資源簡介

北師大版（2019）高中生物《發酵工程》綜合訓練
學校:___________姓名：___________班級：___________考號：___________
一、單選題
1．某制藥公司含“紅曲”成分的保健品致人死亡事件給中國消費者也敲響了警鐘。紅曲是由紅曲菌發酵制得，《本草綱目》有記載：“紅曲主治消食活血，健脾燥胃。”紅曲霉在傳統發酵釀造工藝中主要作為輔助菌種使用，可使產品有一定的色澤和風味。某品牌企業以紅曲霉為發酵菌種生產陳醋的流程如下圖所示，下列相關說法錯誤的是（ ）
A．發酵產酒精時，發酵罐需要先通氣，使菌種數量增多
B．由酒精發酵轉變為甜醋發酵，需要改變的環境條件是增大氧氣含量和提高溫度
C．膨化可使糖化更充分，加普洱熟茶可以增加陳醋的風味
D．含“紅曲”成分的保健品致人死亡可能是其在發酵過程中產生了有害的次生代謝物
2．下列關于無菌操作的敘述正確的是（ ）
A．對培養皿中的菌株進行稀釋時，盛有無菌水的試管僅消毒處理，會造成雜菌污染
B．加入培養基中的指示劑和染料不需要滅菌
C．利用組織培養技術繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進行滅菌
D．接種時灼燒接種環后立刻對菌種劃線
3．下列哪項不是發酵工程的優點（ ）
A．生產條件溫和 B．原料來源豐富、價格低廉
C．廢棄物對環境的污染小且容易處理 D．可同時獲得多種產物
4．關于微生物的培養,下列說法正確的是
A．培養基、手、接種環、工作臺等都需要用適宜的方法滅菌處理
B．制備固體培養基的操作程序為計算、稱量、溶化、滅菌、調pH、倒平板
C．平板劃線法和稀釋涂布平板法都可用于大腸桿菌的純化培養
D．稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比實際活菌數多
5．《唐書》記載：“葡萄酒，西域有之……及破高昌……京中始識其味。”《吐魯番出土文書》記載了古代高昌所謂“踏漿”之法，也就是破碎葡萄果粒的方法，與今日一些酒廠沿用的方法非常相似。下列敘述錯誤的是（ ）
A．古代釀制葡萄酒利用了自然界的野生酵母菌
B．“踏漿”法有利于酵母菌與葡萄汁液混合均勻
C．葡萄酒釀制利用了酵母菌無氧呼吸產生酒精的原理
D．在葡萄酒釀制的整個過程中需要嚴格保證無氧環境
6．細菌需要從外界吸收營養物質并通過代謝來維持正常的生長和繁殖。下列與此有關的說法正確的是（ ）
A．乳酸菌與硝化細菌所利用的碳源物質是相同的
B．氮源不可能作為細菌的能源物質
C．瓊脂是細菌生長和繁殖中不可缺少的一種物質
D．以尿素為唯一氮源的培養基上長出的不都是尿素分解菌
7．近年來，蘋果醋、梨醋等成為果醋市場新貴，該產品由水果汁經“兩次發酵”而成。下列關于“兩次發酵”的敘述，正確的是（ ）
A．第一次發酵指乳酸發酵，第二次發酵指醋酸發酵
B．第一次發酵pH逐漸升高，第二次發酵pH逐漸降低
C．兩次發酵的主要微生物均為單細胞原核生物
D．第二次發酵的溫度比第一次發酵的溫度高
8．由于石油等不可再生資源供應日趨緊張，開發各種再生纖維素纖維成為獲取新型紡織原料的主要渠道，而纖維素分解菌在轉化可再生纖維素方面具有巨大的應用價值。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．富集纖維素分解菌時，應用固體培養基培養
B．分離纖維素分解菌時，培養基中應加入適量的剛果紅
C．可用平板劃線法對纖維素分解菌進行純化培養
D．培養纖維素分解菌時，接種后的培養基需倒置
9．下列有關發酵工程及其應用的敘述，正確的有幾項（ ）
①生產食品酸度調節劑檸檬酸需要篩選產酸量高的黑曲霉
②發酵工程的產品主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身
③谷氨酸棒狀桿菌發酵生產谷氨酸時，培養液的pH應調至酸性
④啤酒的工業化生產過程中，酒精的產生積累主要在后發酵階段
⑤一種放線菌產生的抗生素——井岡霉素可以用于防治水稻枯紋病
A．2項 B．3項 C．4項 D．5項
10．某學習小組欲調查學校生態園土壤中細菌的數量，下列相關操作錯誤的是（　　）
A．在酒精燈火焰附近稱取土壤樣品
B．稀釋土壤樣品的倍數控制在104～106倍
C．土壤樣品稀釋后采用平板劃線法進行接種
D．可以采用牛肉膏蛋白胨培養基培養
11．醋酸菌是原核生物，在有氧條件下可將乙醇氧化成醋酸，有些醋酸菌還能氧化醋酸生成CO2和H2O，反應如下圖，乙醇制醋結束后通常會加入食鹽。下列敘述正確的是（ ）
乙醇乙醛醋酸 CO2+H2O
A．O酶與乙醇結合后一定不會發生形變
B．P酶為乙醛生成醋酸的過程提供能量
C．醋酸菌的生物膜系統為Q酶提供了附著位點
D．食鹽作用可能是防止醋酸繼續生成CO2和H2O
12．發酵產品是中國傳統食品中一個重要的類別，下列相關敘述正確的是（ ）
A．泡菜制作過程中，壇內大量增加的液體主要來自微生物的代謝
B．果醋發酵時，需打開發酵瓶的充氣口
C．將葡萄汁煮沸冷卻后裝入發酵瓶，密閉發酵即可得到葡萄酒
D．腐乳制作過程利用的是毛霉產生的蛋白酶和淀粉酶
13．研究人員從土壤中分離出A、B、C、D四種菌株，并用選擇培養基對其進行鑒別和篩選，結果如表所示。下列敘述正確的是（ ）
培養基 菌株 以淀粉為唯一碳源的培養基 以纖維素為唯一碳源的培養基 以酪蛋白為唯一氮源的培養基 以尿素為唯一氮源的培養基
菌株A +++ - - -
菌株B - +++ - -
菌株C +++ + - -
菌株D - - +++ -
注：+代表產生透明圈，+數量越多表示透明圈越大，-代表無透明圈。
A．四種菌株均可以尿素作為唯一氮源
B．菌株B主要以纖維素作為碳源
C．以淀粉為唯一碳源的培養基可鑒別出菌株A和菌株C
D．菌株C在以纖維素為唯一碳源的培養基上不能生長
14．土壤中的解磷細菌能分泌磷酸酶或有機酸，溶解并吸收利用磷酸鈣，某企業從土壤中分離純化并發酵生產解磷細菌菌肥，發酵液中解磷細菌濃度達到2×108個/mL時發酵結束，分裝入庫。投放市場前應抽檢活菌濃度，下列敘述正確的是（ ）
A．從土壤中分離解磷細菌的培養基以磷酸鈣為唯一的磷源
B．可挑取發酵液中單菌落進行進一步純化培養
C．解磷菌菌肥發酵生產的中心環節是接種及分離提純產物
D．抽檢活菌濃度時，取0．1mL發酵液稀釋104倍后用涂布平板法計數
15．微生物需要從外界吸收營養物質來維持正常的生長和繁殖。下列關于微生物營養的敘述，正確的是（ ）
A．尿素分解菌和纖維素分解菌的培養基中可能含有相同的無機鹽
B．篩選硝化細菌（自養型）的培養基中需加入適宜濃度的有機碳源
C．只含有水和無機鹽兩類成分的培養基中不可能形成生物群落
D．乳酸菌需要的特殊營養物質是指其自身不能合成的某些無機物
二、多選題
16．1881年，科赫在第七屆全球醫學大會展示了用固體培養基進行平板涂布分離微生物的技術，該技術深刻地影響和促進了整個微生物學的發展。平板涂布部分操作如圖所示，下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．稀釋涂布平板法可用于分離純化大腸桿菌
B．平板涂布時，涂布器在灼燒后應立即進行涂板，以免雜菌污染
C．圖中的平板涂布操作中的唯一不規范之處是培養皿的蓋完全打開
D．稀釋涂布平板法計數得到的結果往往會比實際活菌數目要高
17．下列關于生物技術實踐中的有關檢驗的敘述中，正確的是（ ）
A．在果酒制作實驗結束時可用溴麝香草酚藍溶液檢驗是否有酒精產生
B．在微生物培養中，檢驗培養基是否被污染的方法是用一組不接種或接種無菌水的培養基與接種培養物的培養基一起培養
C．檢驗以尿素為唯一氮源的培養基是否分離出了分解尿素的細菌，方法是在培養基中加入酚紅指示劑，若指示劑變紅，則說明分離成功
D．檢驗產生透明圈的菌落是否是分解纖維素的微生物，可以進行發酵產纖維素酶的實驗
18．篩選淀粉分解菌需使用以淀粉為唯一碳源的培養基。接種培養后，若細菌能分解淀粉，培養平板經稀碘液處理，會出現以菌落為中心的透明圈（如圖），實驗結果見下表。下列有關本實驗的敘述，錯誤的是（ ）
菌種 菌落直徑C/mm 透明圈直徑H/mm H/C
細菌Ⅰ 5．1 11．2 2．2
細菌Ⅱ 5．1 13．0 1．6
A．培養基除淀粉外還含有氮源等其他營養物質
B．篩選分解淀粉的細菌時，菌液可直接涂布
C．以上兩種細菌均不能將淀粉酶分泌至細胞外
D．H/C值反映了兩種細菌分解淀粉能力的差異
三、解答題
19．回答與生物技術在食品加工中應用有關的問題：
(1)制作藍莓果酒過程中，在不滅菌的情況下，酵母菌成為優勢菌種的原因是 。隨著酒精度數的提高，藍莓果酒的顏色越來越深的原因是 。
(2)泡菜制作的原理： 。
(3)腐乳制作中，起主要作用的微生物是毛霉，它與乳酸菌在結構上的主要區別是 。
(4)制作泡菜時，對鹽水進行的煮沸冷卻后在使用的原因 。
20．羧甲基纖維素鈉（CMC）是常用的食品添加劑，不能被人體消化吸收，因此通常被認為是安全的食品添加劑。研究者用含1.0%CMC的無菌水作為飲用水，連續飼喂實驗小鼠12周，測定小鼠體重。結果如下圖所示。

(1)根據實驗結果分析CMC是否引起體重變化與 有關。
(2)有人推測小鼠攝入的CMC改變了其腸道內各種微生物的比例。為檢驗上述推測，研究者設計了如下實驗：分別收集A、B組小鼠糞便，制成懸液涂布于_________（選填選項前的符號）上。
A．全營養液體培養基 B．全營養固體培養基
C．以CMC為碳源的液體培養基 D．以CMC為碳源的固體培養基
(3)接種后置于 （填“無氧”或“有氧”）條件下培養，通過觀察比較菌落的種類和數量以確定推測是否成立。
(4)為進一步研究“小鼠體重變化是否由CMC引起的小鼠消化道內各種微生物比例改變所致”，研究者設計了糞菌移植實驗，請完善實驗設計方案。
實驗備選材料：普通小鼠、無菌小鼠、飼喂含CMC無菌水12周的普通小鼠、飼喂無菌水12周的普通小鼠、含1.0%CMC的無菌水、無菌水。
實驗組：將 的糞菌移植到無菌小鼠消化道內，用無菌水作為飲用水。
對照組：將 的糞菌移植到無菌小鼠消化道內，用無菌水作為飲用水。
兩組小鼠在相同且適宜的無菌環境中培養一段時間，測定小鼠的 。
實驗結果： ，說明小鼠體重變化是由CMC引起的小鼠消化道內各種微生物比例改變所致。
四、實驗題
21．某同學在制作泡菜前，查閱資料得知，可以向泡菜壇中加些“陳泡菜水”；在用質量分數為5%的食鹽水制作泡菜時，他在不同時間測定了泡菜中亞硝酸鹽的含量，結果如圖，探究下列問題：
(1)據圖分析，泡菜發酵時間是不是越長越好 ？
(2)他第一次制作出的泡菜“咸而不酸”，造成這個結果最可能的原因是什么 ？
(3)加入“陳泡菜水”的目的是什么 ？
22．擴展青霉是腐爛蘋果中常見的微生物之一，其次級代謝產物棒曲霉素（Pat）是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，研究人員進行了如圖所示的實驗，其中“病健交界處”為腐爛部位與未腐爛部位的交界處，取樣分離的5個部分分別為①號部位、②號部位、③號部位、④號部位、⑤號部位。

(1)該實驗中將擴展青霉菌種接種到蘋果上，這里的蘋果相當于接種培養的 。
(2)活化擴展脊霉菌種使用的培養基成分如表所示，該培養基根據物理性質屬于 培養基，判斷依據是 ，其中能為擴展青霉的生長繁殖提供能源的是 ，NaNO3的作用是 （答兩點）。
蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCI FeSO4 KH2PO4 蒸餾水
30g 2g 0.5g 0.5g 0.01g 1g 1000mL
(3)若想快速直觀的測定青霉菌的數量，最常用的方法是 ，實驗結果統計的菌落數往往比活菌的實際數目低，其原因是 .檢測時使用的接種量為0.1mL而不是1mL，原因是 。
(4)用平板劃線法分離擴展青霉時，劃線的某個平板培養后第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，其他區域的劃線上卻均無菌落。操作失誤的原因可能是 。接種擴展青霉前，應對蘋果進行 （填“消毒”或“滅菌”）。研究人員測定了病斑直徑為1、2、3cm的蘋果中①～⑤號部位的Pat含量，結果如圖。

(5)根據上圖分析，下列說法正確的是（ ）
A．腐爛部位中的Pat含量最高
B．病斑越大，腐爛部位的Pat含量越高
C．離腐爛部位越遠的果肉中Pat含量越低
D．1cm和2cm病斑蘋果中，從①號到②號部位的Pat含量下降幅度較大
(6)實驗結束后，需要對實驗所用器材進行 處理，目的是
試卷第1頁，共3頁
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《北師大版（2019）高中生物《發酵工程》綜合訓練》參考答案
題號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
答案 C A D C D D D A B C
題號 11 12 13 14 15 16 17 18
答案 D B B A A BCD BCD BC
1．C
【分析】醋酸制作的菌種是醋酸菌，代謝類型是需氧型細菌，屬于原核細胞，條件是30～35℃、一直需氧。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。
【詳解】A、有氧條件下，酵母菌進行繁殖，所以發酵產酒精時，發酵罐需要先通氣，使菌種數量增多，A正確；
B、由酒精發酵轉變為甜醋發酵，需要改變的環境條件是增大氧氣含量和提高溫度，B正確；
C、膨化處理是指將糧食加入密閉容器中，加熱加壓后突然減壓，糧食中的水分汽化膨脹，使其出現許多小孔，變得松脆，這有利于加大與紅曲霉的接觸面積，使發酵更充分，C錯誤；
D、發酵產生的有毒物質不是微生物必需的物質，屬于次生代謝物，則含“紅曲”成分的保健品致人死亡可能是發酵過程中產生了有害的次生代謝物，D正確。
故選C。
2．A
【分析】微生物實驗室培養的關鍵是防止雜菌污染，無菌操作分為消毒合滅菌，其中消毒只是殺死物體表面的微生物，而殺菌是殺死所有微生物，常用的滅菌方法有高壓蒸汽滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌。
【詳解】A、對培養皿中的菌株進行稀釋時，盛有無菌水的試管僅消毒處理，不能徹底消滅雜菌，會造成雜菌污染，A正確；
B、指示劑和染料中可能混有微生物，為了防止雜菌污染，加入培養基中的指示劑和染料需要滅菌，B錯誤；
C、利用組織培養技術無菌繁殖脫毒苗時，植物的外植體要進行消毒，以避免被雜菌污染，若滅菌，外植體會失去活性，C錯誤；
D、接種時灼燒接種環之后，要冷卻后再對菌種劃線，以免溫度太高殺死菌種，D錯誤。
故選A。
3．D
【分析】發酵工程的優點有：生產條件溫和、原料來源豐富、價格低廉、廢棄物對環境的污染小且容易處理。
【詳解】發酵工程的優點有：生產條件溫和、原料來源豐富、價格低廉、廢棄物對環境的污染小且容易處理，發酵工程的產物專一，不能同時獲得多種產物，ABC正確，D錯誤。
故選D。
4．C
【詳解】A、培養基、接種環、工作臺等都需要用適宜的方法滅菌處理，而手只能消毒，不能滅菌，A錯誤；
B、制備固體培養基的操作程序為計算、稱量、溶化、調pH、滅菌、倒平板，B錯誤；
C、平板劃線法和稀釋涂布平板法都可用于大腸桿菌的純化培養，其中或者還可以用于計數，C正確；
D、由于菌落會重疊，所以稀釋涂布平板法統計的菌落數往往比實際活菌數少，D錯誤。
故選C。
5．D
【分析】果酒制作過程中，發酵工序：①將葡萄汁裝入發酵瓶，留1/3的空間并封閉充氣口；②制作葡萄酒的過程中，將溫度嚴格控制在18℃—25℃，時間控制在10—12d左右，可通過出料口對發酵的情況進行及時的監測。
【詳解】A、在葡萄酒的自然發酵過程中起主要作用的是附著在葡萄皮上的野生型酵母菌，所以古代釀制葡萄酒利用的是葡萄皮上的野生酵母菌，A正確；
B、“踏漿”法使葡萄破碎，葡萄皮上的酵母菌可以更好的與葡萄汁液混合接觸，酵母菌可以快速發酵加速酒的生成，B正確；
C、酵母菌屬于兼性厭氧菌，其在無氧條件下可以進行無氧呼吸，產生酒精和二氧化碳，C正確；
D、釀酒工序繁多，而酵母菌在缺氧時才發酵產生酒精，所以只需發酵過程保證無氧環境即可，D錯誤。
故選D。
6．D
【分析】微生物培養基的成分有水、無機鹽、碳源、氮源和生長因子，不同的生物有不同的碳源和氮源，如尿素分解菌以尿素為唯一氮源，某些碳源、氮源也可以提供能源，如牛肉膏蛋白胨培養基，據此答題。
【詳解】A、乳酸菌是異養型微生物，需要有機碳源，而硝化細菌是自養型微生物，需要的碳源是二氧化碳 ，A錯誤；
B、有些無機氮源也可以提供能量，如硝化細菌可以利用氧化氨釋放的能量進行有機物的合成，B錯誤；
C、培養基中的瓊脂是凝固劑，不會被微生物利用，C錯誤；
D、自生固氮微生物可以利用大氣中的氨氣作為氮源，因此以尿素為唯一氮源的培養基上長出的不都是尿素分解菌，D正確。
故選D。
7．D
【分析】酵母菌是兼性厭氧菌，在無氧條件下進行酒精發酵；醋酸菌是好氧細菌，當氧氣、糖源都充足時，能將糖分分解成醋酸，當缺少糖源時，則將乙醇轉化為乙醛，再將乙醛變成醋酸。
【詳解】A、第一次發酵指酒精發酵，第二次發酵指醋酸發酵，A錯誤；
B、第一次發酵pH逐漸降低，第二次發酵pH逐漸降低，B錯誤；
C、第一次發酵使用酵母菌為真核生物，第二次為醋酸菌，為單細胞原核生物，C錯誤；
D、第二次發酵的溫度比第一次發酵的溫度高，D正確。
故選D。
8．A
【分析】1、篩選纖維素分解菌應用以纖維素為唯一碳源的擇選培養基。
2、剛果紅可以與纖維素形成紅色復合物，纖維素分解菌產生的纖維素酶可以水解纖維素而使菌落周圍出現透明圈，所以可以用剛果紅染液鑒別纖維素分解菌。
【詳解】A、在分離出纖維素分解菌之前，需對微生物進行富集培養，此時應用液體培養基，利于培養液與微生物充分接觸，加速微生物繁殖，A錯誤；
B、在分離纖維素分解菌時，培養基以纖維素作為唯一碳源，且應加入剛果紅染液，B正確；
C、對纖維素分解菌進行純化培養時，可采用平板劃線法或稀釋涂布平板法， C正確；
D、接種后，為防止皿蓋上凝結的水珠滴落在培養基上造成培養基污染，應將培養基進行倒置培養，D正確。
故選A。
9．B
【分析】發酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現代工程技術，規模化生產對人類有用的產品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身。發酵工程一般包括菌種的選育，擴大培養，培養基的配制、滅菌，接種，發酵、產品的分離、提純等步驟。
【詳解】①生產檸檬酸需要篩選產酸量高的黑曲霉，①正確；
②發酵工程是指利用微生物的特定功能，通過現代工程技術，規模化生產對人類有用的產品，主要包括微生物的代謝物、酶及菌體本身，②正確；
③谷氨酸棒狀桿菌發酵時，需在中性或弱堿性條件下，才能積累谷氨酸，故生產谷氨酸需將pH調至中性或弱堿性，③錯誤；
④啤酒發酵過程分為主發酵和后發酵兩個階段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都是在主發酵階段完成，故啤酒的工業化生產過程中，酒精的產生積累主要在主發酵階段完成，④錯誤；
⑤利用放線菌通過發酵工程產生的井岡霉素可以用來防治水稻枯紋病，這是微生物農藥的實例，⑤正確。
綜上所述可知，有3項正確，B正確，ACD錯誤。
故選B。
10．C
【分析】微生物常見的接種的方法：
（1）平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種、劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
（2）稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。
【詳解】A、稱取土壤樣品時應在酒精燈火焰旁，這是因為酒精燈火焰旁有無菌區，能夠防止雜菌污染，A正確；
B、細菌在土壤中的數量較多，因而稀釋土壤樣品的倍數通常控制在104～106倍，B正確；
C、欲調查學校生態園土壤中細菌的數量，需采用稀釋涂布平板法分離菌種，平板劃線法不能計數，C錯誤；
D、本實驗的目的是調查學校生態園土壤中細菌的數量，因此可以采用牛肉膏蛋白胨培養基培養，D正確。
故選C。
11．D
【分析】參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養需氧型。果醋制作的原理：當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。
【詳解】A、O酶與乙醇，即與底物結合后會發生空間結構的改變，A錯誤；
B、P酶不能為乙醛生成醋酸的過程提供能量，而是能降低該化學反應的活化能，B錯誤；
C、醋酸菌為原核生物，只有細胞膜這一種膜結構，不具有生物膜系統，C錯誤；
D、乙醇制醋結束后通常會加入食鹽，此時食鹽的作用起到了抑菌的作用，進而可防止醋酸繼續生成CO2和H2O，D正確。
故選D。
12．B
【分析】1、參與泡菜制作的微生物是乳酸菌，泡菜制作的原理：（1）乳酸菌在無氧條件下，將糖分解為乳酸。（2）利用乳酸菌制作泡菜的過程中會引起亞硝酸鹽的含量的變化。
2、醋酸菌好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生長的最佳溫度是在30℃～35℃。
【詳解】A、泡菜制作過程中，壇內大量增加的液體主要來自蔬菜細胞滲透失水，A錯誤；
B、果醋發酵時，發酵瓶中如有較多游離的液體，則影響發酵液的通氣性，不利發酵，需打開發酵瓶的充氣口，B正確；
C、將葡萄汁煮沸后，葡萄自帶的菌種被殺滅，難以自制葡萄酒，C錯誤；
D、在腐乳制作中，主要利用毛霉等微生物產生的蛋白酶和脂肪酶將豆腐中的蛋白質和脂肪分解為小分子物質，D錯誤。
故選B。
13．B
【分析】選擇培養基是將允許特定種類的微生物生長、同時抑制或阻止其他微生物生長的培養基；鑒別培養基是在培養基中加入某種試劑或化學藥品，使培養后會發生某種變化，從而區別不同類型的微生物的培養基。
【詳解】A、由題意可知，選擇培養基上的透明圈越大，說明分解相應物質的能力越強。由表格內容可知，四種菌株在以尿素為唯一氮源的培養基上均不能產生透明圈，說明四種菌株均不能分解尿素，即不能以尿素作為唯一氮源，A錯誤；
B、對比菌株B在四種選擇培養基上產生透明圈的情況可知，菌株B主要以纖維素作為碳源，B正確；
C、菌株A和菌株C均可以淀粉為唯一碳源，因此不能用以淀粉為唯一碳源的培養基鑒別出菌株A和菌株C，C錯誤；
D、菌株C在以纖維素為唯一碳源的培養基上可以生長，D錯誤。
故選B。
14．A
【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養，在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養皿表面，經培養后可形成單個菌落。
【詳解】A、解磷細菌能分泌磷酸酶或有機酸，溶解并吸收利用磷酸鈣，故可在培養基加入磷酸鈣為唯一磷源，以達到從土壤中分離出解磷細菌的目的，A正確；
B、單菌落是由單個細胞在固體培養基上形成的菌落，液體培養基上無法形成菌落，B錯誤；
C、發酵生產包含菌種的選育、擴大培養，培養基的配制，滅菌，接種，發酵，產品的分離、提純等環節。其中中心環節是發酵，C錯誤；
D、投放市場前需抽檢發酵液中活菌濃度、而發酵結束時，發酶液中解磷細菌濃度達到2×108個 / m L，若取0.1mL發酵液稀釋104倍，則稀釋液中解磷細菌的濃度為0.2×104個/ m L，用涂布平板法計數時會由于稀釋倍數不夠、導致解磷菌不夠分散、影響菌落數的統計，D錯誤。
故選A。
15．A
【分析】培養基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽。培養基還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。如培養乳酸桿菌時需添加維生素，培養霉菌時需將pH調至酸性，培養細菌時需將pH調至中性或微堿性。選擇培養基是指允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基。
【詳解】A、尿素分解菌的培養基中含有的無機鹽是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4，纖維素分解菌的培養基中含有的無機鹽是NaNO3、KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、KCl。A正確；
B、硝化細菌是自養生物，可以用空氣中CO2作為碳源，用缺乏有機碳源的培養基可以篩選硝化細菌。B錯誤；
C、只含有水和無機鹽兩類成分的培養基，可以培養既能固氮又能以CO2作為碳源的微生物（如固氮藍藻）。C錯誤；
D、乳酸菌需要的特殊營養物質是維生素，是有機物。D錯誤。
故選A。
16．BCD
【分析】稀釋涂布平板法：稀釋涂布平板法除了可以用于分離微生物外，也常用來統計樣品中活菌的數目。當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統計平板上的菌落數，就能推測樣品大約含有多少活菌。
【詳解】A、當樣品的稀釋度足夠高時，培養基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，所以稀釋涂布平板法可用于分離純化大腸桿菌，A正確；
B、平板涂布時，涂布器在灼燒后應該待酒精燃盡、涂布器冷卻后，再進行涂布，B錯誤；
C、圖中的平板涂布操作中的不規范之處除了培養皿的蓋完全打開，還有沒有在火焰旁進行等，C錯誤；
D、當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，稀釋涂布平板法計數得到的結果往往會比實際活菌數目要少，D錯誤。
故選BCD。
17．BCD
【分析】1、酒精與酸性重鉻酸鉀溶液反應呈現灰綠色，因此可以用酸性重鉻酸鉀溶液檢測酒精。
2、分解尿素的菌能將尿素轉化成氨氣，使培養基堿性增強，pH升高，酚紅指示劑會變紅。
【詳解】A、檢測酒精產生應用橙色的重鉻酸鉀溶液，溴麝香草酚藍溶液用來檢驗CO2的產生，A錯誤；
B、在微生物培養中，檢驗培養基是否被污染的方法是將未接種的培養基或接種無菌水的培養基與接種培養物的培養基一起放在恒溫培養箱中培養，如果未接種的培養基或接種無菌水的培養基沒有菌落生長，說明培養基制作合格，即沒有被污染，B正確；
C、鑒定分解尿素的細菌可用加入酚紅指示劑且以尿素為唯一氮源的培養基是否出現紅色來判斷，C正確；
D、為確定得到的是纖維素分解菌，還需進行發酵產纖維素酶的實驗，可通過纖維素酶分解濾紙等纖維素后產生的葡萄糖進行定量測定，D正確。
故選BCD。
18．BC
【分析】1、培養基的營養構成：
①各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽；
②不同培養基還要滿足不同微生物對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。
2、據圖分析：圖示接種方法為稀釋涂布平板法，菌種Ⅰ分解淀粉的能力更強。
【詳解】A、培養基一般含有碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子等成分，A正確；
B、篩選淀粉分解菌時，需要對菌液進行一系列的梯度稀釋，再將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養基上進行培養，B錯誤；
C、由題意可知，題中兩種菌均會產生透明圈，說明兩種菌均可以產生淀粉酶并分泌到細胞外分解淀粉，C錯誤；
D、淀粉分解菌的H/C值越大，說明其產生的淀粉酶分解的淀粉相對越多，可說明該淀粉分解菌分解淀粉的能力越強，D正確。
故選BC。
19．(1) 在缺氧、呈酸性的發酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數其他微生物都因無法適應這一環境而受到抑制 藍莓細胞中的色素進入發酵液
(2)乳酸菌在無氧的環境下大量繁殖進行無氧呼吸，將葡萄糖分解成乳酸
(3)毛霉有以核膜為界限的細胞核
(4)避免高溫殺死細菌，保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響
【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精；生產中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。
【詳解】（1）在缺氧、呈酸性的發酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數其他微生物都因無法適應這一環境而受到抑制，故制作藍莓果酒過程中，在不滅菌的情況下，酵母菌成為優勢菌種；隨著酒精度數的提高，藍莓細胞中的色素進入發酵液，藍莓果酒的顏色越來越深。
（2）制作泡菜利用了乳酸菌的無氧呼吸，制作泡菜的原理是乳酸菌在無氧的環境下大量繁殖進行了無氧呼吸，將葡萄糖分解成乳酸。
（3）毛霉屬于真菌，乳酸菌屬于細菌，毛霉與乳酸菌在結構上的主要區別是毛霉有以核膜為界限的細胞核。
（4）制備泡菜的鹽水應煮沸后冷卻使用，目的是避免高溫殺死細菌，保證乳酸菌等微生物的生命活動不受影響。
20．(1)生活環境
(2)B
(3)無氧
(4) 飼喂含CMC無菌水12周的普通小鼠 飼喂無菌水12周的普通小鼠 體重變化 實驗組小鼠體重大于對照組
【分析】探究實驗的原則：對照原則和單一變量原則。培養基營養構成：各種培養基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。
【詳解】（1）根據題干信息和圖形分析可知，圖1和圖2實驗自變量為是否用CMC處理和是否含有微生物；比較A、B組體重差值與C、D組體重差值，可以看出在普通環境中差值較大，在無菌環境中幾乎無差值，這說明CMC的這種作用依賴于小鼠消化道內的各種微生物。因此CMC是否引起體重變化與生活環境有關。
（2）該實驗的目的是探究小鼠攝入的CMC是否改變了其腸道內各種微生物的比例，因此應該搜集生存在普通環境中的A、B小鼠糞便制成懸浮液涂布于全營養固體培養基上，B符合題意。
故選B。
（3）人體消化道中缺氧，因此接種后應該置于無氧條件下培養。
（4）根據題意分析，該實驗的目的是研究“小鼠體重變化是否由CMC引起的小鼠消化道內各種微生物比例改變所致”，根據對照原則和單一變量原則（無菌水中是否含有CMC）可設計以下糞便移植實驗：
實驗組：將飼喂含 CMC 無菌水12周的普通小鼠的糞菌移植到無菌小鼠的消化道內，用無菌水作為飲用水。
對照組：將飼喂無菌水 12周的普通小鼠的糞菌移植到無菌小鼠消化道內，用無菌水作為飲用水。
兩組小鼠在相同且適宜的無菌環境中培養一段時間，測定小鼠的體重變化。
實驗結果：實驗組小鼠體重大于對照組，說明小鼠體重變化是由 CMC 引起的小鼠消化道內各種微生物比例改變所致。
21．(1)不是；泡菜發酵時間長，亞硝酸鹽含量低，但是發酵時間過長，會產生其他有害物質。11～13天食用比較好，此時亞硝酸鹽含量低。
(2)鹽濃度過高，殺死了乳酸菌等微生物。
(3)“陳泡菜水”含乳酸菌，可快速發酵產生乳酸。
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。據圖可知，泡菜腌制的5-7天內亞硝酸鹽的含量較高，不宜食用。
【詳解】（1）亞硝酸鹽過多會導致人體中毒，據圖分析，亞硝酸鹽在5-7天是含量最高的時候，在11天后亞硝酸鹽的含量最低，即對人體傷害最小，因此食用腌制的泡菜應在腌制11-13天后。
（2）鹽具有殺菌的作用，如果制作泡菜的過程中鹽過多就會影響乳酸菌的活性或殺死乳酸菌，影響乳酸菌的發酵，使制作的泡菜“咸而不酸”，影響泡菜的品質。
（3）“陳泡菜水”中含有乳酸菌，加入“陳泡菜水”相當于接種乳酸菌，增加了乳酸菌的數量。
22．(1)培養基
(2) 液體 培養基中沒有瓊脂（或凝固劑） 蔗糖 為擴展青霉的生長提供氮源和無機鹽，并維持培養液一定的滲透壓
(3) 稀釋涂布平板法 當兩個或多個菌種連在一起時形成的是一個菌落 避免接種量過高，保證培養基上的菌落數在30-300之間，易于平板計數
(4) 第一區域劃線結束，接種環灼燒后未冷卻或劃線未從第一區域末端開始 消毒
(5)ACD
(6) 滅菌 防止擴展青霉污染環境
【分析】1、按物理性質培養基分為固體培養基、液體培養基。固體培養基中加入凝固劑，主要用于微生物的分離、鑒定；液體培養基中不加任何凝固劑，主要用于工業生產。
2、平板劃線操作的注意事項：第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環滅菌；灼燒接種環之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種；劃線時最后一區域不要與第一區域相連；劃線用力大小要適當，防止用力過大將培養基劃破。
3、消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內部的部分微生物（不包括芽孢和孢子），滅菌則是指使用強烈的理化因素殺死物體內外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
【詳解】（1）該實驗中將擴展青霉菌種接種到蘋果上，這里的蘋果相當于接種培養的培養基。
（2）活化擴展青霉菌種使用的培養基成分中沒有凝固劑，故根據物理性質屬于液體培養基，其中能為擴展青霉的生長繁殖提供能源的是蔗糖。NaNO3的作用是為擴展青霉的生長提供氮源和無機鹽、并維持培養液一定的滲透壓。
（3）若想快速直觀的測定青霉菌的數量，最常用的方法是稀釋涂布平板法。由于當兩個或多個菌體連在一起時形成的是一個菌落，故實驗結果統計的菌落數往往比活菌的實際數目低。檢測時使用的接種量為0.1mL而不是1mL，原因是避免接種量過高，保證培養基上的菌落數在30-300之間，易于平板計數。
（4）劃線時需要從上一次劃線的末端開始劃線。用平板劃線法分離擴展青霉時，劃線的某個平板培養后第一劃線區域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，其他區域的劃線上卻均無菌落。導致失誤的原因可能是：第一區域劃線結束，接種環灼燒后未經冷卻直接在第二區域劃線；或劃線未從第一區域末端開始，從而導致這種情況的出現。接種擴展青霉前，為了避免蘋果上其他雜菌、病原微生物的污染，應對蘋果進行消毒處理。
（5）A、由圖可知，①號為腐爛部位，曲線圖中每條曲線①號部位的Pat含量都是最高的，A正確；
B、在曲線圖中，3cm的①部位比2cm的①部位Pat含量要稍低，故病斑越大腐爛部位的 Pat 含量不一定越高，B錯誤；
C、①為腐爛部位，②③④⑤依次距離腐爛部位越來越遠，而曲線圖中從①到⑤Pat含量逐漸降低，故離腐爛部位越遠的果肉中 Pat 含量越低，C正確；
D、由曲線圖可知，1cm 和 2cm 病斑蘋果中，從①號到②號部位的Pat含量下降0.9—1.2左右，故下降幅度較大，D正確。
故選ACD。
（6）實驗結束后，需要對實驗所用器材進行滅菌處理，以防止擴展青霉污染環境。
答案第1頁，共2頁
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