資源簡(jiǎn)介

(共23張PPT)
命題點(diǎn)專訓(xùn)(九)　
基因工程及生物技術(shù)的安全性
和倫理問題(選擇題)
題號(hào)
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1．(2024·湖南師大附中模擬)乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌，但耐酸能力較差，影響產(chǎn)量；釀酒酵母耐酸能力較強(qiáng)，但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌內(nèi)催化乳酸生成的乳酸脫氫酶基因(LDH)導(dǎo)入釀酒酵母，獲得能產(chǎn)生乳酸的酵母工程菌株。下圖為通過雙酶切構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程。GTG為原核生物偏好的起
始密碼子編碼序列，ATG為真核生物偏
好的起始密碼子編碼序列。下列說法正
確的是(　　)
A．引物2的3′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列
B．重組質(zhì)粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體
C．PCR反應(yīng)時(shí)，緩沖液中一般要添加Ca2+來激活相關(guān)酶
D．引物1的5′端序列應(yīng)考慮將GTG改為ATG
題號(hào)
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D　[根據(jù)題意可知，含GTG的一端為L(zhǎng)DH基因的起始，為保證通過雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒，設(shè)計(jì)引物1的5′端序列需要包含BamHⅠ的識(shí)別序列，引物2的5′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列，A錯(cuò)誤；結(jié)合題意可知，本過程中重組質(zhì)粒應(yīng)以不能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體，然后在缺乏尿嘧啶的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的釀酒酵母菌株因獲得尿嘧啶合成酶基因而可以正常生存，從而起到篩選作用，B錯(cuò)誤；真核細(xì)胞和細(xì)菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活，因此，PCR反應(yīng)緩沖液中一般要添加Mg2+，C錯(cuò)誤；設(shè)計(jì)引物1的5′端序列，應(yīng)考慮將編碼起始密碼子的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG，以便目的基因在酵母細(xì)胞中更好地表達(dá)，D正確。]
題號(hào)
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2．(2024·浙江杭州二模)某研究小組構(gòu)建了能表達(dá)ACTA1-GFP融合蛋白的重組質(zhì)粒，該重組質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
注：F1和F2表示上游引物，R1和R2表示下游引物。
A．RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)
B．僅用F2和R1一對(duì)引物，即可確定ACTA1基因插入方向是否正確
C．ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與a鏈的部分序列相同
D．若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子
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C　[據(jù)圖可知，ACTA1基因和GFP基因位于啟動(dòng)子和終止子之間，故RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)，A正確；引物F2與R1結(jié)合部位包含ACTA1基因的堿基序列，因此為了確定ACTA1基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確，進(jìn)行PCR檢測(cè)時(shí)，若僅用一對(duì)引物，應(yīng)選擇圖甲中的引物F2和R1，B正確；ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與b鏈均可以和a鏈互補(bǔ)配對(duì)，二者部分序列相同，C錯(cuò)誤；若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，可根據(jù)電泳條帶數(shù)目能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子，D正確。]
題號(hào)
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3．(2024·江蘇南通模擬)下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”和“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯(cuò)誤的是(　　)
A．可將提取到的白色絲狀物與二苯胺試劑充分混勻，沸水浴加熱后變藍(lán)
B．PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶可在延伸過程中起作用
C．凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察
D．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中可利用DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精來粗提DNA
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題號(hào)
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A　[將絲狀物溶于2 mol/L的5 mL的NaCl溶液中，然后向試管中加入4 mL的二苯胺試劑，沸水浴加熱5 min，試管冷卻后溶液呈現(xiàn)藍(lán)色，A錯(cuò)誤；PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶在延伸過程中根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，B正確；用電泳緩沖液配制的瓊脂糖溶液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長(zhǎng)為300 nm的紫外燈下被檢測(cè)出來，C正確；DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理，可以初步粗提取DNA，D正確。]
題號(hào)
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4．(2024·湖北十堰二模)不對(duì)稱PCR是利用不等量的一對(duì)引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)的方法。加入的一對(duì)引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。PCR最初的若干次循環(huán)中，其擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA(dsDNA)，但當(dāng)限制性引物消耗完后，就會(huì)產(chǎn)生大量的ssDNA。不對(duì)稱PCR的簡(jiǎn)單過程如圖所示。假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，
6次循環(huán)后開始擴(kuò)增產(chǎn)生ssDNA。下列敘
述錯(cuò)誤的是(　　)
A．限制性引物和非限制性引物均需要依據(jù)模板DNA的堿基序列來設(shè)計(jì)
B．據(jù)圖可知，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列相同
C．上述過程中子鏈分別沿限制性引物的5′端、非限制性引物的3′端延伸
D．該不對(duì)稱PCR過程中需要(26－1)a個(gè)限制性引物
題號(hào)
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C　[PCR擴(kuò)增時(shí)需要已知目的基因兩側(cè)的堿基序列來設(shè)計(jì)引物，因此限制性引物和非限制性引物均需要依據(jù)模板DNA的堿基序列來設(shè)計(jì)，A正確；當(dāng)限制性引物的濃度降低，甚至基本耗盡，雙鏈 DNA 的合成速率顯著下降，此時(shí)非限制性引物將繼續(xù)引導(dǎo)單鏈 DNA 的合成，非限制性引物是與乙鏈結(jié)合，故反應(yīng)的最后階段只產(chǎn)生初始 DNA 中一條鏈的拷貝(非限制性引物引導(dǎo)合成的單鏈)，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列一致，B正確；擴(kuò)增時(shí)耐高溫的DNA聚合酶將4種脫氧核苷酸連接至引物的3′端，C錯(cuò)誤；PCR擴(kuò)增時(shí)引物是新子鏈的一部分，假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后產(chǎn)生26個(gè)DNA分子，因此該不對(duì)稱PCR過程中需要(26－1)a個(gè)限制性引物，D正確。]
題號(hào)
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5．(2024·北京延慶一模)研究發(fā)現(xiàn)，為心?；颊咦⑸溥m量t-PA蛋白會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血，但若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血等副作用，改良后的t-PA蛋白成為心梗和腦血栓的急救藥。下圖所示，通過基因工程大量制備改良藥物t-PA蛋白，下列說法錯(cuò)誤的是(　　)
題號(hào)
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A．制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程
B．利用重組pCLY11質(zhì)粒可獲得牛乳腺生物反應(yīng)器
C．選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割質(zhì)粒pCLY11，構(gòu)建重組質(zhì)粒
D．成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含有新霉素的培養(yǎng)基上能存活，且呈現(xiàn)藍(lán)色
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題號(hào)
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D　[由蛋白質(zhì)工程的概念可知，改良后的藥物t-PA蛋白是由t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸改良而來，因此，制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程，A正確；科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件構(gòu)建重組pCLY11，通過顯微注射的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，由這個(gè)受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥物，這稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器，B正確；t-PA改良基因的黏性末端如圖所示，則所選的限制酶所獲得的切口應(yīng)與t-PA改良基因的黏性末端相同，因此需選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切開質(zhì)粒pCLY11，C正確；結(jié)合圖示可知，限制酶XmaⅠ和BglⅡ會(huì)破壞質(zhì)粒pCLY11上的mlacZ，但不會(huì)破壞新霉素抗性基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌具有新霉素抗性，但由于mlacZ基因被破壞，沒有相應(yīng)產(chǎn)物，因而菌落呈現(xiàn)白色，D錯(cuò)誤。]
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6．(2024·遼寧大連模擬)生物安全是指國家有效防范和應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)生物因子及相關(guān)因素威脅，生物技術(shù)能夠穩(wěn)定健康發(fā)展，人民生命健康和生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)處于沒有危險(xiǎn)和不受威脅的狀態(tài)，生物領(lǐng)域具備維護(hù)國家安全和持續(xù)發(fā)展的能力。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)
B．只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用
C．動(dòng)物飼料中的抗生素會(huì)通過食物鏈?zhǔn)谷梭w微生物耐藥性增強(qiáng)
D．外來入侵物種可能增加本土食物來源卻給自然生態(tài)造成破壞
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題號(hào)
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B　[高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，A正確；只要有證據(jù)表明某轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的使用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，B錯(cuò)誤；長(zhǎng)期使用抗生素，必然產(chǎn)生殘留，而其殘留在動(dòng)物飼料中的抗生素，會(huì)隨著食物鏈進(jìn)入人體引發(fā)微生物的耐藥性，C正確；外來入侵物種可能增加本土食物來源，但如果缺乏天敵會(huì)造成自然生態(tài)破壞，D正確。]
題號(hào)
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7．(不定項(xiàng))(2024·江蘇揚(yáng)州模擬)雙向啟動(dòng)子可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)RNA聚合酶來驅(qū)動(dòng)下游基因的表達(dá)，研究人員構(gòu)建了下圖所示的表達(dá)載體，以檢測(cè)雙向啟動(dòng)子作用效果。下列分析錯(cuò)誤的是(　　)
A．為連入GUS基因，需用SalⅠ和SphⅠ酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒
B．表達(dá)載體中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時(shí)使用T-DNA的同一條DNA單鏈為模板
C．可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，在培養(yǎng)基中添加壯觀霉素進(jìn)行篩選
D．可通過觀察是否出現(xiàn)熒光和藍(lán)色物質(zhì)確認(rèn)雙向啟動(dòng)子是否發(fā)揮了作用
題號(hào)
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ABC　[如果用SphⅠ酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒就會(huì)破壞LUC基因，A錯(cuò)誤；表達(dá)載體中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時(shí)雙向啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄方向不同，使用T-DNA的模板鏈也不同，B錯(cuò)誤；將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，但壯觀霉素抗性基因位于T-DNA序列之外，C錯(cuò)誤；雙向啟動(dòng)子如果正常表達(dá)，就會(huì)合成熒光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分別產(chǎn)生熒光、生成藍(lán)色物質(zhì)，從而確定雙向啟動(dòng)子的作用，D正確。]
題號(hào)
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8．(不定項(xiàng))(2024·湖南長(zhǎng)沙三模)自然界中很少出現(xiàn)藍(lán)色的花，天然藍(lán)色花產(chǎn)生的主要原因是花瓣細(xì)胞液泡中花青素在堿性條件下顯藍(lán)色。我國科學(xué)家利用鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)構(gòu)建基因表達(dá)載體(如下圖，PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ為不同限制酶)，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入白玫瑰中，在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中形成穩(wěn)定顯色的靛藍(lán)。
下列說法不正確的是(　　)
A．上述獲得藍(lán)色玫瑰的方案中需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因
B．將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ
C．sfp和idgS基因表達(dá)時(shí)分別以T-DNA的不同鏈為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄
D．農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰細(xì)胞質(zhì)基因組中防止基因擴(kuò)散
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ABD　[靛藍(lán)能夠穩(wěn)定顯色，不受pH的影響，故本題方案中無需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因，A錯(cuò)誤；結(jié)合圖示可知，將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)若使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ，則會(huì)將終止子一同切除，故只能用BamHⅠ，B錯(cuò)誤；sfp和idgS基因具有各自的啟動(dòng)子，表達(dá)是相互獨(dú)立進(jìn)行的，轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板進(jìn)行的，由啟動(dòng)子方向可知，兩基因轉(zhuǎn)錄的模板不同，C正確；農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色體DNA上，D錯(cuò)誤。]命題點(diǎn)專訓(xùn)(九)　基因工程及生物技術(shù)的安全性和倫理問題(選擇題)
1．(2024·湖南師大附中模擬)乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌，但耐酸能力較差，影響產(chǎn)量；釀酒酵母耐酸能力較強(qiáng)，但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌內(nèi)催化乳酸生成的乳酸脫氫酶基因(LDH)導(dǎo)入釀酒酵母，獲得能產(chǎn)生乳酸的酵母工程菌株。下圖為通過雙酶切構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程。GTG為原核生物偏好的起始密碼子編碼序列，ATG為真核生物偏好的起始密碼子編碼序列。下列說法正確的是(　　)
A．引物2的3′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列
B．重組質(zhì)粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體
C．PCR反應(yīng)時(shí)，緩沖液中一般要添加Ca2+來激活相關(guān)酶
D．引物1的5′端序列應(yīng)考慮將GTG改為ATG
2．(2024·浙江杭州二模)某研究小組構(gòu)建了能表達(dá)ACTA1-GFP融合蛋白的重組質(zhì)粒，該重組質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
注：F1和F2表示上游引物，R1和R2表示下游引物。
A．RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)
B．僅用F2和R1一對(duì)引物，即可確定ACTA1基因插入方向是否正確
C．ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與a鏈的部分序列相同
D．若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子
3．(2024·江蘇南通模擬)下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”和“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯(cuò)誤的是(　　)
A．可將提取到的白色絲狀物與二苯胺試劑充分混勻，沸水浴加熱后變藍(lán)
B．PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶可在延伸過程中起作用
C．凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察
D．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中可利用DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精來粗提DNA
4．(2024·湖北十堰二模)不對(duì)稱PCR是利用不等量的一對(duì)引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)的方法。加入的一對(duì)引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。PCR最初的若干次循環(huán)中，其擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA(dsDNA)，但當(dāng)限制性引物消耗完后，就會(huì)產(chǎn)生大量的ssDNA。不對(duì)稱PCR的簡(jiǎn)單過程如圖所示。假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后開始擴(kuò)增產(chǎn)生ssDNA。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．限制性引物和非限制性引物均需要依據(jù)模板DNA的堿基序列來設(shè)計(jì)
B．據(jù)圖可知，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列相同
C．上述過程中子鏈分別沿限制性引物的5′端、非限制性引物的3′端延伸
D．該不對(duì)稱PCR過程中需要(26－1)a個(gè)限制性引物
5．(2024·北京延慶一模)研究發(fā)現(xiàn)，為心?；颊咦⑸溥m量t-PA蛋白會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血，但若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血等副作用，改良后的t-PA蛋白成為心梗和腦血栓的急救藥。下圖所示，通過基因工程大量制備改良藥物t-PA蛋白，下列說法錯(cuò)誤的是(　　)
A．制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程
B．利用重組pCLY11質(zhì)?？色@得牛乳腺生物反應(yīng)器
C．選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割質(zhì)粒pCLY11，構(gòu)建重組質(zhì)粒
D．成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含有新霉素的培養(yǎng)基上能存活，且呈現(xiàn)藍(lán)色
6．(2024·遼寧大連模擬)生物安全是指國家有效防范和應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)生物因子及相關(guān)因素威脅，生物技術(shù)能夠穩(wěn)定健康發(fā)展，人民生命健康和生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)處于沒有危險(xiǎn)和不受威脅的狀態(tài)，生物領(lǐng)域具備維護(hù)國家安全和持續(xù)發(fā)展的能力。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)
B．只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用
C．動(dòng)物飼料中的抗生素會(huì)通過食物鏈?zhǔn)谷梭w微生物耐藥性增強(qiáng)
D．外來入侵物種可能增加本土食物來源卻給自然生態(tài)造成破壞
7．(不定項(xiàng))(2024·江蘇揚(yáng)州模擬)雙向啟動(dòng)子可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)RNA聚合酶來驅(qū)動(dòng)下游基因的表達(dá)，研究人員構(gòu)建了下圖所示的表達(dá)載體，以檢測(cè)雙向啟動(dòng)子作用效果。下列分析錯(cuò)誤的是(　　)
A．為連入GUS基因，需用SalⅠ和SphⅠ酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒
B．表達(dá)載體中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時(shí)使用T-DNA的同一條DNA單鏈為模板
C．可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，在培養(yǎng)基中添加壯觀霉素進(jìn)行篩選
D．可通過觀察是否出現(xiàn)熒光和藍(lán)色物質(zhì)確認(rèn)雙向啟動(dòng)子是否發(fā)揮了作用
8．(不定項(xiàng))(2024·湖南長(zhǎng)沙三模)自然界中很少出現(xiàn)藍(lán)色的花，天然藍(lán)色花產(chǎn)生的主要原因是花瓣細(xì)胞液泡中花青素在堿性條件下顯藍(lán)色。我國科學(xué)家利用鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)構(gòu)建基因表達(dá)載體(如下圖，PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ為不同限制酶)，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入白玫瑰中，在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中形成穩(wěn)定顯色的靛藍(lán)。下列說法不正確的是(　　)
A．上述獲得藍(lán)色玫瑰的方案中需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因
B．將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ
C．sfp和idgS基因表達(dá)時(shí)分別以T-DNA的不同鏈為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄
D．農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰細(xì)胞質(zhì)基因組中防止基因擴(kuò)散
21世紀(jì)教育網(wǎng)(www.21cnjy.com)命題點(diǎn)專訓(xùn)(九)　基因工程及生物技術(shù)的安全性和倫理問題(選擇題)
1．(2024·湖南師大附中模擬)乳酸菌是乳酸的傳統(tǒng)生產(chǎn)菌，但耐酸能力較差，影響產(chǎn)量；釀酒酵母耐酸能力較強(qiáng)，但不產(chǎn)生乳酸。研究者將乳酸菌內(nèi)催化乳酸生成的乳酸脫氫酶基因(LDH)導(dǎo)入釀酒酵母，獲得能產(chǎn)生乳酸的酵母工程菌株。下圖為通過雙酶切構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程。GTG為原核生物偏好的起始密碼子編碼序列，ATG為真核生物偏好的起始密碼子編碼序列。下列說法正確的是(　　)
A．引物2的3′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列
B．重組質(zhì)粒以能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體
C．PCR反應(yīng)時(shí)，緩沖液中一般要添加Ca2+來激活相關(guān)酶
D．引物1的5′端序列應(yīng)考慮將GTG改為ATG
D　[根據(jù)題意可知，含GTG的一端為L(zhǎng)DH基因的起始，為保證通過雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒，設(shè)計(jì)引物1的5′端序列需要包含BamHⅠ的識(shí)別序列，引物2的5′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列，A錯(cuò)誤；結(jié)合題意可知，本過程中重組質(zhì)粒應(yīng)以不能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體，然后在缺乏尿嘧啶的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的釀酒酵母菌株因獲得尿嘧啶合成酶基因而可以正常生存，從而起到篩選作用，B錯(cuò)誤；真核細(xì)胞和細(xì)菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活，因此，PCR反應(yīng)緩沖液中一般要添加Mg2+，C錯(cuò)誤；設(shè)計(jì)引物1的5′端序列，應(yīng)考慮將編碼起始密碼子的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG，以便目的基因在酵母細(xì)胞中更好地表達(dá)，D正確。]
2．(2024·浙江杭州二模)某研究小組構(gòu)建了能表達(dá)ACTA1-GFP融合蛋白的重組質(zhì)粒，該重組質(zhì)粒的部分結(jié)構(gòu)如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
注：F1和F2表示上游引物，R1和R2表示下游引物。
A．RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)
B．僅用F2和R1一對(duì)引物，即可確定ACTA1基因插入方向是否正確
C．ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與a鏈的部分序列相同
D．若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子
C　[據(jù)圖可知，ACTA1基因和GFP基因位于啟動(dòng)子和終止子之間，故RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)，A正確；引物F2與R1結(jié)合部位包含ACTA1基因的堿基序列，因此為了確定ACTA1基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確，進(jìn)行PCR檢測(cè)時(shí)，若僅用一對(duì)引物，應(yīng)選擇圖甲中的引物F2和R1，B正確；ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與b鏈均可以和a鏈互補(bǔ)配對(duì)，二者部分序列相同，C錯(cuò)誤；若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，可根據(jù)電泳條帶數(shù)目能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子，D正確。]
3．(2024·江蘇南通模擬)下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”和“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述中，錯(cuò)誤的是(　　)
A．可將提取到的白色絲狀物與二苯胺試劑充分混勻，沸水浴加熱后變藍(lán)
B．PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶可在延伸過程中起作用
C．凝膠載樣緩沖液中加入的核酸染料與DNA分子結(jié)合，便于在紫外燈下觀察
D．DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中可利用DNA不溶于酒精而某些蛋白質(zhì)溶于酒精來粗提DNA
A　[將絲狀物溶于2 mol/L的5 mL的NaCl溶液中，然后向試管中加入4 mL的二苯胺試劑，沸水浴加熱5 min，試管冷卻后溶液呈現(xiàn)藍(lán)色，A錯(cuò)誤；PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶在延伸過程中根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，B正確；用電泳緩沖液配制的瓊脂糖溶液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長(zhǎng)為300 nm的紫外燈下被檢測(cè)出來，C正確；DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理，可以初步粗提取DNA，D正確。]
4．(2024·湖北十堰二模)不對(duì)稱PCR是利用不等量的一對(duì)引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA(ssDNA)的方法。加入的一對(duì)引物中含量較少的被稱為限制性引物，含量較多的被稱為非限制性引物。PCR最初的若干次循環(huán)中，其擴(kuò)增產(chǎn)物主要是雙鏈DNA(dsDNA)，但當(dāng)限制性引物消耗完后，就會(huì)產(chǎn)生大量的ssDNA。不對(duì)稱PCR的簡(jiǎn)單過程如圖所示。假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后開始擴(kuò)增產(chǎn)生ssDNA。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．限制性引物和非限制性引物均需要依據(jù)模板DNA的堿基序列來設(shè)計(jì)
B．據(jù)圖可知，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列相同
C．上述過程中子鏈分別沿限制性引物的5′端、非限制性引物的3′端延伸
D．該不對(duì)稱PCR過程中需要(26－1)a個(gè)限制性引物
C　[PCR擴(kuò)增時(shí)需要已知目的基因兩側(cè)的堿基序列來設(shè)計(jì)引物，因此限制性引物和非限制性引物均需要依據(jù)模板DNA的堿基序列來設(shè)計(jì)，A正確；當(dāng)限制性引物的濃度降低，甚至基本耗盡，雙鏈 DNA 的合成速率顯著下降，此時(shí)非限制性引物將繼續(xù)引導(dǎo)單鏈 DNA 的合成，非限制性引物是與乙鏈結(jié)合，故反應(yīng)的最后階段只產(chǎn)生初始 DNA 中一條鏈的拷貝(非限制性引物引導(dǎo)合成的單鏈)，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列一致，B正確；擴(kuò)增時(shí)耐高溫的DNA聚合酶將4種脫氧核苷酸連接至引物的3′端，C錯(cuò)誤；PCR擴(kuò)增時(shí)引物是新子鏈的一部分，假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后產(chǎn)生26個(gè)DNA分子，因此該不對(duì)稱PCR過程中需要(26－1)a個(gè)限制性引物，D正確。]
5．(2024·北京延慶一模)研究發(fā)現(xiàn)，為心梗患者注射適量t-PA蛋白會(huì)誘發(fā)顱內(nèi)出血，但若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸，能顯著降低出血等副作用，改良后的t-PA蛋白成為心梗和腦血栓的急救藥。下圖所示，通過基因工程大量制備改良藥物t-PA蛋白，下列說法錯(cuò)誤的是(　　)
A．制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程
B．利用重組pCLY11質(zhì)?？色@得牛乳腺生物反應(yīng)器
C．選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切割質(zhì)粒pCLY11，構(gòu)建重組質(zhì)粒
D．成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞在含有新霉素的培養(yǎng)基上能存活，且呈現(xiàn)藍(lán)色
D　[由蛋白質(zhì)工程的概念可知，改良后的藥物t-PA蛋白是由t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸改良而來，因此，制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程，A正確；科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件構(gòu)建重組pCLY11，通過顯微注射的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，由這個(gè)受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥物，這稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器，B正確；t-PA改良基因的黏性末端如圖所示，則所選的限制酶所獲得的切口應(yīng)與t-PA改良基因的黏性末端相同，因此需選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切開質(zhì)粒pCLY11，C正確；結(jié)合圖示可知，限制酶XmaⅠ和BglⅡ會(huì)破壞質(zhì)粒pCLY11上的mlacZ，但不會(huì)破壞新霉素抗性基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌具有新霉素抗性，但由于mlacZ基因被破壞，沒有相應(yīng)產(chǎn)物，因而菌落呈現(xiàn)白色，D錯(cuò)誤。]
6．(2024·遼寧大連模擬)生物安全是指國家有效防范和應(yīng)對(duì)危險(xiǎn)生物因子及相關(guān)因素威脅，生物技術(shù)能夠穩(wěn)定健康發(fā)展，人民生命健康和生態(tài)系統(tǒng)相對(duì)處于沒有危險(xiǎn)和不受威脅的狀態(tài)，生物領(lǐng)域具備維護(hù)國家安全和持續(xù)發(fā)展的能力。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)
B．只要有證據(jù)表明產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用
C．動(dòng)物飼料中的抗生素會(huì)通過食物鏈?zhǔn)谷梭w微生物耐藥性增強(qiáng)
D．外來入侵物種可能增加本土食物來源卻給自然生態(tài)造成破壞
B　[高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，A正確；只要有證據(jù)表明某轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的使用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，B錯(cuò)誤；長(zhǎng)期使用抗生素，必然產(chǎn)生殘留，而其殘留在動(dòng)物飼料中的抗生素，會(huì)隨著食物鏈進(jìn)入人體引發(fā)微生物的耐藥性，C正確；外來入侵物種可能增加本土食物來源，但如果缺乏天敵會(huì)造成自然生態(tài)破壞，D正確。]
7．(不定項(xiàng))(2024·江蘇揚(yáng)州模擬)雙向啟動(dòng)子可同時(shí)結(jié)合兩個(gè)RNA聚合酶來驅(qū)動(dòng)下游基因的表達(dá)，研究人員構(gòu)建了下圖所示的表達(dá)載體，以檢測(cè)雙向啟動(dòng)子作用效果。下列分析錯(cuò)誤的是(　　)
A．為連入GUS基因，需用SalⅠ和SphⅠ酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒
B．表達(dá)載體中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時(shí)使用T-DNA的同一條DNA單鏈為模板
C．可用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，在培養(yǎng)基中添加壯觀霉素進(jìn)行篩選
D．可通過觀察是否出現(xiàn)熒光和藍(lán)色物質(zhì)確認(rèn)雙向啟動(dòng)子是否發(fā)揮了作用
ABC　[如果用SphⅠ酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒就會(huì)破壞LUC基因，A錯(cuò)誤；表達(dá)載體中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時(shí)雙向啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄方向不同，使用T-DNA的模板鏈也不同，B錯(cuò)誤；將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，但壯觀霉素抗性基因位于T-DNA序列之外，C錯(cuò)誤；雙向啟動(dòng)子如果正常表達(dá)，就會(huì)合成熒光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分別產(chǎn)生熒光、生成藍(lán)色物質(zhì)，從而確定雙向啟動(dòng)子的作用，D正確。]
8．(不定項(xiàng))(2024·湖南長(zhǎng)沙三模)自然界中很少出現(xiàn)藍(lán)色的花，天然藍(lán)色花產(chǎn)生的主要原因是花瓣細(xì)胞液泡中花青素在堿性條件下顯藍(lán)色。我國科學(xué)家利用鏈霉菌的靛藍(lán)合成酶基因(idgS)及其激活基因(sfp)構(gòu)建基因表達(dá)載體(如下圖，PmeⅠ、BamHⅠ、SpeⅠ、SacⅠ為不同限制酶)，通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入白玫瑰中，在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中形成穩(wěn)定顯色的靛藍(lán)。下列說法不正確的是(　　)
A．上述獲得藍(lán)色玫瑰的方案中需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因
B．將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ
C．sfp和idgS基因表達(dá)時(shí)分別以T-DNA的不同鏈為模板進(jìn)行轉(zhuǎn)錄
D．農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰細(xì)胞質(zhì)基因組中防止基因擴(kuò)散
ABD　[靛藍(lán)能夠穩(wěn)定顯色，不受pH的影響，故本題方案中無需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因，A錯(cuò)誤；結(jié)合圖示可知，將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)若使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ，則會(huì)將終止子一同切除，故只能用BamHⅠ，B錯(cuò)誤；sfp和idgS基因具有各自的啟動(dòng)子，表達(dá)是相互獨(dú)立進(jìn)行的，轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板進(jìn)行的，由啟動(dòng)子方向可知，兩基因轉(zhuǎn)錄的模板不同，C正確；農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色體DNA上，D錯(cuò)誤。]
21世紀(jì)教育網(wǎng)(www.21cnjy.com)命題點(diǎn)專訓(xùn)(九)
1．D　[根據(jù)題意可知，含GTG的一端為L(zhǎng)DH基因的起始，為保證通過雙酶切以正確方向插入質(zhì)粒，設(shè)計(jì)引物1的5′端序列需要包含BamHⅠ的識(shí)別序列，引物2的5′端序列應(yīng)包含XbaⅠ的識(shí)別序列，A錯(cuò)誤；結(jié)合題意可知，本過程中重組質(zhì)粒應(yīng)以不能合成尿嘧啶的酵母菌株為受體，然后在缺乏尿嘧啶的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的釀酒酵母菌株因獲得尿嘧啶合成酶基因而可以正常生存，從而起到篩選作用，B錯(cuò)誤；真核細(xì)胞和細(xì)菌的DNA聚合酶都需要Mg2+激活，因此，PCR反應(yīng)緩沖液中一般要添加Mg2+，C錯(cuò)誤；設(shè)計(jì)引物1的5′端序列，應(yīng)考慮將編碼起始密碼子的序列由原核生物偏好的GTG轉(zhuǎn)變?yōu)檎婧松锲玫腁TG，以便目的基因在酵母細(xì)胞中更好地表達(dá)，D正確。]
2．C　[據(jù)圖可知，ACTA1基因和GFP基因位于啟動(dòng)子和終止子之間，故RNA聚合酶與啟動(dòng)子結(jié)合，調(diào)控ACTA1基因和GFP基因的表達(dá)，A正確；引物F2與R1結(jié)合部位包含ACTA1基因的堿基序列，因此為了確定ACTA1基因連接到質(zhì)粒中且插入方向正確，進(jìn)行PCR檢測(cè)時(shí)，若僅用一對(duì)引物，應(yīng)選擇圖甲中的引物F2和R1，B正確；ACTA1基因轉(zhuǎn)錄的模板鏈?zhǔn)莂鏈，引物F1與b鏈均可以和a鏈互補(bǔ)配對(duì)，二者部分序列相同，C錯(cuò)誤；若用引物F2和R2進(jìn)行PCR，可根據(jù)電泳條帶數(shù)目能更好地區(qū)分ACTA1-GFP基因純合子和雜合子，D正確。]
3．A　[將絲狀物溶于2 mol/L的5 mL的NaCl溶液中，然后向試管中加入4 mL的二苯胺試劑，沸水浴加熱5 min，試管冷卻后溶液呈現(xiàn)藍(lán)色，A錯(cuò)誤；PCR反應(yīng)體系中需加入耐高溫的DNA聚合酶，該酶在延伸過程中根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則合成新的DNA鏈，B正確；用電泳緩沖液配制的瓊脂糖溶液中加入的核酸染料能與DNA分子結(jié)合，可以在波長(zhǎng)為300 nm的紫外燈下被檢測(cè)出來，C正確；DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中利用DNA不溶于酒精、但某些蛋白質(zhì)溶于酒精的原理，可以初步粗提取DNA，D正確。]
4．C　[PCR擴(kuò)增時(shí)需要已知目的基因兩側(cè)的堿基序列來設(shè)計(jì)引物，因此限制性引物和非限制性引物均需要依據(jù)模板DNA的堿基序列來設(shè)計(jì)，A正確；當(dāng)限制性引物的濃度降低，甚至基本耗盡，雙鏈 DNA 的合成速率顯著下降，此時(shí)非限制性引物將繼續(xù)引導(dǎo)單鏈 DNA 的合成，非限制性引物是與乙鏈結(jié)合，故反應(yīng)的最后階段只產(chǎn)生初始 DNA 中一條鏈的拷貝(非限制性引物引導(dǎo)合成的單鏈)，最后大量獲得的ssDNA與圖中甲鏈的堿基序列一致，B正確；擴(kuò)增時(shí)耐高溫的DNA聚合酶將4種脫氧核苷酸連接至引物的3′端，C錯(cuò)誤；PCR擴(kuò)增時(shí)引物是新子鏈的一部分，假設(shè)模板DNA分子初始數(shù)量為a個(gè)，6次循環(huán)后產(chǎn)生26個(gè)DNA分子，因此該不對(duì)稱PCR過程中需要(26－1)a個(gè)限制性引物，D正確。]
5．D　[由蛋白質(zhì)工程的概念可知，改良后的藥物t-PA蛋白是由t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸改良而來，因此，制備改良t-PA蛋白的過程屬于蛋白質(zhì)工程，A正確；科學(xué)家將藥用蛋白基因與乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件構(gòu)建重組pCLY11，通過顯微注射的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，由這個(gè)受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物在進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌乳汁來生產(chǎn)所需要的藥物，這稱為乳腺生物反應(yīng)器或乳房生物反應(yīng)器，B正確；t-PA改良基因的黏性末端如圖所示，則所選的限制酶所獲得的切口應(yīng)與t-PA改良基因的黏性末端相同，因此需選用限制酶XmaⅠ和BglⅡ切開質(zhì)粒pCLY11，C正確；結(jié)合圖示可知，限制酶XmaⅠ和BglⅡ會(huì)破壞質(zhì)粒pCLY11上的mlacZ，但不會(huì)破壞新霉素抗性基因，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌具有新霉素抗性，但由于mlacZ基因被破壞，沒有相應(yīng)產(chǎn)物，因而菌落呈現(xiàn)白色，D錯(cuò)誤。]
6．B　[高致病性微生物須在高等級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室中開展實(shí)驗(yàn)活動(dòng)，防止造成致病性微生物外泄，造成污染，危害生物健康，A正確；只要有證據(jù)表明某轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品有害，就應(yīng)該禁止該轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的使用，而不是禁止轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用，B錯(cuò)誤；長(zhǎng)期使用抗生素，必然產(chǎn)生殘留，而其殘留在動(dòng)物飼料中的抗生素，會(huì)隨著食物鏈進(jìn)入人體引發(fā)微生物的耐藥性，C正確；外來入侵物種可能增加本土食物來源，但如果缺乏天敵會(huì)造成自然生態(tài)破壞，D正確。]
7．ABC　[如果用SphⅠ酶切已整合了雙向啟動(dòng)子及LUC基因的質(zhì)粒就會(huì)破壞LUC基因，A錯(cuò)誤；表達(dá)載體中GUS基因和LUC基因轉(zhuǎn)錄時(shí)雙向啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄方向不同，使用T-DNA的模板鏈也不同，B錯(cuò)誤；將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，但壯觀霉素抗性基因位于T-DNA序列之外，C錯(cuò)誤；雙向啟動(dòng)子如果正常表達(dá)，就會(huì)合成熒光素酶和β-葡萄糖苷酶，催化底物分別產(chǎn)生熒光、生成藍(lán)色物質(zhì)，從而確定雙向啟動(dòng)子的作用，D正確。]
8．ABD　[靛藍(lán)能夠穩(wěn)定顯色，不受pH的影響，故本題方案中無需轉(zhuǎn)入能調(diào)控液泡pH的基因，A錯(cuò)誤；結(jié)合圖示可知，將sfp基因插入Ti質(zhì)粒時(shí)若使用的限制酶是PmeⅠ和BamHⅠ，則會(huì)將終止子一同切除，故只能用BamHⅠ，B錯(cuò)誤；sfp和idgS基因具有各自的啟動(dòng)子，表達(dá)是相互獨(dú)立進(jìn)行的，轉(zhuǎn)錄是以DNA的一條鏈為模板進(jìn)行的，由啟動(dòng)子方向可知，兩基因轉(zhuǎn)錄的模板不同，C正確；農(nóng)桿菌可將Ti質(zhì)粒上的T-DNA整合到白玫瑰染色體DNA上，D錯(cuò)誤。]

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