資源簡介

成都外國語學校高 2026 屆高二下半期考試
生物試題
一、單選題（每題 2 分，共 40 分）
1．GA3 是一種由 C、H、O 三種元素構成的與赤霉素作用類似的植物生長調節劑，能促進莖伸長和種子萌
發。GA3 的廣泛施用會導致其在土壤中殘留，研究小組從長期施用 GA3 農田的土壤中篩選出了能降解 GA3
的菌株并調查了土壤中能降解 GA3 的菌的數量，如圖所示。下列相關實驗內容錯誤的是（ ）
A．過程②將稀釋的含有降解 GA3 的菌株接種到甲瓶培養液中來富集培養 GA3 降解菌
B．乙培養基中應以 GA3 為唯一的碳源，可能還有其他微生物的存在
C．圖中 3 號試管中樣品液的稀釋倍數為 104 倍
D．5 號試管的結果表明每克土壤中的活菌數為 1.7×108 個
2．產黃青霉菌生產青霉素的發酵流程如下圖所示，其中“補料”是指補充培養基，其成分有花生餅粉、玉米
漿、葡萄糖、磷酸二氫鈉等。下列關于該發酵過程的敘述，錯誤的是（ ）
A．對產黃青霉菌分離純化時采用的接種方法是稀釋涂布平板法
B．“種母培養”時采用液體培養基有利于增加產黃青霉菌的數量
C．產黃青霉菌為異養厭氧型真菌，添加的磷酸二氫鈉具有多種作用
D．向主發酵罐添加 pH 調節液是因為環境條件會影響青霉素的形成
3．紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內的二萜類生物堿類化合物，是一種有效的抗癌藥物，傳統生產方法是從
紅豆杉樹皮和樹葉中提取，下圖為利用植物細胞工程生產紫杉醇的流程圖，相關敘述正確的是（ ）
A．紫杉醇是植物代謝活動產生的，屬于初生代謝物
{#{QQABAQEl5gAQghRACB6KA0XSCEgQsJASJSoGhVCYKAwCgBFABCA=}#}
B．①②過程通常采用液體培養基，需要適當強度的光照
C．可利用傳代培養的動物癌細胞來檢測紫杉醇的效果
D．植物細胞培養的原理是植物細胞具有全能性
4．植物細胞工程在植物繁殖新途徑等方面都有廣泛的應用，并取得了顯著的社會效益和經濟效益。下圖表示
植物細胞工程應用的相關操作，相關敘述正確的是（ ）
A．A 途徑中發生的可遺傳變異有基因突變和基因重組
B．經 B 途徑得到的大多數植株的隱性性狀容易顯現
C．D 途徑的理論依據是莖尖新生組織具有抗病毒的能力
D．上述應用得到的植株體細胞中的染色體數均相同
5．下圖 1 為某單克隆抗體的制備流程，圖 2 為圖 1 過程②的具體操作。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．圖 1 中制備細胞懸液時可采用機械方法或用胰蛋白酶處理
B．過程②中篩選出的雜交瘤細胞還需要抗原刺激才能產生特異性抗體
C．用多孔玻璃板培養和篩選雜交瘤細胞時，每個孔中盡量只接種 1 個細胞
D．出現陽性反應的原因是抗原與抗體發生了特異性的結合
6．隨著動物細胞工程和胚胎工程的迅猛發展，用引進的良種奶牛大量、快速繁殖滿足了我國對奶類的大量需
求。下圖表示畜牧業生產上培育某種優良種牛的兩種方法，相關分析錯誤的是（ ）
A．方法 I、Ⅱ獲得的胚胎通常需培養至囊胚階段再移植入 D 牛的子宮內
B．方法 I 中 B 牛的卵子需培育到 MⅡ期才具備與精子受精的能力
C．在卵細胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個極體可作為受精的標志
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D．通過方法 I、Ⅱ培育優良種牛 E 和 F 的本質都是有性生殖
7．CRlaa 和 mCRlaa 是兩種早期胚胎培養常用的培養液，這兩種培養液中除 NaCl 濃度不同外，其他成分及
濃度均相同。為了比較這兩種培養液對體外胚胎培養的差異情況，科研人員進行了相關實驗，所得實驗結果
如下表所示。下列敘述錯誤的是（ ）
組別 卵裂數 卵裂率 囊胚數 囊胚率
CRlaa 769 84.9% 189 20.6%
mCRlaa 750 83.7% 252 28.1%
注：卵裂率（%）=卵裂數/卵母細胞總數 x100%。囊胚率（%）=囊胚數/卵母細胞總數 x100%
A．CRlaa 和 mCRlaa 培養液中應含有動物血清 B．mCRlaa 培養液更有利于囊胚發育
C．卵裂期隨著細胞數量增加，胚胎的總體積不斷增加 D．囊胚期細胞逐漸分化，形成內細胞團和滋養層
8．抗體-藥物偶聯物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，實現了對腫瘤細
胞的選擇性殺傷。ADC 通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成，它的作用機制如下圖所示。下
列說法錯誤的是（ ）
A．理論上放射性同位素可以代替 ADC 偶聯的藥物
B．ADC 進入腫瘤細胞要消耗能量
C．ADC 中的抗體可導致腫瘤細胞凋亡
D．單克隆抗體制備過程中，B 細胞和骨髓瘤細胞
融合后可存在 5 種類型的細胞
9．2023 年 11 月，我國科研人員利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干細胞高貢獻的活體嵌合猴，該研究部分過
程如圖所示，由于供體猴胚胎干細胞在體外培養和妊娠期間高度嵌合于受體胚胎，使得后代活體嵌合猴的各
種組織中，高達 90%的細胞來源于供體胚胎干細胞。下列有關敘述正確的是（ ）
（注：GFP 指表達綠色熒光標記蛋白，可監測供體干細胞的存活情況以及其在嵌合體不同組織中的分化、分
布情況。）
A 代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要飼喂含促性腺激素的飼料進行同期發情處理．
B．圖示過程中涉及動物細胞培養、體外受精、早期胚胎培養和胚胎移植等工程技術
C．具有清晰 GFP 信號的囊胚才能被轉移至代孕雌猴體內，否則難以獲得嵌合猴
D．由圖可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴體細胞中，核遺傳物質的一半來源于代孕雌猴
10．將新鮮豬肝剪碎后加入食鹽研磨成勻漿，加入蒸餾水攪拌后再加入 SDS（SDS 能破壞膜結構，使蛋白質
變性，形成 SDS-蛋白復合物）。65℃水浴 10min，經攪拌、過濾獲取濾液。向濾液中加入氯化鉀溶液，攪拌
混勻后離心，得到 DNA 濾液。取 2 倍濾液體積的 95%乙醇沿著燒杯壁緩慢加入濾液中，靜置后得到白色絮
狀物。取一部分白色絮狀物與雙縮脲試劑反應，顏色變化不明顯。若上述過程未經氯化鉀溶液處理，得到的
白色絮狀物用雙縮脲試劑鑒定，出現紫色絡合物。下列說法錯誤的是（ ）
A．加入食鹽的目的是溶解 DNA 和過濾去除不溶的雜質
B．65℃水浴處理可使蛋白質變性，而 DNA 不降解
C．獲取白色絮狀物后加入二苯胺試劑，沸水浴加熱時即可觀察到鑒定結果
D．氯化鉀溶液處理可更好地去除 SDS-蛋白復合物
11．下圖為不同限制酶的識別序列及切割位點（↓表示切割位點），下列敘述錯誤的是（ ）
A．用 EcoR I 切割 DNA 分子中部獲得一個目的基因時，需斷開的磷酸二酯鍵有 2 個
B．用 Bgl II 切出的目的基因與 BamH I 切割的質粒重組后，則不能再被這兩種酶切開
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C．酶切時需要控制好溫度、酶濃度、PH 等因素
D．圖示 4 種限制酶均不能夠識別和切割 RNA 分子內的核苷酸序列
12．目的基因 A 有 100 對堿基，其中腺嘌呤占 30%，現利用目的基因 A 片段兩側的特異性序列設計引物 I、
引物Ⅱ，用 PCR 技術擴增該目的基因，結構如圖所示。PCR 擴增共循環 50 次。下列說法錯誤的是（ ）
A．PCR 儀實質上是一臺溫度自動調控儀器，循環 50 次理論上復制 50 代
B．含目的基因 A 的 DNA 片段經 PCR 循環 50 次，需要兩種引物共 250個
C．PCR 過程與體內 DNA 復制的方式相同，但是只需要一種酶的參與
D．若只考慮目的基因 A，經 PCR 循環 50 次需要鳥嘌呤(250-1)×40 個
13．實驗結果產物能成功檢出用陽性（+）表示，無法檢出用陰性（-）表示。假陽性是指檢查結果是陽性，
但實際是陰性；假陰性則與之相反。某流感患者進行甲型病毒檢測，下列可導致假陽性結果的是（ ）
A．抗原檢測：單克隆抗體保存溫度過高 B．核酸檢測：PCR 擴增時所用引物序列過短
C．核酸檢測：PCR 擴增時復性溫度設置過高 D．核酸檢測：病毒發生變異與 PCR 引物不匹配
14．下圖為利用奶牛乳腺生物反應器生產人血清白蛋白的過程，有關說法正確的是（ ）
A．步驟①將牛組織置于無菌水中并加入適量的胰蛋白酶處理可得到單細胞
B．步驟②將目的基因與乳腺細胞中基因的啟動子重組在一起
C．步驟④常用物理或化學方法激活重構胚，使其完成細胞分裂和發育進程
D．若要獲得同卵雙胎或多胎，分割原腸胚時需將內細胞團均等分割
15．蛛絲有超強韌性，其主要成分蛛絲蛋白是一種特殊的纖維蛋白，具有獨特的結構與性質。科學家將蛛絲
蛋白基因轉入羊的乳腺中以生產蛛絲蛋白，下圖是蛛絲蛋白基因的 DNA 片段。在基因工程中可通過 PCR 技
術和瓊脂糖凝膠電泳技術檢測目的基因是否導入受體細胞。下列說法錯誤的是（ ）
A．PCR 過程中為了減少非特異性擴增，可考慮調節引物長度適當提高退火溫度
B．用 PCR 技術擴增圖中的蛛絲蛋白基因，可選擇圖中的引物①和④
C．科學家將蛛絲蛋白基因與乳腺中特異表達的基因的啟動子等調控元件重組在一起
D．若電泳結果顯示羊體細胞中含有蛛絲蛋白基因，則用抗原-抗體結合法可在其乳汁檢測到蛛絲蛋白
16．毛狀根是植物感染發根農桿菌（其 T﹣DNA 含有生長素合成基因）后產生的病理結構，在生產某些次生
代謝物方面具有獨特的優勢。如圖為利用植物組織或細胞培養技術進行次生代謝物生產的流程，下列敘述錯
誤的是（ ）
A．誘導愈傷組織時，在酒精燈火焰旁將外植體的 1/3-1/2 插入培養基
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B．培養體系 1 制備過程中導入外源基因可采用 PEG 介導法或花粉管通道法
C．與培養體系 1 和 2 不同，培養體系 3 的獲得不需要添加外源植物激素
D．培養體系 1 和 3 的制備都利用了基因重組原理，且可產生相同代謝產物
17．纖維素酶是一種復合酶，包括 C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三
種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。科研人員從某菌株中獲得了 C1 酶基因，將其與 HT 質粒進行連接，構建基因
表達載體生產高效 C1酶。過程如圖所示，已知 C1 酶基因以 B 鏈為轉錄模板鏈，下列說法錯誤的是（ ）
A．在含有纖維素的固體培養基中加入剛果紅，能形成紅色
復合物，滴加適量 C1酶和 CX 酶后周圍會出現透明圈
B．酶切位點 1 加上 SmaI 的識別序列，酶切位點 2 加上
BamHⅠ的識別序列
C．啟動子是一段有特殊序列的 DNA 片段，是 RNA 聚合
酶識別和結合的位點
D．基因工程的載體除了質粒外，還可以是噬菌體或動植物
病毒
18.新冠病毒（SARS-CoV-2）S 蛋白的受體結合結構域（RBD）是引導病毒進入宿主細胞的關鍵結構。我國
科研人員將 GP67 基因（指導合成一段信號肽，引導新合成的蛋白分泌到細胞外）與 RBD 基因融合，構建融
合基因，大量生產 RBD 蛋白，用于制備疫苗，流程見下圖。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．過程①的理論基礎是 DNA 具有相同的結構
B．過程②必須將融合基因與載體連接形成基因表達載體才能注射到受精卵內
C．過程③需用 DNA 分子雜交技術檢測融合基因是否成功表達
D．過程④可直接從培養液獲得 RBD，無需裂解細胞
19．DNA 瓊脂糖凝膠電泳是一種分離、純化或分析 PCR 擴增后的待檢 DNA 片段的技術。下列關于核酸片段
的擴增及電泳鑒定的敘述，正確的是（ ）
A．DNA 分子被電泳緩沖液中的核酸染料染成藍色
B．若要分離較小 DNA 片段，可選擇低濃度凝膠
C．電泳后凝膠中的 DNA 能直接在紫外燈下檢測到
D．用生理鹽水來配制 0.8%~1.2%的瓊脂糖溶液
20. 最早的雙脫氧測序法是 PCR 反應體系中，分別再加入一種少量的雙脫氧腺苷三磷酸（ddATP、ddCTP、
ddGTP 或 ddTTP），子鏈延伸時，雙脫氧核苷三磷酸也遵循堿基互補配對原則，以加入 ddATP 的體系為例：
若配對的為 ddATP，延伸終止；若配對的為脫氧核苷三磷酸（dATP），繼續延伸；PCR 產物變性后電泳檢
測。通過該方法測序某疾病患者及對照個體的一段序列，結果如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A．上述 PCR 反應體系中需加入兩種引物
B．電泳時產物的片段越小，遷移速率越慢
C．5′－CTACCCGTGAT－3′為對照個體的一段序列
D．患者該段序列中某位點的堿基 C 突變為 G
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二．填空題
21．ε-聚賴氨酸（ε-PL）能抑制多種微生物的活性，且人體可將其分解為賴氨酸，是一種優良的天然食品防
腐劑。科研人員欲從土壤中分離能分泌 ε-PL 的微生物，做了如圖所示的實驗（1~V 表示過程，①~③表示菌
落），已知 ε-PL 可使亞甲基藍褪色，形成透明圈。
(1)圖中第 I 步最常用的接種方法是 。若經第Ⅱ步培養后發現菌落鋪滿了整個培養基、無法分辨出單菌
落，則應在第 I 步之前 ，再進行接種。
(2)第Ⅲ步接種，應挑選 （①/②/③）號菌落。一般來說，在相同培養條件下，用不同微生物表現出的穩
定的 來判斷微生物種類。
(3)本實驗中用到了 4 種培養基，其中乙、丁培養基的作用分別是 、 。
(4)為檢測上述收集到的 ε-PL 對不同種類微生物的抑制能力，研究人員將大腸桿菌等菌種分別涂布于某培養
基表面，再將浸有不同濃度 ε-PL 的濾紙圓片置于平板培養基表面，培養后測量清晰區（單位：mm）的寬
度，得到了表所示的結果。
ε-PL 濃度/mg·L-1微生物 20 30 40 50 60 70
大腸桿菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3
沙門氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0
釀酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 -
紅曲霉 + + + + 5.1 6.3
注：“+”表示無清晰區，“-”表示未進行實驗。
下列關于上述抑菌實驗的敘述，正確的是 。
A．結果顯示 ε-PL 對釀酒酵母的抑制作用最強B．ε-PL 對四種微生物的抑制效果與濃度正相關
C．用于實驗的培養基應該用液體的選擇培養基 D．接種需在超凈工作臺上酒精燈火焰周圍進行
22．不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞供體細胞的染色質，與未經射線照射的受體細胞融合，所得融合細
胞含受體全部遺傳物質及供體部分遺傳物質。研究人員嘗試運用不對稱體細胞雜交將紅豆杉（2n=24）與柴
胡（2n=12）進行了融合，培育能產生紫杉醇的柴胡，過程如圖所示。請回答下列問題：
（注：X 射線處理能隨機破壞染色體結構，使其發生斷裂、易位或染色體消除，使細胞不再持續分裂；碘乙
酰胺處理能使細胞質中的某些酶失活，抑制細胞分裂。）
(1)過程①中需將植物組織經 后接種于 MS 培養基上誘導 過程，產生愈傷組織。對原生質體進行的 A
處理為 。
(2)采用二乙酸熒光素（FDA）法可測定原生質體活力。已知 FDA 本身無熒光，當其進入細胞后可被酯酶分
解為無毒、具有熒光的物質，該熒光物質不能透過活細胞質膜，會留在細胞內發出熒光。據此分析應選
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擇 __ 的原生質體用于融合。融合前對原生質體在顯微鏡下用血細胞計數板計數，以確定原生質體密度。
(3)獲得的原生質體經誘導融合后，只有異源融合的原生質體可持續分裂形成再生細胞團，原因是 。
過程④再分化階段，芽的分化要求培養基中 （激素）比例較高。
(4)科研人員對獲得的部分植株細胞進行染色體觀察、計數和 DNA 分子標記鑒定，結果如表所示。后代植株
中 類型一定不是所需植株。科研人員推測雜種植株的染色體主要來源于親本柴胡的染色體，另一方親本
的遺傳物質可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細胞中，而是以 DNA 片段的方式整合進柴胡的基因
組，作出以上推測的依據有 。
后代植株類型 染色體數目、形態 DNA 分子標記鑒定
甲 12，形態與柴胡染色體相似 含雙親 DNA 片段
乙 12，形態與柴胡染色體相似 無紅豆杉 DNA 片段
丙 12，形態與柴胡染色體相似 含雙親 DNA 片段和新的 DNA片段
23．中國科學院的研究團隊利用細胞工程和基因編輯技術，成功培育出世界上首例只有雙母親來源的孤雌小
鼠和雙父親來源的孤雄小鼠，實現了哺乳動物的同性繁殖，實驗流程如圖所示。請回答下列問題：
(1)用 對雌性小鼠進行超數排卵處理可得到大量卵母細胞，受精時的卵母細胞所處的時期
為 。
(2)體外培養動物細胞時，除需要滿足無菌、無毒的環境及適宜的營養物質、溫度等條件外，還需要滿足的氣
體條件是 。
(3)為了獲得更多甲的后代，在得到的重構胚發育到 或囊胚期時，對其進行分割；在分割囊胚階段的
胚胎時，應注意 ，否則會影響胚胎的恢復和進一步發育。
(4)卵細胞、精子分別轉化為 phESC、ahESC，它們類似于胚胎干細胞，胚胎干細胞具有 的潛能。不
考慮致死情況，得到的孤雄小鼠性染色體組成為 。
(5)據圖分析，只依賴雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，請寫出一個理由： 。
24. 凝乳酶是食品生產中常用的凝結劑，科研人員從動物體內獲得了凝乳酶 mRNA，擬利用大腸桿菌通過基
因工程生產凝乳酶。據下圖回答下列問題：
（1）利用凝乳酶 mRNA，在逆轉錄酶的作用下，可以得到凝乳酶的 cDNA，進一步通過 PCR 擴增時需要 2
種引物，引物的作用是_____。
{#{QQABAQEl5gAQghRACB6KA0XSCEgQsJASJSoGhVCYKAwCgBFABCA=}#}
（2）圖 1 和圖 2是選用的質粒及其幾種相關限制酶的識別位點，在構建基因表達載體時，最好選用的限制酶
有_________，這樣選擇的優點是_____（至少答出兩點）。為在凝乳酶基因兩側加上相應的酶切位點，設計引
物時需在引物前添加相應酶切位點，PCR過程中至少復制_____次可以得到含所需酶切位點的凝乳酶基因。
（3）將構建的重組質粒導入大腸桿菌，需要用鈣離子處理，使大腸桿菌處于一種_____。
（4）圖 1 中青霉素抗性基因的作用_____。
25．將天然 Ti 質粒改造成含有 Vir 基因的輔助質粒（輔助 T-DNA 轉移）和不含有 Vir 基因、含有 T-DNA 的
穿梭質粒，共同轉入農桿菌，可提高轉化效率。細菌和棉花對密碼子偏好不同，為提高翻譯效率，增強棉花
抗病蟲害能力，進行如下操作。回答下列問題。
注：F1-F3，R1-R3 表示引物；T-DNA-LB 表示左邊界；T-DNA-RB 表示右邊界；Ori 表示復制原點；KanR 表
示卡那霉素抗性基因；HygBR 表示潮霉素 B 抗性基因。
(1)從蘇云金桿菌提取 DNA 時，需加入蛋白酶，其作用是 。提取過程中加入體積分數為 95%的預冷酒
精，其目的是 。
(2)本操作中獲取目的基因的方法是 和 。
(3)穿梭質粒中 p35s 為啟動子，其作用是 ，驅動目的基因轉錄；插入兩個 p35s 啟動子，其目的可能
是 。
(4)根據圖中穿梭質粒上的 KanR和HygBR 兩個標記基因的位置，用 基因對應的抗生素初步篩選轉化的棉
花愈傷組織。
(5)為檢測棉花植株是否導入目的基因，提取棉花植株染色體 DNA 作模板，進行 PCR，應選用的引物是
和 。
(6)本研究采用的部分生物技術屬于蛋白質工程，理由是______。
A．通過含有雙質粒的農桿菌轉化棉花細胞
B．將蘇云金桿菌 Bt 基因導入棉花細胞中表達
C．將 1-1362 基因序列改變為棉花細胞偏好密碼子的基因序列
D．用 1-1362 合成基因序列和 1363-1848 天然基因序列獲得改造的抗蟲蛋白
{#{QQABAQEl5gAQghRACB6KA0XSCEgQsJASJSoGhVCYKAwCgBFABCA=}#}高二生物半期答案
單選題（每題2分，共40分）
DCCBB DCCCC ABBCB BBCCC
21．（10分，除標注外每空2分）
(1) 稀釋涂布平板法（1分） 稀釋（1分）
(2) ① （1分） 菌落特征（菌落的形狀、大小和顏色等）（1分）
(3) 選擇產ε-PL的菌種 增加目的菌數量和生產ε-PL
(4)ABD
22．（12分，除標注外每空2分）
(1) 消毒（1分） 脫分化（1分） X射線
(2)有熒光
(3)雜種細胞由于融合后在細胞核和細胞質的功能上實現互補，使細胞恢復正常分裂 細胞分裂素（1分）
(4) 乙（1分） 甲、丙類型植株細胞的染色體與柴胡細胞中的染色體數目、形態相似，且含有雙親的DNA片段
23．（12分，除標注外每空2分）
(1) 促性腺激素（1分） MⅡ期（1分）
(2)95%空氣和5%CO2的混合氣體
(3) 桑葚胚（1分） 將內細胞團均等分割（1分）
(4) 分化為成年動物體內的任何一種類型的細胞，并進一步形成機體的所有組織和器官甚至個體 XX、XY或YY
(5)需要將ahESC和另一個精子一起注入一個去核卵細胞中或重構胚必須移植到雌性小鼠體內才能發育為個體
24（12分，除標注外每空2分）
（1）使DNA聚合酶從引物3’端開始連接脫氧核苷酸 （與模板單鏈結合延伸子鏈）
（2） EcoRⅠ、BglⅡ或EcoRⅠ、BamHⅠ 避免標記基因被破壞、避免質粒自身環化、避免目的基因反向連接（確保目的基因與質粒正向連接） 3 （1分）
（3）能吸收周圍DNA分子的生理狀態
（4）便于重組DNA分子的篩選（1分）
25．（14分，除標注外每空2分）
(1) 除去蛋白質雜質 溶解蛋白質等物質，析出不溶于酒精的DNA
(2) PCR技術擴增 （1分） 人工合成（1分）
(3) RNA聚合酶識別并結合的部位（1分） 增強目的基因的表達（1分）
(4)HygBR
(5) F3 （1分） R2（1分）
(6)D成都外國語學校高 2026 屆高二下半期考試
生物試題
一、單選題（每題 2分，共 40分）
1．GA3 是一種由 C、H、O 三種元素構成的與赤霉素作用類似的植物生長調節劑，能促進莖伸長和種子萌
發。GA3 的廣泛施用會導致其在土壤中殘留，研究小組從長期施用 GA3 農田的土壤中篩選出了能降解 GA3
的菌株并調查了土壤中能降解 GA3 的菌的數量，如圖所示。下列相關實驗內容錯誤的是（ ）
A．過程②將稀釋的含有降解 GA3 的菌株接種到甲瓶培養液中來富集培養 GA3 降解菌
B．乙培養基中應以 GA3 為唯一的碳源，可能還有其他微生物的存在
C．圖中 3 號試管中樣品液的稀釋倍數為 104 倍
D．5 號試管的結果表明每克土壤中的活菌數為 1.7×108 個
2．產黃青霉菌生產青霉素的發酵流程如下圖所示，其中“補料”是指補充培養基，其成分有花生餅粉、玉米
漿、葡萄糖、磷酸二氫鈉等。下列關于該發酵過程的敘述，錯誤的是（ ）
A．對產黃青霉菌分離純化時采用的接種方法是稀釋涂布平板法
B．“種母培養”時采用液體培養基有利于增加產黃青霉菌的數量
C．產黃青霉菌為異養厭氧型真菌，添加的磷酸二氫鈉具有多種作用
D．向主發酵罐添加 pH 調節液是因為環境條件會影響青霉素的形成
3．紫杉醇是存在于紅豆杉屬植物體內的二萜類生物堿類化合物，是一種有效的抗癌藥物，傳統生產方法是從
紅豆杉樹皮和樹葉中提取，下圖為利用植物細胞工程生產紫杉醇的流程圖，相關敘述正確的是（ ）
A．紫杉醇是植物代謝活動產生的，屬于初生代謝物FAFKA=}#
B．①②過程通常采用液體培養基，需要適當強度的光照
C．可利用傳代培養的動物癌細胞來檢測紫杉醇的效果
D．植物細胞培養的原理是植物細胞具有全能性
4．植物細胞工程在植物繁殖新途徑等方面都有廣泛的應用，并取得了顯著的社會效益和經濟效益。下圖表示
植物細胞工程應用的相關操作，相關敘述正確的是（ ）
A．A 途徑中發生的可遺傳變異有基因突變和基因重組
B．經 B 途徑得到的大多數植株的隱性性狀容易顯現
C．D 途徑的理論依據是莖尖新生組織具有抗病毒的能力
D．上述應用得到的植株體細胞中的染色體數均相同
5．下圖 1 為某單克隆抗體的制備流程，圖 2 為圖 1 過程②的具體操作。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．圖 1 中制備細胞懸液時可采用機械方法或用胰蛋白酶處理
B．過程②中篩選出的雜交瘤細胞還需要抗原刺激才能產生特異性抗體
C．用多孔玻璃板培養和篩選雜交瘤細胞時，每個孔中盡量只接種 1 個細胞
D．出現陽性反應的原因是抗原與抗體發生了特異性的結合
6．隨著動物細胞工程和胚胎工程的迅猛發展，用引進的良種奶牛大量、快速繁殖滿足了我國對奶類的大量需
求。下圖表示畜牧業生產上培育某種優良種牛的兩種方法，相關分析錯誤的是（ ）
A．方法 I、Ⅱ獲得的胚胎通常需培養至囊胚階段再移植入 D 牛的子宮內
B．方法 I 中 B 牛的卵子需培育到 MⅡ期才具備與精子受精的能力
C．在卵細胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個極體可作為受精的標志
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D．通過方法 I、Ⅱ培育優良種牛 E 和 F 的本質都是有性生殖
7．CRlaa 和 mCRlaa 是兩種早期胚胎培養常用的培養液，這兩種培養液中除 NaCl 濃度不同外，其他成分及
濃度均相同。為了比較這兩種培養液對體外胚胎培養的差異情況，科研人員進行了相關實驗，所得實驗結果
如下表所示。下列敘述錯誤的是（ ）
組別 卵裂數 卵裂率 囊胚數 囊胚率
CRlaa 769 84.9% 189 20.6%
mCRlaa 750 83.7% 252 28.1%
注：卵裂率（%）=卵裂數/卵母細胞總數 x100%。囊胚率（%）=囊胚數/卵母細胞總數 x100%
A．CRlaa 和 mCRlaa 培養液中應含有動物血清 B．mCRlaa 培養液更有利于囊胚發育
C．卵裂期隨著細胞數量增加，胚胎的總體積不斷增加 D．囊胚期細胞逐漸分化，形成內細胞團和滋養層
8．抗體-藥物偶聯物（ADC）通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合，實現了對腫瘤細
胞的選擇性殺傷。ADC 通常由抗體、接頭和藥物（如細胞毒素）三部分組成，它的作用機制如下圖所示。下
列說法錯誤的是（ ）
A．理論上放射性同位素可以代替 ADC 偶聯的藥物
B．ADC 進入腫瘤細胞要消耗能量
C．ADC 中的抗體可導致腫瘤細胞凋亡
D．單克隆抗體制備過程中，B 細胞和骨髓瘤細胞
融合后可存在 5 種類型的細胞
9．2023 年 11 月，我國科研人員利用食蟹猴培育出世界首只胚胎干細胞高貢獻的活體嵌合猴，該研究部分過
程如圖所示，由于供體猴胚胎干細胞在體外培養和妊娠期間高度嵌合于受體胚胎，使得后代活體嵌合猴的各
種組織中，高達 90%的細胞來源于供體胚胎干細胞。下列有關敘述正確的是（ ）
（注：GFP 指表達綠色熒光標記蛋白，可監測供體干細胞的存活情況以及其在嵌合體不同組織中的分化、分
布情況。）
A 代孕雌猴在移植嵌合囊胚前，需要飼喂含促性腺激素的飼料進行同期發情處理．
B．圖示過程中涉及動物細胞培養、體外受精、早期胚胎培養和胚胎移植等工程技術
C．具有清晰 GFP 信號的囊胚才能被轉移至代孕雌猴體內，否則難以獲得嵌合猴
D．由圖可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴體細胞中，核遺傳物質的一半來源于代孕雌猴
10．將新鮮豬肝剪碎后加入食鹽研磨成勻漿，加入蒸餾水攪拌后再加入 SDS（SDS 能破壞膜結構，使蛋白質
變性，形成 SDS-蛋白復合物）。65℃水浴 10min，經攪拌、過濾獲取濾液。向濾液中加入氯化鉀溶液，攪拌
混勻后離心，得到 DNA 濾液。取 2 倍濾液體積的 95%乙醇沿著燒杯壁緩慢加入濾液中，靜置后得到白色絮
狀物。取一部分白色絮狀物與雙縮脲試劑反應，顏色變化不明顯。若上述過程未經氯化鉀溶液處理，得到的
白色絮狀物用雙縮脲試劑鑒定，出現紫色絡合物。下列說法錯誤的是（ ）
A．加入食鹽的目的是溶解 DNA 和過濾去除不溶的雜質
B．65℃水浴處理可使蛋白質變性，而 DNA 不降解
C．獲取白色絮狀物后加入二苯胺試劑，沸水浴加熱時即可觀察到鑒定結果
D．氯化鉀溶液處理可更好地去除 SDS-蛋白復合物
11．下圖為不同限制酶的識別序列及切割位點（↓表示切割位點），下列敘述錯誤的是（ ）
A．用 EcoR I 切割 DNA 分子中部獲得一個目的基因時，需斷開的磷酸二酯鍵有 2 個
B．用 Bgl II 切出的目的基因與 BamH I 切割的質粒重組后，則不能再被這兩種酶切開
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C．酶切時需要控制好溫度、酶濃度、PH 等因素
D．圖示 4 種限制酶均不能夠識別和切割 RNA 分子內的核苷酸序列
12．目的基因 A 有 100 對堿基，其中腺嘌呤占 30%，現利用目的基因 A 片段兩側的特異性序列設計引物 I、
引物Ⅱ，用 PCR 技術擴增該目的基因，結構如圖所示。PCR 擴增共循環 50 次。下列說法錯誤的是（ ）
A．PCR 儀實質上是一臺溫度自動調控儀器，循環 50 次理論上復制 50 代
B．含目的基因 A 的 DNA 片段經 PCR 循環 50 次，需要兩種引物共 250 個
C．PCR 過程與體內 DNA 復制的方式相同，但是只需要一種酶的參與
D．若只考慮目的基因 A，經 PCR 循環 50 次需要鳥嘌呤(250-1)×40 個
13．實驗結果產物能成功檢出用陽性（+）表示，無法檢出用陰性（-）表示。假陽性是指檢查結果是陽性，
但實際是陰性；假陰性則與之相反。某流感患者進行甲型病毒檢測，下列可導致假陽性結果的是（ ）
A．抗原檢測：單克隆抗體保存溫度過高 B．核酸檢測：PCR 擴增時所用引物序列過短
C．核酸檢測：PCR 擴增時復性溫度設置過高 D．核酸檢測：病毒發生變異與 PCR 引物不匹配
14．下圖為利用奶牛乳腺生物反應器生產人血清白蛋白的過程，有關說法正確的是（ ）
A．步驟①將牛組織置于無菌水中并加入適量的胰蛋白酶處理可得到單細胞
B．步驟②將目的基因與乳腺細胞中基因的啟動子重組在一起
C．步驟④常用物理或化學方法激活重構胚，使其完成細胞分裂和發育進程
D．若要獲得同卵雙胎或多胎，分割原腸胚時需將內細胞團均等分割
15．蛛絲有超強韌性，其主要成分蛛絲蛋白是一種特殊的纖維蛋白，具有獨特的結構與性質。科學家將蛛絲
蛋白基因轉入羊的乳腺中以生產蛛絲蛋白，下圖是蛛絲蛋白基因的 DNA 片段。在基因工程中可通過 PCR 技
術和瓊脂糖凝膠電泳技術檢測目的基因是否導入受體細胞。下列說法錯誤的是（ ）
A．PCR 過程中為了減少非特異性擴增，可考慮調節引物長度適當提高退火溫度
B．用 PCR 技術擴增圖中的蛛絲蛋白基因，可選擇圖中的引物①和④
C．科學家將蛛絲蛋白基因與乳腺中特異表達的基因的啟動子等調控元件重組在一起
D．若電泳結果顯示羊體細胞中含有蛛絲蛋白基因，則用抗原-抗體結合法可在其乳汁檢測到蛛絲蛋白
16．毛狀根是植物感染發根農桿菌（其 T﹣DNA 含有生長素合成基因）后產生的病理結構，在生產某些次生
代謝物方面具有獨特的優勢。如圖為利用植物組織或細胞培養技術進行次生代謝物生產的流程，下列敘述錯
誤的是（ ）
A．誘導愈傷組織時，在酒精燈火焰旁將外植體的 1/3-1/2 插入培養基
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B．培養體系 1 制備過程中導入外源基因可采用 PEG 介導法或花粉管通道法
C．與培養體系 1 和 2 不同，培養體系 3 的獲得不需要添加外源植物激素
D．培養體系 1 和 3 的制備都利用了基因重組原理，且可產生相同代謝產物
17．纖維素酶是一種復合酶，包括 C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶能使纖維素分解成纖維二糖，第三
種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。科研人員從某菌株中獲得了 C1 酶基因，將其與 HT 質粒進行連接，構建基因
表達載體生產高效 C1 酶。過程如圖所示，已知 C1 酶基因以 B 鏈為轉錄模板鏈，下列說法錯誤的是（ ）
A．在含有纖維素的固體培養基中加入剛果紅，能形成紅色
復合物，滴加適量 C1 酶和 CX 酶后周圍會出現透明圈
B．酶切位點 1 加上 SmaI 的識別序列，酶切位點 2 加上
BamHⅠ的識別序列
C．啟動子是一段有特殊序列的 DNA 片段，是 RNA 聚合
酶識別和結合的位點
D．基因工程的載體除了質粒外，還可以是噬菌體或動植物
病毒
18.新冠病毒（SARS-CoV-2）S 蛋白的受體結合結構域（RBD）是引導病毒進入宿主細胞的關鍵結構。我國
科研人員將 GP67 基因（指導合成一段信號肽，引導新合成的蛋白分泌到細胞外）與 RBD 基因融合，構建融
合基因，大量生產 RBD 蛋白，用于制備疫苗，流程見下圖。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．過程①的理論基礎是 DNA 具有相同的結構
B．過程②必須將融合基因與載體連接形成基因表達載體才能注射到受精卵內
C．過程③需用 DNA 分子雜交技術檢測融合基因是否成功表達
D．過程④可直接從培養液獲得 RBD，無需裂解細胞
19．DNA 瓊脂糖凝膠電泳是一種分離、純化或分析 PCR 擴增后的待檢 DNA 片段的技術。下列關于核酸片段
的擴增及電泳鑒定的敘述，正確的是（ ）
A．DNA 分子被電泳緩沖液中的核酸染料染成藍色
B．若要分離較小 DNA 片段，可選擇低濃度凝膠
C．電泳后凝膠中的 DNA 能直接在紫外燈下檢測到
D．用生理鹽水來配制 0.8%~1.2%的瓊脂糖溶液
20. 最早的雙脫氧測序法是 PCR 反應體系中，分別再加入一種少量的雙脫氧腺苷三磷酸（ddATP、ddCTP、
ddGTP 或 ddTTP），子鏈延伸時，雙脫氧核苷三磷酸也遵循堿基互補配對原則，以加入 ddATP 的體系為例：
若配對的為 ddATP，延伸終止；若配對的為脫氧核苷三磷酸（dATP），繼續延伸；PCR 產物變性后電泳檢
測。通過該方法測序某疾病患者及對照個體的一段序列，結果如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A．上述 PCR 反應體系中需加入兩種引物
B．電泳時產物的片段越小，遷移速率越慢
C．5′－CTACCCGTGAT－3′為對照個體的一段序列
D．患者該段序列中某位點的堿基 C 突變為 G
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二．填空題
21．ε-聚賴氨酸（ε-PL）能抑制多種微生物的活性，且人體可將其分解為賴氨酸，是一種優良的天然食品防
腐劑。科研人員欲從土壤中分離能分泌 ε-PL 的微生物，做了如圖所示的實驗（1~V 表示過程，①~③表示菌
落），已知 ε-PL 可使亞甲基藍褪色，形成透明圈。
(1)圖中第 I 步最常用的接種方法是 。若經第Ⅱ步培養后發現菌落鋪滿了整個培養基、無法分辨出單菌
落，則應在第 I 步之前 ，再進行接種。
(2)第Ⅲ步接種，應挑選 （①/②/③）號菌落。一般來說，在相同培養條件下，用不同微生物表現出的穩
定的 來判斷微生物種類。
(3)本實驗中用到了 4 種培養基，其中乙、丁培養基的作用分別是 、 。
(4)為檢測上述收集到的 ε-PL 對不同種類微生物的抑制能力，研究人員將大腸桿菌等菌種分別涂布于某培養
基表面，再將浸有不同濃度 ε-PL 的濾紙圓片置于平板培養基表面，培養后測量清晰區（單位：mm）的寬
度，得到了表所示的結果。
ε-PL 濃度/mg·L-1 微生物 20 30 40 50 60 70
大腸桿菌 + + 7.2 10.8 11.6 13.3
沙門氏菌 + + 6.5 9.2 10.9 13.0
釀酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 -
紅曲霉 + + + + 5.1 6.3
注：“+”表示無清晰區，“-”表示未進行實驗。
下列關于上述抑菌實驗的敘述，正確的是 。
A．結果顯示 ε-PL 對釀酒酵母的抑制作用最強B．ε-PL 對四種微生物的抑制效果與濃度正相關
C．用于實驗的培養基應該用液體的選擇培養基 D．接種需在超凈工作臺上酒精燈火焰周圍進行
22．不對稱體細胞雜交是指利用射線破壞供體細胞的染色質，與未經射線照射的受體細胞融合，所得融合細
胞含受體全部遺傳物質及供體部分遺傳物質。研究人員嘗試運用不對稱體細胞雜交將紅豆杉（2n=24）與柴
胡（2n=12）進行了融合，培育能產生紫杉醇的柴胡，過程如圖所示。請回答下列問題：
（注：X 射線處理能隨機破壞染色體結構，使其發生斷裂、易位或染色體消除，使細胞不再持續分裂；碘乙
酰胺處理能使細胞質中的某些酶失活，抑制細胞分裂。）
(1)過程①中需將植物組織經 后接種于 MS 培養基上誘導 過程，產生愈傷組織。對原生質體進行的 A
處理為 。
(2)采用二乙酸熒光素（FDA）法可測定原生質體活力。已知 FDA 本身無熒光，當其進入細胞后可被酯酶分
解為無毒、具有熒光的物質，該熒光物質不能透過活細胞質膜，會留在細胞內發出熒光。據此分析應選
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擇 __ 的原生質體用于融合。融合前對原生質體在顯微鏡下用血細胞計數板計數，以確定原生質體密度。
(3)獲得的原生質體經誘導融合后，只有異源融合的原生質體可持續分裂形成再生細胞團，原因是 。
過程④再分化階段，芽的分化要求培養基中 （激素）比例較高。
(4)科研人員對獲得的部分植株細胞進行染色體觀察、計數和 DNA 分子標記鑒定，結果如表所示。后代植株
中 類型一定不是所需植株。科研人員推測雜種植株的染色體主要來源于親本柴胡的染色體，另一方親本
的遺傳物質可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細胞中，而是以 DNA 片段的方式整合進柴胡的基因
組，作出以上推測的依據有 。
后代植株類型 染色體數目、形態 DNA 分子標記鑒定
甲 12，形態與柴胡染色體相似 含雙親 DNA 片段
乙 12，形態與柴胡染色體相似 無紅豆杉 DNA 片段
丙 12，形態與柴胡染色體相似 含雙親 DNA 片段和新的 DNA 片段
23．中國科學院的研究團隊利用細胞工程和基因編輯技術，成功培育出世界上首例只有雙母親來源的孤雌小
鼠和雙父親來源的孤雄小鼠，實現了哺乳動物的同性繁殖，實驗流程如圖所示。請回答下列問題：
(1)用 對雌性小鼠進行超數排卵處理可得到大量卵母細胞，受精時的卵母細胞所處的時期
為 。
(2)體外培養動物細胞時，除需要滿足無菌、無毒的環境及適宜的營養物質、溫度等條件外，還需要滿足的氣
體條件是 。
(3)為了獲得更多甲的后代，在得到的重構胚發育到 或囊胚期時，對其進行分割；在分割囊胚階段的
胚胎時，應注意 ，否則會影響胚胎的恢復和進一步發育。
(4)卵細胞、精子分別轉化為 phESC、ahESC，它們類似于胚胎干細胞，胚胎干細胞具有 的潛能。不
考慮致死情況，得到的孤雄小鼠性染色體組成為 。
(5)據圖分析，只依賴雄性小鼠不能得到孤雄小鼠，請寫出一個理由： 。
24. 凝乳酶是食品生產中常用的凝結劑，科研人員從動物體內獲得了凝乳酶 mRNA，擬利用大腸桿菌通過基
因工程生產凝乳酶。據下圖回答下列問題：
（1）利用凝乳酶 mRNA，在逆轉錄酶的作用下，可以得到凝乳酶的 cDNA，進一步通過 PCR 擴增時需要 2
種引物，引物的作用是_____。
{#{QQABDQ6t4giQkhTACR5rEwG0CAuQkIGgLYoMgVAcuA5igBFAFKA=}#}
（2）圖 1 和圖 2 是選用的質粒及其幾種相關限制酶的識別位點，在構建基因表達載體時，最好選用的限制酶
有_________，這樣選擇的優點是_____（至少答出兩點）。為在凝乳酶基因兩側加上相應的酶切位點，設計引
物時需在引物前添加相應酶切位點，PCR 過程中至少復制_____次可以得到含所需酶切位點的凝乳酶基因。
（3）將構建的重組質粒導入大腸桿菌，需要用鈣離子處理，使大腸桿菌處于一種_____。
（4）圖 1 中青霉素抗性基因的作用_____。
25．將天然 Ti 質粒改造成含有 Vir 基因的輔助質粒（輔助 T-DNA 轉移）和不含有 Vir 基因、含有 T-DNA 的
穿梭質粒，共同轉入農桿菌，可提高轉化效率。細菌和棉花對密碼子偏好不同，為提高翻譯效率，增強棉花
抗病蟲害能力，進行如下操作。回答下列問題。
注：F1-F3，R1-R3 表示引物；T-DNA-LB 表示左邊界；T-DNA-RB 表示右邊界；Ori 表示復制原點；KanR 表
示卡那霉素抗性基因；HygBR 表示潮霉素 B 抗性基因。
(1)從蘇云金桿菌提取 DNA 時，需加入蛋白酶，其作用是 。提取過程中加入體積分數為 95%的預冷酒
精，其目的是 。
(2)本操作中獲取目的基因的方法是 和 。
(3)穿梭質粒中 p35s 為啟動子，其作用是 ，驅動目的基因轉錄；插入兩個 p35s 啟動子，其目的可能
是 。
(4)根據圖中穿梭質粒上的 KanR 和HygBR 兩個標記基因的位置，用 基因對應的抗生素初步篩選轉化的棉
花愈傷組織。
(5)為檢測棉花植株是否導入目的基因，提取棉花植株染色體 DNA 作模板，進行 PCR，應選用的引物是
和 。
(6)本研究采用的部分生物技術屬于蛋白質工程，理由是______。
A．通過含有雙質粒的農桿菌轉化棉花細胞
B．將蘇云金桿菌 Bt 基因導入棉花細胞中表達
C．將 1-1362 基因序列改變為棉花細胞偏好密碼子的基因序列
D．用 1-1362 合成基因序列和 1363-1848 天然基因序列獲得改造的抗蟲蛋白

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