資源簡介

押題9 發(fā)酵工程、植物細胞工程和動物細胞工程
猜押 6大題型
題型01動植物細胞培養(yǎng)的理論基礎
題型02植物組織培養(yǎng)和植物細胞培養(yǎng)的區(qū)別
題型03動物細胞融合和單克隆抗體技術
題型04體外受精及胚胎工程
題型05細胞工程涉及的多選題型
題型06植物細胞工程和光合作用關聯(lián)大題
猜押考點 3年真題 考情分析 押題依據(jù)
發(fā)酵工程、植物細胞工程和動物細胞工程 2021年山東卷第12、14題 2022年山東卷第12、14、20題 2023年山東卷第12、15題 2024年山東卷第14、15題 2025年新高考生物新結構體系下，細胞工程題型更注重考察學生的審題能力和知識點掌握的全面和準確性；以基礎知識為引導，深入考察思路。 題目更加注重綜合性、應用性、創(chuàng)新性，對知識點的背景和應用有更多的掌握。 細胞工程題型要求考生在細讀題干的基礎上，依據(jù)題目提供的信息，聯(lián)系所學的知識和方法，實現(xiàn)信息的遷移，達到靈活解題的目的；遇到新定義問題，應耐心讀題，分析新定義的特點，弄清新定義的性質，按新定義的要求，“照章辦事”，逐條分析、驗證、運算，使問題得以解決. 難度適中，可以預測2025年選擇題拓展題目命題方向將會以選擇題型展開命題．
題型1 動植物細胞培養(yǎng)的理論基礎
1．一種類型的分化細胞轉變成另一種類型的分化細胞的現(xiàn)象稱為轉分化，通常是將已分化細胞先誘導成iPS細胞，再誘導形成另一種類型的分化細胞。科學家分別通過2組不同的轉錄因子（調(diào)節(jié)基因轉錄的蛋白質分子），使小鼠成纖維細胞經(jīng)基因組重編程表達直接轉分化為心肌細胞與神經(jīng)細胞。下列說法錯誤的是（ ）
A．經(jīng)iPS細胞發(fā)生轉分化的過程中，細胞的全能性會發(fā)生變化
B．轉錄因子的作用是與基因組中特定部位的調(diào)控序列結合，促進相關基因的表達
C．若2組轉錄因子同時作用于小鼠成纖維細胞，可能無法獲得心肌細胞或神經(jīng)細胞
D．與經(jīng)iPS細胞發(fā)生轉分化過程相比，成纖維細胞轉分化過程可能會更加便捷
【答案】B
【分析】1、細胞分化是指在個體發(fā)育中，由一個或一種細胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)，結構和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程。細胞分化的實質是基因的選擇性表達。
2、細胞全能性是指已經(jīng)分化的細胞仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。
【詳解】A、一般細胞的分化程度越高，全能性越低，所以經(jīng)iPS細胞發(fā)生轉分化的過程中，細胞的全能性會發(fā)生變化，A正確；
B、依據(jù)題干信息，轉錄因子是調(diào)節(jié)基因轉錄的蛋白質分子，所以轉錄因子的作用是與基因組中特定部位的調(diào)控序列結合，調(diào)節(jié)相關基因的轉錄，B錯誤；
C、依據(jù)題干信息，通過2組不同的轉錄因子，可使小鼠成纖維細胞經(jīng)基因組重編程表達直接轉分化為心肌細胞與神經(jīng)細胞，所以，若2組轉錄因子同時作用于小鼠成纖維細胞，可能無法獲得心肌細胞或神經(jīng)細胞，C正確；
D、經(jīng)iPS細胞的轉分化過程需要經(jīng)過兩個步驟，先轉分化為iPS細胞，在轉分化為其他細胞，而成纖維細胞可以直接轉化為其他細胞，所以與經(jīng)iPS細胞發(fā)生轉分化過程相比較，成纖維細胞轉分化過程可能會更加便捷，D正確。
故選B。
2．三維細胞培養(yǎng)技術（3D細胞培養(yǎng)）是通過人工模擬細胞間質微環(huán)境，允許動物細胞在三維空間中生長和相互作用的技術。與傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)相比，3D細胞培養(yǎng)更接近體內(nèi)細胞的實際生長環(huán)境。下列說法正確的是（ ）
A．傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)時，細胞并不都需要貼附于某些基質表面才能生長增殖
B．用胰蛋白酶處理傳統(tǒng)培養(yǎng)的貼壁細胞，斷裂其胞間連絲使之游離便于傳代
C．3D細胞培養(yǎng)前需要對動物組織進行滅菌處理，培養(yǎng)時需定期更換培養(yǎng)液
D．利用3D細胞培養(yǎng)技術研究干細胞分化過程時，通常需要進行分瓶處理
【答案】A
【分析】動物細胞培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物。（2）營養(yǎng)物質：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質。（3）溫度和pH：哺乳動物多以36.5℃為宜，最適pH為7.2-7.4。（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH。）
【詳解】A、傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)時，體外培養(yǎng)的動物細胞可分為兩大類：一類細胞能夠 懸浮在培養(yǎng)液中生長增殖，另一類細胞需要貼附于某些基質表面生 長增殖，大多數(shù)細胞需要貼附于某些基質表面才能 生長增殖，A正確；
B、胞間連絲是植物細胞間的結構，動物細胞不存在胞間連絲，B錯誤；
C、細胞培養(yǎng)過程需要營造無菌無毒的環(huán)境，包括定期更換培養(yǎng)液等，但不能對動物組織進行滅菌處理，C錯誤；
D、利用 3D 細胞培養(yǎng)技術研究細胞分化時，發(fā)生細胞結構和功能的穩(wěn)定改變，但是細胞數(shù)量不再增加，因此不需要分瓶處理，D錯誤。
故選A。
3．人參多糖和皂苷是人參的次生代謝物，具有增強人體免疫力、抗腫瘤、保肝和降血糖等功效。研究人員利用植物細胞培養(yǎng)技術實現(xiàn)了人參多糖和皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)。下列說法錯誤的是（ ）
A．人參多糖和皂苷在人參細胞內(nèi)的含量很低，但不是其生長所必需的
B．外植體需經(jīng)酶解法處理，用培養(yǎng)液將細胞制成細胞懸液后再接種到生物反應器內(nèi)
C．該技術利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件，提高了單個細胞中人參多糖和皂苷的含量
D．與大田種植相比，該技術具有生產(chǎn)周期短、不占用耕地及受外界環(huán)境影響小等優(yōu)點
【答案】C
【分析】1、植物代謝會產(chǎn)生一些一般認為不是植物基本的生命活動所必需的產(chǎn)物，稱為次生代謝物。次生代謝物是一類小分子有機物，在細胞中的含量很低，常通過細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)來增加其含量。
2、植物組織培養(yǎng)的過程：離體的植物器官、組織或細胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織，然后再分化生成根、芽，最終形成植物體。植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是植物細胞的全能性。
【詳解】A、人參多糖和皂苷是人參的次生代謝物，不是其生長所必需的，在人參細胞內(nèi)的含量很低，A正確；
B、外植體需經(jīng)酶解法處理，用培養(yǎng)液將細胞制成細胞懸液（有利于細胞產(chǎn)物的釋放）后再接種到生物反應器內(nèi)，B正確；
C、利用植物細胞培養(yǎng)技術可以實現(xiàn)細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，但不能提高單個細胞中次生代謝物的含量，C錯誤；
D、與大田種植相比，植物細胞培養(yǎng)技術具有生產(chǎn)周期短、不占用耕地及受外界環(huán)境影響小等優(yōu)點，D正確。
故選C。
4．研究人員將犬瘟熱病毒免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，制備并篩選出能分泌抗犬瘟熱病毒抗體的雜交瘤細胞，但該種細胞在克隆化培養(yǎng)過程中來自B淋巴細胞的染色體往往出現(xiàn)隨機丟失的現(xiàn)象。不考慮基因互作和其他變異，下列說法錯誤的是（ ）
A．為獲得更多免疫的B淋巴細胞，需對小鼠多次注射犬瘟熱病毒
B．滅活病毒是通過自身糖蛋白等與細胞膜糖蛋白發(fā)生作用來誘導細胞融合的
C．在使用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞時，每一個孔中盡量只接種一個細胞
D．抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞即具有持續(xù)產(chǎn)生抗犬瘟熱病毒抗體的能力
【答案】D
【分析】在制備單克隆抗體時，首先要給小鼠免疫，產(chǎn)生相應的B細胞，然后將B細胞與骨髓瘤細胞融合，經(jīng)過選擇培養(yǎng)基兩次篩選，最后獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細胞。在單克隆抗體的制備過程中，使用了動物細胞培養(yǎng)和動物細胞融合等動物細胞工程技術。
【詳解】A、對動物進行間歇注射抗原處理，以刺激動物機體產(chǎn)生相應的B淋巴細胞，為獲得更多免疫的B淋巴細胞，需對小鼠多次注射犬瘟熱病毒，A正確；
B、滅活病毒通過其表面糖蛋白與宿主細胞膜糖蛋白結合，介導細胞融合，B正確；
C、為確保產(chǎn)生特異性強的抗體，用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞時，每一個孔中盡量只接種一個雜交瘤細胞，C正確；
D、雜交瘤細胞在克隆化培養(yǎng)過程中來自B淋巴細胞的染色體往往出現(xiàn)隨機丟失現(xiàn)象，若丟失的染色體含有產(chǎn)生犬瘟熱病毒抗體的基因，則利用抗體檢測篩選的雜交瘤細胞不一定具有持續(xù)產(chǎn)生抗犬瘟熱病毒抗體的能力，D錯誤。
故選D。
5．鐵皮石斛富含某些糖類和生物堿，是重要的醫(yī)藥藥材。微型繁殖技術可高效、快速地實現(xiàn)鐵皮石斛的產(chǎn)業(yè)化育苗。下列相關說法正確的是（ ）
A．進行無性繁殖的植物更難通過該技術進行快速繁殖
B．該技術是利用液體培養(yǎng)基對植物細胞進行懸浮培養(yǎng)
C．生長素和細胞分裂素的含量比會影響細胞發(fā)育方向
D．利用該技術對鐵皮石斛進行工廠化生產(chǎn)獲得生物堿
【答案】C
【分析】植物細胞工程技術的應用：植物繁殖的新途徑（微型繁殖、作物脫毒、人工種子）、作物新品種的培育（單倍體育種、突變體的利用）、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【詳解】A、題干中的微型繁殖技術是利用植物組織培養(yǎng)對作物進行的快速繁殖，進行無性繁殖的植物更容易進行植物組織培養(yǎng)，因此更容易通過該技術進行快速繁殖，A錯誤；
B、植物組織培養(yǎng)技術利用固體培養(yǎng)基，經(jīng)脫分化和再分化獲得植株，B錯誤；
C、生長素和細胞分裂素的濃度和比例等都會影響植物細胞的發(fā)育方向，C正確；
D、通過植物細胞培養(yǎng)技術利用鐵皮石斛進行工廠化生產(chǎn)生物堿，D錯誤。
故選C。
題型2 植物組織培養(yǎng)和植物細胞培養(yǎng)的區(qū)別
1．地黃為多年生草本植物，含有地黃素、強心苷等多種藥用成分，具有清熱涼血、解毒等功效。利用植物細胞培養(yǎng)技術工廠化生產(chǎn)地黃素的基本流程如下：接種外植體→誘導形成愈傷組織→懸浮振蕩培養(yǎng)→生物反應器中培養(yǎng)→分離、提純。下列敘述正確的是（ ）
A．外植體需先后用次氯酸鈉溶液和酒精進行滅菌
B．誘導形成愈傷組織需要一定的營養(yǎng)條件和適宜的光照
C．振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液的溶氧量，促進細胞呼吸
D．該工廠化生產(chǎn)的目的是大幅提高單個細胞中地黃素的合成量
【答案】C
【分析】植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。
【詳解】A、接種用的外植體需先后用酒精和次氯酸鈉溶液進行消毒，A錯誤；
B、誘導形成愈傷組織的培養(yǎng)基中需添加一定的營養(yǎng)和激素，不需要光照，B錯誤；
C、振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液的溶氧量，從而促進細胞的有氧呼吸，C正確；
D、該工廠化生產(chǎn)通過增加細胞數(shù)目提高地黃素合成量，而不是提高單個細胞中地黃素的合成量，D錯誤。
故選C。
2．植物細胞懸浮培養(yǎng)技術在生產(chǎn)中已得到應用。某興趣小組利用該技術培養(yǎng)胡蘿卜細胞并獲取番茄紅素實驗流程見下圖。下列描述合理的是（ ）
A．實驗流程中可用胰蛋白酶處理愈傷組織，制備懸浮細胞
B．番茄紅素是次生代謝物，一般在特定的組織或器官中產(chǎn)生
C．細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件，提高了單個細胞中次生代謝物的含量
D．胡蘿卜根外植體進行適當?shù)南咎幚砗螅儆谜麴s水清洗2~3次
【答案】B
【分析】植物細胞培養(yǎng)是指在離體條件下對單個植物細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖的技術。
【詳解】A、植物細胞之間的連接物質主要是纖維素和果膠等，制備植物懸浮細胞應用纖維素酶和果膠酶處理愈傷組織，而胰蛋白酶是用于處理動物組織分散動物細胞的，A錯誤；
B、番茄紅素是次生代謝物，次生代謝物一般在特定的組織或器官中，在一定的生長階段產(chǎn)生，B正確；
C、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件，增加細胞數(shù)量，從而提高次生代謝物的總量，而不是提高單個細胞中次生代謝物的含量，C錯誤；
D、胡蘿卜根外植體進行適當?shù)南咎幚砗螅脽o菌水清洗2 - 3次，而不是蒸餾水，以防止雜菌污染，D錯誤。
故選B。
3．下列關于細胞工程的說法正確的是（　　）
A．體外培養(yǎng)的動物細胞形態(tài)相比體內(nèi)正常細胞可能會發(fā)生改變
B．作物脫毒苗培養(yǎng)時先誘導愈傷組織生根，再誘導生芽
C．iPS細胞都是通過將外源基因導入體細胞獲得的
D．離心法收集細胞只能用于傳代培養(yǎng)細胞的收集
【答案】A
【分析】1、動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件①無菌、無毒的環(huán)境：培養(yǎng)液應進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素，以防培養(yǎng)過程中的污染。此外，應定期更換培養(yǎng)液，防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度：哺乳動物多是36.5℃+0.5℃；pH：7.2～7.4。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。 2、物組織培養(yǎng)技術過程：離體的植物組織，器官或細胞（外植體）→愈傷組織→胚狀體→植株（新植體）。原理：植物細胞的全能性。條件：（1）細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；（2）一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。
【詳解】A、體外培養(yǎng)的動物細胞由于缺少體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的生理和生化條件，可能形態(tài)、功能發(fā)生改變，如變扁平或失去特異性等，比體內(nèi)正常細胞可能會發(fā)生改變，A正確；
B、作物脫毒苗培養(yǎng)過程中，通常是先誘導愈傷組織形成芽，然后再誘導生根。這是因為在植物組織培養(yǎng)過程中，愈傷組織的再分化通常是先進行芽的誘導，再進行生根的誘導，兩者的順序不能顛倒。因此，題干中的說法是錯誤的，B錯誤；
C、iPS細胞（誘導多能干細胞）并不一定都需要通過外源基因導入體細胞獲得。除了通過引入特定外源基因來誘導體細胞去分化外，還有一些非基因導入的方法，如使用小分子化合物或通過蛋白質轉染等手段，同樣可以將體細胞誘導為多能干細胞，C錯誤；
D、在傳代培養(yǎng)時可用胰蛋白酶使細胞從瓶壁上脫離，懸浮培養(yǎng)的細胞也可直接用離心法收集，離心法收集細胞不是只能用于傳代培養(yǎng)細胞的收集，也可用于收集藥物處理過的細胞等，D錯誤；
故選A。
4．利用植物細胞培養(yǎng)技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（ ）
A．利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產(chǎn)物
B．植物細胞體積小，故不能通過該技術進行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)
C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應選擇產(chǎn)量高的細胞進行培養(yǎng)
D．該技術主要利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件提高單個細胞中次生代謝物的含量
【答案】A
【分析】由于植物細胞的次生代謝物含量很低，從植物組織提取會大量破壞植物資源，有些產(chǎn)物又不能或難以通過化學合成途徑得到，因此人們期望利用植物細胞培養(yǎng)來獲得目標產(chǎn)物，這個過程就是細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。
【詳解】A、有些產(chǎn)物不能或難以通過化學合成途徑得到，故可利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產(chǎn)物，A正確；
B、利用植物細胞培養(yǎng)技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細胞的某些次生代謝物，故可通過該技術進行植物細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)，B錯誤；
C、次生代謝物不是植物生長所必需的，其含量少，可以通過增加細胞的數(shù)量來增加次生代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量，C錯誤；
D、細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進細胞分裂的培養(yǎng)條件，提高了多個細胞中次生代謝物的含量，不能提高單個細胞中次生代謝物的含量，D錯誤。
故選A。
5．紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。利用植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)的紫草寧，成為世界上首例藥用植物細胞工程產(chǎn)品。下列說法錯誤的是（ ）
A．紫草寧是紫草細胞的次生代謝物
B．可以利用液體培養(yǎng)基進行工廠化生產(chǎn)
C．紫草寧的工廠化生產(chǎn)需要先利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁
D．紫草寧的工廠化生產(chǎn)不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制
【答案】C
【分析】植物組織培養(yǎng)的條件：細胞離體和適宜的外界條件(如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等)，一定的營養(yǎng)(無機、有機成分)和植物激素。
【詳解】A、紫草寧是紫草細胞培養(yǎng)過程中產(chǎn)生的次生代謝物，不是紫草細胞生長和生存所必需的，A正確；
B、進行工廠化生產(chǎn)需要植物細胞增殖，利用液體培養(yǎng)基，B正確；
C、紫草寧的工廠化生產(chǎn)不需要先利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁，獲取產(chǎn)物時再使用，C錯誤；
D、紫草寧的工廠化生產(chǎn)不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制，因此對于社會、經(jīng)濟、環(huán)境保護具有重要意義，D正確。
故選C。
題型3 動物細胞融合和單克隆抗體技術
1．HER-2蛋白主要在胎兒時期表達，成年以后只在極少數(shù)組織內(nèi)低水平表達。由曲妥珠單抗和藥物DMI連接而成的抗體-藥物偶聯(lián)物T-DMI，對HER-2有很強的靶向性，可用于治療HER-2過度表達的轉移性乳腺癌。下列敘述正確的是（ ）
A．需要向小鼠反復注射HER-2，以便在血清中獲取免疫的B淋巴細胞
B．用滅活的病毒誘導細胞融合時細胞膜的蛋白質和脂質分子會重新排布
C．T-DMI中DMI與HER-2特異性結合是對癌細胞進行選擇性殺傷的關鍵
D．用選擇培養(yǎng)基可篩選出產(chǎn)生HER-2抗體的雜交瘤細胞
【答案】B
【分析】單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、制備單克隆抗體時，需向小鼠多次注射抗原（HER-2），以激活B淋巴細胞，但免疫后的B淋巴細胞應從小鼠的脾臟中獲取，而非血清（血清中含多克隆抗體，而非B細胞），A錯誤；
B、滅活病毒誘導細胞融合的原理是病毒表面的糖蛋白促使細胞膜融合。此過程依賴細胞膜的流動性，導致膜蛋白和脂質分子重新排布，B正確；
C、根據(jù)題意信息可知，T-DMI中，曲妥珠單抗（抗體）負責特異性結合HER-2，而DMI是連接的細胞毒藥物。特異性靶向的關鍵在于抗體部分，而非DMI，C錯誤；
D、選擇培養(yǎng)基（如HAT培養(yǎng)基）的作用是篩選出雜交瘤細胞（融合的B細胞與骨髓瘤細胞），但無法直接篩選出分泌特定抗體的細胞。分泌抗體的雜交瘤細胞需通過后續(xù)的抗體檢測進一步確認，D錯誤。
故選B。
2．HER2是在胃癌、乳腺癌等腫瘤細胞中特異性表達的膜蛋白。臨床上用靶向HER2的抗體-藥物偶聯(lián)物（T-DM1）治療癌癥時，偶聯(lián)藥物DM1能破壞細胞骨架，T-DM1可通過雜交瘤細胞制備。下列說法錯誤的是（ ）
A．T-DM1常由抗體、接頭和藥物三部分組成
B．制備雜交瘤細胞需獲得產(chǎn)生HER2抗體的B細胞
C．用帶標記的HER2抗體對克隆化培養(yǎng)的細胞進行檢測
D．T-DM1能特異性識別腫瘤，并抑制腫瘤細胞的增殖
【答案】C
【分析】單克隆抗體的制備過程：用特定抗原對小鼠進行注射，使小鼠產(chǎn)生免疫反應，從產(chǎn)生免疫反應小鼠的脾臟細胞中，得到了抗特定抗原的抗體，這說明在小鼠的脾細胞中形成了相應的B淋巴細胞。將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中產(chǎn)生的B淋巴細胞融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選。在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜種細胞才能生長。這種雜種細胞的特點是既能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生專一的抗體。對上述經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細胞，還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。最后，將雜交瘤細胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，這樣，從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的單克隆抗體了。
【詳解】A、T-DM1常由抗體、接頭和藥物三部分組成，其中抗體的作用是將藥物定向運輸?shù)讲≡畈课唬档退幬锏母弊饔茫珹正確；
B、HER2是在胃癌、乳腺癌等腫瘤細胞中特異性表達的膜蛋白，為了讓藥物通過抗體作用與腫瘤細胞，在制備雜交瘤細胞時需獲得產(chǎn)生HER2抗體的B細胞，因而需要首先將HER2作為抗原注射到小鼠體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應，B正確；
C、用帶標記的HER2蛋白對克隆化培養(yǎng)的細胞進行檢測，進而篩選出能產(chǎn)生特定抗體，即HER2抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；
D、T-DM1能特異性識別腫瘤，因為其上連接的抗體能與腫瘤細胞表面的特定蛋白結合，進而抑制腫瘤細胞的增殖，D正確。
故選C。
3．類器官指利用成體干細胞或多能干細胞進行體外培養(yǎng)而形成的具有一定空間結構的組織類似物，在結構和功能上可模擬真實器官。某研究小組用人類結膜細胞培養(yǎng)成了第一個人結膜類器官，具有真正人類結膜功能，如產(chǎn)生眼淚等。下列敘述正確的是（ ）
A．人類結膜細胞培養(yǎng)過程中可加入適量抗生素和血清以防止雜菌污染
B．可用膠原蛋白酶處理人類結膜細胞以解除細胞接觸抑制的現(xiàn)象
C．人類結膜細胞培養(yǎng)成人結膜類器官的過程中細胞一直是高度分化的
D．成體干細胞具有組織特異性，在體內(nèi)可分化形成誘導多能干細胞
【答案】B
【分析】動物細胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無菌、無毒的環(huán)境。②營養(yǎng)：合成培養(yǎng)基成分：糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常需加入血清、血漿等天然成分。③溫度：適宜溫度。④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。
【詳解】A、血清中含有多種營養(yǎng)物質（如氨基酸、維生素、無機鹽等）和生長因子等，能夠為細胞提供適宜的生存環(huán)境，不能防止雜菌污染，A錯誤；
B、體外培養(yǎng)人類結膜細胞時，培養(yǎng)的細胞會出現(xiàn)貼壁生長、接觸抑制的現(xiàn)象，為解決接觸抑制的問題，可用胰蛋白酶(或膠 原蛋白酶)處理制成單細胞懸液，然后繼續(xù)分瓶培養(yǎng)，B正確；
C、人類結膜細胞培養(yǎng)成人結膜類器官的過程中，細胞會發(fā)生一定的變化。在這個過程中，細胞可能會經(jīng)歷去分化和再分化等過程。去分化是指已分化的細胞失去其特有的結構和功能而轉變成未分化細胞的過程，所以細胞不是一直保持高度分化的狀態(tài)，C錯誤；
D、一般是將成體細胞誘導形成誘導多能干細胞，而不是成體干細胞在體內(nèi)分化形成誘導多能干細胞，并且成體干細胞具有組織特異性，只能分化形成特定的組織細胞，D錯誤。
故選B。
題型4 體外受精及胚胎工程
1．胚胎工程是指對生殖細胞、受精卵或早期胚胎細胞進行多種顯微操作和處理，然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需求。下列與胚胎工程技術相關的敘述中正確的是（　　）
A．參與自然受精的精子需在雄性動物生殖道內(nèi)發(fā)生生理變化后才能獲能
B．參與體外受精的卵子只有在MII期排出兩個極體后才能與精子結合
C．促性腺激素處理的受體母牛具有與供體相同的生理狀態(tài)，可進行胚胎移植
D．被分割的胚胎來源不影響其生殖方式，但分割的次數(shù)直接影響后代的成活率
【答案】D
【分析】胚胎移植的基本程序主要包括：①對供、受體的選擇和處理（選擇遺傳特性和生產(chǎn)性能優(yōu)秀的供體，有健康的體質和正常繁殖能力的受體，用激素進行同期發(fā)情處理，用促性腺激素對供體母牛做超數(shù)排卵處理）；②配種或人工授精；③對胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)或保存（對胚胎進行質量檢查，此時的胚胎應發(fā)育到桑椹或胚囊胚階段）；④對胚胎進行移植；⑤移植后的檢查。
【詳解】A、參與自然受精的精子需在雌性動物生殖道內(nèi)發(fā)生生理變化后才能獲能，A錯誤；
B、參與體外受精的卵子在MII期排出一個極體后才能與精子結合，B錯誤；
C、利用促性腺激素對供體進行處理的目的是超數(shù)排卵，以獲得更多的卵細胞，使受體母牛具有與供體相同的生理狀態(tài)一般用孕激素處理，C錯誤；
D、通過胚胎分割產(chǎn)生后代的生殖方式屬于無性生殖，與胚胎的來源無關，分割的次數(shù)直接影響后代的成活率，分割的次數(shù)越多，成活率越低，D正確。
故選D。
2．胚胎工程技術的應用為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法，如奶牛活體采卵—體外胚胎生產(chǎn)（OPU-IVP）技術，該技術流程如圖。已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復序列，依據(jù)該重復序列設計引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯誤的是（ ）
A．體外受精后，在透明帶和卵細胞膜間觀察到兩個極體說明受精成功
B．活體采卵前誘導母牛超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞
C．取滋養(yǎng)層細胞進行SRY-PCR，應選擇結果為陰性的胚胎進行移植
D．為防止受體母牛發(fā)生免疫排斥反應，胚胎移植前需要進行免疫檢查
【答案】D
【分析】體外受精主要包括：卵母細胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細胞的采集和培養(yǎng)：①主要方法是用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細胞或直接從活體動物的卵巢中吸取卵母細胞。（2）精子的采集和獲能：①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對精子進行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學誘導法。（3）受精：在獲能溶液或專用的受精溶液中完成受精過程。
【詳解】A、在受精過程中，當在透明帶和卵細胞膜間觀察到兩個極體時，說明卵子已經(jīng)完成了受精，因為第一極體和第二極體的形成是受精過程中的重要標志，A正確；
B、激素作用的特點之一是作用于靶器官和靶細胞，活體采卵前誘導母牛超數(shù)排卵所注射的激素（如促性腺激素）只能作用于特定的靶細胞（如卵巢細胞），從而促進卵泡的發(fā)育和排卵，B正確；
C、已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復序列，依據(jù)該重復序列設計引物建立的SRY - PCR體系可用于奶牛胚胎性別鑒定。雌性胚胎不含Y染色體，SRY - PCR結果為陰性；雄性胚胎含Y染色體，SRY - PCR結果為陽性，繁殖優(yōu)良奶牛（雌性），所以應選擇SRY - PCR結果為陰性的胚胎進行移植，C正確；
D、胚胎移植時，受體對移入子宮的外來胚胎基本上不發(fā)生免疫排斥反應，這為胚胎在受體內(nèi)的存活提供了可能，所以胚胎移植前不需要進行免疫檢查，D錯誤。
故選D。
3．如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（ ）
A．雙抗可同時與2種抗原結合
B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞
C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原
D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞
【答案】D
【分析】單克隆抗體的制備過程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細胞；誘導B細胞和骨髓瘤細胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞；進行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細胞；進行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。
【詳解】A、根據(jù)抗原和抗體發(fā)生特異性結合的原理推測，雙抗可同時與2種抗原結合，A正確；
B、 根據(jù)抗原與抗體能夠發(fā)生特異性結合的特性，利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞，從而使藥物發(fā)揮相應的作用，B正確；
C、在兩種不同的抗原刺激下，B細胞增殖、分化產(chǎn)生不同的漿細胞分泌形成兩種抗體，因此，篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原來進行抗原-抗體檢測，從而實現(xiàn)對雙抗的篩選，C正確；
D、 同時注射2種抗原可刺激B細胞分化形成不同的漿細胞，而不是分化成產(chǎn)雙抗的漿細胞，D錯誤。
故選D。
4．一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72 注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗 p72 的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（ ）
A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大
B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合
C．利用該小鼠只能制備出一種抗 p72 的單抗
D．p72 部分結構改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況
【答案】D
【分析】根據(jù)題干信息“一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體”，非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72 上有多個抗原決定簇，所以可以刺激機體產(chǎn)生多種抗體。每個抗原決定簇刺激產(chǎn)生的抗體是單抗。
【詳解】A、單抗的制作需要篩選，而多抗不需要篩選，抗原純度越高，產(chǎn)生的多抗純度越高，因此原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響小，A錯誤；
B、單抗制備過程中通常將經(jīng)過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，B錯誤；
C、非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72 上有多種抗原決定簇，一個抗決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，所以向小鼠體內(nèi)注入p72 后，可以刺激小鼠產(chǎn)生多種抗p72的單抗，C錯誤；
D、p72 部分結構改變只改變了部分抗原決定簇，因此由這部分抗原決定簇產(chǎn)生的抗體失效，但由于還存在由其他抗原決定簇刺激機體產(chǎn)生的抗體，所以多抗仍有效，D正確。
故選D。
題型5 細胞工程涉及的多選題型
1．PSMA是某些種類癌細胞表面高表達膜蛋白，CD28是T細胞表面受體。將兩株不同雜交瘤細胞融合形成的雙雜交瘤細胞，既能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，又可以產(chǎn)生雙特異性抗體PSMA×CD28。PSMA×CD28既能選擇性地靶向結合某種癌細胞表面的PSMA蛋白，又能特異性地結合T細胞表面的CD28蛋白，從而激活T細胞，通過活化的T細胞來識別和殺滅目標癌細胞。圖1所示為雙特異性抗體PSMA×CD28的制備流程，圖2所示為雙特異性抗體PSMA×CD28的結構及作用機理。下列分析正確的是（ ）
A．①過程需給小鼠分別注射PSMA蛋白、CD28蛋白，才能最終得到圖2中有效激活T細胞和殺傷癌細胞的雙特異性抗體PSMA×CD28
B．圖1至少進行3次抗原檢測進行篩選才能得到雙雜交瘤細胞XY，最后一次篩選需在96孔板的孔洞中同時加入PSMA和CD28蛋白
C．對⑤過程得到的雙雜交瘤細胞進行傳代培養(yǎng)前，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理
D．獲得的雜交瘤細胞XY要置于含有95%空氣和5%混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)
【答案】AD
【分析】單克隆抗體的制備過程：①用特定的抗原對小鼠進行免疫，并從該小鼠的脾中得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞。 ②用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選：在該培養(yǎng)基上，未融合的親本細胞和融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞才能生長。③對上述經(jīng)選擇培養(yǎng)的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。④將抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞在體外條件下大規(guī)模培養(yǎng)，或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。⑤從細胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取大量的單克隆抗體。
【詳解】A、雙特異性抗體既能選擇性地靶向結合某種癌細胞表面的PSMA蛋白，又能特異性地結合T細胞表面的CD28蛋白，所以雙特異性抗體生產(chǎn)過程中，應先將癌細胞表面的PSMA蛋白和T細胞表面的CD28蛋白作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，使小鼠產(chǎn)生免疫反應，才能最終得到圖2中有效激活T細胞和殺傷癌細胞的雙特異性抗體PSMA×CD28，A正確；
B、篩選雙特異性抗體時需要使用制備單克隆抗體時所使用的圖2中抗原物質，該過程需要先用一種抗原（如PSMA）篩選出能夠分泌抗PSMA抗體的雜交瘤細胞，再用另一種抗原（如CD28）從已篩選出的雜交瘤細胞中篩選出能分泌抗CD28抗體的雜交瘤細胞，所以篩選獲得雙特異性抗體時至少需要進行過2次抗原檢測，B錯誤；
C、⑤過程得到的雙雜交瘤細胞能懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，不需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，只有貼壁生長的細胞進行傳代培養(yǎng)前才需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，使其分散成單個細胞，C錯誤；
D、動物細胞培養(yǎng)時，通常將細胞置于含有95%空氣和5% CO2 混合氣體的CO2培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，95% 空氣提供細胞代謝所需的氧氣，5%CO2可以維持培養(yǎng)液的 pH，所以獲得的雜交瘤細胞XY要置于含有95%空氣和5% CO2 混合氣體的 CO2 培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)，D正確。
故選AD。
2．科研人員誘導依賴維生素B5的植物細胞和葉綠體缺陷型植物細胞融合，再利用選擇培養(yǎng)基篩選出了雜種細胞。下列相關說法正確的是（ ）
A．誘導融合之前需先用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除
B．誘導融合產(chǎn)生雜種細胞的過程體現(xiàn)了細胞的全能性
C．該選擇培養(yǎng)基需加入碳源、氮源、水和無機鹽
D．該選擇培養(yǎng)基中不加入維生素B5
【答案】AD
【分析】植物體細胞雜交其實質為植物原生質體的融合，在融合前需要使用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除植物的細胞壁，再用化學法（聚乙二醇）或物理法（振動、離心、電刺激）誘導原生質體融合；細胞融合完成的標志是融合細胞再生出新的細胞壁；獲得融合細胞后需利用植物的組織培養(yǎng)技術將細胞培育成植株，故植物體細胞雜交技術的最終目的是培育具有優(yōu)良性狀的植物新品種。
【詳解】A、植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，在進行植物細胞融合之前，需要用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除，獲得原生質體，這樣才能促進細胞的融合，A正確；
B、細胞全能性是指已經(jīng)分化的細胞，仍然具有發(fā)育成完整個體的潛能。誘導融合產(chǎn)生雜種細胞只是細胞之間的融合過程，并沒有發(fā)育成完整的個體，沒有體現(xiàn)細胞的全能性，B錯誤；
C、該選擇培養(yǎng)基篩選的是融合后的雜種細胞，雜種細胞既能利用自身光合作用產(chǎn)生有機物（因為融合了葉綠體缺陷型植物細胞，另一種細胞可能含有葉綠體可進行光合作用相關過程或者雜種細胞融合后可能有相關功能），又依賴維生素B5，所以培養(yǎng)基中不需要額外加入碳源、氮源等供能物質，C錯誤；
D、由于是誘導依賴維生素B5的植物細胞和葉綠體缺陷型植物細胞融合，融合后的雜種細胞依賴維生素B5，而普通細胞可能不依賴，為了篩選出雜種細胞，在選擇培養(yǎng)基中不加維生素B5，這樣不能合成維生素B5又依賴它的普通細胞就無法生長，從而篩選出雜種細胞，D正確。
故選AD。
3．細胞融合技術突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能。某研究小組以小鼠甲為實驗材料設計實驗，研制抗病毒A的單克隆抗體。下列敘述錯誤的是（ ）
A．實驗前必須給小鼠甲注射病毒A是為了得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞
B．將小鼠體內(nèi)取出的脾臟用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶處理，使其分散成單個細胞
C．篩選1需用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選才能獲得融合的雜交痛瘤胞
D．篩選2利用96孔板經(jīng)1次篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞
【答案】BD
【分析】1、單克隆抗體的制備：（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾臟內(nèi)獲得相應的B淋巴細胞；（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；（4）將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。
2、單克隆抗體的應用：①作為診斷試劑，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點；②用于治療疾病和運載藥物。
【詳解】A、該實驗前必須給小鼠甲注射病毒A，該處理的目的是誘導小鼠甲產(chǎn)生能夠分泌抗病毒A抗體的B淋巴細胞，A正確；
B、將小鼠體內(nèi)取出的脾臟用剪刀剪碎后加入胰蛋白酶處理，使其分散成單個細胞，B錯誤；
C、為了得到能產(chǎn)生抗病毒A單克隆抗體的雜交瘤細胞，需要進行篩選。第一次篩選用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞(“BB”細胞、“瘤瘤”細胞)都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞(“B瘤”細胞)才能生長，C正確；
D、第二次篩選用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群，該過程用到抗原抗體雜交，獲取的雜交瘤細胞通過培養(yǎng)獲得大量的分泌特異性抗體的雜交瘤細胞，D錯誤。
故選BD。
4．肉蓯蓉具有較高的藥用價值，自然條件下的產(chǎn)量較低，其次生代謝產(chǎn)物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人員以外植體誘導出愈傷組織，進一步進行細胞懸浮培養(yǎng)。在不同的初始接種濃度下培養(yǎng)一段時間后，對懸浮培養(yǎng)液的PeGs進行測定，結果如下圖所示。下列有關敘述不正確的是（ ）
A．植物細胞培養(yǎng)的目的主要是獲得植物生長和生存所必需的次生代謝產(chǎn)物
B．若工廠化大量生產(chǎn)PeGs細胞懸浮培養(yǎng)時就應選擇接種細胞的濃度為3.2g·L-1
C．若需進一步了解細胞生成PeGs的能力，則要檢測培養(yǎng)后培養(yǎng)液中的細胞密度
D．植物組織培養(yǎng)時，應對外植體進行滅菌處理以防止培養(yǎng)基及愈傷組織污染
【答案】ABD
【分析】1、植物組織培養(yǎng)就是在無菌和人工控制的條件下，將離體的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。
2、植物組織培養(yǎng)的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環(huán)境等）；②一定的營養(yǎng)（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。
【詳解】A、植物細胞培養(yǎng)的目的主要是獲得植物細胞的次生代謝產(chǎn)物，次生代謝不是生物生長所必需的，A錯誤；
B、若工廠化大量生產(chǎn)PeGs，細胞懸浮培養(yǎng)時選擇接種細胞的濃度應在2.4至4.0g·L-1之間設置梯度濃度找到最適濃度，B錯誤；
C、若需進一步了解細胞生成PeGs的能力，細胞密度若過大影響其產(chǎn)量，因此要檢測培養(yǎng)后培養(yǎng)液中的細胞密度，C正確；
D、植物組織培養(yǎng)時，應對外植體進行消毒處理，對培養(yǎng)基進行滅菌處理，以防止培養(yǎng)基及愈傷組織污染，D錯誤。
故選ABD。
5．下列關于植物愈傷組織的說法正確的是（　　）
A．用果膠酶和膠原蛋白酶去除愈傷組織的細胞壁獲得原生質體
B．融合的原生質體需再生出細胞壁后才能形成愈傷組織
C．體細胞雜交獲得的雜種植株細胞中具有來自親本的2個細胞核
D．通過愈傷組織再生出多個完整植株的過程屬于無性繁殖
【答案】BD
【分析】植物體細胞雜交過程：將植物細胞A與植物細胞B用纖維素酶和果膠酶處理，得到不含細胞壁的原生質體A和原生質體B，運用物理方法或化學方法誘導融合，形成雜種細胞，再利用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培養(yǎng)成雜種植株。
【詳解】A、植物細胞壁的主要成分是纖維素和果膠，故用果膠酶和纖維素酶去除愈傷組織的細胞壁獲得原生質體，A錯誤；
B、用纖維素酶和果膠酶分別處理不同的植物細胞，得到原生質體，運用物理方法或化學方法誘導融合，形成雜種細胞，再利用植物組織培養(yǎng)技術將雜種細胞培養(yǎng)成雜種植株，故融合的原生質體需再生出細胞壁后才能形成愈傷組織，B正確；
C、體細胞雜交獲得的雜種植株細胞中具有來自親本的遺傳物質，只有1個細胞核，C錯誤；
D、通過愈傷組織再生出多個完整植株的過程屬于植物的組織培養(yǎng)，從繁殖看屬于無性繁殖，D正確。
故選BD。
題型6 植物細胞工程和光合作用關聯(lián)大題
1．銀杏葉中的黃酮醇具有重要的藥用價值。為探究紅藍光質比例對銀杏幼苗光合特性及黃酮醇含量的影響，科研人員以銀杏幼苗為實驗材料，在適宜的光照強度下，設置紅藍光組合比例分別為1∶1（1R1B）、1∶3（1R3B）、1∶5（1R5B）和白光（W，對照）4種光質處理，處理20d后檢測銀杏凈光合速率、氣孔導度、胞間CO2濃度及總黃酮醇含量，結果如圖所示。
(1)由圖可知，實驗組的凈光合速率都比對照組高，原因是 。實驗組凈光合速率的變化主要由非氣孔因素導致，原因是 。
(2)不同比例紅藍光對銀杏葉總黃酮醇含量的影響為 。黃酮醇是銀杏葉細胞的次生代謝物，與傳統(tǒng)的從銀杏葉中提取黃酮醇相比， 技術可實現(xiàn)黃酮醇的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液的目的 。（答出兩點）
(3)除光質外，光照和黑暗交替頻率也可以影響銀杏的光合產(chǎn)物積累量。研究人員采用光照、黑暗交替進行的方式處理生理狀態(tài)相同的銀杏幼苗，其中光照和黑暗的總時長相同。結果發(fā)現(xiàn)隨著光暗交替次數(shù)的增加和交換頻率的加快，銀杏幼苗有機物的積累量逐漸增加，請從光合作用的過程角度分析，出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因 。
【答案】(1) 光合色素主要吸收紅光和藍紫光，實驗組氣孔導度和胞間CO2濃度高 凈光合速率與氣孔導度、胞間CO2濃度的變化趨勢不完全相同
(2) 隨藍光比例的增加，總黃酮醇含量先增加后減少，并在1R3B 處理時最高 植物細胞培養(yǎng) 提供營養(yǎng)；排除代謝廢物
(3)隨著光暗交替頻率的加快，光反應產(chǎn)生的NADPH和ATP能夠被暗反應充分利用
【分析】1、溫度對光合作用的影響：在最適溫度下酶的活性最強，光合作用強度最大，當溫度低于最適溫度，光合作用強度隨溫度的增加而加強，當溫度高于最適溫度，光合作用強度隨溫度的增加而減弱。
2、二氧化碳濃度對光合作用的影響：在一定范圍內(nèi)，光合作用強度隨二氧化碳濃度的增加而增強．當二氧化碳濃度增加到一定的值，光合作用強度不再增強。
3、光照強度對光合作用的影響：在一定范圍內(nèi)，光合作用強度隨光照強度的增加而增強．當光照強度增加到一定的值，光合作用強度不再增強。
【詳解】（1）光合色素主要吸收紅光和藍紫光，由圖可知，對照組為白光處理，實驗組為不同比例組合的紅光藍光處理，因此實驗組有利于提高光反應速率，且實驗組氣孔導度和胞間CO2濃度高，促進暗反應的進行，因此實驗組的凈光合速率都比對照組高。由圖可知，與對照組 相比，實驗組凈光合速率與氣孔導度、胞間CO2濃度的變化趨勢不完全相同，實驗組凈光合速率的變化主要由非氣孔因素導致。
（2）由圖可知，隨藍光比例的增加，總黃酮醇含量先增加后減少，并在1R3B 處理時最高。與傳統(tǒng)的從銀杏葉中提取黃酮醇相比，植物組織培養(yǎng)技術可實現(xiàn)黃酮醇的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液可以提供營養(yǎng)物質，并防止代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害。
（3）隨著光暗交替頻率的加快，光反應產(chǎn)生的NADPH和ATP能夠被暗反應充分利用，從而促進光合作用的進行。
2．我國鹽堿地具備開發(fā)種植潛力的面積約有5億畝，鹽堿耕地超過1億畝。鹽堿地是重要的土地資源，開發(fā)好、利用好鹽堿地，對保障中國糧倉、中國飯碗將起到重要作用。科學家將主效耐堿基因AT1導入小麥的愈傷組織，從而獲得了小麥的耐鹽堿組織，實驗過程用到的部分結構如下圖。請據(jù)圖回答問題：
(1)已知A位點和B位點分別是起始密碼子和終止密碼子對應的基因位置，擴增基因選用的引物組合應為 。AT1基因以b鏈為轉錄模板鏈，為了使AT1基因按照正確的方向與質粒連接，在引物1的 端添加 的酶切位點。
(2)擴增AT1基因時，PCR反應中不能使用普通DNA聚合酶的原因是 ，在構建AT1基因表達載體時，為使AT1基因定向插入Ti質粒，既避免AT1和Ti質粒自身連接成環(huán)或反向連接，通常采取的措施是 。
(3)培育轉基因植株時，培養(yǎng)基中加入蔗糖的作用是 （答出兩點），組織培養(yǎng)15～20d后，將愈傷組織轉接到誘導生芽的培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)只生根不生芽，可能的原因是 。
【答案】(1) 引物1和4 5′ PstI
(2) 在PCR反應中，需要利用高溫使DNA雙鏈解旋，普通的DNA聚合酶在高溫下會變性失活 使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的限制酶對ATi基因和Ti質粒分別進行切割
(3) 提供能量，調(diào)節(jié)滲透壓 培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成
【分析】基因工程基本操作程序：目的基因的獲取、基因表達載體的構建、目的基因導入受體細胞和目的基因的檢測與鑒定。
【詳解】（1）已知A位點和B位點分別是起始密碼子和終止密碼子對應的基因位置，為保證擴增的基因片段中含有轉錄形成的起始密碼子和終止密碼子的堿基序列，在擴增基因時應選用的引物組合為引物1和4，DNA復制時子鏈的延伸方向為5′→3′端，因此在引物1的5′端加入Pst I的酶切位點，在引物4的5′端加入Sma I的酶切位點，這樣有利于對目的基因和載體進行雙酶切后重組載體的連接。
（2）在PCR反應中，需要利用高溫使DNA雙鏈解旋，普通的DNA聚合酶在高溫下會變性失活；在構建表達載體時，若限制酶切割AT1和Ti質粒產(chǎn)生粘性末端相同，則會導致AT1和Ti質粒自身連接成環(huán)或反向連接，為避免AT1和Ti質粒自身連接成環(huán)或反向連接，應使用兩種能產(chǎn)生不同黏性末端的限制酶對ATi基因和Ti質粒分別進行切割。
（3）在植物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基加入的蔗糖一方面是為細胞提供能量，另一方面是調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓；在植物組織培養(yǎng)時，培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素的比值影響細胞分化的方向，比值適中時促進愈傷組織的形成，比值低時有利于芽的分化抑制根的形成，比值高時，有利于根的分化抑制芽的形成，所以，將愈傷組織轉接到誘導生芽的培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)只生根不生芽，可能的原因是培養(yǎng)基中生長素和細胞分裂素比值高，有利于根的分化，抑制芽的形成。
21世紀教育網(wǎng)(www.21cnjy.com)押題9 發(fā)酵工程、植物細胞工程和動物細胞工程
猜押 6大題型
題型01動植物細胞培養(yǎng)的理論基礎
題型02植物組織培養(yǎng)和植物細胞培養(yǎng)的區(qū)別
題型03動物細胞融合和單克隆抗體技術
題型04體外受精及胚胎工程
題型05細胞工程涉及的多選題型
題型06植物細胞工程和光合作用關聯(lián)大題
猜押考點 3年真題 考情分析 押題依據(jù)
發(fā)酵工程、植物細胞工程和動物細胞工程 2021年山東卷第12、14題 2022年山東卷第12、14、20題 2023年山東卷第12、15題 2024年山東卷第14、15題 2025年新高考生物新結構體系下，細胞工程題型更注重考察學生的審題能力和知識點掌握的全面和準確性；以基礎知識為引導，深入考察思路。 題目更加注重綜合性、應用性、創(chuàng)新性，對知識點的背景和應用有更多的掌握。 細胞工程題型要求考生在細讀題干的基礎上，依據(jù)題目提供的信息，聯(lián)系所學的知識和方法，實現(xiàn)信息的遷移，達到靈活解題的目的；遇到新定義問題，應耐心讀題，分析新定義的特點，弄清新定義的性質，按新定義的要求，“照章辦事”，逐條分析、驗證、運算，使問題得以解決. 難度適中，可以預測2025年選擇題拓展題目命題方向將會以選擇題型展開命題．
題型1 動植物細胞培養(yǎng)的理論基礎
1．一種類型的分化細胞轉變成另一種類型的分化細胞的現(xiàn)象稱為轉分化，通常是將已分化細胞先誘導成iPS細胞，再誘導形成另一種類型的分化細胞。科學家分別通過2組不同的轉錄因子（調(diào)節(jié)基因轉錄的蛋白質分子），使小鼠成纖維細胞經(jīng)基因組重編程表達直接轉分化為心肌細胞與神經(jīng)細胞。下列說法錯誤的是（ ）
A．經(jīng)iPS細胞發(fā)生轉分化的過程中，細胞的全能性會發(fā)生變化
B．轉錄因子的作用是與基因組中特定部位的調(diào)控序列結合，促進相關基因的表達
C．若2組轉錄因子同時作用于小鼠成纖維細胞，可能無法獲得心肌細胞或神經(jīng)細胞
D．與經(jīng)iPS細胞發(fā)生轉分化過程相比，成纖維細胞轉分化過程可能會更加便捷
2．三維細胞培養(yǎng)技術（3D細胞培養(yǎng)）是通過人工模擬細胞間質微環(huán)境，允許動物細胞在三維空間中生長和相互作用的技術。與傳統(tǒng)的細胞培養(yǎng)相比，3D細胞培養(yǎng)更接近體內(nèi)細胞的實際生長環(huán)境。下列說法正確的是（ ）
A．傳統(tǒng)細胞培養(yǎng)時，細胞并不都需要貼附于某些基質表面才能生長增殖
B．用胰蛋白酶處理傳統(tǒng)培養(yǎng)的貼壁細胞，斷裂其胞間連絲使之游離便于傳代
C．3D細胞培養(yǎng)前需要對動物組織進行滅菌處理，培養(yǎng)時需定期更換培養(yǎng)液
D．利用3D細胞培養(yǎng)技術研究干細胞分化過程時，通常需要進行分瓶處理
3．人參多糖和皂苷是人參的次生代謝物，具有增強人體免疫力、抗腫瘤、保肝和降血糖等功效。研究人員利用植物細胞培養(yǎng)技術實現(xiàn)了人參多糖和皂苷的工業(yè)化生產(chǎn)。下列說法錯誤的是（ ）
A．人參多糖和皂苷在人參細胞內(nèi)的含量很低，但不是其生長所必需的
B．外植體需經(jīng)酶解法處理，用培養(yǎng)液將細胞制成細胞懸液后再接種到生物反應器內(nèi)
C．該技術利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件，提高了單個細胞中人參多糖和皂苷的含量
D．與大田種植相比，該技術具有生產(chǎn)周期短、不占用耕地及受外界環(huán)境影響小等優(yōu)點
4．研究人員將犬瘟熱病毒免疫小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，制備并篩選出能分泌抗犬瘟熱病毒抗體的雜交瘤細胞，但該種細胞在克隆化培養(yǎng)過程中來自B淋巴細胞的染色體往往出現(xiàn)隨機丟失的現(xiàn)象。不考慮基因互作和其他變異，下列說法錯誤的是（ ）
A．為獲得更多免疫的B淋巴細胞，需對小鼠多次注射犬瘟熱病毒
B．滅活病毒是通過自身糖蛋白等與細胞膜糖蛋白發(fā)生作用來誘導細胞融合的
C．在使用96孔板培養(yǎng)和篩選雜交瘤細胞時，每一個孔中盡量只接種一個細胞
D．抗體檢測呈陽性的雜交瘤細胞即具有持續(xù)產(chǎn)生抗犬瘟熱病毒抗體的能力
5．鐵皮石斛富含某些糖類和生物堿，是重要的醫(yī)藥藥材。微型繁殖技術可高效、快速地實現(xiàn)鐵皮石斛的產(chǎn)業(yè)化育苗。下列相關說法正確的是（ ）
A．進行無性繁殖的植物更難通過該技術進行快速繁殖
B．該技術是利用液體培養(yǎng)基對植物細胞進行懸浮培養(yǎng)
C．生長素和細胞分裂素的含量比會影響細胞發(fā)育方向
D．利用該技術對鐵皮石斛進行工廠化生產(chǎn)獲得生物堿
題型2 植物組織培養(yǎng)和植物細胞培養(yǎng)的區(qū)別
1．地黃為多年生草本植物，含有地黃素、強心苷等多種藥用成分，具有清熱涼血、解毒等功效。利用植物細胞培養(yǎng)技術工廠化生產(chǎn)地黃素的基本流程如下：接種外植體→誘導形成愈傷組織→懸浮振蕩培養(yǎng)→生物反應器中培養(yǎng)→分離、提純。下列敘述正確的是（ ）
A．外植體需先后用次氯酸鈉溶液和酒精進行滅菌
B．誘導形成愈傷組織需要一定的營養(yǎng)條件和適宜的光照
C．振蕩培養(yǎng)的目的是增加培養(yǎng)液的溶氧量，促進細胞呼吸
D．該工廠化生產(chǎn)的目的是大幅提高單個細胞中地黃素的合成量
2．植物細胞懸浮培養(yǎng)技術在生產(chǎn)中已得到應用。某興趣小組利用該技術培養(yǎng)胡蘿卜細胞并獲取番茄紅素實驗流程見下圖。下列描述合理的是（ ）
A．實驗流程中可用胰蛋白酶處理愈傷組織，制備懸浮細胞
B．番茄紅素是次生代謝物，一般在特定的組織或器官中產(chǎn)生
C．細胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)主要是利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件，提高了單個細胞中次生代謝物的含量
D．胡蘿卜根外植體進行適當?shù)南咎幚砗螅儆谜麴s水清洗2~3次
3．下列關于細胞工程的說法正確的是（　　）
A．體外培養(yǎng)的動物細胞形態(tài)相比體內(nèi)正常細胞可能會發(fā)生改變
B．作物脫毒苗培養(yǎng)時先誘導愈傷組織生根，再誘導生芽
C．iPS細胞都是通過將外源基因導入體細胞獲得的
D．離心法收集細胞只能用于傳代培養(yǎng)細胞的收集
4．利用植物細胞培養(yǎng)技術在離體條件下對單個細胞或細胞團進行培養(yǎng)使其增殖，可獲得植物細胞的某些次生代謝物。下列說法正確的是（ ）
A．利用該技術可獲得某些無法通過化學合成途徑得到的產(chǎn)物
B．植物細胞體積小，故不能通過該技術進行其產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)
C．次生代謝物是植物所必需的，但含量少，應選擇產(chǎn)量高的細胞進行培養(yǎng)
D．該技術主要利用促進細胞生長的培養(yǎng)條件提高單個細胞中次生代謝物的含量
5．紫草寧是從紫草細胞中提取的一種藥物和色素，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。利用植物細胞培養(yǎng)生產(chǎn)的紫草寧，成為世界上首例藥用植物細胞工程產(chǎn)品。下列說法錯誤的是（ ）
A．紫草寧是紫草細胞的次生代謝物
B．可以利用液體培養(yǎng)基進行工廠化生產(chǎn)
C．紫草寧的工廠化生產(chǎn)需要先利用纖維素酶和果膠酶去除細胞壁
D．紫草寧的工廠化生產(chǎn)不占用耕地，幾乎不受季節(jié)、天氣等的限制
題型3 動物細胞融合和單克隆抗體技術
1．HER-2蛋白主要在胎兒時期表達，成年以后只在極少數(shù)組織內(nèi)低水平表達。由曲妥珠單抗和藥物DMI連接而成的抗體-藥物偶聯(lián)物T-DMI，對HER-2有很強的靶向性，可用于治療HER-2過度表達的轉移性乳腺癌。下列敘述正確的是（ ）
A．需要向小鼠反復注射HER-2，以便在血清中獲取免疫的B淋巴細胞
B．用滅活的病毒誘導細胞融合時細胞膜的蛋白質和脂質分子會重新排布
C．T-DMI中DMI與HER-2特異性結合是對癌細胞進行選擇性殺傷的關鍵
D．用選擇培養(yǎng)基可篩選出產(chǎn)生HER-2抗體的雜交瘤細胞
2．HER2是在胃癌、乳腺癌等腫瘤細胞中特異性表達的膜蛋白。臨床上用靶向HER2的抗體-藥物偶聯(lián)物（T-DM1）治療癌癥時，偶聯(lián)藥物DM1能破壞細胞骨架，T-DM1可通過雜交瘤細胞制備。下列說法錯誤的是（ ）
A．T-DM1常由抗體、接頭和藥物三部分組成
B．制備雜交瘤細胞需獲得產(chǎn)生HER2抗體的B細胞
C．用帶標記的HER2抗體對克隆化培養(yǎng)的細胞進行檢測
D．T-DM1能特異性識別腫瘤，并抑制腫瘤細胞的增殖
3．類器官指利用成體干細胞或多能干細胞進行體外培養(yǎng)而形成的具有一定空間結構的組織類似物，在結構和功能上可模擬真實器官。某研究小組用人類結膜細胞培養(yǎng)成了第一個人結膜類器官，具有真正人類結膜功能，如產(chǎn)生眼淚等。下列敘述正確的是（ ）
A．人類結膜細胞培養(yǎng)過程中可加入適量抗生素和血清以防止雜菌污染
B．可用膠原蛋白酶處理人類結膜細胞以解除細胞接觸抑制的現(xiàn)象
C．人類結膜細胞培養(yǎng)成人結膜類器官的過程中細胞一直是高度分化的
D．成體干細胞具有組織特異性，在體內(nèi)可分化形成誘導多能干細胞
題型4 體外受精及胚胎工程
1．胚胎工程是指對生殖細胞、受精卵或早期胚胎細胞進行多種顯微操作和處理，然后將獲得的胚胎移植到雌性動物體內(nèi)生產(chǎn)后代，以滿足人類的各種需求。下列與胚胎工程技術相關的敘述中正確的是（　　）
A．參與自然受精的精子需在雄性動物生殖道內(nèi)發(fā)生生理變化后才能獲能
B．參與體外受精的卵子只有在MII期排出兩個極體后才能與精子結合
C．促性腺激素處理的受體母牛具有與供體相同的生理狀態(tài)，可進行胚胎移植
D．被分割的胚胎來源不影響其生殖方式，但分割的次數(shù)直接影響后代的成活率
2．胚胎工程技術的應用為優(yōu)良牲畜的大量繁殖提供了有效的解決辦法，如奶牛活體采卵—體外胚胎生產(chǎn)（OPU-IVP）技術，該技術流程如圖。已知雄性奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復序列，依據(jù)該重復序列設計引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯誤的是（ ）
A．體外受精后，在透明帶和卵細胞膜間觀察到兩個極體說明受精成功
B．活體采卵前誘導母牛超數(shù)排卵所注射的激素只能作用于特定細胞
C．取滋養(yǎng)層細胞進行SRY-PCR，應選擇結果為陰性的胚胎進行移植
D．為防止受體母牛發(fā)生免疫排斥反應，胚胎移植前需要進行免疫檢查
3．如圖所示，將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子，在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制備雙特異性抗體，簡稱雙抗。下列說法錯誤的是（ ）
A．雙抗可同時與2種抗原結合
B．利用雙抗可以將蛋白類藥物運送至靶細胞
C．篩選雙抗時需使用制備單克隆抗體時所使用的2種抗原
D．同時注射2種抗原可刺激B細胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細胞
4．一個抗原往往有多個不同的抗原決定簇，一個抗原決定簇只能刺激機體產(chǎn)生一種抗體，由同一抗原刺激產(chǎn)生的不同抗體統(tǒng)稱為多抗。將非洲豬瘟病毒衣殼蛋白 p72 注入小鼠體內(nèi)，可利用該小鼠的免疫細胞制備抗 p72 的單抗，也可以從該小鼠的血清中直接分離出多抗。下列說法正確的是（ ）
A．注入小鼠體內(nèi)的抗原純度對單抗純度的影響比對多抗純度的影響大
B．單抗制備過程中通常將分離出的漿細胞與骨髓瘤細胞融合
C．利用該小鼠只能制備出一種抗 p72 的單抗
D．p72 部分結構改變后會出現(xiàn)原單抗失效而多抗仍有效的情況
題型5 細胞工程涉及的多選題型
1．PSMA是某些種類癌細胞表面高表達膜蛋白，CD28是T細胞表面受體。將兩株不同雜交瘤細胞融合形成的雙雜交瘤細胞，既能夠懸浮在培養(yǎng)基中生長繁殖，又可以產(chǎn)生雙特異性抗體PSMA×CD28。PSMA×CD28既能選擇性地靶向結合某種癌細胞表面的PSMA蛋白，又能特異性地結合T細胞表面的CD28蛋白，從而激活T細胞，通過活化的T細胞來識別和殺滅目標癌細胞。圖1所示為雙特異性抗體PSMA×CD28的制備流程，圖2所示為雙特異性抗體PSMA×CD28的結構及作用機理。下列分析正確的是（ ）
A．①過程需給小鼠分別注射PSMA蛋白、CD28蛋白，才能最終得到圖2中有效激活T細胞和殺傷癌細胞的雙特異性抗體PSMA×CD28
B．圖1至少進行3次抗原檢測進行篩選才能得到雙雜交瘤細胞XY，最后一次篩選需在96孔板的孔洞中同時加入PSMA和CD28蛋白
C．對⑤過程得到的雙雜交瘤細胞進行傳代培養(yǎng)前，需用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理
D．獲得的雜交瘤細胞XY要置于含有95%空氣和5%混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)
2．科研人員誘導依賴維生素B5的植物細胞和葉綠體缺陷型植物細胞融合，再利用選擇培養(yǎng)基篩選出了雜種細胞。下列相關說法正確的是（ ）
A．誘導融合之前需先用纖維素酶和果膠酶將細胞壁去除
B．誘導融合產(chǎn)生雜種細胞的過程體現(xiàn)了細胞的全能性
C．該選擇培養(yǎng)基需加入碳源、氮源、水和無機鹽
D．該選擇培養(yǎng)基中不加入維生素B5
3．細胞融合技術突破了有性雜交的局限，使遠緣雜交成為可能。某研究小組以小鼠甲為實驗材料設計實驗，研制抗病毒A的單克隆抗體。下列敘述錯誤的是（ ）
A．實驗前必須給小鼠甲注射病毒A是為了得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細胞
B．將小鼠體內(nèi)取出的脾臟用剪刀剪碎后加入胃蛋白酶處理，使其分散成單個細胞
C．篩選1需用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選才能獲得融合的雜交痛瘤胞
D．篩選2利用96孔板經(jīng)1次篩選獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的雜交瘤細胞
4．肉蓯蓉具有較高的藥用價值，自然條件下的產(chǎn)量較低，其次生代謝產(chǎn)物苯乙醇苷(PeGs)是主要活性成分。研究人員以外植體誘導出愈傷組織，進一步進行細胞懸浮培養(yǎng)。在不同的初始接種濃度下培養(yǎng)一段時間后，對懸浮培養(yǎng)液的PeGs進行測定，結果如下圖所示。下列有關敘述不正確的是（ ）
A．植物細胞培養(yǎng)的目的主要是獲得植物生長和生存所必需的次生代謝產(chǎn)物
B．若工廠化大量生產(chǎn)PeGs細胞懸浮培養(yǎng)時就應選擇接種細胞的濃度為3.2g·L-1
C．若需進一步了解細胞生成PeGs的能力，則要檢測培養(yǎng)后培養(yǎng)液中的細胞密度
D．植物組織培養(yǎng)時，應對外植體進行滅菌處理以防止培養(yǎng)基及愈傷組織污染
5．下列關于植物愈傷組織的說法正確的是（　　）
A．用果膠酶和膠原蛋白酶去除愈傷組織的細胞壁獲得原生質體
B．融合的原生質體需再生出細胞壁后才能形成愈傷組織
C．體細胞雜交獲得的雜種植株細胞中具有來自親本的2個細胞核
D．通過愈傷組織再生出多個完整植株的過程屬于無性繁殖
題型6 植物細胞工程和光合作用關聯(lián)大題
1．銀杏葉中的黃酮醇具有重要的藥用價值。為探究紅藍光質比例對銀杏幼苗光合特性及黃酮醇含量的影響，科研人員以銀杏幼苗為實驗材料，在適宜的光照強度下，設置紅藍光組合比例分別為1∶1（1R1B）、1∶3（1R3B）、1∶5（1R5B）和白光（W，對照）4種光質處理，處理20d后檢測銀杏凈光合速率、氣孔導度、胞間CO2濃度及總黃酮醇含量，結果如圖所示。
(1)由圖可知，實驗組的凈光合速率都比對照組高，原因是 。實驗組凈光合速率的變化主要由非氣孔因素導致，原因是 。
(2)不同比例紅藍光對銀杏葉總黃酮醇含量的影響為 。黃酮醇是銀杏葉細胞的次生代謝物，與傳統(tǒng)的從銀杏葉中提取黃酮醇相比， 技術可實現(xiàn)黃酮醇的工廠化生產(chǎn)，培養(yǎng)過程中需要定期更換培養(yǎng)液的目的 。（答出兩點）
(3)除光質外，光照和黑暗交替頻率也可以影響銀杏的光合產(chǎn)物積累量。研究人員采用光照、黑暗交替進行的方式處理生理狀態(tài)相同的銀杏幼苗，其中光照和黑暗的總時長相同。結果發(fā)現(xiàn)隨著光暗交替次數(shù)的增加和交換頻率的加快，銀杏幼苗有機物的積累量逐漸增加，請從光合作用的過程角度分析，出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因 。
2．我國鹽堿地具備開發(fā)種植潛力的面積約有5億畝，鹽堿耕地超過1億畝。鹽堿地是重要的土地資源，開發(fā)好、利用好鹽堿地，對保障中國糧倉、中國飯碗將起到重要作用。科學家將主效耐堿基因AT1導入小麥的愈傷組織，從而獲得了小麥的耐鹽堿組織，實驗過程用到的部分結構如下圖。請據(jù)圖回答問題：
(1)已知A位點和B位點分別是起始密碼子和終止密碼子對應的基因位置，擴增基因選用的引物組合應為 。AT1基因以b鏈為轉錄模板鏈，為了使AT1基因按照正確的方向與質粒連接，在引物1的 端添加 的酶切位點。
(2)擴增AT1基因時，PCR反應中不能使用普通DNA聚合酶的原因是 ，在構建AT1基因表達載體時，為使AT1基因定向插入Ti質粒，既避免AT1和Ti質粒自身連接成環(huán)或反向連接，通常采取的措施是 。
(3)培育轉基因植株時，培養(yǎng)基中加入蔗糖的作用是 （答出兩點），組織培養(yǎng)15～20d后，將愈傷組織轉接到誘導生芽的培養(yǎng)基上，發(fā)現(xiàn)只生根不生芽，可能的原因是 。
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