資源簡介

高2023級2024-2025學年度下期第二次月考
生 物 試 題
一、選擇題 （共16題，每題3分，共48分。在每題列出的四個選項中，選出最符合題目要求的一項）。
1．2021年3月，習近平總書記在考察武夷山國家公園時指出，建立以國家公園為主體的自然保護地體系，保持自然生態系統的原真性和完整性，保護生物多樣性。根據以上精神，結合生物學知識，下列敘述錯誤的是（ ）
A.在國家公園中引人外來物種，有可能導致生物多樣性下降
B.建立動物園和植物園，能夠更好地對瀕危動植物進行就地保護
C.規范人類活動、修復受損生境，有利于自然生態系統的發育和穩定
D.在破碎化生境之間建立生態廊道，是恢復自然生態系統完整性的重要措施
2. 嗜鹽單胞菌可利用海水合成聚羥基脂肪酸酯（PHA，一種新型生物塑料），在細胞內形成由膜包裹的不溶性顆粒。科研人員從海水中分離得到一株嗜鹽單胞菌，在非滅菌、高鹽、高pH的發酵液中連續發酵生產PHA，其流程如下圖所示。下列相關敘述不正確的是（ ）
A. 利用含PHA的選擇培養基篩選嗜鹽單胞菌
B. 高鹽、高pH的發酵液抑制了雜菌生長
C. 培養液上清循環利用，有利于節約物質和能量
D. 發酵完成后收集沉淀的菌體以得到PHA
3. 為解決中藥藿香種質退化、易感染病蟲害等問題，研究者對組織培養不同階段的藿香進行輻射處理，以期獲得性狀優良的突變株。
據圖分析，相關敘述正確的是（ ）
①②應持續照光以誘導外植體的再分化
③④過程細胞表達基因種類和水平相同
培養材料在射線的作用下發生定向突變
篩選出的優良突變株可再進行快速繁殖
4．某湖泊早年受周邊農業和城鎮稠密人口的影響，常年處于C02過飽和狀態。經治理后，該湖泊生態系統每年的有機碳分解量低于生產者有機碳的合成量，實現了碳的零排放。下列敘述錯誤的是( )
A.低碳生活和綠色農業可以減小生態足跡
B.水生消費者對有機碳的利用，緩解了碳排放
C.湖泊沉積物中有機碳的分解會隨著全球氣候變暖而加劇
D.在湖泊生態修復過程中，適度提高水生植物的多樣性有助于碳的固定
5. 下圖為幼鼠腎臟上皮細胞培養過程示意圖，已知腎臟上皮細胞屬于需要貼附于某些基質表面才能生長增殖的細胞。
下列敘述不正確的是（ ）
A. 甲→乙過程需要用機械的方法和特定的酶處理
B. 丙過程會出現細胞貼壁生長和接觸抑制的現象
C. 丙在CO2培養箱中培養以維持培養液pH相對穩定
D. 丁過程為傳代培養，利用了動物細胞全能性的原理
6. 科學家將某些誘導基因轉入小鼠成纖維細胞中成功獲取誘導多能干細胞，這類細胞可用于一系列的研究，具體過程如下圖所示。
以下說法錯誤的是（ ）
A. 干細胞具有自我更新能力和分化潛能
B. 過程③可用物理、化學等方法誘導
C. 還可通過導入特定蛋白來實現過程①
D. 過程④裂解丁細胞后獲得單克隆抗體
7. 2017年，我國科學家培育出轟動世界的體細胞克隆猴“中中”和“華華”，下圖為其培育流程。下列相關敘述錯誤的是（ ）
過程①可將成纖維細胞顯微注射到去核卵母細胞的透明帶
過程②通常需在液體培養基中加入血清等天然成分
C 該過程需用到體外受精、細胞培養和胚胎移植技術
D.體細胞核移植技術的難度明顯高于胚胎細胞核移植
8. 研究者通過下圖所示的操作過程，獲得導入S基因的基因編輯小鼠。
下列相關敘述正確的是（ ）
A. 過程①獲得的卵母細胞需培養至MⅡ期
B. 過程②在雌鼠a的輸卵管內完成受精
C. 過程③需將表達載體注射到子宮中
D. 過程④需抑制雌鼠b對植入胚胎的免疫排斥
9. 反向PCR是一種通過已知序列設計引物對未知
序列（圖中L、R）進行擴增的技術，其過程如下圖所示。下列相關敘述不正確的是（ ）
A. 過程①用同一種限制酶對未知序列兩端進行切割
B. 過程②需要使用DNA連接酶，形成磷酸二酯鍵
C. 過程③PCR體系需要添加DNA聚合酶和解旋酶
D. 該技術可檢測T-DNA整合到植物染色體DNA的位置
10.如圖為“土壤中分解尿素的細菌的分離與計數”實驗操作流程，下列說法正確的是（ ）
A.實驗中選擇培養基含有無機鹽、葡萄糖、尿素、蛋白胨、瓊脂、水等物質
B.培養基用高壓蒸汽滅菌后，將pH調至中性或弱堿性
C.平均每克土壤中分解尿素的細菌數約為2.2×108個
D.為判斷培養基的選擇作用，需設置未接種的培養基作對照
11. 巢式PCR是一種特殊的聚合酶鏈式反應，使用兩組不同的引物實現目標DNA片段的擴增。第一組外引物擴增出的DNA片段(中間產物)長度超出目標區域，第二組內引物稱為巢式引物，其結合部位在中間產物內部的目標區域，從而擴增出目標產物，具體過程如圖所示。下列有關敘述錯誤的是(　　)
A. 巢式PCR反應體系中所用的兩組引物需先后加入
B. 巢式PCR過程中反應溫度最低的一步是復性階段
C. 若直接用內引物對模板DNA擴增，不易得到目標產物
D. 巢式PCR獲得的產物與常規PCR相比特異性更低
12. 為利用鏈霉菌生產藥物A，研究者構建重組DNA并導入鏈霉菌。重組DNA含啟動子P、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）,兩個基因可共同表達。培養和篩選過程如下圖所示。
下列敘述不正確的是（ ）
A. 導入成功的鏈霉菌細胞內可能發生基因重組
B. 誘變處理可能獲得產藥物A能力更強的菌株
C. 卡那霉素抗性強弱可反映藥物A基因的表達強度
D. 應選用b培養基上的菌株作為工程菌生產藥物A
13. 快速、準確地確定蛋白質的三維空間結構，一直是生命科學領域的研究熱點和難點。人工智能程序AlphaFold 2對大部分蛋白質結構的預測極為精準，接近真實的蛋白質結構，達到了人類利用冷凍電鏡等復雜儀器觀察預測的水平。下列相關敘述不正確的是（ ）
A. 蛋白質的氨基酸序列是預測其空間結構的重要基礎
B. 預測、設計并制造新蛋白質的技術屬于蛋白質工程
C. 結構預測能幫助揭示蛋白質分子間相互作用的機制
D. 依據新蛋白質的氨基酸序列能推出唯一的基因序列
14. 下列與高中生物學實驗相關的敘述中，不合理的是（ ）
A. 接種環和涂布器在使用前后均需要進行灼燒滅菌
B. DNA粗提取時使用酒精溶解DNA使之與蛋白質分離
C. 通過調整培養基中植物激素的比例誘導愈傷組織分化
D. 通過改變反應體系的溫度來控制PCR反應的進程
15. 如圖1表示的是細胞內DNA復制的過程，圖2表示圖1 中RNA引物去除并修復的過程。下列相關敘述錯誤的有(　　)
　　　　圖1　　　　　　　　圖2
A. 兩條子鏈合成過程所需的RNA引物數量不同
B. 酶1、2可催化RNA降解，去除引物
C. 酶3是DNA聚合酶，需要新增加引物才能合成DNA單鏈
D. 酶4是DNA連接酶，催化兩個DNA單鏈片段的連接
16．隨著轉基因成果的不斷涌現，人們對轉基因生物安全性的關注與日俱增。下列敘述中不正確的是（ ）
A．轉基因生物不會對生物多樣性構成威脅
B．對農業轉基因生物的生產應該嚴格控制，以避免產生對人類有害的物質
C．一旦發現轉基因生物出現了安全性問題，應該馬上停止實驗，并銷毀重組生物
D．外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，有可能會出現意想不到的后果
二、非選擇題（共52分）
17. (12分）豆汁是久負盛名的傳統風味名吃，以其獨特的風味及豐富的營養深受當地居民的喜愛。下圖是以綠豆為原料制備豆汁的傳統工藝流程。在此過程中，淀粉分離和發酵產酸是豆汁加工的關鍵工序。
（1）豆汁中的酸味主要來自乳酸菌在________條件下所產生的乳酸，綠豆液中的糖類為乳酸菌的生命活動提供了__________，乳酸發酵的反應簡式是____________________。（2分）
（2）研究人員通過篩選豆汁中的發酵菌株，優化發酵工藝。將額外添加了碳酸鈣（酸性條件下分解）培養基經______________法滅菌后倒平板，將經自然發酵得到的生豆汁采用__________________法接種于平板上，進行分離和計數。在適宜條件下培養一段時間后，選取培養基上________（選填“有”或“沒有”）碳酸鈣溶解圈的菌落，進一步純化和培養。
（3）將得到的乳酸菌分別接種到綠豆液后，在相同條件下，檢測相關指標，結果見下表。應優先選取菌株__________作為優化發酵工藝的菌種，理由是__________________。（2分）
菌株類型 檢測指標 菌株A 菌株B 菌株C 菌株D
絮凝率（%） 51.61 65.42 53.87 61.37
發酵液pH 3.59 4.09 4.15 3.78
豆汁風味 腐味 清香味 清香味 弱清香味
注：絮凝率與淀粉沉降分離速度正相關，淀粉沉降分離速度越快，豆汁品質越佳。
若要對篩選出的菌株進行工業化生產，還需研究其進行發酵的最佳條件，為此請提出一個可以進一步研究的問題______________________________________________。（2分）
18.（11分） 常規種植的棉花（陸地棉）含有棉酚，具有一定毒性，主要分布在莖、葉、苞片、鈴殼及種子里的許多黑色細小的腺體中，高棉酚植株這些腺體也比較豐富。科研人員選取低棉酚的野生棉（2n=26）和品質好的陸地棉（4n=52）來培育棉酚含量低且品質好的棉花新品種。
（1）科研人員用__________________酶處理野生棉和陸地棉的懸浮細胞，分別獲得兩種棉的原生質體。
（2）將紫外線處理后的野生棉原生質體與陸地棉原生質體用化學誘導劑_______誘導融合，獲得的原生質體經過__________過程，成為完整植物細胞，進而分裂和脫分化形成______，最終經過_________過程形成完整的再生植株。
（3）①用特異性引物對陸地棉和野生棉基因組DNA進行PCR擴增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。圖2是用該引物對雙親及再生植株1~6進行PCR擴增的結果。據圖判斷，再生植株1~6中屬于雜種植株的有_____________________。（2分）
②在個體水平上，可通過觀察雜種植株______________________________________，（2分）篩選出低棉酚的雜種植物，并對其產棉品質進行鑒定，以獲得所需棉花新品種。
（4）上述培育棉花新品種所用到的生物技術稱為_______________________，該技術的原理是__________________________________________________________________。（2分）
(
ADC
抗體
藥物
接頭
)19．（8分）單克隆抗體特異性強、靈敏度高，可以大量制備，已被廣泛應用于疾病的診斷和治療。用H7N9病毒制備單克隆抗體的流程如下圖所示：
（1）過程①常用的酶 。向小鼠體內注射抗原蛋白的目的是 。細胞Ⅱ應具有的特點是 。（2分）
（2）對于轉基因成功的細胞Ⅱ還要進行克隆化培養和 檢測。
（3）可以利用蛋白質工程技術對抗H7N9抗體進行改造以延長其體外保存的時間，蛋白質工程的操作手段通過 來間接的改造蛋白質。
（4）單克隆抗體還可以用于抗體—藥物偶聯物（ADC），實現對腫瘤細胞的選擇性殺傷。ADC中抗體主要作用是 ，殺傷腫瘤細胞的是 。
20. (11分)人的血清蛋白(HSA)具有重要的醫用價值，研究人員欲用乳腺生物反應器來大量生產HSA。圖1為HSA基因片段和人工構建的大腸桿菌質粒pBR322，其中Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Neor表示新霉素抗性基因，箭頭表示切割形成末端完全不同的4種限制酶的切割位點。HSA只能從血漿中制備，以基因工程技術獲取重組HSA(rHSA)的三條途徑如圖2所示。請回答下列問題。
(
轉錄方向
)
圖1 圖2
(1) 據圖1分析，選擇限制酶_________________切割質粒和目的基因，可提高目的基因和載體的正確連接率。雙酶切法的優點之一是避免質粒與目的基因之間的___________________________。
(2) 為了排除普通受體細胞(未導入質粒)、空質粒受體細胞(導入pBR322質粒而非重組質粒)的干擾，目的基因導入后進行了進一步篩選：制備甲、乙兩種培養基，甲培養基中有新霉素，乙培養基中有氨芐青霉素，含重組質粒的受體細胞在甲培養基上__________(填“能”或“不能”)生存，在乙培養基上__________(填“能”或“不能”)生存。
(3) 將農桿菌與水稻受體細胞混合后共同培養，旨在讓Ti質粒的T DNA進入水稻受體細胞。常用____________標記的目的基因片段作為探針檢測目的基因是否整合到受體細胞的染色體DNA上。為檢測目的基因的表達情況，可提取受體細胞的蛋白質，用________________進行雜交實驗。
(4) 人體合成的初始HSA多肽，需要經過加工形成正確的空間結構才能有活性。與圖2中途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優勢是水稻具有______________（填細胞器名稱），能對初始HSA進行高效加工。為證明rHSA具有醫用價值，需確認rHSA與____________________的生物學功能一致。
(5) 科學家培養出一種轉基因羊，其膀胱上皮細胞可以合成人血清白蛋白并分泌到尿液中。其培育方法中將重組質粒通過_____________法導入山羊的________細胞。與乳腺生物反應器相比，膀胱生物反應器不受________________限制，受體來源更廣泛。
21. (10分)SLA 2基因是豬白細胞抗原基因，在動物免疫應答中發揮作用。為研究SLA 2基因的結構和功能，科研人員克隆到SLA 2基因，先構建大腸桿菌質粒A，再增加特異性啟動子后，構建真核表達質粒B后，然后轉化感染豬腎上皮細胞，進行后續研究，其主要過程如下圖(質粒中數字代表限制酶切點與復制原點間的距離)。請回答下列問題。
限制酶 BclⅠ NotⅠ XhaⅠ Sau3AⅠ
識別序列及切割位點 T↓GATCA ACTAG↑T GC↓GGCCGC CGCCGG↑CG T↓CTAGA AGATC↑T ↓GATC CTAG↑
(1) 從豬基因組中特異地克隆出SLA 2基因的關鍵是__________________，依據基因片段的大小，實驗室可利用________________技術初步鑒定該基因。
(2) 限制酶BclⅠ與Sau3AⅠ切割相同DNA形成的黏性末端是否相同？___________，其中________在該DNA上的切點可能更多。
(3) 下列引物序列中，圖示過程①中的引物是________。為提高SLA 2基因的表達量，研究人員同時對基因的5′端序列進行密碼子優化設計(如GGT優化為GGC)，優化的序列位于基因的______________(填“編碼區”“編碼區上游”或“編碼區下游”)，這種優化實現的變異屬于____________________。
A. 5′—GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC—3′
B. 5′—GTTGCGGCCGCTCACACTGTGGCTTGGTAACAC—3′
C. 5′—GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAATCCTC—3′
D. 5′—GTTTGATCACTCACACTCTAGGCCCTTGGTC—3′
(4) 過程②和過程⑤中均構建了重組質粒，其中屬于真核表達質粒是在過程________中構建的，這類表達質粒上必須有目的基因、________________________________等結構，其目的是____________________________________________。
2025年春季高2023級第二次月考
生物試題
選擇題
1-5 BADBD 5-10DCACC 10-15BDDBC 16A
二、非選擇題
17.（12分）
（1）①. 無氧 ②. 碳源（和能源）
③. C6H12O62C3H6O3+少量能量（2分 ）
（2）①. 高壓蒸汽滅菌 ②. 稀釋涂布平板法 ③. 有
（3）①. B ②. 菌株B的發酵液酸味柔和有清香味，且絮凝率高（2分 ）
（4）單位時間、單位體積的最適接種量、發酵條件最適發酵溫度和pH、最佳發酵時間等。（2分 ）
18.（11分）
（1）纖維素酶、果膠酶
（2） ①. 聚乙二醇PEG ②. 再生細胞壁 ③. 愈傷組織 ④. 再分化
（3） ①. 1、3、5、6 ②. 莖、葉等結構中黑色細小腺體的數量（2分 ）
（4） ①. 植物體細胞雜交技術 ②. 細胞膜的流動性、細胞全能性（2分 ）
19.（8分）
（1）逆轉錄酶 產生已免疫B淋巴細胞（能產生抗體的B淋巴細胞） 既能無限增殖，又能產生特異性抗體（2分 ）
(2)（專一）抗體
(3)改造或者合成基因
（4）靶向運輸藥物，并識別腫瘤細胞 藥物
20. （11分）
(1) EcoRⅠ和PstⅠ　 反向連接　
(2) 能　 不能　
(3) 放射性同位素(或熒光)　 抗人血清蛋白(HSA)的抗體　
(4) 內質網、高爾基體 　 HSA　
(5) 顯微注射　受精卵　性別和年齡
21. （10分）
(1) 設計特異性引物　 凝膠電泳　
(2) 相同　Sau3AⅠ　
(3) B、C　編碼區　基因突變
(4) ⑤ 啟動子、終止子　保證目的基因能夠轉錄(表達)
答案：
1.【答案】B 最好的保護方式是就地保護，建立自然保護區，國家森林公園等
2【答案】A
【詳解】A、嗜鹽單胞菌可利用海水合成PHA，不能用含PHA選擇培養基篩選嗜鹽單胞菌，A錯誤；
B、高鹽、高pH的發酵液使雜菌因失水過多或蛋白質變性而死亡，故可抑制雜菌生長，B正確；
C、培養液上清可以循環利用，可避免物質和能量的浪費，有利于節約物質和能量，C正確；
D、嗜鹽單胞菌可利用海水合成PHA，在細胞內形成由膜包裹的不溶性顆粒，因此發酵完成后收集沉淀的菌體以得到PHA，D正確。
故選A。
3.【答案】D
【詳解】A、①和②脫分化，不需要持續光照，A錯誤；
B、③誘導生芽，④過程誘導生根，二者基因表達種類不同，水平不同，B錯誤；
C、射線為物理誘變因素，導致基因不定向突變，C錯誤；
D、篩選出的優良突變株可以再進行快速繁殖，進而能保持親本的優良遺傳特性、繁殖種苗的速度快，D正確。
故選D。
4【答案】B 消費者呼吸作用利用有機碳，會產生二氧化碳，不會緩解碳排放
5【答案】D
【詳解】A、甲→乙過程表示將組織塊分散成單個細胞，需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理，A正確；
B、丙過程表示原代培養，對于需要貼附于某些基質表面才能生長增殖的細胞而言，在培養過程中會出現細胞貼壁和接觸抑制現象，B正確；
C、丙過程表示原代培養，在CO2培養箱中培養，CO2可以維持培養液pH相對穩定，D正確；
D、丁過程是傳代培養過程，利用細胞增殖的原理，D錯誤。
故選D。
6【答案】D
【詳解】A、干細胞是具有分裂分化能力的細胞，具有自我更新能力和分化潛能，A正確；
B、過程③為細胞融合成雜交細胞的過程，可用物理、化學等方法誘導，B正確；
C、科學家已嘗試采用多種方法來制備iPS細胞（誘導多能干細胞），包括借助載體將特定基因導入細胞中，直接將特定蛋白導入細胞中或者用小分子化合物等來誘導形成iPS細胞，C正確；
D、雜交瘤細胞可分泌抗體，不需要裂解細胞，D錯誤。
故選D。
7.【答案】C
【詳解】A、圖示的是動物細胞核移植技術，①代表利用顯微注射將成纖維細胞注射到去核的卵母細胞中，A正確；
B、進行體外動物細胞培養需要在培養基中添加血清等天然成分，培養基物理狀態為液體培養基，B正確
C、圖中過程需用到細胞培養、胚胎移植等技術，沒用到體外受精技術，C錯誤；
D、體細胞分化程度高全能性低，胚胎細胞分化程度低全能性高，因此體細胞核移植技術的難度明顯高于胚胎細胞核移植，D正確。
故選C。
8.【答案】A
【詳解】A、卵母細胞需要培養到MⅡ期才具備與精子受精的能力，因此過程①獲得的卵母細胞需培養至MⅡ期，A正確；
B、過程②是體外受精，體外受精是將獲能的精子和培養成熟的卵子置于適當的培養液中共同培養一段時間，來促使它們完成受精，B錯誤；
C、③是導入含S基因的表達載體，應該將含S基因的表達載體通過顯微注射法注射至小鼠的受精卵中，C錯誤；
D、受體對移入子宮的外來胚胎不發生免疫排斥反應，故過程④不需要抑制雌鼠b對植入胚胎的免疫排斥，D錯誤。
故選A。
9.【答案】C
【詳解】A、由圖可知，過程①即酶切后，已知序列能環化，說明兩端的黏性末端相同，故過程①是用同一種限制酶對未知序列兩端進行切割，A正確；
B、過程②即環化，將DNA片段連接起來，該過程中使用DNA連接酶催化相鄰核苷酸之間形成磷酸二酯鍵，B正確；
C、過程③即PCR擴增，PCR體系需要添加耐高溫的DNA聚合酶，不需要解旋酶解旋斷氫鍵，高溫變性即可斷開DNA分子的氫鍵，C錯誤；
D、PCR分析可以使用一種叫做引物的專用分子，它能夠識別被復制的DNA并且在指定的區域進行復制。引物的位置很重要，因為以給定的位置與目的基因互補。如果目的基因已經整合到染色體DNA上，那么PCR產物（也就是復制得到的DNA）就會在對應的位置出現。可以快速確認目的基因是否整合到染色體DNA上，因此該技術可檢測T-DNA整合到植物染色體DNA的位置，D正確；
故選C。
【答案】C
A篩選尿素分解菌，應該以尿素作為唯一碳源
B.應該選調節Ph在滅菌
C.稀釋倍數為105根據計算公式C/V×M 228/0.1×105=2.28×108
D.為判斷培養基的選擇作用，需設置接種在基礎培養基（牛肉膏蛋白胨培養基），選擇培養基上菌落數應該明顯少于選擇培養基
11.【答案】D
A. 巢式PCR反應體系中所用的兩組引物需先后加入，第一組外引物擴增出的DNA片段(中間產物)長度超出目標區域，第二組內引物稱為巢式引物，其結合部位在中間產物內部的目標區域，從而擴增出目標產物。正確
B. 巢式PCR過程中反應溫度最低的一步是復性階段 變性90 復性50 延伸72。正確
C. 若直接用內引物對模板DNA擴增，模板鏈較長，容易增加非特異性片段，不易得到目標產物。正確
D. 巢式PCR獲得的產物與常規PCR相比特異性更低。特異性應該更高 錯誤
12.【答案】D
【詳解】A、導入成功的鏈霉菌細胞內可能發生基因重組，目的基因會插入到受體細胞的基因組中，發生的可遺傳變異類型為基因重組，A正確；
B、基因突變可能大幅度提升生物的優良性狀，因此誘變處理可能獲得產藥物A能力更強的菌株，B正確；
C、藥物A基因和Neo基因（卡那霉素抗性基因）共用一個啟動子，二者共同表達，所以卡那霉素抗性強弱可反映藥物A基因的表達量，C正確；
D、誘變處理后將菌液稀釋后涂布，在含不同濃度卡那霉素的培養基上各接種等量同一稀釋度的培養液，應該選擇含卡那霉素濃度最高的培養基（即d）上所長出的菌落，其生產藥物A的能力也較強，D錯誤。
故選D。
13.【答案】D
【詳解】A、蛋白質多樣性與組成蛋白質的氨基酸的種類、數目、排列順序及肽鏈盤曲折疊形成的蛋白質的空間結構不同有關，因此蛋白質的氨基酸序列是預測其空間結構的重要基礎，A正確；
B、蛋白質工程是指以蛋白質分子的結構規律及其生物功能的關系作為基礎，通過化學、物理和分子生物學的手段進行基因修飾或基因合成，對現有蛋白質進行改造，或制造一種新的蛋白質，以滿足人類對生產和生活的需求，因此預測、設計并制造新蛋白質的技術屬于蛋白質工程，B正確；
C、結構決定功能，結構預測能幫助揭示蛋白質分子間相互作用的機制，C正確；
D、一個氨基酸的密碼子可能有多個，因此依據新蛋白質的氨基酸序列能推出多個基因序列，D錯誤。
故選D。
14.【答案】B
【詳解】A、為了防止雜菌污染和感染操作者，每次接種前后，接種環和涂布器在使用前后均需要進行灼燒滅菌，A正確；
B、DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精，可利用這個特性將DNA與蛋白質分離，B錯誤；
C、細胞分裂素與生長素的比例可以影響細胞分化的方向，因此通過調整細胞分裂素與生長素的比例可誘導愈傷組織形成完整的植株，C正確；
D、PCR反應中，每次循環一般分為變性（超過90°C）、復性（50°C左右）和延伸（72°C左右），所以通過改變體系中的溫度，控制PCR的反應進程，D正確。
故選B。
C
【解析】A. 兩條子鏈合成過程所，其中一條子鏈合成多段岡崎，每一個片段需要一個引物，而另一條子鏈完整合成。
B. 由圖可知酶1、2可催化RNA降解，去除引物
C. 酶3是DNA聚合酶，延子鏈片段5’→3’合成，不需要另外添加引物 錯誤
D. 酶4是DNA連接酶，催化兩個DNA單鏈片段的連接
16【答案】A
【詳解】A.轉基因生物可能會對生物多樣性構成威脅，A錯誤；
B.應該嚴格選擇轉基因植物的目的基因，以避免產生對人類有害的物質，B正確；
C.一旦發現轉基因生物出現了安全性問題，應該馬上停止實驗，并銷毀重組生物，C正確；
D.外源基因插入宿主基因組的部位往往是隨機的，有可能會出現意想不到的后果，D正確。
17.【答案】
（1） ①. 無氧 ②. 碳源（和能源） ③. C6H12O62C3H6O3+少量能量
（2） ①. 高壓蒸汽滅菌 ②. 稀釋涂布平板法 ③. 有
（3） ①. B ②. 菌株B的發酵液酸味柔和有清香味，且絮凝率高
（4）單位時間、單位體積的最適接種量、發酵條件最適發酵溫度和pH、最佳發酵時間等。
解析：（1）乳酸菌是厭氧型細菌，需在無氧條件下進行發酵。綠豆液中的糖類為乳酸菌的生命活動提供了碳源，乳酸發酵的反應簡式是C6H12O62C3H6O3+少量能量。
（2）對培養基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。滅菌后倒平板，將經自然發酵得到的生豆汁采用稀釋涂布平板法接種于平板上，進行分離和計數。產酸菌能在含CaCO3的培養基上產生溶解圈，故需選取由碳酸鈣溶解圈的單菌落作為目的菌種，采用稀釋涂布平板法進一步純化，挑選出碳酸鈣溶解圈大的菌落作為目標菌株擴大培養。
（3）對比表中A、B、C、D四種菌株，菌株B發酵液中酸味柔和、有清香味，絮凝率最高，可作為優化發酵工藝的菌種。
（4）菌株發酵需要在特定條件下進行，若要對篩選出的菌株進行工業化生產，還需研究其進行發酵的最佳條件，可從單位時間、單位體積的最適接種量；最適溫度；最佳的發酵時長等方面進行研究。
18.【答案】（1）纖維素酶、果膠酶
（2）B、C、A （3） ①. 聚乙二醇 ②. 再生細胞壁 ③. 愈傷組織 ④. 再分化
（4） ①. 1、3、5、6 ②. 莖、葉等結構中黑色細小腺體的數量
（5） ①. 植物體細胞雜交技術 ②. 細胞膜的流動性、細胞全能性
【解析】（1） 進行植物體細胞雜交，首先需用纖維素酶和果膠酶處理野生棉和陸地棉的懸浮細胞，去除細胞壁，獲得各自獲得有活力的原生質體。
（2）一定劑量的紫外線處理野生棉原生質體，可破壞部分染色體。用流式細胞儀測定上述各種原生質體細胞的DNA含量，據圖1可知，圖A中大多數細胞的DNA含量約為100，圖B中大多數細胞的DNA約等于50，圖C細胞中DNA含量差異較大，未經處理的野生棉、紫外線處理后的野生棉、陸地棉細胞的檢測結果依次為圖中B、C、A。
（3） 將紫外線處理后的野生棉原生質體與陸地棉原生質體用化學誘導劑聚乙二醇（PEG） 誘導融合，形成的融合細胞經過細胞壁再生，成為完整細胞，進而分裂和脫分化形成愈傷組織，經過再分化形成完整的再生植株。
（4）①雜種植株含有兩個親本的遺傳物質，據圖可知，1、3、5、6含有兩個親本的遺傳物質，屬于雜種植株。
②棉酚主要分布在莖、葉、苞片、鈴殼及種子里的許多黑色細小的腺體中，對雜種植株可通過觀察莖、葉黑色細小腺體的多少，篩選出低酚的雜種植物。
（5）上述培育棉花新品種所用到的生物技術稱為植物體細胞雜交技術，植物體細胞雜交技術的原理：細胞膜的流動性、細胞的全能性。
19.【答案】（1） 逆轉錄酶 產生已免疫B細胞 既能無限增殖，又能產生特異性抗體 （2）（專一）抗體 改造或者合成基因
1、單克隆抗體的制備流程：人工誘導經過免疫的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合，再經篩選獲得能產生特定抗體的雜交瘤細胞，通過培養獲得的雜交瘤細胞得到單克隆抗體。
2、動物細胞培養需要滿足以下條件：
（1）充足的營養供給--微量元素、無機鹽、糖類、氨基酸、促生長因子、血清等。
（2）適宜的溫度：36.5℃±0.5℃；適宜的pH：7.2～7.4。
（3）無菌、無毒的環境：培養液應進行無菌處理，通常還要在培養液中添加一定量的抗生素，以防培養過程中的污染，此外，應定期更換培養液，防止代謝產物積累對細胞自身造成危害。
（4）氣體環境：95%空氣+5%CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養液的pH。
【詳解】（1）過程①是逆轉錄過程，常用的酶是逆轉錄酶；向小鼠體內注射抗原蛋白的目的是引起小鼠的特異性免疫，使小鼠產生已免疫的B淋巴細胞；細胞Ⅱ為雜交瘤細胞，具有既能無限增殖，又能產生特異性抗體的特點。
（2）對于轉基因成功的細胞Ⅱ還要進行克隆化培養和抗體檢測，以確保細胞能產生特異性抗體。
（3）可以利用蛋白質工程技術對抗H7N9抗體進行改造以延長其體外保存的時間，蛋白質工程的操作手段有改造基因和合成基因。
（4）抗體主要發揮靶向運輸作用，即通過特異性結合靶細胞表面抗原，將連接的藥物輸送到靶細胞；藥物發揮治療效應，殺傷靶細胞
20. (1) EcoRⅠ和PstⅠ　反向連接　(2) 能　不能　(3) 放射性同位素(或熒光)　抗人血清蛋白(HSA)的抗體　(4) 內質網 高爾基體 　HSA　(5) 顯微注射　受精卵　性別和年齡
解析：(1) 據圖1可知，BamH Ⅰ會切割目的基因，TthⅢ 1會切割質粒中的復制原點，而EcoRⅠ和PstⅠ這兩種酶能切割質粒和目的基因，不破壞Neor抗性基因和復制原點等，且能得到不同的黏性末端，避免質粒和目的基因自連及反向連接，因此在構建基因表達載體時，選擇EcoRⅠ和PstⅠ作為切割質粒和目的基因的限制酶可提高目的基因和載體的正確連接效率。
分析題圖1可知，Pst Ⅰ破壞了氨芐青霉素抗性基因(Ampr)，構建的重組質粒無氨芐青霉素抗性，但具有新霉素抗性基因，而甲培養基中含有新霉素，因此，含重組質粒的受體細胞能在甲培養基上能生存；乙培養基中含有氨芐青霉素，能殺死含有目的基因的受體細胞，不能在乙培養基中生存。
農桿菌細胞內含有Ti質粒，當它侵染植物細胞后，能將Ti質粒上的T DNA(可轉移的DNA)轉移到被侵染的細胞，并且將其整合到該細胞的染色體DNA上，所以將農桿菌與水稻受體細胞混合后共同培養，旨在讓Ti質粒的T DNA進入水稻受體細胞；目的基因片段作為探針檢測目的基因是否整合到受體細胞的染色體DNA上，常用熒光標記(或放射性同位素標記)；為檢測目的基因的表達情況，可提取受體細胞的蛋白質，利用的原理是抗原—抗體特異性結合，所以用抗人血清蛋白(HSA)的抗體進行雜交實驗來檢測血清蛋白(HSA)。(4) 由于大腸桿菌為原核生物，無生物膜系統，而水稻為真核生物，具有生物膜系統，而人體合成的初始HSA多肽，需要經過生物膜系統加工形成正確的空間結構才能有活性，因此與途徑Ⅱ相比，選擇途徑Ⅰ獲取rHSA的優勢是水稻是真核生物，具有生物膜系統，能對初始rHSA多肽進行高效加工；為證明rHSA具有醫用價值，需確認rHSA生物活性和功能與人的血清蛋白(HSA)是否一致。
(5) 將重組質粒通過顯微注射法導入動物的受體細胞時，常選用受精卵作為受體細胞，主要原因是動物受精卵具有發育的全能性，由于生物界共用一套遺傳密碼子，所以人血清白蛋白基因能在山羊膀胱上皮細胞中表達出相應的蛋白質；“乳腺細胞生物反應器”只能從哺乳期雌性動物的乳汁中獲取產物，與“乳腺細胞生物反應器”相比，“膀胱生物反應器”的優點是雌性和雄性動物的尿液中都可提取到產物，且不受性別、年齡等限制，因而受體來源更廣泛。
21. (1) 設計特異性引物　凝膠電泳　(2) 相同　Sau3AⅠ　(3) B、C　編碼區　基因突變　(4) ⑤ 啟動子、終止子　保證目的基因能夠轉錄(表達)
解析：(1) 利用PCR技術克隆出SLA 2基因的關鍵是根據目的基因兩端的堿基序列設計特異性引物。擴增后的產物可依據基因片段的大小，利用凝膠電泳技術初步鑒定該基因。
據圖可知，限制酶BclⅠ與Sau3AⅠ識別的序列不同，但是切割后形成的黏性末端相同，都是—GATC—，其中Sau3AⅠ在該DNA上的切點可能更多。
PCR是在體外進行DNA復制，原理是DNA復制；引物需與經限制酶剪切過的黏性末端互補配對，為防止基因發生自身環化和反向鏈接，需要雙限制酶切，經分析表格中相關限制酶的切割位點和引物序列，氨芐青霉素抗性基因可被BclⅠ識別，Sau3AⅠ為BclⅠ的同尾酶，也可切割氨芐青霉素抗性基因，故選擇XbaⅠ和NotⅠ兩種限制酶，使切割后的質粒A和擴增后的SLA 2基因能正確連接，可知對應引物中應分別包含XbaⅠ和NotⅠ的識別序列，根據XbaⅠ和NotⅠ的識別序列，可知B、C符合題意。研究人員同時對基因的5′端序列進行密碼子優化設計(如GGT優化為GGC)，由于編碼蛋白質的基因序列位于編碼區，故優化的序列位于基因的編碼區，這種優化改變了基因結構，屬于基因突變。
(4) 根據題意“構建真核表達質粒后，轉染豬腎上皮細胞”可知，過程②和過程⑤中均構建了重組質粒，其中屬于真核表達質粒是在過程⑤中構建的，這類表達質粒上必須有目的基因、啟動子、終止子等結構，其目的是保證目的基因能夠轉錄(表達)。

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