資源簡(jiǎn)介

(共42張PPT)
3.2.2 基因工程的基本操作程序
本節(jié)聚焦：
1.基因工程的基本操作程序主要包括哪幾個(gè)步驟？
2.基因工程操作的每一步涉及的技術(shù)和方法
舊知識(shí)回顧
00
獲取目的基因的方法：
① 目的基因；
②通過(guò)構(gòu)建 來(lái)獲取目的基因；
③常用 特異性地快速擴(kuò)增目的基因。
人工合成
基因文庫(kù)
PCR
獲得了目的基因后能不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，為什么？
思考
提示：不能，原因：①游離的DNA進(jìn)入細(xì)胞后，一般會(huì) ；
②即使可以進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和翻譯，游離的DNA也無(wú)法跟著 進(jìn)行復(fù)制，
導(dǎo)致子代細(xì)胞中 。
直接被分解
細(xì)胞分裂
不再含有目的基因
基因工程的基本操作程序
00
重組DNA分子
①目的基因的篩選與獲取
②基因表達(dá)載體的構(gòu)建
③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
④目的基因的檢測(cè)和鑒定
★核心工作
基因1 基因2 基因3
知識(shí)擴(kuò)展：原核細(xì)胞基因的結(jié)構(gòu)
02
DNA分子
基因通常是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，一個(gè)DNA上有多個(gè)基因。
原核生物
的基因
↓放大
① 編碼區(qū)： 轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的mRNA， 編碼(翻譯)出蛋白質(zhì)的DNA區(qū)段。
②非編碼區(qū)： 轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的mRNA， 編碼(翻譯)出蛋白質(zhì)的DNA區(qū)段。
注：非編碼區(qū)含有能調(diào)控遺傳信息表達(dá)的DNA序列。
能
能
不能
不能
知識(shí)擴(kuò)展：原核細(xì)胞基因的結(jié)構(gòu)
02
啟動(dòng)子
終止子
①啟動(dòng)子：
本質(zhì)：一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段；
位置：位于基因的 ；
作用： 酶識(shí)別并結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；
②終止子：
本質(zhì)：一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段；
位置：位于基因的 ；
作用： ；
上游
RNA聚合
下游
終止轉(zhuǎn)錄
注：根據(jù)啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄模式，有三種類(lèi)型；
知識(shí)擴(kuò)展：原核細(xì)胞基因的結(jié)構(gòu)
02
啟動(dòng)子
終止子
【拓展延伸】根據(jù)啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄模式，可分為：
① 啟動(dòng)子：其調(diào)控作用使得基因在不同部位或組織中的表達(dá)水平相當(dāng)。
這類(lèi)啟動(dòng)子一般來(lái)自管家基因，可連續(xù)不斷地啟動(dòng)基因的表達(dá)。
② 啟動(dòng)子：其調(diào)控作用使得基因往往只在某些特定器官或組織中表達(dá)。這類(lèi)啟動(dòng)子一般來(lái)自奢侈基因，其啟動(dòng)的外源基因在僅在特定的部位特異表達(dá)。
③ 啟動(dòng)子：當(dāng)誘導(dǎo)物存在時(shí)，可以激活或抑制目的基因的表達(dá)。
組成型
組織特異性
誘導(dǎo)型
知識(shí)擴(kuò)展：原核細(xì)胞基因的表達(dá)
02
啟動(dòng)子
終止子
轉(zhuǎn) 錄
mRNA
翻 譯
多肽鏈
終止密碼子不編碼
氨基酸
基因1 基因2 基因3
知識(shí)擴(kuò)展：真核細(xì)胞基因的結(jié)構(gòu)
02
DNA分子
基因通常是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，一個(gè)DNA上有多個(gè)基因。
↓放大
【注意】不同于原核生物的基因，真核生物的編碼區(qū)是 。
又可分為：①外顯子： 轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的mRNA， 編碼蛋白質(zhì)的DNA序列。
②內(nèi)含子： 轉(zhuǎn)錄相應(yīng)的mRNA， 編碼蛋白質(zhì)的DNA序列。
真核生物
的基因
能
能
能
不能
不連續(xù)，有間隔的
數(shù)量關(guān)系：外顯子=內(nèi)含子+1
知識(shí)擴(kuò)展：真核細(xì)胞基因的表達(dá)
02
啟動(dòng)子
終止子
轉(zhuǎn) 錄
前體mRNA
翻 譯
多肽鏈
加 工
成熟mRNA
終止密碼子不編碼
氨基酸
基因表達(dá)載體的構(gòu)建（基因工程的核心工作）
02
1.基因表達(dá)載體構(gòu)建的目的：
①讓目的基因在受體細(xì)胞中 ，并且可以遺傳給下一代。
②同時(shí)使目的基因能夠 和 。
2.基因表達(dá)載體的組成：
穩(wěn)定存在
表達(dá)
發(fā)揮作用
呆得住
能表達(dá)：轉(zhuǎn)錄、翻譯
:便于重組DNA分子的篩選；
:
位置：位于基因的上游；
作用：RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合的位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng)轉(zhuǎn)錄；
:
:主要是指編碼特定蛋白質(zhì)的基因；
位置：位于基因的下游；
作用：終止轉(zhuǎn)錄；
終止子
啟動(dòng)子
標(biāo)記基因
目的基因
復(fù)制原點(diǎn)：能夠完成自主復(fù)制；
基因表達(dá)載體的構(gòu)建（基因工程的核心工作）
02
目的基因插入位點(diǎn)是隨意的嗎？應(yīng)注意什么？
思考
提示： 隨意的；
目的基因的表達(dá)需要 與 的調(diào)控，
所以目的基因應(yīng)插入到啟動(dòng)子和終止子 的部位。
不是
啟動(dòng)子
終止子
之間
基因表達(dá)載體的構(gòu)建（基因工程的核心工作）
02
3.基因表達(dá)載體的構(gòu)建過(guò)程:
①用一定的 切割載體(質(zhì)粒)，使它出現(xiàn) 個(gè)切口。
②用 限制酶或能產(chǎn)生 末端的限制酶切割含有目的基因的DNA片段。
③利用 將含目的基因的DNA片段拼接到載體的切口處，
這樣就形成了 （即： ）。
限制酶
同種
相同
DNA連接酶
一
一個(gè)重組DNA分子
基因表達(dá)載體
提示： ；
原因：用SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的 ，
不利于 。
重難點(diǎn)：限制酶的選擇原則
02
１．構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，能否用SmaⅠ限制酶切割質(zhì)粒？為什么？
不能
抗生素抗性基因（標(biāo)記基因）
進(jìn)一步篩選重組DNA分子
提示： ；
弊端：① ；
② ；
③ ；
重難點(diǎn)：限制酶的選擇原則
02
相同的黏性末端，可以相互連接！
2.只使用EcoRⅠ分別切割質(zhì)粒和外源DNA，能否構(gòu)建基因表達(dá)載體？
能
質(zhì)粒、目的基因會(huì)發(fā)生自身環(huán)化連接
質(zhì)粒與目的基因會(huì)發(fā)生反向連接
會(huì)發(fā)生兩兩自身連接
注：用同種限制酶或
同尾酶處理，產(chǎn)生的
都是相同的黏性末端，均會(huì)出現(xiàn)以上弊端。
單酶切法
提示： ；
優(yōu)點(diǎn)：① ；
② ；
重難點(diǎn)：限制酶的選擇原則
02
3.使用Bam HⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA，
能否構(gòu)建基因表達(dá)載體？
可以防止質(zhì)粒、目的基因的自身環(huán)化連接
還可以防止目的基因與載體的反向連接
注：不能防止
兩兩自身連接。
相同的黏性末端，可以相互連接！
能
雙酶切法
重難點(diǎn)：限制酶的選擇原則
02
【小結(jié)】選擇限制酶的基本原則:
①切割目的基因時(shí): ；
②切割質(zhì)粒時(shí):至少保留一個(gè)完整的 ,便于篩選；
除此之外還需保留 、 、 。
③確保目的基因和載體上有 黏性末端
(補(bǔ)充說(shuō)明：平末端也可以，但連接平末端效率低）。
能切下目的基因且不破壞目的基因
相同
標(biāo)記基因
復(fù)制原點(diǎn)
啟動(dòng)子
終止子
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
02
3．某同學(xué)擬用限制酶(酶1、酶2、酶3和酶4)、DNA連接酶為工具，將目的基因(兩端含相應(yīng)限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn))和質(zhì)粒進(jìn)行切割、連接，以構(gòu)建重組表達(dá)載體。限制酶的切割位點(diǎn)如圖所示。下列重組表達(dá)載體構(gòu)建方案合理且效率最高的是(　　)
A．質(zhì)粒和目的基因都用酶3切割，常用E.coli DNA連接酶連接
B．質(zhì)粒用酶3切割、目的基因用酶1切割，用T4 DNA連接酶連接
C．質(zhì)粒和目的基因都用酶1和酶2切割，用T4 DNA連接酶連接
D．質(zhì)粒和目的基因都用酶2和酶4切割，用E.coli DNA連接酶連接
C
酶3切割后得到的是平末端，E.coli DNA連接酶連接平末端效率極低，×；
酶3切割后得到的是平末端，酶1切割后得到的是黏性末端，不能連接，×；
雙酶切法，合理且效率高，，√；
酶4會(huì)破壞質(zhì)粒上的抗生素抗性基因，無(wú)法進(jìn)行后續(xù)的篩選 ，×；
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
02
4．用氨芐青霉素抗性基因(AmpR)、四環(huán)素抗性基因(TetR)作為標(biāo)記基因構(gòu)建的質(zhì)粒如圖所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的質(zhì)粒，構(gòu)建基因表達(dá)載體(重組質(zhì)粒)，并轉(zhuǎn)化到受體菌中。下列敘述錯(cuò)誤的是(　　)
A．若用Hind Ⅲ酶切，目的基因轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物可能不同
B．若用PvuⅠ酶切，在含Tet(四環(huán)素)培養(yǎng)基中的菌落，不一定含有目的基因
C．若用ScaⅠ酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Tet(四環(huán)素)的培養(yǎng)基中能形成菌落
D．若用SphⅠ酶切，攜帶目的基因的受體菌在含Amp和Tet的培養(yǎng)基中能形成菌落
D
若用Hind Ⅲ酶切，目的基因可能正向插入，也可能反向插入，√；
重組質(zhì)粒和普通質(zhì)粒中都有TetR(四)，不一定有目的基因，√；
(氨AmpR)被破壞，(四TetR)作為標(biāo)記基因，√；
(四TetR)被破壞，(氨AmpR)作為標(biāo)記基因，僅在含Amp的培養(yǎng)基中能形成菌落，×；
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
02
9．當(dāng)目的基因和質(zhì)粒都用Hind Ⅲ處理、連接后，目的基因可能正向插入載體，也可能反向插入載體，為判斷目的基因的插入方向，可使用限制酶處理，并進(jìn)行電泳檢測(cè)(如圖)。下列選項(xiàng)中能判斷目的基因插入方向的限制酶是(　　)
A．Hind Ⅲ B．EcoRⅠ
C．BamHⅠ D．EcoRⅠ和HindⅢ
注：EcoRⅠ、BamHⅠ和Hind Ⅲ的識(shí)別序列、切割位點(diǎn)均不同，
數(shù)字表示相鄰兩個(gè)限制酶切點(diǎn)之間的堿基對(duì)數(shù)(bp)，質(zhì)粒全長(zhǎng)20 000 bp。
B
基因表達(dá)載體的構(gòu)建
02
15.某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過(guò)程如圖1所示。
(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用 兩種酶對(duì)質(zhì)粒和含抗鹽基因的DNA進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性。
SalⅠ和HindⅢ
基因表達(dá)載體的構(gòu)建·
02
(4)如圖2表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測(cè)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。
培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖必需的成分外，培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有
、 。
從檢測(cè)篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是 (填圖2中的數(shù)字)菌落中的細(xì)菌。
氨芐青霉素
四環(huán)素(或氨芐青霉素和四環(huán)素)
4和6
普通質(zhì)粒：氨芐+四環(huán)
重組質(zhì)粒：氨芐
基因工程的基本操作程序
①目的基因的篩選與獲取
②基因表達(dá)載體的構(gòu)建
③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
④目的基因的檢測(cè)和鑒定
00
重組DNA分子
③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
常用方法
將目的基因?qū)?br/>植物細(xì)胞
將目的基因?qū)?br/>動(dòng)物細(xì)胞
將目的基因?qū)?br/>微生物細(xì)胞
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
03
Ga2+處理法
（感受態(tài)細(xì)胞法）
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
花粉管通道法
顯微注射法
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
1.花粉管通道法：(我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng))
①方法一：用微量注射器將含目的基因的
DNA溶液直接注入 中。
②方法二：在植物受粉后的一定時(shí)間內(nèi)，剪去柱頭，
將DNA溶液滴加在花柱切面上，
使目的基因借助 進(jìn)入胚囊。
子房
花粉管通道
受體細(xì)胞：
受精卵
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
【資料】我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法，是利用植物授粉后形成的天然花粉管通道，將外源基因攜帶進(jìn)入胚囊，此時(shí)的受精卵未形成細(xì)胞壁，且正在進(jìn)行活躍的DNA復(fù)制，容易將外源DNA片段整合到受體基因組中。
我國(guó)科學(xué)家獨(dú)創(chuàng)的花粉管通道法有什么優(yōu)點(diǎn)？
思考
操作簡(jiǎn)單、技術(shù)成本低，免去了組織培養(yǎng)
以及誘導(dǎo)再生植株的全套人工培養(yǎng)過(guò)程。
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
2.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：(常用)
【資料】轉(zhuǎn)化：
是指目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi) 和 的過(guò)程。
【資料】農(nóng)桿菌的特點(diǎn)：
農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有 質(zhì)粒，
當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，
能將Ti質(zhì)粒上的 (可轉(zhuǎn)移的DNA)
轉(zhuǎn)移到被侵染的細(xì)胞內(nèi)，
并且將其整合到該細(xì)胞的 上。
維持穩(wěn)定
表達(dá)
注：農(nóng)桿菌能在自然條件下侵染雙子葉植物和裸子植物，而對(duì)大多數(shù)單子葉植物沒(méi)有侵染能力；
隨著轉(zhuǎn)化方法的突破，用農(nóng)桿菌侵染水稻、玉米等多種單子葉植物也取得了成功。
Ti
T-DNA
染色體DNA
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
請(qǐng)根據(jù)農(nóng)桿菌的特點(diǎn)，寫(xiě)出利用農(nóng)桿菌進(jìn)行轉(zhuǎn)化的思路。
思考
Ti質(zhì)粒
目的基因
植物細(xì)胞
植物
細(xì)胞
染色體DNA
農(nóng)桿菌
基因表達(dá)載體
導(dǎo)入
插入
表達(dá)
新
性狀
植株
轉(zhuǎn)入
構(gòu)建
兩次拼接
①第一次拼接：
將 拼接到 上；
②第二次拼接（非人工操作）：
將 拼接到 上。
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中進(jìn)行了兩次拼接，有什么區(qū)別？
思考
目的基因
Ti質(zhì)粒的T－DNA
被插入目的基因的T－DNA
受體細(xì)胞染色體的DNA
兩次導(dǎo)入
①第一次導(dǎo)入：
將 導(dǎo)入到 上；
②第二次導(dǎo)入（非人工操作）：
將 導(dǎo)入到 上。
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法中進(jìn)行了兩次導(dǎo)入，有什么區(qū)別？
思考
含目的基因的重組Ti質(zhì)粒
農(nóng)桿菌
含目的基因的T－DNA
受體細(xì)胞
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·植物細(xì)胞
03
2.農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：
①方法一：
可以將新鮮的從葉片上取下的圓形小片 ，
然后 ，并 ；
②方法二：
可以將 直接浸沒(méi)在 中一段時(shí)間，
然后培養(yǎng)植株并獲得 ，
再進(jìn)行 、 等；
受體細(xì)胞：
與農(nóng)桿菌共培養(yǎng)
篩選轉(zhuǎn)化細(xì)胞
再生成植株
體細(xì)胞
花序
含有農(nóng)桿菌的溶液
種子
篩選
鑒定
受體細(xì)胞：
受精卵
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·動(dòng)物細(xì)胞
03
3.顯微注射法：
顯微注射
受精卵
受體細(xì)胞：
受精卵
構(gòu)建基因表達(dá)載體并提純
利用 將基因表達(dá)載體注入動(dòng)物的 中
早期胚胎培養(yǎng)
胚胎移植
獲得具有新性狀的動(dòng)物
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·微生物細(xì)胞
03
單細(xì)胞、繁殖快、易于培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少。
在基因工程操作中，常以原核生物作為受體細(xì)胞，
其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。有什么優(yōu)點(diǎn)？
思考
大腸桿菌和酵母菌在基因工程中都可以作為受體細(xì)胞，但又有所不同。在生產(chǎn)需要加工和分泌的蛋白質(zhì)時(shí)，誰(shuí)更有優(yōu)勢(shì)？
思考
酵母菌，因?yàn)榻湍妇钦婧思?xì)胞，具有多種細(xì)胞器，
內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體可以對(duì)翻譯形成的多肽鏈進(jìn)一步加工。
將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞·微生物細(xì)胞
03
4.Ga2+處理法（感受態(tài)細(xì)胞法）：
大腸桿菌
感受態(tài)細(xì)胞
Ca2+
混合
基因表達(dá)載體
緩沖液
吸收DNA
完成轉(zhuǎn)化
Ca2+的作用是什么？
思考
增加細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性。
感受態(tài)細(xì)胞有什么特點(diǎn)？
思考
細(xì)胞處于一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
基因工程的基本操作程序
04
重組DNA分子
①目的基因的篩選與獲取
②基因表達(dá)載體的構(gòu)建
③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
④目的基因的檢測(cè)和鑒定
④目的基因的檢測(cè)和鑒定
目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，是否穩(wěn)定維持和表達(dá)其遺傳特性，
只有通過(guò)檢測(cè)與鑒定才能知道。
目的基因的檢測(cè)與鑒定
04
類(lèi)型 檢測(cè)內(nèi)容 方法
分子水平的檢測(cè) 受體細(xì)胞的染色體DNA上 是否插入了 .
目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了 . 目的基因是否翻譯成 .
個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定 個(gè)體是否具有相應(yīng) .
目的基因(DNA)
mRNA
PCR等技術(shù)
蛋白質(zhì)
抗原-抗體雜交技術(shù)
性狀
抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn)、
抗病接種實(shí)驗(yàn)等
檢測(cè)內(nèi)容及方法
逆轉(zhuǎn)錄
目的基因的檢測(cè)與鑒定·①PCR等技術(shù)檢測(cè)
04
提取
待測(cè)DNA
轉(zhuǎn)基因
生物
PCR
通過(guò)電泳檢測(cè)是否擴(kuò)增出目的基因
提取
待測(cè)mRNA
轉(zhuǎn)基因
生物
PCR
利用目的基因的核苷酸序列設(shè)計(jì)引物。
PCR中的引物應(yīng)該根據(jù)什么進(jìn)行設(shè)計(jì)？
思考
目的基因的檢測(cè)與鑒定·②DNA分子雜交技術(shù)
04
1.檢測(cè)工具： 。
帶有標(biāo)記(放射性同位素標(biāo)記或熒光分子標(biāo)記等)
的單鏈核酸片段(DNA或RNA)，
能與目的基因的一條鏈發(fā)生堿基互補(bǔ)配對(duì)。
基因探針
利用基因探針檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入的原理是？
思考
堿基互補(bǔ)配對(duì)原則。
目的基因的檢測(cè)與鑒定·②DNA分子雜交技術(shù)
04
2.基本思路：
①制作基因探針,并用 擴(kuò)增;
②提取受體細(xì)胞全部DNA并用 擴(kuò)增，與基因探針置于同一培養(yǎng)液；
③ 處理，使之全部變?yōu)閱捂?，觀(guān)察是否出現(xiàn)雜交DNA片段。
④如果顯示出 ，就表明目的基因已插入染色體DNA中。
PCR
PCR
高溫變性
雜交帶
目的基因的檢測(cè)與鑒定·②DNA分子雜交技術(shù)
04
3.檢測(cè)受體細(xì)胞是否含目的基因的具體過(guò)程：
提取DNA
樣本
基因組DNA
酶切
DNA片段
電泳
轉(zhuǎn)膜
硝酸纖維素膜
基因探針通過(guò)分子雜交與目的基因結(jié)合，產(chǎn)生雜交信號(hào)，能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來(lái)。
待測(cè)DNA
目的基因
目的基因的檢測(cè)與鑒定·③抗原-抗體雜交技術(shù)
04
1.檢測(cè)對(duì)象： ，即檢測(cè)目的基因是否翻譯/成功表達(dá)。
2.基本思路：
蛋白質(zhì)
從轉(zhuǎn)基因生物中提取出 .
用相應(yīng)的抗體進(jìn)行 雜交
若出現(xiàn) ,
則表明目的基因已形成蛋白質(zhì)產(chǎn)品。
待檢測(cè)蛋白質(zhì)
抗原－抗體
雜交帶
抗原-抗體技術(shù)的原理是？
思考
抗原與抗體的特異性結(jié)合。
目的基因的檢測(cè)與鑒定·個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定實(shí)例
04
轉(zhuǎn)基因生物 鑒定方法 成功標(biāo)志
抗蟲(chóng)植物
抗病毒（菌）植物
抗鹽植物
抗除草劑植物
獲取目的基因產(chǎn)物的轉(zhuǎn)基因生物
飼喂害蟲(chóng)
害蟲(chóng)死亡
病毒（菌）感染
未染病
鹽水澆灌
正常生長(zhǎng)
噴灑除草劑
正常生長(zhǎng)
提取細(xì)胞產(chǎn)物與天然產(chǎn)品進(jìn)行
功能活性比較
功能、活性正常
目的基因的檢測(cè)與鑒定
04

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