資源簡介

機密★啟用前
試卷類型A
4.我國科學家發明的三菌兩步發酵法生產維生素C的工藝流程如下。·該流程中第二步發酵
山東名校考試聯盟
是由氧化葡萄糖酸桿菌和巨大芽孢桿菌混合發酵完成的，前者為產酸曲俗稱小菌，單獨培養
時增殖慢，產酸能力較低；后者為伴生菌俗稱大茵，它不產酸。兩者混合培養時產酸顯著提
2024一2025學年高二年級下學期期中檢測
高。下列敘述正確的是
生物試題
生酮基古龍酸鑿
2025.04
氧化葡葫糖酸桿菌
三大孢扛藥
第一步發酵
第二步發酵
注意事項：
加氫山梨醇
發醉液轉移
1.答題前，考生先將自已的姓名、考生號、座號填寫在相應位置，認真核對條形碼上的姓
山梨糖
名、考生號和座號，并將條形碼粘貼在指定位置上」
葡簡
2-酮-L-古龍酸+維生茶G
2.選擇題答案必須使用2B鉛筆（按填涂樣例）正確填涂；非選擇題答案必須使用0.5毫
A.發酵工程的中心環節是滅菌，發酵罐內要嚴格控制溫度、H和溶解氧等條件
米黑色簽字筆書寫，繪圖時，可用2B鉛筆作答，字體工整、筆跡清楚。
B.可通過將培養液的H調制中性或弱堿性篩選獲得巨大芽孢桿南
3.請按照題號在各題目的答題區域內作答，超出答題區蜮書寫的答案無效；在草稿紙，試
C.混合發酵產酸顯著提高的原因可能是大菌產生了促進小菌生長和繁殖的物質
題卷上答題無效。保持卡面清潔，不折疊、不破損。
D.從發酵液中提取2一酮基一L一古龍酸需采用過濾、沉淀等方法
5.轉錄因子Ghl和GhE1能調控棉花愈傷組織細胞的生長發育，參與體細胞胚胎發生過程中
一、選擇題：本題共15小題，每小題2分，共30分。每小題只有個選項符合題目要求。
細胞命運的重塑，其機制如圖示。下列相關分析正確的是
1.云南腌酸筍的做法：新鮮竹筍去皮，切絲，清水浸泡：加鹽腌制，清洗晾干，放入干凈容器內，
加蓋密封，陰涼通風處腌制30天，讓竹筍絲自然發酵。下列說法正確的是
粘是4澤蛋百
+促逃抑制
A.制作酸筍主要是利用竹筍表面天然醋酸菌進行發酵
Cht
GhEI蛋白
ROS
+器宮發生
B.發酵容器密封的主要目的是防止雜茵污染
6
C.酸筍中乳酸積累到質量分數0.4%一0.8%時，口味、品質最佳
愈傷細胞增殖
D.隨發僻進行，酸筍中亞硝酸鹽的含量會先增加后保持穩定
2.研究人員利用石油污染灘涂土壤篩選高效降解石油細茵，進行如下圖所示的操作（①一⑤表
A.提高培養基中生長素和細胞分裂素的比例可促進愈傷組織形成芽
示不同的菌落)。下列敘述正確的是
B.Gh1基因發生甲基化可能會抑制愈傷組織細胞的增殖
④
降解熊
C.促進GhEl基因的表達可促進愈傷組織年分化
接種
段時潤
接種】力評能高效降
石沛的
D.Ghl與GhE1單獨作用均能調控GhPs基因的表達
甲
乙
6.植物細胞懸浮培養是指將游離的單細胞或小細胞團以一定的細胞密度懸浮在液體培養基中
蠻失蠻趕
石油降解擱石油培養基
的培養方法，是制藥和生物技術領域中常用的方法。某興趣小組利用該方法培養胡蘿卜細
胞并獲取番茄紅素，實驗流程見下圖。下列描述合理的是
A.圖中液體培養基和固體培養基成分的唯一不同是后者含有瓊脂
B.甲過程采用的接種方法可用于菌體計數，但結果通常偏大
胡蘿卜根外植體配分化愈傷組織髯處塞懸浮細胞細惑培養番茄紅素
C.菌落①中菌體時不能分解石油而無降解圈產生，其生長不需要碳源
A.胡蘿卜根外植體脫分化前需州適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉的混合液消毒
D.乙過程選擇茵落⑤接種到石油培養基，可根據石油剝余量進行降解能力評估
B.胡蘿卜根外植體脫分化形成愈傷組織是基因選擇性表達的結果
3.慶大霉素(GM)能抑制沙門氏菌的生長。為了探究LPC(用MRS培養基培養乳酸菌后獲得
C.可用膠原蛋白酶處理愈傷組織，制備懸浮細胞
的上清液)對沙門氏菌生長的影響及作用機制，研究人員在接種沙門氏菌的平板上做了五組
D.可通過植物細胞懸浮培養，提高單個細胞中番茄紅素的含量
不同處理，實驗結果如圖所示。下列說法不正確的是
7.自體皮膚細胞培養移植是治療皮膚嚴重燙傷、燒傷的有效方法。取受損者的皮膚進行處理
A.將含沙門氏菌的菌液稀釋到適宜濃度以保證平板上菌落數在
MRS GM
(●ǐ
后置于培養瓶中培養，直至鋪滿整個培養瓶的底部，單層細胞相互連接形成很薄的“皮膚”。
30-300之間
(●)Hem-iPC
將這些“人造皮膚”移植到患者的傷處進行治療。下列關于皮膚細胞培養的敘述，正確的是
B.設置MRS是為'了排除MRS培養基成分對實驗結果的影響
OH-LPC
A.將皮膚細胞置于含有葡萄糖、氨基酸、無機鹽，瓊脂等物質的培養基中培養
C.Heat一LPC與LPC對比結果說明LPC中的抑菌物質熱穩定性注：●表示加樣孔
B.在合成培養基中加人抗生素和血清為皮膚細胞提供無菌、無毒的環境
Heat-LPC(100℃處理15min)
比較強
NaOH-LPC(向LPC中t如入NOH
C.松蓋培養瓶應置于含95%氧氣和5%C02的混合氣體的C02培養箱中培養
D.LP℃可能是通過其中含有的酸性物質抑制沙門氏菌的生長
腳節H至近中性)
D.“人造皮膚”的獲得說明皮膚細胞具有貼壁生長和接觸抑制的特點
高二生物試題第1頁（共8頁）
高二生物試題第2頁（共8頁）高二生物參考答案
一、選擇題：本題共 15 小題，每小題 2 分，共 30 分。每小題只有一個選項符合題目要求。
1.C
【解析】 A.根據題干信息，酸筍的發酵要密封容器，應該是利用微生物的無氧呼吸，發揮作用的主要菌種
應該是乳酸菌而不是醋酸菌，A 錯誤；B.發酵容器密封的主要目的是創造無氧環境有利于厭氧菌的繁殖、代
謝，B 錯誤；C.發酵過程中，當乳酸積累到質量分數 0.4%到 0.8%時，酸筍的口味、品質最佳，C 正確；
D.隨發酵進行，酸筍中亞硝酸鹽的含量會先增后降最后保持穩定，D 錯誤。
2.D
【解析】 A.圖中液體富集培養基和固體選擇培養基成分的不同之處有：后者以石油作為唯一碳源、后者固
體培養基中含有瓊脂，A 錯誤；B.甲過程采用的是稀釋涂布平板法，該方法用于計數時往往使結果偏小，B
錯誤；C.菌落①周圍無降解圈產生，說明其中的菌體不能利用石油這唯一的碳源，很可能是自養型微生物，
以 CO2 作為碳源，C 錯誤；D.乙過程選擇菌落⑤接種到石油培養基，可根據石油剩余量進行降解能力評估，
D 正確。
3.A
【解析】 A.本實驗需在培養基上形成均勻分布的沙門氏菌的菌落，目的不用于計數，無需保證平板上菌落
數在 30-300 之間。A 錯誤；B.MRS 培養基中的成分可能對該實驗造成干擾，設置 MRS 是為了排除無關變
量的影響，B 正確；C.Heat-LPC 經過了高溫處理，但是該組的抑菌圈與 LPC 組的基本
相同，說明加熱不影響 LPC，進而說明其中所含抑菌物質的熱穩定性強，C 正確；
D.NaOH-LPC 組沒有抑菌圈，該組在 LPC 中加入了 NaOH 后調節到了中性，加入的
NaOH 與 LPC 中的酸性物質反應，使其失去了抑菌的作用，因而推測 LPC 抑菌是因為
其含有酸性物質，D 正確。
4.C
【解析】 A.發酵工程中，發酵罐內發酵是中心環節，A 錯誤；B.培養液的 pH 調制中性或弱堿性是大部分
細菌的生活環境。無法起到篩選作用。B 錯誤；C.據題意推測，第二步混合發酵產酸顯著提高的原因很可能
是大菌為小菌提供某種生長因子促進了小菌生長和繁殖，C 正確；D.2-酮基-L-古龍酸是微生物的代謝物，
從發酵液中提取需采用提取、分離和純化等措施，D 錯誤。
5.B
【解析】 A.提高培養基中生長素和細胞分裂素的比例可促進愈傷組織形成根，A 錯誤；
B.甲基化會抑制 Gh1 表達，不能與 GhE1 的表達產物形成復合物，GhPs 基因不能表達，會抑制愈傷組織細
胞的增殖，B 正確；C.促進 GhEl 基因的表達，可能會導致 GhPs 的表達產物增多，從而促進愈傷組織細胞
的增殖，抑制愈傷組織分化成根等器官，C 錯誤；D.Gh1 與 GhE1 表達后形成的蛋白質相互結合可調控 GhPs
的表達，Gh1 與 GhE1 單獨作用不能調控 GhPs 基因的表達，D 錯誤。
6.B
【解析】 A.胡蘿卜根外植體脫分化前需用適宜濃度的乙醇和次氯酸鈉先后分別處理，A 錯誤；B.胡蘿卜根
1
外植體脫分化形成愈傷組織是在離體及適宜的培養條件下基因選擇性表達的結果，B 正確；C.膠原蛋白酶可
用來處理動物細胞制備動物細胞懸液，不能處理植物細胞，C 錯誤；D.細胞產物的工廠化生產主要是利用促
進細胞生長的培養條件，增加細胞數量，從而提高次生代謝物的總量，而不是提高單個細胞中次生代謝物
的含量，D 錯誤。
7.D
【解析】 A.動物細胞培養的培養基屬于液體培養基，不需要加入瓊脂，A 錯誤；B.合成培養基滅菌及培養
液中加抗生素是為動物細胞培養提供無菌環境，無毒環境是通過及時更換培養基來實現的，B 錯誤；C.培養
皮膚細胞的培養皿或松蓋培養瓶應置于 95% 的空氣和 5%的 CO2 的 CO2 培養箱中，C 錯誤；D.細胞鋪滿培
養瓶的底部，說明皮膚細胞需要貼壁生長，貼壁生長的皮膚細胞不具備無限增殖的能力，具有接觸抑制，D
正確。
8.B
【解析】 A.給小鼠多次間歇注射的是 HPV 病毒的蛋白質外殼，目的是產生更多具備產生抗 HPV 抗體的能
力的 B 細胞，細胞處于活化的 B 細胞分化成漿細胞的過程中，A 正確；B.滅活的病毒能使細胞膜上的蛋白
質和脂質重新排布，誘導細胞融合，融合的細胞可能是 B 細胞，也可能是骨髓瘤細胞，也可能是骨髓瘤細
胞和免疫的 B 細胞融合，B 錯誤；C.可用 96 孔板克隆化培養可抗體檢測，篩選出能產生抗 HPV 單克隆抗
體的雜交瘤細胞 ，能增殖的細胞是在選擇培養基上篩選出來的，C 正確；D.同位素標記的抗 HPV 單克隆抗
體可定位檢測宮頸癌利用了抗原--抗體特異性結合的原理，D 正確。
9.A
【解析】 A.①中供體細胞是從歐拉型良種公羊體內獲取的組織用胰蛋白酶和膠原蛋白酶處理后離心，去掉
酶液獲得，A 正確；B.②去核常用顯微操作去核，是除去 MⅡ期的卵母細胞內由紡錘體--染色體組成的復合
物，B 錯誤；C.重組細胞的獲得是將供體細胞注入去核的卵母細胞，用滅活的病毒、聚乙二醇等方法誘導二
者融合獲得的，高 Ca--高 pH 是誘導植物原生質體融合的方法，C 錯誤；D.③可用電刺激、Ca2+ 載體、蛋
白酶合成抑制劑等處理重組細胞，使其可以順利完成細胞分裂和發育的進程，不是蛋白酶合成促進劑，D
錯誤。
10.C
【解析】 A.采卵的過程中可以給母親注射促性腺激素，促進卵細胞的生成，使其排出更多成熟的卵子，A
錯誤；B.采集的精子需置于人工配制的肝素溶液中獲能是獲得受精的能力，但不是獲得能量，B 錯誤；
C.受精的過程中精子核膜破裂，形成雄原核，卵細胞排出第二極體形成雌原核，二者融合形成受精卵，完
成受精作用，C 正確；D.胚胎發育過程中，囊胚進一步擴大，會導致透明帶破裂，胚胎從其中伸展出來，稱
為孵化，D 錯誤。
2
11.B
【解析】 A.胚胎移植是將胚胎移植到同種雌性動物體內，所以本地母牛是具有健康體質和正常繁殖能力的，
與荷斯坦奶牛屬于同一物種的生物，A 正確；B. SRY 檢測為陽性的個體，性別為雄性，應選擇囊胚期滋養
層的細胞 SRY 檢測為陰性的胚胎均等分割后進行胚胎移植，B 錯誤；C.④過程的實質是早期胚胎在相同生
理條件下空間位置的轉移，C 正確；D.該培育過程的優勢是可以充分發揮雌性優良個體的繁殖潛力，D 正確。
12.D
【解析】 A.DNA 不溶于酒精溶液，但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精。利用這一原理，可以將 DNA 與
蛋白質進一步的分離，A 錯誤；B.用紗布過濾以獲取含 DNA 的過濾液，若用濾紙過濾，會因 DNA 會吸附
于濾紙導致過濾液中的 DNA 含量極少，B 錯誤；C.絲狀物溶于 2mol·L-1 的 NaCl 溶液，與二苯胺充分混合
以檢測 DNA，C 錯誤；D.用二苯胺檢測 DNA 需要沸水浴條件，待試管冷卻后，比較兩支試管中溶液顏色
的變化，需要做對照試驗,D 正確。
13.D
【解析】 A.木瓜環斑病毒是 RNA 病毒，其基因的本質是 RNA，須經逆轉錄合成 DNA 以后才能導入到真
核細胞的基因組中，A 正確；B.經逆轉錄處理后合成 DNA 還需構建基因表達載體以后才能在植物細胞內表
達。B 正確；C.農桿菌轉化法 Ti 質粒上的 T-DNA 部分才能轉移到木瓜基因組中，C 正確；D.若在木瓜植株
檢測到 CP 基因，則說明基因導入成功，但不一定表達成功，不一定抗病毒能力，D 錯誤。
14．B
【解析】 A.蛋白質工程，不能直接對蛋白質進行處理，是通過改變控制蛋白質的基因來完成的,A 錯誤;
B.蛋白質工程可以通過對目的基因的定點誘變來實現，B 正確；C.密碼子具有簡并性，同一種氨基酸可以有
多種密碼子決定，根據中心法則推斷出德谷胰島素的脫氧核苷酸序列有多種，C 錯誤；D.德谷胰島素功能改
變的原因，不包括氨基酸的數目,D 錯誤。
15.C
【解析】 A.在基因表達載體上，除了有目的基因、啟動子、終止子等外，還需要標記基因，故轉基因食品
風險評估時還需考慮標記基因的安全性問題，A 正確；B．轉基因生物引發安全性問題的原因之一是外源基
因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，不確定是否破壞或影響宿主基因組中正常基因的表達，B 正確；
C.轉基因生物的安全性包括食物安全（滯后效應、過敏原、營養成分改變）、生物安全（對生物多樣性的
影響）、環境安全（對生態系統穩定性的影響），C 錯誤；D．子代受精卵中的細胞質幾乎全部來自母方，
轉入葉綠體中的基因不會隨花粉傳遞給子代，研究轉基因農作物時應采取多種方法防止轉基因花粉的傳播，
避免基因污染，符合生物技術的安全與倫理規范，D 正確。
3
二、選擇題
16.AB
【解析】 A.黑曲霉是真菌，是真核生物，人工誘變可導致其發生基因突變和染色體變異，A 正確；B.根據
表中信息，透明圈與菌落直徑比值最大的突變菌株是產酸能力最強的，是 L6，B 正確；C.培養基 pH 的調
節需要在滅菌前進行，即高壓蒸汽滅菌前進行 pH 的調節，并調至 4.5 左右，C 錯誤；D.工業生產中，黑曲
霉可以用來生產淀粉酶，但單細胞蛋白指的是微生物菌體，不是淀粉酶，D 錯誤。
17.ABC
【解析】 A.為避免去壁的原生質體吸水漲破，通常在高滲溶液中利用纖維素酶和果膠酶處理植物細胞，A
錯誤；B.C 細胞的 DNA 含量大約是 200，A 細胞是 50，B 細胞是 150，C 細胞 DNA 含量是 A 細胞與 B 細
胞 DNA 含量之和，C 最可能是 A 細胞與 B 細胞融合后的雜種細胞，B 錯誤；C.篩選出的雜種細胞需脫分化
形成愈傷組織后才能經誘導再分化形成雜種植株，C 錯誤；D.通過植物體細胞雜交技術繁殖后代屬于無性繁
殖，D 正確。
18.BCD
【解析】 A.動物細胞融合技術使遠緣雜交稱為可能，原理是細胞膜的流動性，A 正確；B.人體細胞突變株
不能利用次黃嘌呤，小鼠細胞不能利用胸腺脫氧核苷，HAT 培養基中應加入次黃嘌呤和胸腺脫氧核苷，人
--鼠細胞的融合細胞能利用上述兩種物質正常存活、分裂，從而篩選出人--鼠雜交細胞，B 錯誤；C.根據分
析可知，所有能存活的細胞都含有 X 染色體，但只含有 X 和 3 號染色體的細胞死亡，但含有 X 和 17 號染
色體的融合細胞存活，小鼠細胞中缺乏 TK 基因，故人的 TK 基因位于 17 號染色體上，人體細胞中無 HGPRT
基因，無法判斷 HGPRT 基因的位置，C 錯誤；D.在②③過程中，需定期用胰蛋白酶處理，使貼壁生長的細
胞從瓶壁上脫離下來進行傳代培養，但不能將胰蛋白酶加入培養液中培養，同時培養液中加入抗生素防止
細菌污染而抑制生長，D 錯誤。
19.ABC
【解析】 A.在 PCR 實驗中，微量離心管、槍頭等在使用前均須進行高壓蒸汽滅菌處理，而不是消毒處理，
A 錯誤；B.稍冷卻的瓊脂糖溶液中加入的核酸染料能與 DNA 分子結合，在波長為 300nm 的紫外燈下可以被
檢測出來，凝膠載樣緩沖液中加入的是指示劑，B 錯誤；DNA 分子的電泳鑒定實驗中，決定 DNA 分子遷
移速率的因素有凝膠的濃度、DNA 分子的大小和構象，DNA 分子越小，遷移的速率越快，DNA 分子越大，
遷移速率越慢，C 錯誤；DNA 的環狀和鏈狀屬于 DNA 構像，相同長度的環狀 DNA 和鏈狀 DNA 遷移速率
不同，D 正確。
20.C
【解析】 乳腺生物反應器的培育，需要將目的基因導入動物的受精卵,由受精卵發育成個體。
三、非選擇題
4
21.（1）高壓蒸汽(濕熱) 不接種培養（或空白培養 ）
(2)選擇
(3)基本 防止基本培養基中混入特定氨基酸（2 分）
(4)菌落 A
(5)突變株 C 缺乏合成營養物質甲所需要的酶（2 分） 突變株 D 可以提供突變株 C 生長需要的營養物
質甲，突變株 C 可以提供突變株 D 生長需要的營養物質乙（2 分）
【解析】 （1）配制的培養基必須進行高壓蒸汽(濕熱)滅菌處理，檢測固體培養基滅菌效果的常用方法是不
接種培養（或空白培養 ）。
（2）根據用途分類，圖中基本培養基屬于“選擇”培養基，在該培養基上不能生長的即為相應的缺陷型培養
基；
（3）進行過程②培養時，為防止特定氨基酸混入基本培養基中，應先將絲絨布轉印至基本培養基上，再轉
接至完全培養基上；
（4）菌落 A 在完全培養基上能生長，而在基本培養基上不能生長，最可能是某種氨基酸缺陷型菌株，應挑
取完全培養基中的菌落 A 進行接種培養，并進一步鑒定；
（5）由表格分析可知，突變株 C 的生長依賴于營養物質甲，突變株 C 不能在一般培養基上生長的原因最可
能是突變株 C 缺乏合成營養物質甲所需要的酶；突變株 C 的生長依賴物質甲，而突變株 D 的生長依賴于營
養物質乙，不添加營養物質甲和乙，二者混合培養時都能生長，最可能的原因是突變株 C 為突變株 D 提供
了營養物質乙，突變株 D 為突變株 C 提供了營養物質甲。
22.（1）①④（1 分） ①過程中 HER2 蛋白作為抗原刺激小鼠產生能產生抗 HER2 蛋白抗體的 B 淋巴細
胞 ；④過程中用 HER2 蛋白檢測篩選出能產生抗 HER2 抗體的雜交瘤細胞 （2 分）
（2）將篩選出的雜交瘤細胞注射到小鼠的腹腔內增殖，培養一段時間后，提取小鼠腹水中的抗體（2 分）
（3） 能準確識別抗原的細微差異，與特定的抗原發生特異性結合，并且可大量制備 （2 分）
（4）雙特異性抗體同時結合 HER2 蛋白和 CD28，使 CD28 接收激活信號，且實現癌細胞與 T 細胞的聚集，
最終激活 T 細胞殺傷癌細胞 （2 分）
【解析】 （1）HER2 蛋白屬于抗原，①為注射抗原，讓小鼠產生抗 HER2 蛋白抗體的 B 淋巴細胞，②為
誘導融合的過程，③為用選擇培養基篩選出 B 細胞和骨髓瘤細胞融合的雜交瘤細胞，④為用 HER2 蛋白篩
選出能產生抗 HER2 蛋白抗體的雜交瘤細胞.⑤為擴大培養，故用到 HER2 蛋白的是過程①④。
（2）⑤為擴大培養，可以用培養基擴大培養，從培養液中提取；也可以注射到小鼠體內，從小鼠腹水中提
取。
（3）單克隆抗體的優點有能準確識別抗原的細微差異，與特定的抗原發生特異性結合，并且可大量制備。
（4）乳腺癌細胞表面高表達 HER2 蛋白，CD28 是 T 細胞表面受體，雙特異性抗體是由抗 HER2 蛋白的抗
體和 CD28 的抗體組成的， 雙特異性抗體同時結合 HER2 蛋白和 CD28，使 CD28 接收激活信號，且實現
5
癌細胞與 T 細胞的聚集，最終激活 T 細胞殺傷癌細胞
23.(1) 作為載體，將 OSNL 四個外源基因送入 CEFs 細胞中 （2 分）
（2）誘導 CEFs 細胞形成 iPGCs 細胞的技術是將已經分化的細胞誘導為類似胚胎干細胞的一種細胞（iPS），
再誘導 iPS 分化為誘導原始生殖細胞（iPGCs）的技術（2 分），而細胞核移植技術是將動物的一個細胞的
細胞核移入去核的卵母細胞內，使這個重組的細胞發育為胚胎，繼而發育為動物個體的技術 （2 分）
（3）全能性 基因工程、動物細胞培養（2 分）
（4）①iPS 細胞可以用成體細胞直接誘導而成，避免破壞胚胎所引起的倫理問題 ；②iPS 細胞可以來源于
病人自身體細胞，移植回病人體內可避免免疫排斥 （2 分）
【解析】 (1)OSNL 四個基因是目的基因，孵化 9 天的黑羽雞胚中分離獲得的 CEFs 細胞是受體細胞，通過
逆轉錄病毒將目的基因導入受體細胞中，逆轉錄病毒的作用是作為載體，將 OSNL 四個外源基因送入 CEFs
細胞中
(2)誘導 CEFs 細胞形成 iPCEFs 細胞的技術是將已經分化的 CEFs 細胞誘導為類似胚胎干細胞的一種細胞
（iPS），再誘導 iPS 分化為誘導原始生殖細胞（iPGCs）的技術，而細胞核移植技術是將動物的一個細胞的
細胞核移入去核的卵母細胞內，使這個重組的細胞發育為胚胎，繼而發育為動物個體的技術
（3）將 iPGCS 細胞到孵化 2.5 天的白羽雞胚血管中，通過體外胚胎培養技術，得到的子代中會出現 iPGCs
發育為生殖器官的個體，這樣的個體會產生含黑羽基因配子，相互交配會產生了具有黑羽雞表型特征的個
體。該實驗流程中用到的生物技術有基因工程、動物細胞培養和體外胚胎培養（答出 2 點即可）。
(4)隨著誘導 iPS 細胞技術的成熟，誘導 iPS 細胞在醫學上的應用優于胚胎干細胞的原因是有：①iPS 細胞可
以從成體細胞直接誘導而成，避免破壞胚胎所引起的倫理問題 ；②iPS 細胞可以來源于病人自身體細胞，
移植回病人體內可避免免疫排斥。
24.（1） 2 種 使 DNA 聚合酶能夠從引物的 3'端開始連接脫氧核苷酸（2 分） 瓊脂糖凝膠電泳
（2）BamH I HaeⅢ（2 分，答對 1 個的 1 分） BcⅡ HaeⅢ（2 分，答對 1 個的 1 分）
5'-GATC-3'、 5'-GATC-3'（2 分，答對 1 個的 1 分，可以不寫-5'-3'）
（3）大腸桿菌沒有生物膜系統（或內質網，高爾基體），缺乏完善的蛋白質加工修飾功能，產生的干擾素
和真核細胞的干擾素在結構上不完全一樣（2 分）
【解析】 （1）基因的 PCR 擴增技術，需要兩個引物在諧音的兩端和配對，所以需要兩種引物。引物的作
用是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。PCR擴增以后常用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR
的產物。
（2）要想保證干擾素、基因與質粒的正確連接， 如果選用 BcⅡ切目的基因。會導目的基因正向和反向連
6
接的質粒上都有可能，所以選用的是產生粘性末端的 BamH I 和 產生平末端的 HaeⅢ；因為質粒的復制原
點上有 BamH I 的識別位點。切割質粒的時候不能選用 BamH I，但還需要產生與 BamH I 處理后相同的粘性
末端，所以選用 BcⅡ和 HaeⅢ這兩種限制酶。干擾措施，真和生我的氣。
干擾素是真核基因控制的。干擾素的合成過程當中需要內質網，高爾基體的修飾加工。大腸桿菌內沒有內
質網，高爾基體修飾加工的具體過程不一樣。所以大腸桿菌產生的干擾素和真核細胞產生的干擾素有所區
別。
25.(1)替換 蛋白質
（2）否 引物 2 和引物 3 可通過堿基互補配對形成雙鏈，影響與模板正常配對（意思對即可）（2 分）
引物 1 和引物 4 （2 分，答不全不得分） 便于重組 DNA 分子的篩選
（3）微生物具有生理結構和遺傳物質簡單、生長繁殖快、對環境因素敏感和容易進行遺傳物質操作等優點
（2 分，答出兩點即可） Ca2+（或 CaCl2） 白色
【解析】 （1）題意可知，將葡萄糖異構酶的 184 位的天冬酰胺（Asn）替換成天冬氨酸（Asp），需進行
基因內部堿基對的替換；該過程對蛋白質的結構進行了設計改造，屬于蛋白質工程；
（2）改造葡萄糖異構酶基因時，PCR1 和 PCR2 不能在同一反應體系中進行，因為引物 2 和引物 3 可通過
堿基互補配對形成雙鏈，影響與模板正常配對。PCR3 反應體系中需要加入的引物是引物 1 和引物 4 ，質粒
pCLY11 中 neor 的作用是作為標記基因，便于篩選含目的基因的受體細胞。
（3）若將重組質粒導入大腸桿菌細胞內，一般先用 Ca2+（或 CaCl2）處理大腸桿菌細胞，使細胞處于一種
能吸收周圍環境中 DNA 分子的生理狀態，即感受態。由于重組質粒構建時破壞了 mlacZ 基因（表達產物會
使細胞呈藍色，否則細胞呈白色），所以所選的工程菌菌落應呈白色。
7

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