資源簡介

2026屆高二年級半期考試
生物試題
1-5 BBCBA 6-10 BBBBC 11-15 ADDBB 16-19DCBD
20CD 21BCD
22．（除標(biāo)注外，每空1分，共12分）
(1) 水解蛋白質(zhì)，使得DNA與蛋白質(zhì)分離 溶解蛋白質(zhì)等物質(zhì)，析出不溶于酒精的DNA
(2) PCR技術(shù)擴(kuò)增 人工合成
(3) RNA聚合酶識別并結(jié)合的部位 同時實現(xiàn)兩個目的基因的共同表達(dá)及調(diào)控，從而降低基因工程的成本與復(fù)雜性（2分）
(4)HygBR
(5) F3 R2
(6)CD（2分）
23．（除標(biāo)注外，每空1分，共11分）
(1) 死亡率 緩解 間接
(2) 負(fù)反饋 收支平衡
(3) 10（2分） 30（2分） 處于B狀態(tài)的巖龍蝦種群數(shù)量為35只時，若當(dāng)年最大捕撈量超過30只，種群數(shù)量降到A點以下，死亡率大于出生率，種群會衰退（2分）
24．（除標(biāo)注外，每空1分，共10分）
(1) 變性 氫鍵
(2) 避免目的基因和質(zhì)粒的任意連接、防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化（2分） T4DNA連接酶
(3) 細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài) 利用DNA分子雜交技術(shù)，將大腸桿菌的基因組DNA提取出來，在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素等作標(biāo)記，以此作為探針，使探針與基因組DNA雜交，如果顯示出雜交帶，表明大腸桿菌中含有重組質(zhì)粒（2分）
(4)甘氨酸-脯氨酸-絲氨酸（2分）
25．（除標(biāo)注外，每空1分，共12分）
(1)前者微生物分散的活菌和死菌一起計數(shù)，后者存在多個活菌形成一個菌落的情況且只計數(shù)活菌 （2分）
(2)5000（2分）
(3) 殺死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染（2分） 防止溫度過高殺死菌種（2分）
(4) A A消毒液活菌數(shù)減少量最多，且殺菌時間較短，效率最高（2分）
(5)黑
26．（出標(biāo)注外，每空2分，共11分）
(1) 磷酸二酯鍵（1分） 不破壞標(biāo)記基因，且能保證N基因正常表達(dá)
(2)C-G、A-T、U-A
(3) N基因的兩條鏈 不能擴(kuò)增出目的基因
(4)不污染環(huán)境、增加土壤養(yǎng)分
【分析】PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。
PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。
【詳解】（1）限制酶切割的化學(xué)鍵為磷酸二酯鍵。在構(gòu)建片段甲時，應(yīng)將M1與M2片段分別插入質(zhì)粒的Ⅰ和Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ酶切位點之間，不破壞標(biāo)記基因，且能保證N基因正常發(fā)表達(dá)。
（2）RNA的堿基組成有A、U、G、C，DNA的堿基組成為A、T、G、C，向?qū)NA與B1基因組DNA互補配對可以形成的堿基對有G-C和C-G、A-T、U-A。
（3）用引物P1和P2進(jìn)行PCR可擴(kuò)增N基因，驗證片段甲插入了細(xì)菌B1基因組，所用的模板是N基因的兩條鏈；用該模板與引物P3和P4進(jìn)行PCR，因為P3不能與N基因模板鏈結(jié)合，實驗結(jié)果是不能擴(kuò)增出DNA片段。
（4）與秸稈焚燒相比，利用高效降解纖維素的細(xì)菌處理秸稈的優(yōu)點是不污染環(huán)境、增加土壤養(yǎng)分。2026屆高二年級半期考試
生物試題
時間：75分鐘 滿分：100分
一、單選題（2 19=38分）
1．關(guān)于人類活動對生態(tài)環(huán)境的影響，下列敘述錯誤的是（ ）
A．清潔能源的使用能夠降低碳足跡
B．在近海中網(wǎng)箱養(yǎng)魚不會影響海洋生態(tài)系統(tǒng)
C．全球性的生態(tài)環(huán)境問題往往與人類活動有關(guān)
D．水泥生產(chǎn)不是導(dǎo)致溫室效應(yīng)加劇的唯一原因
2．鈣調(diào)蛋白是廣泛存在于真核細(xì)胞的Ca2+感受器。小鼠鈣調(diào)蛋白兩端有近似對稱的球形結(jié)構(gòu)，每個球形結(jié)構(gòu)可結(jié)合2個Ca2+。下列敘述錯誤的是（ ）
A．鈣調(diào)蛋白的合成場所是核糖體
B．Ca2+是鈣調(diào)蛋白的基本組成單位
C．鈣調(diào)蛋白球形結(jié)構(gòu)的形成與氫鍵有關(guān)
D．鈣調(diào)蛋白結(jié)合Ca2+后，空間結(jié)構(gòu)可能發(fā)生變化
3．ATP可為代謝提供能量，也參與RNA的合成，ATP結(jié)構(gòu)如圖所示，圖中～表示高能磷酸鍵，下列敘述錯誤的是（ ）
A．ATP轉(zhuǎn)化為ADP可為離子的主動運輸提供能量
B．用α位32P標(biāo)記的ATP可以合成帶有32P的RNA
C．β和γ位磷酸基團(tuán)之間的高能磷酸鍵不能在細(xì)胞核中斷裂
D．光合作用可將光能轉(zhuǎn)化為化學(xué)能儲存于β和γ位磷酸基團(tuán)之間的高能磷酸鍵
4．從小鼠胚胎中分離獲取胚胎成纖維細(xì)胞進(jìn)行貼壁培養(yǎng)，在傳代后的不同時間點檢測細(xì)胞數(shù)目，結(jié)果如圖。下列敘述正確的是（ ）
A．傳代培養(yǎng)時，培養(yǎng)皿需密封防止污染
B．選取①的細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)比②更合理
C．直接用離心法收集細(xì)胞進(jìn)行傳代培養(yǎng)
D．細(xì)胞增長進(jìn)入平臺期可能與細(xì)胞密度過大有關(guān)
5．關(guān)于采用瓊脂糖凝膠電泳鑒定PCR產(chǎn)物的實驗，下列敘述正確的是（ ）
A．瓊脂糖凝膠濃度的選擇需考慮待分離DNA片段的大小
B．凝膠載樣緩沖液中指示劑的作用是指示DNA分子的具體位置
C．在同一電場作用下，DNA片段越長，向負(fù)極遷移速率越快
D．瓊脂糖凝膠中的DNA分子可在紫光燈下被檢測出來
6．迷迭香酸具有多種藥理活性。進(jìn)行工廠化生產(chǎn)時，先誘導(dǎo)外植體形成愈傷組織，再進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)獲得迷迭香酸，加入誘導(dǎo)劑茉莉酸甲酯可大幅提高產(chǎn)量。下列敘述錯誤的是（ ）
A．迷迭香頂端幼嫩的莖段適合用作外植體
B．誘導(dǎo)愈傷組織時需加入NAA和脫落酸
C．懸浮培養(yǎng)時需將愈傷組織打散成單個細(xì)胞或較小的細(xì)胞團(tuán)
D．茉莉酸甲酯改變了迷迭香次生代謝產(chǎn)物的合成速率
7．弗蘭克氏菌能夠與沙棘等非豆科木本植物形成根瘤，進(jìn)行高效的共生固氮，促進(jìn)植物根系生長，增強其對旱、寒等逆境的適應(yīng)性。下列敘述錯誤的是（ ）
A．沙棘可作為西北干旱地區(qū)的修復(fù)樹種
B．在礦區(qū)廢棄地選擇種植沙棘，未遵循生態(tài)工程的協(xié)調(diào)原理
C．二者共生改良土壤條件，可為其他樹種的生長創(chuàng)造良好環(huán)境
D．研究弗蘭克氏菌的遺傳多樣性有利于沙棘在生態(tài)修復(fù)中的應(yīng)用
8．糖尿病是危害人類健康的主要疾病之一。恢復(fù)功能性胰島B細(xì)胞總量是治療糖尿病的重要策略。我國學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，向患有糖尿病的小鼠注射胰高血糖素受體單克隆抗體（mAb），可以促進(jìn)胰島A細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)少數(shù)胰島A細(xì)胞向胰島B細(xì)胞轉(zhuǎn)化，促進(jìn)功能性胰島B細(xì)胞再生。根據(jù)上述實驗結(jié)果，下列敘述錯誤的是（ ）
A．mAb的制備可能涉及細(xì)胞融合技術(shù)
B．注射mAb可降低胰腺分泌胰高血糖素的量
C．mAb和胰高血糖素均能與胰高血糖素受體特異性結(jié)合
D．胰高血糖素主要通過促進(jìn)肝糖原分解和非糖物質(zhì)轉(zhuǎn)化為糖，升高血糖水平
9．植物甲抗旱、抗病性強，植物乙分蘗能力強、結(jié)實性好。科研人員通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育出兼有甲、乙優(yōu)良性狀的植物丙，過程如下圖所示。下列敘述錯誤的是（ ）
A．過程①中酶處理的時間差異，原因可能是兩種親本的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)有差異
B．過程②中常采用滅活的仙臺病毒或PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合
C．過程④和⑤的培養(yǎng)基中均需要添加生長素和細(xì)胞分裂素
D．可通過分析植物丙的染色體，來鑒定其是否為雜種植株
10．人的前胰島素原是由110個氨基酸組成的單鏈多肽。前胰島素原經(jīng)一系列加工后轉(zhuǎn)變?yōu)橛?1個氨基酸組成的活性胰島素，才具有降血糖的作用。該實例體現(xiàn)了生物學(xué)中“結(jié)構(gòu)與功能相適應(yīng)”的觀念。下列敘述與上述觀念不相符合的是（ ）
A．熱帶雨林生態(tài)系統(tǒng)中分解者豐富多樣，其物質(zhì)循環(huán)的速率快
B．高溫處理后的抗體，失去了與抗原結(jié)合的能力
C．硝化細(xì)菌沒有中心體，因而不能進(jìn)行細(xì)胞分裂
D．草履蟲具有纖毛結(jié)構(gòu)，有利于其運動
11．研究者探究不同濃度的雌激素甲對牛的卵母細(xì)胞和受精卵在體外發(fā)育的影響，實驗結(jié)果如下表所示。根據(jù)實驗數(shù)據(jù)，下列敘述錯誤的是（ ）
甲的濃度（μg/mL） 卵母細(xì)胞（個） 第一極體排出（個） 成熟率（%） 卵裂數(shù)（個） 卵裂率（％）
0 106 70 66.0 28 40.0
1 120 79 65.8 46 58.2
10 113 53 46.9 15 28.3
100 112 48 42.8 5 10.4
A．實驗結(jié)果說明甲抑制卵裂過程
B．甲濃度過高抑制第一極體的排出
C．添加1μg/mL的甲可提高受精后胚胎發(fā)育能力
D．本實驗中，以第一極體的排出作為卵母細(xì)胞成熟的判斷標(biāo)準(zhǔn)
12．研究發(fā)現(xiàn)，某種蘆鹀分布在不同地區(qū)的三個種群，因棲息地環(huán)境的差異導(dǎo)致聲音信號發(fā)生分歧。不同蘆鹀種群的兩個和求偶有關(guān)的鳴唱特征，相較于其他鳴唱特征有明顯分歧。因此推測和求偶有關(guān)的鳴唱特征，在蘆鹀的早期物種形成過程中有重要作用。下列敘述錯誤的是（ ）
A．蘆鹀的鳴唱聲屬于物理信息
B．求偶的鳴唱特征是蘆鹀與棲息環(huán)境之間協(xié)同進(jìn)化的結(jié)果
C．蘆鹀之間通過鳴唱形成信息流，蘆鹀既是信息源又是信息受體
D．和求偶有關(guān)的鳴唱特征的差異，表明這三個蘆鹀種群存在生殖隔離
13．波爾山羊享有“世界山羊之王”的美譽，具有生長速度快、肉質(zhì)細(xì)嫩等優(yōu)點。生產(chǎn)中常采用胚胎工程技術(shù)快速繁殖波爾山羊。下列敘述錯誤的是（ ）
A．選擇遺傳性狀優(yōu)良的健康波爾母山羊進(jìn)行超數(shù)排卵處理
B．胚胎移植前可采集滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行遺傳學(xué)檢測
C．普通品質(zhì)的健康杜泊母綿羊不適合作為受體
D．生產(chǎn)中對提供精子的波爾公山羊無需篩選
14．據(jù)報道，2015年到2019年長江經(jīng)濟(jì)帶人均生態(tài)足跡由0.3212hm2下降至0.2958hm2，5年的下降率為7.91%。人均生態(tài)承載力從0.4607hm2下降到0.4498hm2，5年的下降率為2.37%。結(jié)合上述數(shù)據(jù)，下列敘述錯誤的是（ ）
A．長江經(jīng)濟(jì)帶這5年處于生態(tài)盈余的狀態(tài)
B．長江經(jīng)濟(jì)帶這5年的環(huán)境容納量維持不變
C．長江經(jīng)濟(jì)帶居民綠色環(huán)保的生活方式有利于生態(tài)足跡的降低
D．農(nóng)業(yè)科技化和耕地質(zhì)量的提升可提高長江經(jīng)濟(jì)帶的生態(tài)承載力
15．2021年3月，習(xí)近平總書記在考察武夷山國家公園時指出，建立以國家公園為主體的自然保護(hù)地體系，目的就是按照山水林田湖草是一個生命共同體的理念，保持自然生態(tài)系統(tǒng)的原真性和完整性，保護(hù)生物多樣性。根據(jù)以上精神，結(jié)合生物學(xué)知識，下列敘述錯誤的是（ ）
A．在國家公園中引入外來物種，有可能導(dǎo)致生物多樣性下降
B．建立動物園和植物園，能夠更好地對瀕危動植物進(jìn)行就地保護(hù)
C．規(guī)范人類活動、修復(fù)受損生境，有利于自然生態(tài)系統(tǒng)的發(fā)育和穩(wěn)定
D．在破碎化生境之間建立生態(tài)廊道，是恢復(fù)自然生態(tài)系統(tǒng)完整性的重要措施
16．制醋、制飴、制酒是我國傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。醋酸菌屬于好氧型原核生物，常用于食用醋的發(fā)酵。下列敘述錯誤的是（ ）
A．食用醋的酸味主要來源于乙酸 B．醋酸菌不適宜在無氧條件下生存
C．醋酸菌含有催化乙醇氧化成乙酸的酶 D．葡萄糖在醋酸菌中的氧化分解發(fā)生在線粒體內(nèi)
17．細(xì)胞是生物體結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。下列敘述正確的是（ ）
A．病毒通常是由蛋白質(zhì)外殼和核酸構(gòu)成的單細(xì)胞生物
B．原核生物因為沒有線粒體所以都不能進(jìn)行有氧呼吸
C．哺乳動物同一個體中細(xì)胞的染色體數(shù)目有可能不同
D．小麥根細(xì)胞吸收離子消耗的ATP主要由葉綠體產(chǎn)生
18．采用稻田養(yǎng)蟹的生態(tài)農(nóng)業(yè)模式既可提高水稻產(chǎn)量又可收獲螃蟹。下列敘述錯誤的是（ ）
A．該模式中水稻屬于第一營養(yǎng)級
B．該模式中水稻和螃蟹處于相同生態(tài)位
C．該模式可促進(jìn)水稻對二氧化碳的吸收
D．該模式中碳循環(huán)在無機環(huán)境和生物間進(jìn)行
19．大豆是我國重要的糧食作物。下列敘述錯誤的是（ ）
A．大豆油含有不飽和脂肪酸，熔點較低，室溫時呈液態(tài)
B．大豆的蛋白質(zhì)、脂肪和淀粉可在人體內(nèi)分解產(chǎn)生能量
C．大豆中的蛋白質(zhì)含有人體細(xì)胞不能合成的必需氨基酸
D．大豆中的脂肪和磷脂均含有碳、氫、氧、磷4種元素
二、多選題(每題3分，共6分。全部選對得3分，選對但不全得1分，有選錯得0分)
20．某些香蕉植株組織中存在的內(nèi)生菌可防治香蕉枯萎病，其篩選流程及抗性檢測如圖。下列操作正確的是（ ）
A．在大量感染香蕉枯萎病的香蕉種植園內(nèi)，從感病植株上采集樣品
B．將采集的樣品充分消毒后，用蒸餾水沖洗，收集沖洗液進(jìn)行無菌檢測
C．將無菌檢測合格的樣品研磨，經(jīng)稀釋涂布平板法分離得到內(nèi)生菌的單菌落
D．判斷內(nèi)生菌的抗性效果需比較有無接種內(nèi)生菌的平板上的病原菌菌斑大小
21．研究人員對小鼠進(jìn)行致病性大腸桿菌接種，構(gòu)建腹瀉模型。用某種草藥進(jìn)行治療，發(fā)現(xiàn)草藥除了具有抑菌作用外，對于空腸、回腸黏膜細(xì)胞膜上的水通道蛋白3（AQP3）的相對表達(dá)量也有影響，結(jié)果如圖所示。下列敘述正確的是（ ）
A．水的吸收以自由擴(kuò)散為主、水通道蛋白的協(xié)助擴(kuò)散為輔
B．模型組空腸黏膜細(xì)胞對腸腔內(nèi)水的吸收減少，引起腹瀉
C．治療后空腸、回腸AQP3相對表達(dá)量提高，緩解腹瀉，減少致病菌排放
D．治療后回腸AQP3相對表達(dá)量高于對照組，可使回腸對水的轉(zhuǎn)運增加
三、非選擇題（共56分）
22．將天然Ti質(zhì)粒改造成含有Vir基因的輔助質(zhì)粒（輔助T-DNA轉(zhuǎn)移）和不含有Vir基因、含有T-DNA的穿梭質(zhì)粒，共同轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，可提高轉(zhuǎn)化效率。細(xì)菌和棉花對密碼子偏好不同，為提高翻譯效率，增強棉花抗病蟲害能力，進(jìn)行如下操作。回答下列問題。
注：F1-F3，R1-R3表示引物；T-DNA-LB表示左邊界；T-DNA-RB表示右邊界；Ori表示復(fù)制原點；KanR表示卡那霉素抗性基因；HygBR表示潮霉素B抗性基因。
(1)從蘇云金桿菌提取DNA時，需加入蛋白酶，其作用是 。提取過程中加入體積分?jǐn)?shù)為95%的預(yù)冷酒精，其目的是 。
(2)本操作中獲取目的基因的方法是 和 。
(3)穿梭質(zhì)粒中p35s為啟動子，其作用是 ，驅(qū)動目的基因轉(zhuǎn)錄；插入兩個p35s啟動子，其目的可能是 。
(4)根據(jù)圖中穿梭質(zhì)粒上的KanR和HygBR兩個標(biāo)記基因的位置，用 基因?qū)?yīng)的抗生素初步篩選轉(zhuǎn)化的棉花愈傷組織。
(5)為檢測棉花植株是否導(dǎo)入目的基因，提取棉花植株染色體DNA作模板，進(jìn)行PCR，應(yīng)選用的引物是 和 。
(6)本研究采用的部分生物技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程，理由是______。
A．通過含有雙質(zhì)粒的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化棉花細(xì)胞
B．將蘇云金桿菌Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中表達(dá)
C．將1-1362基因序列改變?yōu)槊藁?xì)胞偏好密碼子的基因序列
D．用1-1362合成基因序列和1363-1848天然基因序列獲得改造的抗蟲蛋白
23．為協(xié)調(diào)漁業(yè)資源的開發(fā)和保護(hù)，實現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展，研究者在近海漁業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的管控區(qū)中劃分出甲（捕撈）、乙（非捕撈）兩區(qū)域，探究捕撈產(chǎn)生的生態(tài)效應(yīng)，部分食物鏈如圖1。回答下列問題。
(1)甲區(qū)域巖龍蝦的捕撈使海膽密度上升，海藻生物量下降。捕撈壓力加劇了海膽的種內(nèi)競爭，引起海膽的遷出率和 上升。乙區(qū)域禁捕后，捕食者的恢復(fù) （填“緩解”或“加劇”）了海膽的種內(nèi)競爭，海藻生物量增加。以上研究說明捕撈能 （填“直接”或“間接”）降低海洋生態(tài)系統(tǒng)中海藻的生物量。
(2)根據(jù)乙區(qū)域的研究結(jié)果推測，甲區(qū)域可通過 調(diào)節(jié)機制恢復(fù)到乙區(qū)域的狀態(tài)。當(dāng)甲區(qū)域達(dá)到生態(tài)平衡，其具有的特征是結(jié)構(gòu)平衡、功能平衡和 。
(3)為了合理開發(fā)漁業(yè)資源，構(gòu)建生態(tài)學(xué)模型，探究巖龍蝦種群出生率和死亡率與其數(shù)量的動態(tài)關(guān)系。僅基于模型（圖2）分析，對處于B狀態(tài)的巖龍蝦種群進(jìn)行捕撈時，為持續(xù)獲得較大的巖龍蝦產(chǎn)量，當(dāng)年捕撈量應(yīng)為 只；當(dāng)年最大捕撈量不能超過 只，否則需要采取有效保護(hù)措施保證巖龍蝦種群的延續(xù)，原因是 。
24．某同學(xué)采用基因工程技術(shù)在大腸桿菌中表達(dá)蛋白E。回答下列問題。
(1)該同學(xué)利用PCR擴(kuò)增目的基因。PCR的每次循環(huán)包括變性、復(fù)性、延伸3個階段，其中DNA雙鏈打開成為單鏈的階段是 ，引物與模板DNA鏈堿基之間的化學(xué)鍵是 。
(2)質(zhì)粒載體上有限制酶a、b、c的酶切位點，限制酶的切割位點如圖所示。構(gòu)建重組質(zhì)粒時，與用酶a單酶切相比，用酶a和酶b雙酶切的優(yōu)點體現(xiàn)在 （答出兩點即可）；使用酶c單酶切構(gòu)建重組質(zhì)粒時宜選用的連接酶是 。
(3)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌前，通常先將受體細(xì)胞處理成感受態(tài)，感受態(tài)細(xì)胞的特點是 ；若要驗證轉(zhuǎn)化的大腸桿菌中含有重組質(zhì)粒，簡要的實驗思路和預(yù)期結(jié)果是 。
(4)蛋白E基因中的一段DNA編碼序列（與模板鏈互補）是GGGCCCAAGCTGAGATGA，編碼從GGG開始，部分密碼子見表。若第一個核苷酸G缺失，則突變后相應(yīng)肽鏈的序列是 。
氨基酸 賴氨酸 精氨酸 絲氨酸 脯氨酸 亮氨酸 甘氨酸 終止
密碼子 AAG AGA AGC CCA CCC CUG GGC GGG UGA
25．合理使用消毒液有助于減少傳染病的傳播。某同學(xué)比較了3款消毒液A、B、C殺滅細(xì)菌的效果，結(jié)果如圖所示。回答下列問題。
(1)該同學(xué)采用顯微鏡直接計數(shù)法和菌落計數(shù)法分別測定同一樣品的細(xì)菌數(shù)量，發(fā)現(xiàn)測得的細(xì)菌數(shù)量前者大于后者，其原因是 。
(2)該同學(xué)從100 mL細(xì)菌原液中取1 mL加入無菌水中得到10 mL稀釋菌液，再從稀釋菌液中取200 μL涂布平板，菌落計數(shù)的結(jié)果為100，據(jù)此推算細(xì)菌原液中細(xì)菌濃度為 個/mL。
(3)菌落計數(shù)過程中，涂布器應(yīng)先在酒精燈上灼燒，冷卻后再涂布。灼燒的目的是 ，冷卻的目的是 。
(4)據(jù)圖可知殺菌效果最好的消毒液是 ，判斷依據(jù)是 。（答出兩點即可）
(5)鑒別培養(yǎng)基可用于反映消毒液殺滅大腸桿菌的效果。大腸桿菌在伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基上生長的菌落呈 色。
26．某研究小組將纖維素酶基因（N）插入某種細(xì)菌（B1）的基因組中，構(gòu)建高效降解纖維素的菌株（B2）。該小組在含有N基因的質(zhì)粒中插入B1基因組的M1與M2片段；再經(jīng)限制酶切割獲得含N基因的片段甲，片段甲兩端分別為M1與M2；利用CRISPR/Cas9基因組編輯技術(shù)將片段甲插入B1的基因組，得到菌株B2。酶切位點（I～Ⅳ）、引物（P1～P4）的結(jié)合位置、片段甲替換區(qū)如圖所示，→表示引物5'→3'方向。回答下列問題。
(1)限制酶切割的化學(xué)鍵是 。為保證N基因能在菌株B2中表達(dá)，在構(gòu)建片段甲時，應(yīng)將M1與M2片段分別插入質(zhì)粒的Ⅰ和Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ酶切位點之間，原因是 。
(2)CRISPR/Cas9技術(shù)可以切割細(xì)菌B1基因組中與向?qū)NA結(jié)合的DNA。向?qū)NA與B1基因組DNA互補配對可以形成的堿基對有G－C和 。
(3)用引物P1和P2進(jìn)行PCR可驗證片段甲插入了細(xì)菌B1基因組，所用的模板是 ；若用該模板與引物P3和P4進(jìn)行PCR，實驗結(jié)果是 。
(4)與秸稈焚燒相比，利用高效降解纖維素的細(xì)菌處理秸稈的優(yōu)點是 （答出2點即可）。

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