǎn)是
A．發(fā)酵前都需要對(duì)原料進(jìn)行滅菌
B．都需要進(jìn)行菌種接種
C．都需要一定有氧環(huán)境供發(fā)酵菌種進(jìn)行繁殖
D．發(fā)酵結(jié)束后都必須進(jìn)行消毒以延長(zhǎng)保存期
4．西瓜枯萎病是由尖孢鐮刀菌（一種真菌）引起的。研究人員從西瓜枯萎病多發(fā)的土壤中分離出多種單菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，然后將擴(kuò)大培養(yǎng)的發(fā)酵液與未凝固的普通培養(yǎng)基混合后倒平板，冷卻后再接種尖孢鐮刀菌，培養(yǎng)并觀察尖孢鐮刀菌菌絲生長(zhǎng)情況，以期篩選出尖孢鐮刀菌的拮抗菌。下列敘述錯(cuò)誤的是
A．在西瓜枯萎病多發(fā)的土壤中取樣更容易獲得目的菌種
B．培養(yǎng)土壤多種菌的發(fā)酵液中可能含有拮抗菌的代謝產(chǎn)物
C．需要將尖孢鐮刀菌接種在普通培養(yǎng)基上培養(yǎng)觀察作為對(duì)照
D．尖孢鐮刀菌菌絲生長(zhǎng)最好組別對(duì)應(yīng)的微生物為最高效拮抗菌
5．利用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)在離體條件下對(duì)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)進(jìn)行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細(xì)胞的某些次生代謝物。下列說(shuō)法正確的是
A．利用該技術(shù)可獲得某些無(wú)法通過化學(xué)合成途徑得到的產(chǎn)物
B．植物細(xì)胞體積小，故不能通過該技術(shù)進(jìn)行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)
C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應(yīng)選擇產(chǎn)量高的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)
D．該技術(shù)主要利用促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)的培養(yǎng)條件提高單個(gè)細(xì)胞中次生代謝物的含量
6．為培育具有市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力的無(wú)籽柑橘（植株C），研究者設(shè)計(jì)了如下流程。下列敘述正確的是
A．過程①的培養(yǎng)液中各成分均采用高壓蒸汽滅菌法滅菌
B．過程②獲得的一個(gè)融合體系中的細(xì)胞均為所需的雜種細(xì)胞
C．過程③僅使用一個(gè)培養(yǎng)基培養(yǎng)即可獲得植株C
D．植株C的染色體組成與植株A和柑橘B均不相同，其無(wú)籽性狀不能遺傳
7．胞質(zhì)雜種是指兩個(gè)原生質(zhì)體融合產(chǎn)生的雜種細(xì)胞，其中一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核消失后，兩個(gè)原生質(zhì)體的細(xì)胞質(zhì)雜交得到的個(gè)體。科研人員利用雄性不育的品種A與可育的品種B通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了雄性不育的胞質(zhì)雜種“華柚2號(hào)”，制備過程如下圖所示，其中GFP（綠色熒光蛋白）基因轉(zhuǎn)入了品種A的細(xì)胞核基因組中。經(jīng)檢測(cè)，“華柚2號(hào)”的細(xì)胞核和葉綠體基因來(lái)自品種B，線粒體基因來(lái)自品種A，下列敘述正確的是
A．制備原生質(zhì)體時(shí)需用纖維素酶或膠原蛋白酶去除細(xì)胞壁
B．電刺激或Ca2+載體可用于誘導(dǎo)原生質(zhì)體A和B的融合
C．“華柚2號(hào)”的獲得說(shuō)明控制雄性不育的基因可能位于線粒體中
D．應(yīng)篩選發(fā)綠色熒光的雜種細(xì)胞C經(jīng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得“華柚2號(hào)”
8．灌流式培養(yǎng)是在細(xì)胞培養(yǎng)管內(nèi)，一邊不斷注入新鮮培養(yǎng)基，一邊將培養(yǎng)液的上清液不斷移出。區(qū)別傳統(tǒng)的懸浮培養(yǎng)，灌流式培養(yǎng)可避免因細(xì)胞密度過大、有害代謝產(chǎn)物積累等因素而使細(xì)胞分裂受阻的現(xiàn)象出現(xiàn)。下列敘述正確的是
A．灌流式培養(yǎng)的細(xì)胞會(huì)貼壁生長(zhǎng)，但不會(huì)出現(xiàn)接觸抑制現(xiàn)象
B．灌流是在細(xì)胞密度達(dá)到一定濃度或者營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)低于一定濃度時(shí)進(jìn)行
C．灌流速率越高，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)利用越充分
D．向培養(yǎng)管注入的新鮮培養(yǎng)基中補(bǔ)充動(dòng)物血清是為了防止雜菌污染
9．我國(guó)科學(xué)家成功構(gòu)建了具有高比例胚胎干細(xì)胞的活產(chǎn)嵌合體猴。如圖所示，研究人員將4CL體系下培育的、可表達(dá)綠色熒光蛋白的供體獼猴的胚胎干細(xì)胞（簡(jiǎn)稱4CL干細(xì)胞）注射至與其遺傳信息不同的獼猴胚胎中，并最終得到嵌合體猴。下列敘述錯(cuò)誤的是
A．嵌合體猴中僅部分位置能發(fā)出綠色熒光是基因重組的結(jié)果
B．嵌合體猴中來(lái)源于4CL干細(xì)胞的遺傳信息不一定能遺傳給后代
C．植入胚胎前通常需要對(duì)代孕母猴注射相關(guān)的激素促使其同期發(fā)情
D．嵌合囊胚中的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞將發(fā)育為嵌合體猴的各種組織
10．犬皰疹病毒病是一種由犬皰疹病毒引起的急性、全身出血性壞死的犬類傳染病。gD蛋白是犬皰疹病毒囊膜的重要組成部分，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答。研究人員首先利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)制備了gD蛋白，又以gD蛋白為抗原來(lái)制備單克隆抗體，以期快速檢測(cè)該病毒，其主要技術(shù)路線如圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是
A．與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合前，細(xì)胞甲需要通過原代和傳代培養(yǎng)擴(kuò)大細(xì)胞數(shù)量
B．與誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合相比，①過程特有的方法是滅活病毒誘導(dǎo)法
C．僅有雜交瘤細(xì)胞能在第1次篩選使用的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)
D．體外培養(yǎng)經(jīng)抗體檢測(cè)呈陽(yáng)性的雜交瘤細(xì)胞是獲得大量單克隆抗體的方法之一
11．胚胎工程技術(shù)的應(yīng)用為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法，如奶牛活體采卵—體外胚胎生產(chǎn)（OPU-IVP）技術(shù)，該技術(shù)流程如圖。已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復(fù)序列，依據(jù)該重復(fù)序列設(shè)計(jì)引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯(cuò)誤的是
A．體外受精后，在透明帶和卵細(xì)胞膜間觀察到兩個(gè)極體說(shuō)明受精成功
B．活體采卵前誘導(dǎo)母牛超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細(xì)胞
C．取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行SRY-PCR，應(yīng)選擇結(jié)果為陰性的胚胎進(jìn)行移植
D．為防止受體母牛發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，胚胎移植前需要進(jìn)行免疫檢查
12．生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中合理選擇材料和研究方法是順利完成實(shí)驗(yàn)的前提條件。下列敘述錯(cuò)誤的是
A．稀釋涂布平板法既可分離菌株又可用于計(jì)數(shù)
B．進(jìn)行胚胎分割時(shí)通常是在原腸胚期進(jìn)行分割
C．獲取馬鈴薯脫毒苗常選取莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)
D．使用不同的限制酶也能產(chǎn)生相同的黏性末端
13．下圖為DNA 分子的某一片段，其中①②③分別表示某種酶的作用部位，則相應(yīng)的酶依次為
A．DNA 連接酶、限制酶、解旋酶
B．限制酶、解旋酶、DNA連接酶
C．限制酶、DNA連接酶、解旋酶
D．解旋酶、限制酶、DNA連接酶
14．關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法正確的是
A．整個(gè)提取過程中可以不使用離心機(jī)
B．研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘后，應(yīng)充分搖勻再倒入燒杯中
C．鑒定過程中DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變
D．僅設(shè)置一個(gè)對(duì)照組不能排除二苯胺加熱后可能變藍(lán)的干擾
15．如圖是將目的基因?qū)氪竽c桿菌內(nèi)制備“基因工程菌”的示意圖，其中引物1-4在含有目的基因的DNA上的結(jié)合位置如甲圖所示，限制酶BamHI、EcoRI、HindIII在質(zhì)粒上的識(shí)別位點(diǎn)如乙圖所示。以下敘述錯(cuò)誤的是
A．PCR過程完成4輪循環(huán)，理論上至少需加入引物30個(gè)
B．過程①中不能同時(shí)使用限制酶EcoRI和BamHI切割質(zhì)粒
C．在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的大腸桿菌就是此過程制備的工程菌
D．若已經(jīng)合成了圖甲所示4種引物，應(yīng)選擇引物1和4擴(kuò)增目的基因
二、選擇題：本題共5小題，每小題3分，共15分。在每小題給出的四個(gè)選項(xiàng)中，有一項(xiàng)或多項(xiàng)是符合題目要求的，全部選對(duì)得3分，選對(duì)但選不全得1分，有選錯(cuò)得0分。
16．下列關(guān)于基因工程的敘述，錯(cuò)誤的是
A．質(zhì)粒都以抗生素合成基因作為標(biāo)記基因且不能有限制酶的酶切位點(diǎn)
B．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將目的基因隨機(jī)插入受體細(xì)胞的染色體DNA上
C．E·coli DNA連接酶既可連接黏性末端又可以連接平末端
D．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要在目的基因上游加上起始密碼子
17．噬菌體能專一性感染細(xì)菌，進(jìn)入宿主細(xì)胞的噬菌體不會(huì)被殺病毒劑滅活，在裂解宿主細(xì)胞后能繼續(xù)感染并裂解周圍細(xì)菌。在培養(yǎng)基平板上，一個(gè)被感染的細(xì)菌最終會(huì)形成一個(gè)噬菌斑。利用這一原理可以檢測(cè)受污染水樣中目標(biāo)菌的數(shù)量，具體操作步驟如圖所示，實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)的平均噬菌斑數(shù)量為56個(gè)。下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是
A．步驟1保溫的目的是讓噬菌體侵染大腸桿菌
B．步驟2中不加殺病毒劑對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響不大
C．步驟3常使用的接種工具是接種環(huán)或涂布器
D．待檢測(cè)受污染水樣中目標(biāo)菌的濃度為11200個(gè)/mL
18．實(shí)驗(yàn)小鼠皮膚細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程如圖所示。下列敘述正確的是
A．所需培養(yǎng)基為合成培養(yǎng)基，使用時(shí)通常需要加入一些天然成分
B．傳代培養(yǎng)時(shí)，懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞直接用離心法收集，無(wú)須再用酶處理
C．細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)需置于含有95%O2和5%CO2的混合氣體的CO2培養(yǎng)箱
D．培養(yǎng)細(xì)胞1是原代培養(yǎng)，往往會(huì)因?yàn)榧?xì)胞密度過大、有害物質(zhì)積累等分裂受阻
19．單倍體技術(shù)被稱為育種技術(shù)的“黑馬”，它能極大縮短育種周期，提高育種效率。下圖為誘導(dǎo)產(chǎn)生大麥（2n=14，開兩性花）雙單倍體的三條不同途徑。種間雜交時(shí)，多棱大麥（母本）與球莖大麥（父本）雜交形成的受精卵中來(lái)自球莖大麥的染色體會(huì)逐漸消失。下列敘述錯(cuò)誤的是
A．多棱大麥和球莖大麥存在生殖隔離是因?yàn)閮晌锓N的配子無(wú)法相互識(shí)別
B．只考慮染色體組成，大麥經(jīng)孤雌生殖途徑產(chǎn)生的單倍體有214種
C．花粉處理法得到的大麥雙單倍體與母本植株性狀表現(xiàn)完全相同
D．三種途徑得到的大麥雙單倍體植株均是純合子，能穩(wěn)定遺傳
20．下表為幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，由此推斷，下列說(shuō)法正確的是
限制酶名稱 識(shí)別序列和切割位點(diǎn) 限制酶名稱 識(shí)別序列和切割位點(diǎn)
BamH I 5'-G↓GATCC -3' Kpn I 5' - GGTAC↓C-3'
EcoR I 5' -C↓AATTC -3' Sau3A I 5'-↓GATC-3'
Hind II 5' - GTY↓RAC -3' Sma I 5'- CCC↓GGG -3'
注：Y為C或T，R為A或G。
A．HindII能識(shí)別GTCAAC序列，也能識(shí)別GTTAAC序列
B．Sau3A I和EcoRI破壞的都是識(shí)別序列中心軸線處的磷酸二酯鍵
C．BamHI和KpnI兩種限制酶可識(shí)別相同的序列但切割后形成不同的黏性末端
D．HindII、SmaI兩種限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列中心軸線上，因而形成平末端
三、非選擇題：本題共5小題，共55分。
21．（共11分。每空1分。）分析以下兩個(gè)關(guān)于微生物的活動(dòng)回答：
I、某校生物社團(tuán)小組在老師的指導(dǎo)下，開展了釀制葡萄酒等系列實(shí)踐活動(dòng)。分析回答：
注：各發(fā)酵瓶的左側(cè)管為充氣管右側(cè)管為排氣管
(1)生物社團(tuán)小組的三位同學(xué)分別設(shè)計(jì)了上圖所示三個(gè)發(fā)酵釀酒裝置。經(jīng)過討論，大家認(rèn)為充氣管底端應(yīng)浸沒在發(fā)酵液中，以便為微生物大量繁殖提供 ；然后不再充氣，每隔一段時(shí)間均需排氣1次。你認(rèn)為甲乙丙三位同學(xué)設(shè)計(jì)的裝置最合理的是 。
(2)同學(xué)們發(fā)現(xiàn)敞口放置的葡萄酒散發(fā)出很濃的醋味，為了避免此種情況出現(xiàn)，他們應(yīng)如何保存釀制的葡萄酒？ 、 （答出2條，每條1分）。
(3)同學(xué)們想利用裝置進(jìn)行葡萄醋的制作，但是卻忘記了制醋的實(shí)驗(yàn)原理，請(qǐng)你來(lái)幫助他們：糖制醋： ；酒制醋： 。
Ⅱ、產(chǎn)脂肪酶酵母可用于含油廢水處理。為篩選產(chǎn)脂肪酶酵母菌株。科研人員開展了相關(guān)研究。請(qǐng)回答下列問題：
(4)在分離純化酵母菌種時(shí)，倒平板操作中，待平板冷凝后通常需要將平板 ，以免造成平板污染。與擴(kuò)大培養(yǎng)時(shí)相比，此時(shí)配制的培養(yǎng)基還需加入 。
(5)為了進(jìn)一步提高酵母菌產(chǎn)酶能力，對(duì)分離所得的菌株，采用射線輻照進(jìn)行誘變育種。將輻照處理后的酵母菌涂布在以 為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，按照菌落直徑大小進(jìn)行初篩，選擇直徑較大的菌落，純化后獲得A、B兩突變菌株。
(6)在處理含油廢水的同時(shí)，可獲得單細(xì)胞蛋白，實(shí)現(xiàn)污染物資源化。為評(píng)價(jià)A、B兩菌株的相關(guān)性能，進(jìn)行了培養(yǎng)研究，結(jié)果如圖。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇菌株 進(jìn)行后續(xù)相關(guān)研究，理由是 。
22．（共10分。每空1分。）流程圖是生物學(xué)研究中模型構(gòu)建的一種表現(xiàn)形式。請(qǐng)回答下列問題。
(1)半夏是我國(guó)常用的傳統(tǒng)中藥材，經(jīng)過Ⅰ、Ⅱ階段產(chǎn)生半夏試管苗C。
①若要快速繁殖有優(yōu)良性狀的半夏，所給細(xì)胞中不能作為外植體的是 （填“表皮細(xì)胞”或“葉肉細(xì)胞”或“成熟篩管細(xì)胞”），在Ⅰ、Ⅱ階段中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是 階段， A、B細(xì)胞中的蛋白質(zhì)種類 （填“完全不”或“不完全”或“完全”）相同。
②若要培育半夏新品種，常常用射線、化學(xué)物質(zhì)等處理圖中的 （填“A”或“B”或“C”），原因是 。
(2)iPS細(xì)胞增殖分化后能形成多種組織細(xì)胞，可用于多種疾病的治療。科學(xué)家將4種基因?qū)胄∈蟪衫w維細(xì)胞后，經(jīng)過 （填“Ⅰ”或“Ⅱ”）階段的變化產(chǎn)生iPS細(xì)胞，該過程類似于植物組織培養(yǎng)的 過程。科研人員已成功將Ⅱ型糖尿病病人的體細(xì)胞經(jīng)重編程后誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞，并定向分化為胰島組織回植患者體內(nèi)，科學(xué)家普遍認(rèn)為iPS細(xì)胞的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞，原因是 。（答一點(diǎn)即可）
(3)上述流程是否可以表示動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的流程 （填“是”或“否”），原因是 。
23．（共11分。每空1分。）如圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，請(qǐng)分析回答下列有關(guān)問題。
(1)方法I和方法II培育優(yōu)良種牛的本質(zhì)區(qū)別是方法I涉及的生殖方式為 生殖，方法Ⅱ涉及的生殖方式為 生殖。
(2)過程①應(yīng)用的技術(shù)是 。克隆牛F的核基因來(lái)源于 (填“奶牛B”“奶牛C”或“奶牛D”)。
(3)過程②常用 處理，目的是使奶牛B ，從奶牛B體內(nèi)獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到 (時(shí)期)才能與獲能的精子結(jié)合。
(4)胚胎移植前，要對(duì)受體進(jìn)行 處理，以保證胚胎能在受體子宮內(nèi)正常發(fā)育；若想提高胚胎的利用率，進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的 ；若想鑒定胚胎性別，選擇處于 發(fā)育階段的胚胎進(jìn)行分割，取 細(xì)胞進(jìn)行DNA分析。
24．（共12分。除特殊標(biāo)記外，每空2分。）美西螈具有很強(qiáng)的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬細(xì)胞在斷肢再生的早期起重要作用。為研究巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，科研人員制備了抗巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志蛋白CD14的單克隆抗體，具體方法如下。回答下列問題：
（一）基因工程抗原的制備
(1)根據(jù)美西螈CD14基因的核苷酸序列，合成引物，利用PCR擴(kuò)增CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3’—OH與加入的脫氧核苷酸的5’—P形成磷酸二酯鍵，則新合成鏈的延伸方向是 （填“ 5’→3’ ”或“ 3’→5’ ”）。（1分）
(2)載體和CD14片段的酶切位點(diǎn)及相應(yīng)的酶切抗性基因序列如圖1所示。用Xho I和Sal 1分別酶切CD14和載體后連接，CD14接入載體時(shí)會(huì)形成正向連接和反向連接的兩種重組DNA．可進(jìn)一步用這兩種限制酶對(duì)CD14的連接方向進(jìn)行鑒定，理由是 。
培養(yǎng)能表達(dá)CD14蛋白的大腸桿菌，分離純化目的蛋白。
（二）抗CD14單克隆抗體的制備流程如圖2所示：
(3)步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射 （1分）和 （1分）。
(4)步驟②所用的SP2/0細(xì)胞的生長(zhǎng)特點(diǎn)是 。
(5)吸取③中的上清液到④的培養(yǎng)孔中，根據(jù)抗原—抗體雜交原理，需加入 進(jìn)行專一抗體檢測(cè)，檢測(cè)過程發(fā)現(xiàn)有些雜交瘤細(xì)胞不能分泌抗CD14抗體，原因是 。
(6)步驟⑥從 （1分）中提取到大量的抗CD14抗體，用于檢測(cè)巨噬細(xì)胞。
25．（共11分。除特殊標(biāo)記外，每空1分。）賴氨酸是人體細(xì)胞不能合成的必需氨基酸。科學(xué)家把某種必需氨基酸含量多的蛋白質(zhì)編碼基因（R）導(dǎo)入玉米中，使玉米中賴氨酸的含量提高30%。回答下列問題。

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增R基因時(shí)，需要在一定的緩沖液中才能進(jìn)行，其中需要加入 酶（2分）。為了特異性擴(kuò)增R基因序列，需根據(jù) 設(shè)計(jì)特異性引物。
(2)在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，若為了避免R基因和質(zhì)粒的自連或反向連接，提高重組效率，應(yīng)該選擇的限制酶是 （2分）。
(3)隨著轉(zhuǎn)化方法的突破，農(nóng)桿菌侵染玉米這種單子葉植物也取得了成功。科研人員從新鮮的玉米葉片上取下的圓形小片與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)，當(dāng)農(nóng)桿菌侵染玉米細(xì)胞后，能將
上的T-DNA轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞，并且將其整合到 。
(4)檢測(cè)R基因是否表達(dá)的方法是 。
(5)在基因工程中若要培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因小鼠，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞常用的方法是 ，常用的受體細(xì)胞是 （2分）。
參考答案
題號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 B D C D A D C B A A
題號(hào) 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
答案 D B D A C AD BCD ABD ABC AD
21．(1) 氧氣 乙
(2)低溫保存、密封保存
(3) C6H12 O6+2O2→2CH3COOH+2CO2 +2H2 O C2H5OH+O2→CH3 COOH+H2 O
(4) 將平板倒置 瓊脂
(5)脂肪
(6) B 菌株B增殖速度快，單細(xì)胞蛋白的產(chǎn)量也高，同時(shí)降解脂肪的能力強(qiáng)，凈化效果更好。
22．(1) 成熟篩管細(xì)胞 Ⅰ、Ⅱ 不完全 B 這種細(xì)胞一直處在不斷增殖的狀態(tài)，容易受到培養(yǎng)條件和誘變因素的影響產(chǎn)生突變
(2) Ⅰ 脫分化 iPS 細(xì)胞來(lái)自病人的體細(xì)胞，不發(fā)生免疫排斥
(3)否 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)只涉及細(xì)胞增殖，不涉及細(xì)胞分化
23．(1) 有性 無(wú)性
(2) 動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù) 奶牛C
(3) 促性腺激素 超數(shù)排卵 減數(shù)第二次分裂中期(MⅡ中期)
(4) 同期發(fā)情 桑葚胚或囊胚 囊胚 滋養(yǎng)層細(xì)胞
24．(1)5'→3'
(2)正向連接的重組DNA有這兩種酶切位點(diǎn)（限制酶的識(shí)別序列）；而反向連接的重組DNA會(huì)形成新的序列，沒有這兩種酶的酶切位點(diǎn)（沒有限制酶的識(shí)別序列）
(3) CD14蛋白/CD14抗原 分泌抗CD14抗體的雜交瘤細(xì)胞
(4)能在體外無(wú)限增殖
(5) CD14蛋白 參與形成雜交瘤細(xì)胞的B淋巴細(xì)胞種類多，有的不能分泌抗CD14抗體
(6)小鼠腹水
25．(1) 耐高溫的DNA聚合酶 R基因兩端的堿基（核苷酸）序列（R基因的已知序列）
(2)PstI、EcoRI
(3) Ti質(zhì)粒 該細(xì)胞的染色體DNA上
(4)抗原—抗體雜交
(5) 顯微注射法 受精卵

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