資源簡介

2025年高考生物復習考前沖刺 細胞工程
一．選擇題（共16小題）
1．（2024秋 南開區期末）下列與動物細胞細胞工程和胚胎工程有關的敘述中，錯誤的是（　　）
A．體外培養的動物細胞需定期用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續增殖
B．利用體細胞核移植技術可以生成帶有供體核遺傳物質的胚胎干細胞
C．雜交瘤細胞的克隆化培養可獲得由單個細胞分裂增殖產生的細胞團
D．胚胎移植后經受體孕育的后代，其遺傳特性與供體保持一致
2．（2024秋 東城區期末）利用小麥細胞與柴胡細胞進行植物體細胞雜交，希望獲得具有柴胡藥效的小麥。通過PCR對雜種植株和雙親植株的物種特異性DNA進行擴增，電泳結果如圖所示。下列說法不正確的是（　　）
A．用纖維素酶和果膠酶處理柴胡和小麥細胞
B．用電融合的方法或PEG誘導原生質體融合
C．雜種細胞中丟失了部分來自小麥的遺傳信息
D．雜種細胞染色體組成與柴胡細胞完全相同
3．（2024秋 常州期末）關于細胞工程的操作，下列敘述錯誤的是（　　）
A．花藥離體培養得到的胚狀體需要鑒定核型，篩選后才能用于單倍體育種
B．誘導植物形成愈傷組織時往往要避光培養，而在再分化過程中要有光照
C．將動物組織塊中的細胞分散開時，胰蛋白酶和膠原蛋白酶都需要使用
D．制備單克隆抗體過程中，第二次篩選時挑出陽性孔中的細胞擴大培養
4．（2025 浙江模擬）下列關于動物細胞工程的敘述，錯誤的是（　　）
A．PEG誘導動物細胞融合形成的雜種細胞，經動物細胞培養不能得到優良動物個體
B．培養的體細胞傳代次數不能過多是為了保持細胞正常的二倍體核型
C．在高倍顯微鏡下觀察發生基因突變的細胞比例可推知某化學藥品的毒性
D．胰蛋白酶處理動物組織后，用培養液稀釋制成細胞懸浮液
5．（2025 浙江模擬）體外受精技術是提高動物繁殖能力的有效措施，該技術還可為胚胎移植提供可用的胚胎。下列關于體外受精和胚胎移植的敘述，錯誤的是（　　）
A．在精子的刺激下，卵子完成減數分裂Ⅱ，排出第二極體后形成雌原核
B．精子入卵后細胞膜會迅速發生生理反應，阻止其他精子進入卵細胞
C．對奶牛胚胎進行分割時，應選擇發育良好、形態正常的原腸胚進行均等分割
D．“設計試管嬰兒”利用了體外受精技術、胚胎移植技術和遺傳學診斷技術
6．（2025 內蒙古模擬）下列有關牛體外受精的敘述錯誤的是（　　）
A．精子需經過獲能步驟，才可用于體外受精
B．卵母細胞需培養至MⅡ期，與精子結合完成受精
C．體外受精需加入聚乙二醇等誘導精卵結合
D．精子入卵后卵細胞膜發生生理反應，阻止其他精子進入
7．（2025 內蒙古模擬）動物細胞培養時操作不當會造成“黑膠蟲”細菌的污染，該菌對氯霉素敏感。下列敘述正確的是（　　）
A．配制細胞培養基時，加血清（含細胞生長必需的蛋白）和氯霉素后濕熱滅菌
B．在加入氯霉素防治“黑膠蟲”污染過程中，需要考慮細胞和細菌生長雙重因素
C．考察“黑膠蟲”污染程度時，應取細胞培養液，直接涂布在平板上培養后計數
D．采用更換培養基、胰蛋白酶處理和分瓶培養等操作可清除“黑膠蟲”污染
8．（2025 內蒙古模擬）關于膜融合的相關對象，下列敘述正確的是（　　）
A．胰蛋白酶分泌過程中，內質網產生的囊泡會與細胞膜融合
B．克隆羊過程中，電融合法促進供體細胞核和卵細胞融合
C．制備單克隆抗體過程中，將骨髓瘤細胞和T細胞融合
D．清除衰老細胞器過程中，會存在囊泡與溶酶體的融合
9．（2025 內蒙古模擬）下列關于植物細胞工程的敘述，正確的是（　　）
A．誘導愈傷組織形成和后續培養過程中均需提供適宜的溫度和光照
B．誘導愈傷組織再分化需改變激素的濃度和比例
C．獲得的試管苗通常直接移栽大田
D．獲得的脫毒苗具有抗病毒能力
10．（2024秋 海淀區期末）醫學上把已經消除體細胞“記憶”，且恢復到胚胎細胞狀態的細胞稱為“重編程”細胞。研究發現，將通透性強的纖維原細胞短暫地暴露于鼠胚胎干細胞提取物中能獲得“重編程”細胞。下列有關敘述正確的是（　　）
A．提取物通過改變細胞的遺傳物質獲得“重編程”細胞
B．“重編程”細胞的獲得過程體現了纖維原細胞的全能性
C．“重編程”細胞的獲得過程會改變細胞的形態、結構和功能
D．該項研究可以表明正常機體內細胞的分化過程是可逆的
11．（2024秋 重慶校級期末）CD14為抗巨噬細胞表面標志蛋白，制備抗CD14單克隆抗體的流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（　　）
A．步驟①和⑤是分別注射CD14蛋白和注射分泌抗CD14抗體的雜交瘤細胞
B．步驟②選用SP2/0細胞是因為該細胞具有能夠在體外無限增殖的生長特點
C．吸取③中上清液到④培養孔中，③所得雜交瘤細胞均能分泌抗CD14抗體
D．步驟③采用了選擇培養基進行篩選，步驟④則利用了抗原﹣抗體雜交的原理
12．（2024秋 朝陽區期末）法律和法規是規范生物技術研究，防止生物技術濫用的有力武器。下列敘述與我國相關法規不符的是（　　）
A．用農業轉基因生物加工制成的產品需提供標識
B．不得將體外受精獲得的人類胚胎植入人體生殖系統
C．在任何情況下不發展、不生產、不儲存生物武器
D．禁止非醫學需要的胎兒性別鑒定和選擇性別人工終止妊娠
13．（2024秋 朝陽區期末）IL﹣17A是一種細胞因子，在銀屑病等自身免疫病的發病機制中發揮關鍵作用。我國科研人員研發了抗IL﹣17A人源﹣鼠源重組單克隆抗體。以下關于該抗體制備過程的敘述正確的是（　　）
A．用IL﹣17A注射小鼠，從小鼠血清中分離出B細胞
B．用滅活病毒誘導小鼠B細胞與骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞
C．用克隆化培養和PCR技術篩選出能分泌抗IL﹣17A抗體的雜交瘤細胞
D．用蛋白質工程技術直接將鼠源抗IL﹣17A抗體中的部分氨基酸序列替換為人源
14．（2024秋 朝陽區期末）我國科學家研制的干細胞藥物——“人臍帶間充質干細胞治療心衰注射液”，已經進入臨床試驗階段。據此推測合理的是（　　）
A．人臍帶間充質干細胞進入人體后可以分化為心肌細胞
B．人臍帶間充質干細胞與心肌細胞的基因表達情況相同
C．人臍帶間充質干細胞與心肌細胞的形態結構相同
D．人臍帶間充質干細胞比心肌細胞的分化程度高
15．（2024秋 靖遠縣校級期末）6﹣磷酸葡萄糖脫氫酶（G﹣6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理，利用含血清的培養液進行原代培養，然后制成細胞懸液，轉入無血清培養液對不同的單個細胞分別進行單克隆培養，克隆形成率與接種細胞密度的關系如表。分別從原代培養和各單克隆培養中取樣，對提取到的G﹣6PD蛋白進行電泳檢測，結果如圖所示。下列有關敘述錯誤的是（　　）
克隆形成率與接種細胞密度的關系
1mL中接種細胞數/個 1cm2上接種細胞數/個 克隆形成率/%
10000 2000 0.1
1000 200 1.0
20 4 50
10 2 100
A．無血清培養液必須含酶抑制劑，以保護細胞免受殘留的消化酶過度消化而損傷
B．為提高克隆形成率，需將原代培養制成的細胞懸液稀釋為10個細胞/mL或更低
C．原代培養的細胞電泳圖中出現2種不同條帶是等位基因XF和XS同時表達的產物
D．出現圖示實驗結果的原因可能是女性細胞中的一條X染色體隨機失活而導致的
16．（2024秋 靖遠縣校級期末）體外受精的早期胚胎在體外發育中，往往會停止在某一階段不再發育，這種現象稱為發育阻滯。研究表明，胚胎的發育阻滯與胚胎的母源基因調控向自身基因調控轉換有關。小鼠的受精卵發育早期的胚胎基本受母源性信息調控，自身基因的啟動最早出現在2細胞期，該時期的胚胎對環境極為敏感。下列有關敘述正確的是（　　）
A．從活的母畜中采集到的卵母細胞均可直接用于體外受精
B．小鼠的胚胎發育阻滯一般發生在開始出現分化的囊胚期
C．體外培養條件與體內發育條件的差異不會造成發育阻滯
D．調控轉換時可能發生母源mRNA被降解失活，自身基因轉錄活躍
二．解答題（共4小題）
17．（2024秋 南開區期末）研究者以擬南芥根段作為組織培養材料，探討了激素誘導愈傷組織分化生芽的機制。請分析回答：
（1）離體的擬南芥根段在適宜條件下可以培育出完整的植株，說明 　 　。
（2）剪下根段后需要經過一系列的消毒過程，一般先用流水沖洗，然后在無菌操作臺上依次用 　 　和次氯酸鈉溶液等消毒劑浸泡消毒，從每種消毒劑中取出根段后需用 　 　沖洗多次，再用無菌濾紙吸干表面水分。
（3）植物組織培養常用的MS培養基是在已配制好的MS母液中添加 　 　、瓊脂、植物激素等配制而成。在組織培養過程中，根段細胞經過 　 　過程形成愈傷組織，此后調整培養基中細胞分裂素（CK）與生長素的比例可誘導愈傷組織分化。
（4）愈傷組織生芽過程中，細胞分裂素（CK）通過ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。為探討A基因與W基因的關系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型的愈傷組織分別置于細胞分裂素（CK）與生長素比例高的（高CK）培養基中誘導生芽，測定此過程中W基因的表達量，結果如圖1。分析得出結論：在高CK誘導下A基因 　 　（填“促進”或“抑制”）W基因表達。得出該結論的依據為：與野生型相比，　 　。
（5）采用轉基因技術在上述突變體a中過量表達W基因，獲得材料甲。將材料甲、突變體a和野生型三組愈傷組織在高CK培養基中培養，三組愈傷組織分化生芽的比例如圖2，由此能得出的結論包括 　 　。（多選）
A.A基因在愈傷組織生芽過程中起作
B.缺失A基因，W基因表達不能促進生芽
C.過量表達W基因可使生芽時間提前
D.W基因的表達產物調控A基因的表達
18．（2024秋 南開區期末）EB病毒（EBV）可引發鼻咽癌等癌癥。我國科研人員制備有效阻斷EBV感染的單克隆抗體，為治療和疫苗研發提供思路。
（1）如圖1所示，EBV表面的糖蛋白gHgL與上皮細胞表面受體（如E2等）結合后，引起gB發生 　 　變化，啟動病毒包膜和上皮細胞膜融合。gHgL可作為制備有效阻斷EBV感染的單克隆抗體的 　 　。
不同熒光標記的分于 相關分子的特點
熒光A﹣抗CD4抗體 CD4為輔助性T細胞的標記分子
熒光B﹣抗CD8抗體 CD8為輔助毒性T細胞的體記分子
熒光C﹣抗CD20抗體 CD20為B細胞的標記分子
熒光D﹣抗CD56抗體 CD56為NK細胞的標記分子
熒光E﹣gHgL gHgL可與細胞上的受體特異性結合
（2）研究人員從EBV感染者外周血中分離出單個核細胞（PBMC），包含自然殺傷（NK）細胞、T細胞、B細胞。將右上表中不同熒光標記的分子與PBMC培養后篩選出目標細胞，將目標細胞中的抗體mRNA 　 　為cDNA，擴增出gHgL抗體基因，轉入細胞成功表達出單克隆抗體。篩選出的目標細胞應具有熒光 　 　。（填寫表格中大寫字母）
（3）經篩選得到單抗D8，與已報道的單抗A1相比，兩者都有較強的gHgL結合能力，都能顯著抑制EBV病毒感染上皮細胞。將gHgL與D8或A1混合接觸后，檢測與上皮細胞表面受體E2的結合能力，結果如圖2。分析可知D8與A1作用的區別是 　 　。
19．（2025 云南模擬）嵌合抗原受體﹣T細胞（CAR﹣T細胞）療法在人類腫瘤治療中取得了重要突破。CAR﹣T細胞療法是將CAR基因導入T細胞成為CAR﹣T細胞，通過CAR蛋白上的scFv肽鏈（小肽不足以發揮抗原作用，但能發揮抗體識別作用）特異性識別腫瘤細胞膜上的抗原，并通過CAR蛋白上的其它肽鏈結構激活CAR﹣T細胞繼而殺傷腫瘤細胞。回答下列問題：
（1）獲得含有scFv肽鏈的單克隆抗體，流程如圖1。
①圖中通過驅動細胞和測試細胞反復免疫小鼠產生抗體的過程屬于 　 　（填“細胞”或“體液”）免疫，參與該過程的免疫細胞來源于小鼠骨髓 　 　。實驗小鼠機體產生免疫應答的過程中，輔助性T細胞的主要作用是 　 　。該實驗最適用于篩選 　 　（填標號）。
A．大鼠肝細胞區別于兔肝細胞特殊抗原的抗體
B．正常細胞區別于感染HIV細胞內特殊抗原的抗體
C．衰老神經細胞區別于正常神經細胞抗原的抗體
②取第二組小鼠分離脾細胞，加入 　 　誘導脾細胞和骨髓瘤細胞的融合。
（2）CAR基因的構建，流程如圖2。在設計添加CAR基因兩端限制酶識別序列并與表達載體正確連接的過程中，必須考慮的有 　 　（填標號）。
A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶識別序列
B．CAR基因內可以含有引物所含限制酶識別序列
C．限制酶識別序列需位于載體啟動子、復制原點和標記基因內
D．上、下游引物所含限制酶識別序列不同
E．CAR基因插入載體位點需位于啟動子下游
（3）從免疫學角度分析，如果用高特異性抗體DNA直接構建CAR基因，再通過載體導入T細胞并穩定表達，不但會使治療效果大幅降低，同時還會 　 　。
20．（2023秋 宣威市校級期末）我國科學家經過多年的反復試驗，可以在10s之內對卵母細胞進行去核操作，在15s之內將體細胞注入去核的卵母細胞里。有評論者認為：該研究的研究者利用“聰明的化學方法和操作技巧”，攻克了多年來導致體細胞克隆猴失敗的障礙。培育克隆猴的流程如圖所示，結合圖回答問題：
（1）研究人員在將胎猴的體細胞注入去核的卵母細胞前，用滅活的仙臺病毒進行了短暫處理。在此過程中，滅活的仙臺病毒所起的作用　 　。
（2）哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度小于體細胞核移植，其原因是　 　。
（3）動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是　 　，去除的“核”具體是指　 　。一般利用未去核的卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，其原因是　 　（答出2點）。
（4）體細胞克隆猴的另一個技術難點是猴的體細胞克隆胚胎發育差。科學家發現，胚胎發育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關。由此推測，圖中Kdm4d的mRNA翻譯產生的酶的作用是　 　。
2025年高考生物復習考前沖刺 細胞工程
參考答案與試題解析
題號 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
答案 A D C C C C B D B C C
題號 12 13 14 15 16
答案 B B A C D
一．選擇題（共16小題）
1．（2024秋 南開區期末）下列與動物細胞細胞工程和胚胎工程有關的敘述中，錯誤的是（　　）
A．體外培養的動物細胞需定期用胰蛋白酶處理，分瓶后才能繼續增殖
B．利用體細胞核移植技術可以生成帶有供體核遺傳物質的胚胎干細胞
C．雜交瘤細胞的克隆化培養可獲得由單個細胞分裂增殖產生的細胞團
D．胚胎移植后經受體孕育的后代，其遺傳特性與供體保持一致
【考點】體外受精和胚胎移植；動物細胞培養的條件與過程；單克隆抗體及其應用；動物細胞核移植技術．
【專題】正推法；植物的組織培養；理解能力．
【答案】A
【分析】體外培養的動物細胞可以分為兩大類：一類細胞能夠懸浮在培養液中生長增殖；另一類則需要貼附于某些基質表面才能生長增殖，多數細胞屬于這種類型懸浮培養的細胞直接用離心法收集；貼壁細胞需要重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個細胞。
【解答】解：A、懸浮培養的細胞直接用離心法收集；貼壁細胞需要重新用胰蛋白酶等處理，使之分散成單個細胞，A錯誤；
B、體細胞核移植技術獲得的重組細胞，細胞核來自于供體，可以生成帶有供體核遺傳物質的胚胎干細胞，B正確；
C、克隆化培養指單細胞培養，使之無性繁殖獲得克隆細胞團的方法，將雜交瘤細胞克隆化培養，可獲得由單個細胞分裂增殖產生的細胞團，C正確；
D、代孕母體不提供遺傳物質，提供營養和子宮環境孕育后代，后代的遺傳特性與供體一致，D正確。
故選：A。
【點評】本題考查動物工程的相關內容，要求學生能運用所學的知識正確作答。
2．（2024秋 東城區期末）利用小麥細胞與柴胡細胞進行植物體細胞雜交，希望獲得具有柴胡藥效的小麥。通過PCR對雜種植株和雙親植株的物種特異性DNA進行擴增，電泳結果如圖所示。下列說法不正確的是（　　）
A．用纖維素酶和果膠酶處理柴胡和小麥細胞
B．用電融合的方法或PEG誘導原生質體融合
C．雜種細胞中丟失了部分來自小麥的遺傳信息
D．雜種細胞染色體組成與柴胡細胞完全相同
【考點】植物體細胞雜交技術及應用．
【專題】正推法；植物的組織培養；理解能力．
【答案】D
【分析】植物體細胞雜交技術：將不同來源的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術。
【解答】解：A、用纖維素酶和果膠酶處理柴胡和小麥細胞，以獲得原生質體，A正確；
B、電融合法或PEG誘導法均可以用于原生質體融合過程，B正確；
C、對比雜種植株和小麥的電泳結果可知，小麥中某些條帶在雜種植株中沒有相應的條帶，說明雜種細胞中丟失了部分來自小麥的遺傳信息，C正確；
D、雜種細胞染色體來源于柴胡和小麥，與柴胡細胞不完全相同，D錯誤。
故選：D。
【點評】本題考查植物體細胞雜交的相關知識，要求考生識記植物體細胞雜交的具體過程及意義，能結合所學的知識準確判斷各選項。
3．（2024秋 常州期末）關于細胞工程的操作，下列敘述錯誤的是（　　）
A．花藥離體培養得到的胚狀體需要鑒定核型，篩選后才能用于單倍體育種
B．誘導植物形成愈傷組織時往往要避光培養，而在再分化過程中要有光照
C．將動物組織塊中的細胞分散開時，胰蛋白酶和膠原蛋白酶都需要使用
D．制備單克隆抗體過程中，第二次篩選時挑出陽性孔中的細胞擴大培養
【考點】單克隆抗體及其應用；植物的組織培養；作物新品種的培育；動物細胞培養的條件與過程．
【專題】正推法；育種；植物的組織培養；克隆技術；理解能力．
【答案】C
【分析】植物組織培養：將離體的植物器官、組織或細胞等，培養在人工配制的培養基上，給予適宜的培養條件，誘導其形成完整植株的技術。
【解答】解：A、花藥離體培養得到的胚狀體有可能來自于花藥壁等組織細胞，不一定為單倍體組織，因此需要鑒定核型，篩選后才能用于單倍體育種，A正確；
B、植物組織培養過程中，脫分化形成愈傷組織時要避光培養，而在再分化過程中要有光照，B正確；
C、將動物組織塊中的細胞分散開時，只需要使用胰蛋白酶或膠原蛋白酶即可，C錯誤；
D、制備單克隆抗體過程中，第二次篩選為克隆化培養和單一抗體陽性檢驗，應挑出陽性孔中的細胞擴大培養，D正確。
故選：C。
【點評】本題考查單倍體育種、植物組織培養、動物細胞培養等技術及相關應用，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
4．（2025 浙江模擬）下列關于動物細胞工程的敘述，錯誤的是（　　）
A．PEG誘導動物細胞融合形成的雜種細胞，經動物細胞培養不能得到優良動物個體
B．培養的體細胞傳代次數不能過多是為了保持細胞正常的二倍體核型
C．在高倍顯微鏡下觀察發生基因突變的細胞比例可推知某化學藥品的毒性
D．胰蛋白酶處理動物組織后，用培養液稀釋制成細胞懸浮液
【考點】動物細胞培養的條件與過程；動物細胞融合技術．
【專題】正推法；克隆技術；理解能力．
【答案】C
【分析】動物細胞培養的過程：取動物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉入培養液中（原代培養）→放入二氧化碳培養箱培養→貼滿瓶壁的細胞用酶分散為單個細胞，制成細胞懸液→轉入培養液（傳代培養）→放入二氧化碳培養箱培養。
【解答】解：A、動物細胞融合形成的雜種細胞經過動物細胞培養不能培育成動物個體，且動物細胞培養只能得到大量細胞或細胞產物，不能得到動物個體，A正確；
B、體細胞傳代次數過多遺傳物質會發生改變，培養的體細胞傳代次數不能過多，一般在10代以內，目的是保持細胞正常的二倍體核型，B正確；
C、不能通過顯微鏡觀察到基因突變，C錯誤；
D、胰蛋白酶可以消化細胞間的膠原纖維和其它成分從而獲得單細胞，用培養液稀釋制成細胞懸浮液，D正確。
故選：C。
【點評】本題考查動物細胞培養的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
5．（2025 浙江模擬）體外受精技術是提高動物繁殖能力的有效措施，該技術還可為胚胎移植提供可用的胚胎。下列關于體外受精和胚胎移植的敘述，錯誤的是（　　）
A．在精子的刺激下，卵子完成減數分裂Ⅱ，排出第二極體后形成雌原核
B．精子入卵后細胞膜會迅速發生生理反應，阻止其他精子進入卵細胞
C．對奶牛胚胎進行分割時，應選擇發育良好、形態正常的原腸胚進行均等分割
D．“設計試管嬰兒”利用了體外受精技術、胚胎移植技術和遺傳學診斷技術
【考點】體外受精和胚胎移植；胚胎分割技術．
【專題】正推法；胚胎工程．
【答案】C
【分析】體外受精包括精子的采集和獲能、卵母細胞的采集和培養、體外受精，該技術產生的動物稱為試管動物。
【解答】解：AB、體內受精時，當精子觸及卵細胞膜的瞬間，透明帶會迅速產生生理反應阻止后來的精子進入；精子入卵后卵子完成減 數分裂Ⅱ、排出第二極體、形成雌原核，AB正確；
C、對奶牛胚胎進行分割時，應選擇發育良好、形態正常的桑葚胚或囊胚進行均等分割，不能選擇原腸胚，因為原腸胚高度分化，C錯誤；
D、設計試管嬰兒是指體外受精形成的胚胎在植入母體孕育前，根據人們的需要，將胚胎的一個細胞取出，進行某些基因檢測，設計試管嬰兒利用了體外受精技術、胚胎移植技術和植入前胚胎遺傳學診斷技術，D正確。
故選：C。
【點評】本題主要考查體外受精和胚胎移植、胚胎分割技術的內容，要求考生識記相關知識，并結合所學知識準確答題。
6．（2025 內蒙古模擬）下列有關牛體外受精的敘述錯誤的是（　　）
A．精子需經過獲能步驟，才可用于體外受精
B．卵母細胞需培養至MⅡ期，與精子結合完成受精
C．體外受精需加入聚乙二醇等誘導精卵結合
D．精子入卵后卵細胞膜發生生理反應，阻止其他精子進入
【考點】體外受精和胚胎移植．
【專題】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】C
【分析】哺乳動物的體外受精主要包括卵母細胞的采集和培養、精子的采集和獲能和受精等幾個主要步驟。
【解答】解：A、體外受精時，采集到的精子需要經獲能處理后才具有受精能力，才可用于體外受精，A正確；
B、動物排出的可能是初級卵母細胞也可能是次級卵母細胞，都要在輸卵管內進一步成熟，達到MⅡ時，才具備與精子受精的能力，B正確；
C、體外受精不需加入聚乙二醇等誘導精卵結合，聚乙二醇常用于細胞融合，C錯誤；
D、卵細胞膜反應是指精子外膜和卵黃膜融合，精子入卵后，卵黃膜會拒絕其他精子再進入卵內的過程，這是防止多精入卵的第二道屏障，D正確。
故選：C。
【點評】本題考查體外受精的相關知識，要求考生識記體外受精的具體過程及注意事項，能結合所學的知識準確答題。
7．（2025 內蒙古模擬）動物細胞培養時操作不當會造成“黑膠蟲”細菌的污染，該菌對氯霉素敏感。下列敘述正確的是（　　）
A．配制細胞培養基時，加血清（含細胞生長必需的蛋白）和氯霉素后濕熱滅菌
B．在加入氯霉素防治“黑膠蟲”污染過程中，需要考慮細胞和細菌生長雙重因素
C．考察“黑膠蟲”污染程度時，應取細胞培養液，直接涂布在平板上培養后計數
D．采用更換培養基、胰蛋白酶處理和分瓶培養等操作可清除“黑膠蟲”污染
【考點】動物細胞培養的條件與過程．
【專題】正推法；克隆技術；理解能力．
【答案】B
【分析】動物細胞培養條件：
（1）無菌無毒環境：無菌——對培養液和所有培養用具進行無菌處理；在細胞培養液中添加一定量的抗生素。無毒——定期更換培養液，防止細胞代謝產物積累對自身造成危害。
（2）營養：所需營養物質與體內基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。
（3）溫度和pH值：哺乳動物多以36.5±0.5℃為宜，多數細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
（4）氣體環境：通常采用培養皿或松蓋培養瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養箱中進行培養。O2是細胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養液的pH。
【解答】解：A、配制細胞培養基時，濕熱滅菌后通過過濾滅菌加入血清（含細胞生長必需的蛋白）和氯霉素，A錯誤；
B、在加入氯霉素防治“黑膠蟲”污染過程中，需要考慮細胞和細菌生長雙重因素，保證動物細胞的正常生長，同時抑制細菌的生長，B正確；
C、考察“黑膠蟲”污染程度時，應取細胞培養液，稀釋后涂布在平板上培養，待菌落數目穩定后計數，C錯誤；
D、采用更換培養基、胰蛋白酶處理和分瓶培養等操作都不能清除“黑膠蟲”污染，D錯誤。
故選：B。
【點評】本題考查動物細胞培養的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
8．（2025 內蒙古模擬）關于膜融合的相關對象，下列敘述正確的是（　　）
A．胰蛋白酶分泌過程中，內質網產生的囊泡會與細胞膜融合
B．克隆羊過程中，電融合法促進供體細胞核和卵細胞融合
C．制備單克隆抗體過程中，將骨髓瘤細胞和T細胞融合
D．清除衰老細胞器過程中，會存在囊泡與溶酶體的融合
【考點】單克隆抗體及其應用；各類細胞器的結構和功能．
【專題】正推法；細胞器；克隆技術；理解能力．
【答案】D
【分析】分泌蛋白的合成、加工和運輸過程：最初是在核糖體中由氨基酸形成肽鏈，肽鏈進入內質網進行加工，形成有一定空間結構的蛋白質，再到高爾基體，高爾基體對其進行進一步加工，然后形成囊泡分泌到細胞外。該過程消耗的能量由線粒體提供。
【解答】解：A、胰蛋白酶分泌過程中，內質網產生的囊泡會與高爾基體膜融合，A錯誤；
B、克隆羊過程中，供體細胞被注入卵母細胞后，可通過電融合法促進細胞融合，而非促進細胞核與卵細胞融合，B錯誤；
C、制備單克隆抗體過程中，將骨髓瘤細胞和B細胞融合，C錯誤；
D、溶酶體含多種酸性水解酶，通過含有損傷衰老細胞器的囊泡與溶酶體的融合，能夠清除衰老的細胞器，D正確。
故選：D。
【點評】本題考查膜融合的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
9．（2025 內蒙古模擬）下列關于植物細胞工程的敘述，正確的是（　　）
A．誘導愈傷組織形成和后續培養過程中均需提供適宜的溫度和光照
B．誘導愈傷組織再分化需改變激素的濃度和比例
C．獲得的試管苗通常直接移栽大田
D．獲得的脫毒苗具有抗病毒能力
【考點】植物的組織培養．
【專題】正推法；植物的組織培養；理解能力．
【答案】B
【分析】植物組織培養的過程為：離體的植物組織，器官或細胞經過脫分化（避光）形成愈傷組織；愈傷組織經過再分化（需光）過程形成胚狀體，進一步發育形成植株。決定植物脫分化和再分化的關鍵因素是植物激素的種類和比例，特別是生長素和細胞分裂素的協同作用在組織培養過程中非常重要。
【解答】解：A、誘導愈傷組織形成的過程中不需要光照，后續培養過程中需要光照，A錯誤；
B、生長素與細胞分裂素比值高時有利于誘導根的形成，該比值較低時有利于誘導芽的形成，因此誘導愈傷組織再分化需改變激素的濃度和比例，B正確；
C、獲得的幼苗需要先移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環境中，待其長狀后再移栽到大田中，C錯誤；
D、莖尖等分裂旺盛部位無病毒感染，利用莖尖分生組織能培養出無病毒且保持優良性狀的幼苗，即脫毒苗，脫毒苗不等于抗毒苗，即獲得的脫毒苗不具備抗病毒能力，D錯誤。
故選：B。
【點評】本題考查植物組織培養的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
10．（2024秋 海淀區期末）醫學上把已經消除體細胞“記憶”，且恢復到胚胎細胞狀態的細胞稱為“重編程”細胞。研究發現，將通透性強的纖維原細胞短暫地暴露于鼠胚胎干細胞提取物中能獲得“重編程”細胞。下列有關敘述正確的是（　　）
A．提取物通過改變細胞的遺傳物質獲得“重編程”細胞
B．“重編程”細胞的獲得過程體現了纖維原細胞的全能性
C．“重編程”細胞的獲得過程會改變細胞的形態、結構和功能
D．該項研究可以表明正常機體內細胞的分化過程是可逆的
【考點】干細胞的培養及其應用．
【專題】正推法；細胞的分化、衰老和凋亡．
【答案】C
【分析】細胞的全能性是指細胞經分裂和分化后，仍具有產生完整生物體或分化成其他各種細胞的潛能。
【解答】解；A、“重編程”細胞為恢復到胚胎細胞狀態的細胞，細胞的遺傳物質未發生改變，A錯誤；
B、細胞經分裂和分化后，仍具有產生完整生物體或分化成其他各種細胞的潛能，即細胞的全能性，所以“重編程”細胞的獲得不能體現纖維原細胞的全能性，B錯誤；
C、纖維原細胞是分化后的細胞，具有一定的形態和結構，而“重編程”細胞是胚胎細胞狀態的細胞，其結構與纖維原細胞不同，故“重編程”細胞的獲得過程會改變細胞的形態、結構和功能，C正確；
D、細胞的分化是不可逆的，D錯誤。
故選：C。
【點評】本題主要考查細胞的全能性的相關知識，要求考生能夠結合所學知識準確判斷各選項，屬于識記和理解層次的考查。
11．（2024秋 重慶校級期末）CD14為抗巨噬細胞表面標志蛋白，制備抗CD14單克隆抗體的流程如圖所示。下列敘述錯誤的是（　　）
A．步驟①和⑤是分別注射CD14蛋白和注射分泌抗CD14抗體的雜交瘤細胞
B．步驟②選用SP2/0細胞是因為該細胞具有能夠在體外無限增殖的生長特點
C．吸取③中上清液到④培養孔中，③所得雜交瘤細胞均能分泌抗CD14抗體
D．步驟③采用了選擇培養基進行篩選，步驟④則利用了抗原﹣抗體雜交的原理
【考點】單克隆抗體及其應用．
【專題】模式圖；克隆技術；理解能力．
【答案】C
【分析】單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備，雜交瘤抗體技術是在細胞融合技術的基礎上，將具有分泌特異性抗體能力的效應B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞，雜交瘤細胞既能產生抗體，又能無限增殖。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群，可制備針對一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。
【解答】解：A、要獲得抗CD14單克隆抗體，步驟①應該注射CD14蛋白（CD14抗原），步驟⑤是將分泌抗CD14抗體的雜交瘤細胞注入小鼠體內培養，以獲得大量單克隆抗體，A正確；
B、步驟②所用的SP2/0細胞是骨髓瘤細胞，具有能夠在體外無限增殖的生長特點，B正確；
C、形成雜交瘤細胞的B淋巴細胞種類很多，③所得雜交瘤細胞不一定能分泌抗CD14抗體，需要利用抗原﹣抗體雜交原理進行第二次篩選，C錯誤；
D、步驟③用特定的選擇培養基進行篩選，在該選擇培養基上，只有融合的雜交瘤細胞才能夠生長，沒有融合的細胞及同種核融合的細胞不能生長；步驟④則利用了抗原﹣抗體雜交的原理，用CD14蛋白檢測其中是否含抗CD14蛋白的抗體，D正確。
故選：C。
【點評】本題考查單克隆抗體的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
12．（2024秋 朝陽區期末）法律和法規是規范生物技術研究，防止生物技術濫用的有力武器。下列敘述與我國相關法規不符的是（　　）
A．用農業轉基因生物加工制成的產品需提供標識
B．不得將體外受精獲得的人類胚胎植入人體生殖系統
C．在任何情況下不發展、不生產、不儲存生物武器
D．禁止非醫學需要的胎兒性別鑒定和選擇性別人工終止妊娠
【考點】體外受精和胚胎移植；生物技術引發的倫理問題；生物武器對人類的威脅．
【專題】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】B
【分析】生物安全是指與生物有關的各種因素對社會、經濟、人類健康以及生態環境所產生的危害或潛在風險。消除生物武器威脅、防止生物武器擴散是生物安全防控的重要方面。我國禁止生殖性克隆人原則：不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗。
【解答】解：A、按照有關轉基因農作物的法律法規，用農業轉基因生物加工制成的產品需提供標識，A正確；
B、我國不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗，但可以在特定條件下可以將體外受精獲得的人類胚胎植入人體生殖系統獲得試管嬰兒，B錯誤；
C、我國在任何情況下不發展、不生產、不儲存生物武器，C正確；
D、按照相關法律，我國禁止非醫學需要的胎兒性別鑒定和選擇性別人工終止妊娠，D正確。
故選：B。
【點評】本題主要考查的是生物技術的安全性和倫理問題的相關知識，意在考查學生對基礎知識的理解掌握，難度適中。
13．（2024秋 朝陽區期末）IL﹣17A是一種細胞因子，在銀屑病等自身免疫病的發病機制中發揮關鍵作用。我國科研人員研發了抗IL﹣17A人源﹣鼠源重組單克隆抗體。以下關于該抗體制備過程的敘述正確的是（　　）
A．用IL﹣17A注射小鼠，從小鼠血清中分離出B細胞
B．用滅活病毒誘導小鼠B細胞與骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞
C．用克隆化培養和PCR技術篩選出能分泌抗IL﹣17A抗體的雜交瘤細胞
D．用蛋白質工程技術直接將鼠源抗IL﹣17A抗體中的部分氨基酸序列替換為人源
【考點】單克隆抗體及其應用．
【專題】正推法；克隆技術；理解能力．
【答案】B
【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原，然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞：①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。（3）克隆化培養和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：A、制備單克隆抗體，首先用IL﹣17A（抗原）注射小鼠，從小鼠脾臟中分離出B細胞，A錯誤；
B、動物細胞融合可以用滅活病毒誘導，制備單克隆抗體需要將經免疫的小鼠的B細胞與骨髓瘤細胞融合為雜交瘤細胞，B正確；
C、用克隆化培養和抗原—抗體分子雜交技術（單一抗體檢測）篩選出能分泌抗IL﹣17A抗體的雜交瘤細胞，C錯誤；
D、蛋白質工程技術需要通過改變基因結構進而改造蛋白質，而不能直接改變蛋白質（例如鼠源抗IL﹣17A抗體）中的氨基酸序列，D錯誤。
故選：B。
【點評】本題考查單克隆抗體的制備與應用的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
14．（2024秋 朝陽區期末）我國科學家研制的干細胞藥物——“人臍帶間充質干細胞治療心衰注射液”，已經進入臨床試驗階段。據此推測合理的是（　　）
A．人臍帶間充質干細胞進入人體后可以分化為心肌細胞
B．人臍帶間充質干細胞與心肌細胞的基因表達情況相同
C．人臍帶間充質干細胞與心肌細胞的形態結構相同
D．人臍帶間充質干細胞比心肌細胞的分化程度高
【考點】干細胞的培養及其應用．
【專題】正推法；細胞的分化、衰老和凋亡；理解能力．
【答案】A
【分析】細胞分化的概念：在個體發育中，相同細胞的后代，在形態、結構和生理功能上發生穩定性差異的過程。細胞分化過程遺傳物質不變，只是基因選擇性表達的結果。
【解答】解：A、人臍帶間充質干細胞作為干細胞的一種，具有自我更新和分化為多種細胞類型的潛能。在特定的條件下，它們可以分化為心肌細胞，這對于治療心衰等心臟疾病具有重要意義，A正確；
B、細胞分化是基因選擇性表達的結果，由于人臍帶間充質干細胞和心肌細胞是兩種不同類型的細胞，它們的基因表達情況必然存在差異，B錯誤；
C、人臍帶間充質干細胞和心肌細胞作為兩種不同類型的細胞，它們的形態和結構通常也會有所不同，C錯誤；
D、細胞分化的程度通常與其功能特化和形態結構的復雜性成正比。心肌細胞作為高度特化的細胞類型，其分化程度通常要高于未分化的干細胞，D錯誤。
故選：A。
【點評】本題考查干細胞的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
15．（2024秋 靖遠縣校級期末）6﹣磷酸葡萄糖脫氫酶（G﹣6PD）有F和S兩種類型，分別由一對等位基因XF和XS編碼。將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理，利用含血清的培養液進行原代培養，然后制成細胞懸液，轉入無血清培養液對不同的單個細胞分別進行單克隆培養，克隆形成率與接種細胞密度的關系如表。分別從原代培養和各單克隆培養中取樣，對提取到的G﹣6PD蛋白進行電泳檢測，結果如圖所示。下列有關敘述錯誤的是（　　）
克隆形成率與接種細胞密度的關系
1mL中接種細胞數/個 1cm2上接種細胞數/個 克隆形成率/%
10000 2000 0.1
1000 200 1.0
20 4 50
10 2 100
A．無血清培養液必須含酶抑制劑，以保護細胞免受殘留的消化酶過度消化而損傷
B．為提高克隆形成率，需將原代培養制成的細胞懸液稀釋為10個細胞/mL或更低
C．原代培養的細胞電泳圖中出現2種不同條帶是等位基因XF和XS同時表達的產物
D．出現圖示實驗結果的原因可能是女性細胞中的一條X染色體隨機失活而導致的
【考點】動物細胞培養的條件與過程．
【專題】數據表格；胚胎工程；理解能力；解決問題能力．
【答案】C
【分析】由題干信息可知，“將基因型為XFXS的女性皮膚組織用胰蛋白酶處理，進行原代培養，然后用不同的單個細胞分別進行單克隆培養”，無論是原代培養還是單克隆培養，對于體細胞來說，正常情況下得到的細胞基因型是相同的；由題圖的電泳結果分析，1﹣9通過單克隆培養得到的細胞所含的蛋白都只有一種，說明可能是女性細胞中一條X染色體在電泳過程中隨機失活導致的。據此分析判斷即可。
【解答】解：A、培養貼壁生長的細胞需用消化酶消化傳代，在含血清傳代培養時，血清中某些成分可以終止消化酶的消化作用，而無血清培養液培養時，必須使用酶抑制劑，以保護細胞免受殘留的消化酶過度消化而損傷，A正確；
B、細胞懸液的細胞密度越大，接種時每平方厘米培養皿上接種的細胞就越多，克隆的形成率就越低，B正確；
CD、原代培養細胞電泳圖有2個條帶，單克隆培養的細胞只有1個條帶，可能的原因是女性細胞雖然含有XF和XS，但其中一條X染色體可能隨機失活，原代培養細胞電泳圖出現2個不同條帶可能是因為同時檢測了多個細胞的產物，C錯誤、D正確。
故選：C。
【點評】本題考查動物細胞培養的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
16．（2024秋 靖遠縣校級期末）體外受精的早期胚胎在體外發育中，往往會停止在某一階段不再發育，這種現象稱為發育阻滯。研究表明，胚胎的發育阻滯與胚胎的母源基因調控向自身基因調控轉換有關。小鼠的受精卵發育早期的胚胎基本受母源性信息調控，自身基因的啟動最早出現在2細胞期，該時期的胚胎對環境極為敏感。下列有關敘述正確的是（　　）
A．從活的母畜中采集到的卵母細胞均可直接用于體外受精
B．小鼠的胚胎發育阻滯一般發生在開始出現分化的囊胚期
C．體外培養條件與體內發育條件的差異不會造成發育阻滯
D．調控轉換時可能發生母源mRNA被降解失活，自身基因轉錄活躍
【考點】體外受精和胚胎移植．
【專題】正推法；胚胎工程；理解能力．
【答案】D
【分析】胚胎發育過程：
（1）卵裂期：細胞進行有絲分裂，數量增加，胚胎總體積不增加。
（2）桑葚胚：32個細胞左右的胚胎。
（3）囊胚：細胞開始分化，其中個體較大的細胞叫內細胞團將來發育成胎兒的各種組織；而滋養層細胞將來發育成胎膜和胎盤；胚胎內部逐漸出現囊胚腔。
（4）原腸胚：內細胞團表層形成外胚層，下方細胞形成內胚層，由內胚層包圍的囊腔叫原腸腔[細胞分化在胚胎期達到最大限度。
【解答】解：A、借助超聲波探測儀、內窺鏡或腹腔鏡等工具直接從活體動物卵巢中吸取的卵母細胞需體外培養成熟才可用于體外受精，A錯誤；
B、胚胎的發育阻滯與胚胎的母源基因調控向自身基因調控轉換有關，小鼠的胚胎發育調控轉換期是在2細胞期，母源mRNA逐漸被降解失活，自身基因轉錄活躍，最易發生發育阻滯，B錯誤；
C、胚胎的母源基因調控向自身基因調控轉換時，對環境極為敏感，體內發育條件一般比體外更適宜、穩定，故體外培養容易發生發育阻滯，C錯誤；
D、胚胎的母源基因調控向自身基因調控轉換時可能發生母源mRNA被降解失活，自身基因轉錄活躍的情況，D正確。
故選：D。
【點評】本題考查胚胎工程的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
二．解答題（共4小題）
17．（2024秋 南開區期末）研究者以擬南芥根段作為組織培養材料，探討了激素誘導愈傷組織分化生芽的機制。請分析回答：
（1）離體的擬南芥根段在適宜條件下可以培育出完整的植株，說明 　植物細胞具有全能性　。
（2）剪下根段后需要經過一系列的消毒過程，一般先用流水沖洗，然后在無菌操作臺上依次用 　酒精　和次氯酸鈉溶液等消毒劑浸泡消毒，從每種消毒劑中取出根段后需用 　無菌水　沖洗多次，再用無菌濾紙吸干表面水分。
（3）植物組織培養常用的MS培養基是在已配制好的MS母液中添加 　蔗糖　、瓊脂、植物激素等配制而成。在組織培養過程中，根段細胞經過 　脫分化　過程形成愈傷組織，此后調整培養基中細胞分裂素（CK）與生長素的比例可誘導愈傷組織分化。
（4）愈傷組織生芽過程中，細胞分裂素（CK）通過ARRs（A）基因和WUS（W）基因起作用。為探討A基因與W基因的關系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型的愈傷組織分別置于細胞分裂素（CK）與生長素比例高的（高CK）培養基中誘導生芽，測定此過程中W基因的表達量，結果如圖1。分析得出結論：在高CK誘導下A基因 　促進　（填“促進”或“抑制”）W基因表達。得出該結論的依據為：與野生型相比，　經高CK誘導后，突變體a中的W基因表達量明顯低　。
（5）采用轉基因技術在上述突變體a中過量表達W基因，獲得材料甲。將材料甲、突變體a和野生型三組愈傷組織在高CK培養基中培養，三組愈傷組織分化生芽的比例如圖2，由此能得出的結論包括 　ABC　。（多選）
A.A基因在愈傷組織生芽過程中起作
B.缺失A基因，W基因表達不能促進生芽
C.過量表達W基因可使生芽時間提前
D.W基因的表達產物調控A基因的表達
【考點】植物的組織培養．
【專題】圖文信息類簡答題；植物的組織培養；解決問題能力．
【答案】（1）植物細胞具有全能性
（2）酒精 無菌水
（3）蔗糖 脫分化
（4）促進 經高CK誘導后，突變體a中的W基因表達量明顯低
（5）ABC
【分析】植物組織培養依據的原理為植物體細胞的全能性，即細胞經分裂和分化后仍然具有發育成完整植株的潛能；生長素和細胞分裂素能促進細胞分裂分化，在培養的不同時期對兩者的比例會有不同要求，在再分化過程中，生長素高，促進根的分化，細胞分裂素比例高，促進芽的分化。植物組織培養的條件：①細胞離體和適宜的外界條件（如適宜溫度、適時的光照、pH和無菌環境等）；②一定的營養（無機、有機成分）和植物激素（生長素和細胞分裂素）。
【解答】解：（1）離體的植物組織培養成完整植株的過程體現了細胞的全能性。
（2）外植體消毒一般先用流水沖洗，然后在無菌操作臺上依次用酒精和次氯酸鈉溶液浸泡消毒，從每種消毒劑中取出根段后需用無菌水沖洗多次，最后再用無菌濾紙吸干表面水分。
（3）MS培養基是在已配制好的MS母液中添加蔗糖、瓊脂、植物激素等配制而成。已分化的細胞形成愈傷組織的過程稱之為脫分化，植物激素可誘導愈傷組織分化，生長素用量比細胞分裂素（CK）比值適中時，促進愈傷組織的形成。
（4）由圖判斷，經高CK誘導后，突變體a的W基因的表達量明顯低，說明在高CK誘導下A基因促進W基因表達。
（5）材料甲體內缺少A基因，W基因過量表達，突變體a的A基因不能表達，野生型是正常的，由圖2野生型曲線和突變體a曲線對比可知，A基因在愈傷組織分化生芽的過程中起作用，缺失A基因時W基因表達不能促進生芽；由材料甲曲線和野生型曲線比較可知，過量表達W基因可使生芽時間提前。
故選：ABC。
故答案為：
（1）植物細胞具有全能性
（2）酒精 無菌水
（3）蔗糖 脫分化
（4）促進 經高CK誘導后，突變體a中的W基因表達量明顯低
（5）ABC
【點評】本題結合柱形圖和折線圖，考查植物組織培養過程分析，要求考生能夠從題目中提取有效信息進行分析，難度適中。
18．（2024秋 南開區期末）EB病毒（EBV）可引發鼻咽癌等癌癥。我國科研人員制備有效阻斷EBV感染的單克隆抗體，為治療和疫苗研發提供思路。
（1）如圖1所示，EBV表面的糖蛋白gHgL與上皮細胞表面受體（如E2等）結合后，引起gB發生 　空間結構　變化，啟動病毒包膜和上皮細胞膜融合。gHgL可作為制備有效阻斷EBV感染的單克隆抗體的 　抗原　。
不同熒光標記的分于 相關分子的特點
熒光A﹣抗CD4抗體 CD4為輔助性T細胞的標記分子
熒光B﹣抗CD8抗體 CD8為輔助毒性T細胞的體記分子
熒光C﹣抗CD20抗體 CD20為B細胞的標記分子
熒光D﹣抗CD56抗體 CD56為NK細胞的標記分子
熒光E﹣gHgL gHgL可與細胞上的受體特異性結合
（2）研究人員從EBV感染者外周血中分離出單個核細胞（PBMC），包含自然殺傷（NK）細胞、T細胞、B細胞。將右上表中不同熒光標記的分子與PBMC培養后篩選出目標細胞，將目標細胞中的抗體mRNA 　逆轉錄　為cDNA，擴增出gHgL抗體基因，轉入細胞成功表達出單克隆抗體。篩選出的目標細胞應具有熒光 　C、E　。（填寫表格中大寫字母）
（3）經篩選得到單抗D8，與已報道的單抗A1相比，兩者都有較強的gHgL結合能力，都能顯著抑制EBV病毒感染上皮細胞。將gHgL與D8或A1混合接觸后，檢測與上皮細胞表面受體E2的結合能力，結果如圖2。分析可知D8與A1作用的區別是 　D8能夠阻礙gHgL和E2結合，而A1不能　。
【考點】單克隆抗體及其應用．
【專題】正推法；克隆技術；理解能力．
【答案】（1）空間結構；抗原
（2）逆轉錄；C、E
（3）D8能夠阻礙gHgL和E2結合，而A1不能
【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原，然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞。①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。（3）克隆化培養和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）分析圖1，EBV表面的糖蛋白gHgL與上皮細胞表面受體（如E2等）結合后，會引起gB的空間結構發生改變。gHgL與上皮細胞表面受體（如E2等）結合后，會引起gB的空間結構發生改變，啟動病毒包膜和上皮細胞膜融合，抗gHgL的單克隆抗體可與gHgL結合，阻斷其與上皮細胞表面受體（如E2等）結合，進而阻斷病毒包膜和上皮細胞膜融合，阻斷EBV感染，故gHgL可作為制備有效阻斷EBV感染的單克隆抗體的抗原。
（2）cDNA是mRNA通過逆轉錄形成的。根據gHgL的作用機理，可知篩選出的目標細胞分泌產生的抗體與B細胞構成競爭關系，同時其發揮作用需要膜上的受體特異性結合，故篩選出的目標細胞應具有熒光C和E。
（3）依據圖示信息和題干內容可知，gHgL與D8混合接觸后，與上皮細胞表面受體E2的結合能力明顯下降，而與A1混合接觸后，變化不大，說明D8與A1作用的區別是D8能夠阻礙gHgL和E2結合，而A1不能。
故答案為：
（1）空間結構；抗原
（2）逆轉錄；C、E
（3）D8能夠阻礙gHgL和E2結合，而A1不能
【點評】本題考查單克隆抗體的制備，考查學生對相關概念、原理的理解與掌握程度，以及運用所學知識分析和解決實際問題的能力。
19．（2025 云南模擬）嵌合抗原受體﹣T細胞（CAR﹣T細胞）療法在人類腫瘤治療中取得了重要突破。CAR﹣T細胞療法是將CAR基因導入T細胞成為CAR﹣T細胞，通過CAR蛋白上的scFv肽鏈（小肽不足以發揮抗原作用，但能發揮抗體識別作用）特異性識別腫瘤細胞膜上的抗原，并通過CAR蛋白上的其它肽鏈結構激活CAR﹣T細胞繼而殺傷腫瘤細胞。回答下列問題：
（1）獲得含有scFv肽鏈的單克隆抗體，流程如圖1。
①圖中通過驅動細胞和測試細胞反復免疫小鼠產生抗體的過程屬于 　體液　（填“細胞”或“體液”）免疫，參與該過程的免疫細胞來源于小鼠骨髓 　造血干細胞　。實驗小鼠機體產生免疫應答的過程中，輔助性T細胞的主要作用是 　分泌細胞因子，促進B細胞增殖分化，同時其受刺激后細胞表面的分子發生特異性變化后與B細胞接觸，參與B細胞的激活　。該實驗最適用于篩選 　C　（填標號）。
A．大鼠肝細胞區別于兔肝細胞特殊抗原的抗體
B．正常細胞區別于感染HIV細胞內特殊抗原的抗體
C．衰老神經細胞區別于正常神經細胞抗原的抗體
②取第二組小鼠分離脾細胞，加入 　聚乙二醇　誘導脾細胞和骨髓瘤細胞的融合。
（2）CAR基因的構建，流程如圖2。在設計添加CAR基因兩端限制酶識別序列并與表達載體正確連接的過程中，必須考慮的有 　ADE　（填標號）。
A．PCR使用的上、下游引物需含限制酶識別序列
B．CAR基因內可以含有引物所含限制酶識別序列
C．限制酶識別序列需位于載體啟動子、復制原點和標記基因內
D．上、下游引物所含限制酶識別序列不同
E．CAR基因插入載體位點需位于啟動子下游
（3）從免疫學角度分析，如果用高特異性抗體DNA直接構建CAR基因，再通過載體導入T細胞并穩定表達，不但會使治療效果大幅降低，同時還會 　導致CAR蛋白攻擊其他正常細胞，使機體受損　。
【考點】單克隆抗體及其應用．
【專題】圖文信息類簡答題；免疫調節；基因工程；克隆技術；理解能力．
【答案】（1）體液 造血干細胞 分泌細胞因子，促進B細胞增殖分化，同時其受刺激后細胞表面的分子發生特異性變化后與B細胞接觸，參與B細胞的激活 C 聚乙二醇
（2）ADE
（3）導致CAR蛋白攻擊其他正常細胞，使機體受損
【分析】單克隆抗體的制備：（1）制備產生特異性抗體的B淋巴細胞：向免疫小鼠體內注射特定的抗原，然后從小鼠脾內獲得相應的B淋巴細胞。（2）獲得雜交瘤細胞
①將鼠的骨髓瘤細胞與脾細胞中形成的B淋巴細胞融合；②用特定的選擇培養基篩選出雜交瘤細胞，該雜種細胞既能夠增殖又能產生抗體。（3）克隆化培養和抗體檢測。（4）將雜交瘤細胞在體外培養或注射到小鼠腹腔內增殖。（5）提取單克隆抗體：從細胞培養液或小鼠的腹水中提取。
【解答】解：（1）①體液免疫由B細胞介導完成，由漿細胞產生抗體發揮作用，其中的免疫細胞由骨髓造血干細胞分裂分化而來。在實驗小鼠產生免疫應答（即體液免疫）的過程中，輔助性T細胞的主要作用包括以下幾個方面：接受來自抗原呈遞細胞的抗原信息，細胞表面的特定分子發生變化并與B細胞接觸，這是激活B細胞的第二信號，輔助性T細胞還可以分泌細胞因子，促進B細胞增殖分化。
A、物種不同，表面抗原差異較大，A錯誤；
B、感染HIV細胞內特殊抗原不能被抗體識別，B錯誤；
C、同一物種，細胞衰老后可能產生個別的特異性抗原，C正確。
故選：C。
②動物細胞融合技術中可以利用滅活的病毒或聚乙二醇誘導細胞融合。
（2）A、PCR使用的上、下游引物的5′端需含限制酶識別序列，從而使擴增得到的DNA可以被限制酶識別，A正確；
B、CAR基因內不能含有相關的限制酶識別序列，否則會被限制酶切割破壞，B錯誤；
C、限制酶識別序列需位于載體的啟動子下游、終止子上游，以保證基因可以正常轉錄，C錯誤；
D、上、下游引物所含限制酶識別序列不同，即應采用兩種不同的限制酶，以避免目的基因和質粒自身環化或目的基因反向連接，D正確；
E、CAR基因插入載體位點需位于啟動子下游，以保證基因可以正常轉錄，E正確。
故選：ADE。
（3）scFv肽鏈不足以發揮抗原作用，但能發揮抗體識別作用，如果用高特異性抗體DNA直接構建CAR基因，再通過載體導入T細胞并穩定表達，不但會使治療效果大幅降低，由于缺少scFv的識別作用，可能會導致CAR蛋白攻擊其他正常細胞，導致機體受損。
故答案為：
（1）體液 造血干細胞 分泌細胞因子，促進B細胞增殖分化，同時其受刺激后細胞表面的分子發生特異性變化后與B細胞接觸，參與B細胞的激活 C 聚乙二醇
（2）ADE
（3）導致CAR蛋白攻擊其他正常細胞，使機體受損
【點評】本題綜合考查單克隆抗體的制備、基因工程的相關知識，還涉及免疫調節的基礎知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
20．（2023秋 宣威市校級期末）我國科學家經過多年的反復試驗，可以在10s之內對卵母細胞進行去核操作，在15s之內將體細胞注入去核的卵母細胞里。有評論者認為：該研究的研究者利用“聰明的化學方法和操作技巧”，攻克了多年來導致體細胞克隆猴失敗的障礙。培育克隆猴的流程如圖所示，結合圖回答問題：
（1）研究人員在將胎猴的體細胞注入去核的卵母細胞前，用滅活的仙臺病毒進行了短暫處理。在此過程中，滅活的仙臺病毒所起的作用　誘導胎猴體細胞與去核卵母細胞融合　。
（2）哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度小于體細胞核移植，其原因是　胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易　。
（3）動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是　顯微操作去核法　，去除的“核”具體是指　紡錘體—染色體的復合物　。一般利用未去核的卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，其原因是　卵母細胞體積大，易操作，并且卵母細胞中具有促進細胞核全能性表達的物質　（答出2點）。
（4）體細胞克隆猴的另一個技術難點是猴的體細胞克隆胚胎發育差。科學家發現，胚胎發育障礙與克隆胚胎基因組上大量組蛋白的甲基化密切相關。由此推測，圖中Kdm4d的mRNA翻譯產生的酶的作用是　參與形成不同組蛋白甲基化狀態，調節DNA和組蛋白的纏繞程度，從而控制這些DNA與基因轉錄因子接觸　。
【考點】動物細胞核移植技術．
【專題】正推法；克隆技術；解決問題能力．
【答案】（1）誘導胎猴體細胞與去核卵母細胞融合
（2）胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易
（3）顯微操作去核法 紡錘體—染色體的復合物 卵母細胞體積大，易操作，并且卵母細胞中具有促進細胞核全能性表達的物質
（4）參與形成不同組蛋白甲基化狀態，調節DNA和組蛋白的纏繞程度，從而控制這些DNA與基因轉錄因子接觸
【分析】將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經去掉細胞核的卵母細胞中，使其重組并發育成一個新的胚胎，這個新的胚胎最終發育成動物個體。用核移植的方法得到的動物稱為克隆動物。
【解答】解：（1）研究人員在將胎猴的體細胞注入去核的卵母細胞前，用滅活的仙臺病毒進行了短暫處理。在此過程中，滅活的仙臺病毒所起的作用是誘導胎猴體細胞與去核卵母細胞融合；
（2）哺乳動物的核移植可以分為胚胎細胞核移植和體細胞核移植，由于胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易，故胚胎細胞核移植獲得克隆動物的難度小于體細胞核移植；
（3）動物細胞核移植技術中普遍使用的去核方法是顯微操作去核法，去除的“核”是指紡錘體—染色體的復合物；一般利用未去核的卵母細胞作為受體細胞，而不用精子，因為卵母細胞體積大，易操作，并且卵母細胞中具有促進細胞核全能性表達的物質；
（4）圖中Kdm4d的mRNA翻譯產生的酶是組蛋白去甲基化酶，參與形成不同組蛋白甲基化狀態，調節DNA和組蛋白的纏繞程度，從而控制這些DNA與基因轉錄因子接觸。
故答案為：
（1）誘導胎猴體細胞與去核卵母細胞融合
（2）胚胎細胞分化程度低，恢復全能性相對容易
（3）顯微操作去核法 紡錘體—染色體的復合物 卵母細胞體積大，易操作，并且卵母細胞中具有促進細胞核全能性表達的物質
（4）參與形成不同組蛋白甲基化狀態，調節DNA和組蛋白的纏繞程度，從而控制這些DNA與基因轉錄因子接觸
【點評】本題考查動物細胞工程的相關內容，要求學生能結合所學知識正確作答。
21世紀教育網(www.21cnjy.com)

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