資源簡介

2025年高考生物復習考前沖刺 發酵工程
一．選擇題（共16小題）
1．（2024秋 重慶校級期末）為制備無細胞的酵母汁進行乙醇發酵，對酵母菌細胞破碎處理時需加入適量緩沖液。下列敘述正確的是（　　）
A．酵母菌進行乙醇發酵的主要反應場所在線粒體基質中
B．無細胞的酵母汁進行乙醇發酵時需要攪拌增大溶氧量
C．緩沖液的作用是保護酵母汁中酶的空間結構和提供酶促反應的適宜pH
D．若酵母汁中含有活細胞，用臺盼藍試劑染色后鏡檢發現活細胞成藍色
2．（2024秋 撫順期末）酸筍具有濃郁的乳酸香味和豐富的文化內涵，其制作步驟一般為選筍、切塊、煮筍、冷卻、腌制、發酵等。下列敘述錯誤的是（　　）
A．煮筍可使蛋白質變性從而容易被微生物利用
B．可用開水燙洗玻璃罐，并用酒精擦拭消毒
C．乳酸在乳酸菌的線粒體基質中產生
D．酸筍發酵過程中，發酵液中可能會有氣泡產生
3．（2024秋 隨州期末）傳統發酵技術在我國應用廣泛，某學生認為果酒制作的流程中存在一些問題，并提出了自己的改進方法。下列描述正確的有（　　）
①發酵容器要清洗干凈并用70%的酒精消毒
②葡萄要先除去枝梗再充分洗凈
③人為添加酵母菌種可以縮短發酵時間，實驗更易成功
④建議改用“泡菜壇”裝置進行果酒的發酵
⑤放氣過程中可能會進入空氣，造成污染
⑥正午暴曬沖洗的葡萄，充分干燥后再釀制
A．①②③④ B．①②④⑥ C．①③④⑤ D．②③⑤⑥
4．（2024秋 張家口期末）養殖場糞便中的某些微生物可使氨氮化合物轉化為尿素進而產生NH3，影響畜禽健康。為從糞便中篩選能利用氨氮化合物且NH3產生量少的微生物。興趣小組開展如圖所示實驗，下列敘述正確的是（　　）
A．①過程應通過平板劃線法進行接種，劃線次數與灼燒接種環次數相同
B．牛肉膏蛋白胨是一種常用的細菌培養基，需將培養基pH調至酸性
C．②過程應篩選不能在1上生長而能在2上生長的菌
D．③可通過在上清液中添加脲酶后，檢測培養液中尿素的剩余量，篩選得到的甲、乙
5．（2025 1月份模擬）基于我國傳統酸醋工藝，一種以果汁為原料進行液態發酵生產果醋的流程如圖。下列敘述錯誤的是（　　）
A．制取果汁時添加果膠酶可提高果汁產量，處理①加糖可增加碳源
B．醋酸發酵階段通入充足的氧氣有利于微生物將乙醇轉化為乙酸
C．酒精發酵和醋酸發酵的微生物呼吸方式相同，最適生長溫度不同
D．發酵生產結束后，處理②需根據果醋保存時間選擇消毒或滅菌方法
6．（2025 四川模擬）根據抗菌特性可將抗菌劑分為抑菌劑和殺菌劑，其中抑菌劑可抑制細菌生長，殺菌劑能殺死細菌。為分析抗菌劑的抗菌特性，有人將不同抗菌劑分別添加到培養的細菌懸液中，用稀釋涂布平板法或顯微鏡直接計數法測定細菌數量，評估細菌的生長情況，變化趨勢曲線如圖所示（不考慮抗菌劑殘留對計數的影響），其中曲線1為僅添加無菌水的實驗結果。下列敘述錯誤的是（　　）
A．添加抑菌劑后，通過稀釋涂布平板法進行計數，統計的細菌數量會保持不變
B．若添加某抗菌劑后兩種方法計數結果為曲線2和3，其差異是由于死菌被計數
C．曲線2代表添加抑菌劑后的細菌數量，曲線3代表添加殺菌劑后的細菌數量
D．若添加某抗菌劑后兩種方法統計的細菌數量均下降，推測細菌出現裂解而死亡
7．（2024秋 張家口期末）下列關于果酒、泡菜和果醋發酵的敘述，錯誤的是（　　）
A．制作果醋、泡菜時所用的主要菌種均不具有以核膜為界限的細胞核
B．果酒、果醋和泡菜發酵中都只利用了微生物的無氧呼吸
C．果酒發酵的溫度比果醋發酵的溫度稍低
D．果酒、果醋和泡菜發酵過程，發酵液的pH均會下降
8．（2024秋 順義區期末）中國是釀酒歷史最古老的國家之一，家釀葡萄酒和工業化生產啤酒的過程均需要（　　）
A．利用醋酸菌無氧呼吸的原理
B．接種人工選育的單一菌種
C．為發酵過程提供適宜的溫度
D．對發酵產物進行分離和提純
9．（2024秋 保定期末）我國是世界上啤酒的生產和消費大國。啤酒是以大麥為主要原料經酵母菌發酵制成的，其工業化生產流程如圖所示。
下列說法錯誤的是（　　）
A．選育優良菌種可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得
B．焙烤的目的是利用高溫對大麥種子進行滅菌，防止發酵過程中的雜菌污染
C．用一定濃度的赤霉素處理大麥種子，可使其無須發芽也能滿足生產條件
D．發酵過程包括主發酵和后發酵兩個階段，大部分代謝產物在主發酵階段生成
10．（2024秋 固始縣期末）下列關于傳統發酵技術、發酵工程及其應用的敘述，正確的是（　　）
A．傳統發酵過程中為降低雜菌污染，發酵前需要對器具，原料等進行滅菌
B．家庭制作泡菜和果醋過程中，發酵液表層出現的白膜是由同種微生物形成
C．通過發酵工程生產的蘇云金桿菌可制成微生物農藥，是生物防治手段
D．發酵工程與傳統發酵技術最大的區別就是前者可以利用微生物來進行發酵
11．（2024秋 固始縣期末）進行土壤中尿素分解菌的選擇培養時，利用的培養基組分及含量如表所示。下列分析錯誤的是（　　）
組分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O
含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容1000mL
A．KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機鹽，又可調節培養基的pH
B．尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對培養基中的微生物起選擇作用
C．瓊脂一般不可以為尿素分解菌提供碳源，只起到凝固劑的作用
D．蒸餾水既可進行定容，又可對培養液進行稀釋以便于計數
12．（2024 鄒城市校級模擬）藍莓果實的主要抗氧化活性成分為花色苷和多酚類物質，具有保護眼睛、抗氧化、消炎、增強記憶、增強免疫和抗癌等多種作用，因此利用藍莓釀造的藍莓酒具有較好的保健功能。釀造藍莓酒的工藝流程為新鮮藍莓→榨汁→接種→發酵→過濾→藍莓酒→儲存。下列敘述錯誤的是（　　）
A．藍莓酒發酵過程中起主要作用的微生物是酵母菌
B．對藍莓汁進行糖度調整可改變藍莓酒的酒精度
C．接種后需要持續通入無菌空氣以加快發酵進程
D．若利用酸性重鉻酸鉀檢測酒精度，需先對藍莓酒進行脫色處理
13．（2024 六合區校級二模）將大腸桿菌培養在含有葡萄糖培養液中，在時間0時，將含大腸桿菌的培養液均分為四組，處理見下表。混勻處理6小時后，將經不同處理的培養液分別涂布在四組不同的平板上，每組涂12個，在37℃下培養24小時，計數每組平板中菌落的平均數。結果如下表所示：下列有關說法，正確的是（　　）
組別 組1 組2 組3 組4
培養液處理 只有葡萄糖 葡萄糖+物質A 葡萄糖+物質B 葡萄糖+物質A+物質B
平板的菌落平均數 長滿菌落 2±2 4±1 23±3
A．研究物質A和B對大腸桿菌的共同作用時，組1是對照組，2、3、4組為實驗組
B．物質A和物質B均能抑制大腸桿菌的生長，且物質B的抑制作用強于物質A
C．物質A與物質B同時存在時，有些原來不能存活的大腸桿菌存活下來
D．可在培養液（基）中加入酚紅試劑鑒別大腸桿菌
14．（2024 聊城二模）傳統發酵過程中，控制發酵條件至關重要。下列相關敘述正確的是（　　）
A．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入無菌空氣制作葡萄醋
B．泡菜發酵后期，盡管乳酸菌占優勢，但仍有產氣菌繁殖，需定期開蓋放氣
C．制作果酒的葡萄汁不宜超過發酵瓶體積的，制作泡菜的鹽水要淹沒全部菜料
D．果酒與果醋發酵時溫度宜控制在18～25℃，泡菜發酵時溫度宜控制在30～35℃
15．（2024 江西二模）花生的根系在生長過程中會分泌苯甲酸、苯乙酮等物質（這些物質不是花生基本的生命活動所必需的）以抑制某些病菌和其他植物的生長。同一片土地多年連續種植花生會導致這些有毒物質不斷積累，造成花生產量下降。某大學通過“采集根際土壤→選擇培養→分離、純化培養→菌種鑒定”篩選出可將苯甲酸降解為無毒小分子（CO2、H2O等）的根際菌，分離、純化培養的具體操作如圖所示。下列相關敘述錯誤的是（　　）
A．花生根系分泌的苯甲酸、苯乙酮等物質屬于次生代謝物
B．可從多年連續種植花生的土壤中尋找降解苯甲酸的根際菌
C．該實驗需配制以苯甲酸為唯一碳源的選擇培養基進行培養
D．若每次稀釋10倍，圖中的a為18，圖中將土壤稀釋了103倍
16．（2024 懷化三模）我國科學家通過轉基因技術使面包酵母在質膜表面表達纖維二糖磷酸化酶和a﹣葡聚糖磷酸化酶，進而可利用農作物秸稈合成人工淀粉和生產單細胞蛋白，助力糧食安全生產，其過程如圖所示。下列分析錯誤的是（　　）
A．纖維素轉化為淀粉的物質基礎是組成兩者的單體相同
B．纖維素與淀粉的轉化途徑說明酶具有專一性和高效性
C．葡萄糖在酵母菌體內轉化為氨基酸才能參與形成蛋白質
D．調控發酵的溫度或pH可改變酶活性以影響終產物生成
二．解答題（共4小題）
17．（2025 云南模擬）中國名茶普洱茶的主要活性成分——茶褐素，具有降脂減肥、抗氧化和提高免疫力等功能，在功能食品領域具有廣闊的應用前景。研究人員在制作普洱熟茶的固體發酵過程中分離得到優勢菌塔賓曲霉，其可在綠茶浸提液（富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白質和咖啡堿等）中生長繁殖，之后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度如圖。
回答下列問題：
（1）綠茶浸提液中的氨基酸和蛋白質可為塔賓曲霉生長提供的營養物質為　 　。
（2）塔賓曲霉為好氧微生物，用綠茶浸提液進行液體培養時應采用　 　（填“靜置”或“搖床”）培養。培養過程中茶褐素在發酵前兩天均無顯著增加的原因是　 　。
（3）為檢測發酵1天時塔賓曲霉的數量，將發酵液稀釋1×103倍后，分別取0.1mL稀釋液均勻涂布于3個培養基平板上，培養后菌落數量分別為48、45和42個，則每毫升發酵液中活菌數量為　 　個。
（4）從實際生產角度出發，由圖可知在第　 　天結束發酵即可獲得較高濃度的茶褐素。為探索生產茶褐素的最適溫度，需設計下一步實驗，寫出實驗思路　 　。
18．（2024秋 保定期末）大腸桿菌是一類引起人體腹瀉的重要病原菌，為檢測某品牌冰激凌中的大腸桿菌含量是否超標，高二學習興趣小組按圖示方法分離大腸桿菌，在適宜溫度下培養，統計菌落數目。
（1）培養大腸桿菌的培養基中一般都含有 　 　、水、無機鹽等營養成分。為了便于肉眼區分大腸桿菌與其他微生物，需在培養基中添加伊紅—亞甲藍，可觀察到大腸桿菌菌落呈深紫色，并有金屬光澤。從用途上劃分該培養基屬于 　 　培養基。
（2）興趣小組用 　 　法將菌種接種到培養基中，1×10﹣1～1×10﹣4每個濃度涂3個平板。運用該方法統計菌落數目時應該設置兩組對照組。一組為陰性對照組，具體做法是不進行涂布或者用無菌水涂布平板，目的是 　 　；另一組為陽性對照組，具體做法是 　 　，目的是說明實驗組培養基是否培養出了大腸桿菌。
（3）興趣小組只對一個冰激凌進行了檢測，該做法 　 　（填“合理”或“不合理”），理由是 　 　。
（4）接種后平板要在適宜溫度下培養，每隔24h統計一次菌落數目，選取 　 　時的記錄作為結果。如果以菌落數代表樣品中的大腸桿菌數量，則統計結果比實際值 　 　，原因是 　 　。
19．（2024 息縣模擬）（一）某食品公司得到一種高效釀酒的酵母菌菌株，并設計方案獲得發酵產物。
（1）對于酵母菌的培養，比較適合它的培養基為　 　（A．馬鈴薯蔗糖培養基；B．MS培養基；C．LB培養基；D．牛肉湯培養基），除了要選擇合適的培養基成分外，還要考慮培養基中營養物質的　 　。
（2）欲知道這種微生物的繁殖速度，可用涂布分離法或　 　對酵母菌進行計數。對培養到某一時期的培養液制備成10﹣5的稀釋液，每次取0.1mL進行涂布分離，三個培養皿生長的菌落數依次為35個、32個、29個，則培養液中的酵母菌數量為　 　個/mL。在恒溫培養箱培養時，培養皿的放置方式如圖　 　（填“a”或“b”）。
（3）該酵母菌的發酵食品也會因為發酵時間的長短和　 　不同，而形成不同的代謝產物，使發酵食品的風味發生變化。釀酒時會因為發酵液放置過久等原因，導致出現酸味，可能是因為產生了　 　（填物質）。
（二）目前我國新冠病毒核酸檢測的方法是RT﹣PCR，如圖為RT﹣PCR（逆轉錄熒光PCR技術）的原理：PCR過程中探針和引物一起與模板結合，探針兩側分別帶有熒光基團和淬滅基團（抑制熒光發出），當酶催化子鏈延伸至探針處時會水解探針，導致熒光基團與淬滅基團分離而發出熒光（熒光強度與探針水解量成正相關）。
請回答下列問題：
（4）PCR技術與DNA體內復制過程相比，兩者的復制方式都是　 　。RT﹣PCR過程中，需先以RNA為模板合成cDNA，故裝置中需添加　 　酶。除了加酶，解開cDNA雙螺旋的方法還有　 　。
（5）對新冠病毒進行檢測時，探針是一段與　 　相同的核苷酸序列。
（6）通過熒光檢測到熒光信號，則可判定該檢測樣本為　 　性（選填“陽”、“陰”），在相同PCR循環次數條件下，熒光強度與病毒數量呈　 　。
（7）為了在沒有條件進行核酸檢測前及早發現新冠病毒，我國于2022年3月11日推出新冠病毒抗原檢測試劑盒作為核酸檢測的補充措施，該試劑盒的檢測原理是　 　。試劑盒中的探針應采用　 　技術生產。
20．（2024秋 瀘縣校級月考）生物修復技術已變成對生態環境進行保護過程中的一類最有價值的修復手段，如圖為從某植物根際土壤中篩選出高效石油降解菌的部分流程示意圖，請據圖1回答：
（1）用于培養石油降解菌的培養基在接種前需要通過 　 　法進行滅菌。步驟Ⅰ為低溫石油降解菌的富集培養。稱取1g土壤樣品加入預先裝有100mL以 　 　為唯一碳源的培養基的三角瓶中，在15℃、160r/min的恒溫振蕩搖床中培養6d，在相同的培養條件下連續培養四個周期。搖床培 養的目的是 　 　。
（2）在操作Ⅱ、Ⅲ中，采用的接種方法分別是 　 　、　 　。
（3）研究人員通常根據菌落的 　 　特征來初步區分不同種的微生物，統計菌落種類和數量時要 每隔24h觀察統計一次，直到 　 　時。
（4）目前，已知有200多種微生物能降解石油，但多數微生物的降解速率都很低，現在分離篩選得到三株降解石油能力較強的菌株，請提出鑒定不同菌株降解石油能力大小的方法 　 　。
（5）石油主要含有烷烴、環烷烴和芳香烴，科研人員已經篩選出分別降解三種烴類的細菌B、C、D（每種菌只含有一種相應的烴類降解酶）探究菌A高效降解石油的原因，凝膠電泳技術分離相關蛋白，結果如圖2。
①檢測微管蛋白的目的是 　 　。
②依據實驗結果分析菌A降解石油的能力強于菌B、C、D 原因是 　 　。
2025年高考生物復習考前沖刺 發酵工程
參考答案與試題解析
一．選擇題（共16小題）
1．（2024秋 重慶校級期末）為制備無細胞的酵母汁進行乙醇發酵，對酵母菌細胞破碎處理時需加入適量緩沖液。下列敘述正確的是（　　）
A．酵母菌進行乙醇發酵的主要反應場所在線粒體基質中
B．無細胞的酵母汁進行乙醇發酵時需要攪拌增大溶氧量
C．緩沖液的作用是保護酵母汁中酶的空間結構和提供酶促反應的適宜pH
D．若酵母汁中含有活細胞，用臺盼藍試劑染色后鏡檢發現活細胞成藍色
【考點】果酒、果醋的制作．
【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．
【答案】C
【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵，故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精；生產中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。
【解答】解：A、酵母菌進行乙醇發酵的主要反應場所在細胞質基質中，A錯誤；
B、無細胞的酵母汁進行乙醇發酵時需要無氧條件，不能攪拌增大溶氧量，B錯誤；
C、酶的作用條件溫和，需要適宜的溫度和pH等條件，實驗中緩沖液的作用是保護酶分子空間結構和提供酶促反應的適宜pH，C正確；
D、活細胞的細胞膜具有選擇透過性，染色后鏡檢，活細胞不變色，D錯誤。
故選：C。
【點評】本題考查酵母菌發酵的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
2．（2024秋 撫順期末）酸筍具有濃郁的乳酸香味和豐富的文化內涵，其制作步驟一般為選筍、切塊、煮筍、冷卻、腌制、發酵等。下列敘述錯誤的是（　　）
A．煮筍可使蛋白質變性從而容易被微生物利用
B．可用開水燙洗玻璃罐，并用酒精擦拭消毒
C．乳酸在乳酸菌的線粒體基質中產生
D．酸筍發酵過程中，發酵液中可能會有氣泡產生
【考點】制作泡菜．
【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．
【答案】C
【分析】泡菜（酸菜）的制作原理：在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。
【解答】解：A、因為高溫會使蛋白質變性，導致其更易被微生物（如乳酸菌）利用，從而促進后續的發酵過程，A正確；
B、使用開水燙洗玻璃罐可以有效去除表面的雜質和微生物，通過酒精擦拭則可以進一步消毒，以減少外來微生物對發酵過程的影響，B正確；
C、乳酸菌在無氧條件下將葡萄糖分解成乳酸，這一過程發生在細胞質中，乳酸菌是原核生物，沒有線粒體，C錯誤；
D、酸筍腌制發酵的過程有多種微生物的參與，如酵母菌、乳酸菌等，酵母菌進行細胞呼吸會釋放出CO2，D正確。
故選：C。
【點評】本題考查泡菜制作的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，學生具備運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
3．（2024秋 隨州期末）傳統發酵技術在我國應用廣泛，某學生認為果酒制作的流程中存在一些問題，并提出了自己的改進方法。下列描述正確的有（　　）
①發酵容器要清洗干凈并用70%的酒精消毒
②葡萄要先除去枝梗再充分洗凈
③人為添加酵母菌種可以縮短發酵時間，實驗更易成功
④建議改用“泡菜壇”裝置進行果酒的發酵
⑤放氣過程中可能會進入空氣，造成污染
⑥正午暴曬沖洗的葡萄，充分干燥后再釀制
A．①②③④ B．①②④⑥ C．①③④⑤ D．②③⑤⑥
【考點】果酒、果醋的制作．
【專題】實驗材料與實驗步驟；正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作．
【答案】C
【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；反應中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。
【解答】解：①為了避免雜菌污染，發酵容器要清洗干凈并用70%的酒精消毒，①正確；
②葡萄清洗時，不能先除去枝梗，會導致雜菌污染、營養流失，而是應該先沖洗后去除枝梗，②錯誤；
③人為添加酵母菌菌種，酵母菌純度高，酵母菌數量增多，可以縮短發酵時間，③正確；
④酒精發酵利用的是酵母菌的無氧呼吸，故泡菜壇水槽注滿水可以制造一個無氧環境，有利于果酒發酵，④正確；
⑤放氣時有可能會進入空氣，空氣中的雜菌可能進入發酵瓶造成污染，⑤正確；
⑥沖洗后的葡萄不可在正午時進行暴曬，紫外線具有消毒殺菌的作用，會殺死葡萄皮上的酵母菌，影響發酵效果，⑥錯誤。
綜上所述，①③④⑤正確。
故選：C。
【點評】本題考查果酒制作，要求考生識記參與果酒制作的微生物及其代謝類型，掌握果酒制作的原理及條件，能結合所學的知識對選項進行分析判斷。
4．（2024秋 張家口期末）養殖場糞便中的某些微生物可使氨氮化合物轉化為尿素進而產生NH3，影響畜禽健康。為從糞便中篩選能利用氨氮化合物且NH3產生量少的微生物。興趣小組開展如圖所示實驗，下列敘述正確的是（　　）
A．①過程應通過平板劃線法進行接種，劃線次數與灼燒接種環次數相同
B．牛肉膏蛋白胨是一種常用的細菌培養基，需將培養基pH調至酸性
C．②過程應篩選不能在1上生長而能在2上生長的菌
D．③可通過在上清液中添加脲酶后，檢測培養液中尿素的剩余量，篩選得到的甲、乙
【考點】微生物的選擇培養（稀釋涂布平板法）；微生物的純培養．
【專題】模式圖；微生物的分離、培養和應用；理解能力．
【答案】D
【分析】培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質；分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對特殊營養物質和氧氣的要求。
【解答】解：A、①過程經過培養篩選獲得多個所需菌落，應通過平板劃線法進行接種，劃線次數比灼燒接種環次數少1次，即每次劃線前需要灼燒接種環，劃線結束后還需要灼燒1次，A錯誤；
B、牛肉膏蛋白胨是一種常用的細菌培養基，需將培養基pH調至中性或弱堿性，B錯誤；
C、②過程要篩選的是不能利用尿素的單菌落，因此應篩選能在1上生長而不能在2上生長的菌株，C錯誤；
D、③過程要分離出甲和乙，可通過在上清液中添加脲酶后，檢測培養液中尿素的剩余量，尿素剩余量少的是甲，剩余量多的是乙，D正確。
故選：D。
【點評】本題考查微生物培養與分離的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
5．（2025 1月份模擬）基于我國傳統酸醋工藝，一種以果汁為原料進行液態發酵生產果醋的流程如圖。下列敘述錯誤的是（　　）
A．制取果汁時添加果膠酶可提高果汁產量，處理①加糖可增加碳源
B．醋酸發酵階段通入充足的氧氣有利于微生物將乙醇轉化為乙酸
C．酒精發酵和醋酸發酵的微生物呼吸方式相同，最適生長溫度不同
D．發酵生產結束后，處理②需根據果醋保存時間選擇消毒或滅菌方法
【考點】果酒、果醋的制作．
【專題】模式圖；正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．
【答案】D
【分析】1、酵母菌在有氧和無氧的條件下都能生活：在有氧時，酵母菌大量繁殖，但是不起到發酵效果；在無氧時，繁殖速度減慢，但是此時可以進行發酵。
2、醋酸菌好氧性細菌，當缺少糖源時和有氧條件下，可將乙醇（酒精）氧化成醋酸；當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸。
【解答】解：A、因為果膠酶能分解果膠，使不溶性的果膠變成可溶性的半乳糖醛酸，因而制取果汁時添加果膠酶可提高果汁產量，處理①中加糖可增加碳源，為酒精發酵提供充足的底物和能量，A正確；
B、醋酸菌是好氧菌，醋酸發酵階段通入充足的氧氣有利于微生物將乙醇轉化為乙酸，B正確；
C、酒精發酵和醋酸發酵的微生物呼吸方式相同，均為有氧呼吸；前者涉及的微生物是酵母菌，利用的是酵母菌的無氧呼吸，后者涉及的微生物主要是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，二者最適生長溫度不同，醋酸菌適宜的溫度為30～35℃，酵母菌適宜的溫度范圍是18～30℃，C正確；
D、發酵生產結束后，處理②需根據果醋保存時間選擇適當的消毒方法即可，不需要經過滅菌，避免影響產品的品質，D錯誤。
故選：D。
【點評】本題主要考查果酒、果醋的制作的內容，要求考生識記相關知識，并結合所學知識準確答題。
6．（2025 四川模擬）根據抗菌特性可將抗菌劑分為抑菌劑和殺菌劑，其中抑菌劑可抑制細菌生長，殺菌劑能殺死細菌。為分析抗菌劑的抗菌特性，有人將不同抗菌劑分別添加到培養的細菌懸液中，用稀釋涂布平板法或顯微鏡直接計數法測定細菌數量，評估細菌的生長情況，變化趨勢曲線如圖所示（不考慮抗菌劑殘留對計數的影響），其中曲線1為僅添加無菌水的實驗結果。下列敘述錯誤的是（　　）
A．添加抑菌劑后，通過稀釋涂布平板法進行計數，統計的細菌數量會保持不變
B．若添加某抗菌劑后兩種方法計數結果為曲線2和3，其差異是由于死菌被計數
C．曲線2代表添加抑菌劑后的細菌數量，曲線3代表添加殺菌劑后的細菌數量
D．若添加某抗菌劑后兩種方法統計的細菌數量均下降，推測細菌出現裂解而死亡
【考點】微生物的選擇培養（稀釋涂布平板法）．
【專題】坐標曲線圖；材料分析題；微生物的分離、培養和應用；理解能力．
【答案】A
【分析】培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質；分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對特殊營養物質和氧氣的要求。
【解答】解：A、稀釋涂布平板法是通過統計菌落數目反映活菌數目，抑菌劑可抑制細菌生長，添加抑菌劑后，通過稀釋涂布平板法進行計數，統計的細菌數量會減少，A錯誤；
B、顯微鏡直接計數法往往不能區分細胞是否死亡，稀釋涂布平板法是對活菌進行計數，若添加某抗菌劑后兩種方法計數結果為曲線2和3，其差異是由于顯微鏡直接計數時死菌被計數，產生了曲線2，B正確；
C、曲線1為對照組，而抑菌劑可抑制細菌生長，殺菌劑能殺死細菌，據圖可知，曲線2代表添加抑菌劑后的細菌數量，曲線3代表添加殺菌劑后的細菌數量，C正確；
D、若添加某抗菌劑后兩種方法統計的細菌數量均下降，即顯微鏡直接計數所得的結果也減小，由此推測細菌出現裂解而死亡，D正確。
故選：A。
【點評】本題考查微生物培養與分離的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
7．（2024秋 張家口期末）下列關于果酒、泡菜和果醋發酵的敘述，錯誤的是（　　）
A．制作果醋、泡菜時所用的主要菌種均不具有以核膜為界限的細胞核
B．果酒、果醋和泡菜發酵中都只利用了微生物的無氧呼吸
C．果酒發酵的溫度比果醋發酵的溫度稍低
D．果酒、果醋和泡菜發酵過程，發酵液的pH均會下降
【考點】果酒、果醋的制作；制作泡菜．
【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．
【答案】B
【分析】1、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細菌，只有當氧氣充足時，才能進行旺盛的生理活動，其代謝類型屬于異養需氧型。當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變為乙醛，再將乙醛變為醋酸。醋酸菌的最適生長溫度為30～35℃。
2、果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。
【解答】解：A、制作果醋、泡菜時所用的主要菌種分別為醋酸菌、乳酸菌，二者均為原核生物，均不具有以核膜為界限的細胞核，A正確；
B、果酒發酵中利用了酵母菌的有氧呼吸和無氧呼吸，果醋和泡菜發酵中分別只利用了微生物的有氧呼吸、無氧呼吸，B錯誤；
C、果酒發酵的溫度一般為18～25℃，果醋發酵的溫度一般為30～35℃，C正確；
D、果酒、果醋和泡菜發酵過程，微生物都會產生酸性物質釋放到發酵液中，發酵液的pH均會下降，D正確。
故選：B。
【點評】本題考查傳統發酵技術的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
8．（2024秋 順義區期末）中國是釀酒歷史最古老的國家之一，家釀葡萄酒和工業化生產啤酒的過程均需要（　　）
A．利用醋酸菌無氧呼吸的原理
B．接種人工選育的單一菌種
C．為發酵過程提供適宜的溫度
D．對發酵產物進行分離和提純
【考點】果酒、果醋的制作．
【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．
【答案】C
【分析】發障工程一般包括菌種的選育、擴大培養、培養基的配制、滅菌、接種、發酵、產物的分離、提純等方面。
【解答】解：A、家釀葡萄酒和工業化生產啤酒利用的是酵母菌無氧呼吸產生酒精的原理，A錯誤；
B、家釀葡萄酒不需要接種人工選育的單一菌種，B錯誤；
C、家釀葡萄酒和工業化生產啤酒均需要為發酵過程提供適宜的溫度，C正確；D、家釀葡萄酒不需要對發酵產物進行分離和提純，D錯誤。
故選：C。
【點評】本題考查傳統發酵技術和發酵工程的相關知識，要求考生識記相關的制作原理和流程，意在考查考生的識記和分析能力。
9．（2024秋 保定期末）我國是世界上啤酒的生產和消費大國。啤酒是以大麥為主要原料經酵母菌發酵制成的，其工業化生產流程如圖所示。
下列說法錯誤的是（　　）
A．選育優良菌種可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得
B．焙烤的目的是利用高溫對大麥種子進行滅菌，防止發酵過程中的雜菌污染
C．用一定濃度的赤霉素處理大麥種子，可使其無須發芽也能滿足生產條件
D．發酵過程包括主發酵和后發酵兩個階段，大部分代謝產物在主發酵階段生成
【考點】發酵工程的基本環節；發酵工程在食品、醫藥、農牧業等工業上的應用．
【專題】模式圖；微生物的分離、培養和應用；理解能力．
【答案】B
【分析】發酵工程一般包括菌種的選育和擴大培養、培養基的配制和滅菌、接種和發酵、產品的分離和提純等方面，發酵是發酵工程的中心環節。
【解答】解：A、發酵工程需要利用優良菌種，既可以從自然界中篩選，也可以通過誘變育種或基因工程育種獲得，A正確；
B、焙烤的目的是利用高溫使大麥種子胚失去活性，B錯誤；
C、赤霉素可以使大麥種子不發芽就能產生淀粉酶，因此用一定濃度的赤霉素處理大麥種子，可使其無須發芽也能滿足生產條件，C正確；
D、發酵過程包括主發酵和后發酵兩個階段，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代謝物的生成都在主發酵階段生成，D正確。
故選：B。
【點評】本題考查發酵工程的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
10．（2024秋 固始縣期末）下列關于傳統發酵技術、發酵工程及其應用的敘述，正確的是（　　）
A．傳統發酵過程中為降低雜菌污染，發酵前需要對器具，原料等進行滅菌
B．家庭制作泡菜和果醋過程中，發酵液表層出現的白膜是由同種微生物形成
C．通過發酵工程生產的蘇云金桿菌可制成微生物農藥，是生物防治手段
D．發酵工程與傳統發酵技術最大的區別就是前者可以利用微生物來進行發酵
【考點】果酒、果醋的制作；發酵工程的基本環節；發酵工程在食品、醫藥、農牧業等工業上的應用．
【專題】正推法；微生物的分離、培養和應用；理解能力．
【答案】C
【分析】1、酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精，酵母菌最適宜生長繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產中是否有酒精的產生，可用酸性重鉻酸鉀來檢驗，該物質與酒精反應呈現灰綠色。
2、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。
【解答】解：A、傳統發酵過程中為降低雜菌污染，發酵前需要對器具進行消毒，傳統發酵技術通常利用原料中的野生菌種進行發酵，原料不能消毒和滅菌，A錯誤；
B、制作果醋和制作泡菜的壇內都會有白膜出現，前者是醋酸菌大量繁殖形成，后者是酵母菌大量繁殖形成的，B錯誤；
C、通過發酵工程生產的蘇云金桿菌可制成微生物農藥，用來防治多種農林蟲害，這屬于生物防治的實例，C正確；
D、發酵工程與傳統發酵技術都需要利用微生物來進行發酵，而發酵工程通常利用單一菌種來進行發酵，D錯誤。
故選：C。
【點評】本題考查發酵工程的相關內容，要求考生能結合所學知識準確答題。
11．（2024秋 固始縣期末）進行土壤中尿素分解菌的選擇培養時，利用的培養基組分及含量如表所示。下列分析錯誤的是（　　）
組分 KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4 7H2O 葡萄糖 尿素 瓊脂 H2O
含量 1.4g 2.1g 0.2g 10.0g 1.0g 15.0g 定容1000mL
A．KH2PO4和Na2HPO4既可為菌體提供無機鹽，又可調節培養基的pH
B．尿素既可為尿素分解菌提供氮源，又可對培養基中的微生物起選擇作用
C．瓊脂一般不可以為尿素分解菌提供碳源，只起到凝固劑的作用
D．蒸餾水既可進行定容，又可對培養液進行稀釋以便于計數
【考點】微生物的選擇培養（稀釋涂布平板法）．
【專題】數據表格；微生物的分離、培養和應用．
【答案】D
【分析】進行土壤中尿素分解菌的選擇培養的原理：培養基的氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長發育繁殖，而受到抑制，所以用此培養基就能夠選擇出分解尿素的微生物。
【解答】解：A、KH2PO4和Na2HPO4這兩種無機鹽既可為細菌生長提供無機營養，又可作為緩沖劑保持細胞生長過程中pH相對穩定，A正確；
B、培養基中除了尿素無其他含氮物質，只有尿素分解菌能通過分解尿素進行生長繁殖，故尿素既能為尿素分解菌提供氮源又可對培養基中的微生物起選擇作用，B正確；
C、瓊脂不能被微生物利用，只能充當凝固劑，C正確；
D、蒸餾水起定容作用，蒸餾水不能對培養液進行稀釋，稀釋所用的溶劑應該是無菌水，D錯誤。
故選：D。
【點評】本題考查微生物的分離和培養，要求考生識記培養基的概念和菌落計數的方法，掌握相關的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進行綜合運用需要平常多積累。
12．（2024 鄒城市校級模擬）藍莓果實的主要抗氧化活性成分為花色苷和多酚類物質，具有保護眼睛、抗氧化、消炎、增強記憶、增強免疫和抗癌等多種作用，因此利用藍莓釀造的藍莓酒具有較好的保健功能。釀造藍莓酒的工藝流程為新鮮藍莓→榨汁→接種→發酵→過濾→藍莓酒→儲存。下列敘述錯誤的是（　　）
A．藍莓酒發酵過程中起主要作用的微生物是酵母菌
B．對藍莓汁進行糖度調整可改變藍莓酒的酒精度
C．接種后需要持續通入無菌空氣以加快發酵進程
D．若利用酸性重鉻酸鉀檢測酒精度，需先對藍莓酒進行脫色處理
【考點】果酒、果醋的制作．
【專題】正推法；果酒、果醋、腐乳和泡菜的制作；理解能力．
【答案】C
【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精。
【解答】解：A、果酒的制作離不開酵母菌，在藍莓酒發酵過程中起主要作用的微生物是酵母菌，A正確；
B、糖可作為酒精發酵的原料，因此對藍莓汁進行糖度調整可改變藍莓酒的酒精度，B正確；
C、酵母菌為兼性厭氧菌，釀酒初期需要氧氣促進酵母菌的生長、繁殖，后期酵母菌需在無氧環境中進行酒精發酵，C錯誤；
D、若利用酸性重鉻酸鉀檢測酒精度，需先對藍莓酒進行脫色處理，排除果酒原有顏色的干擾，D正確。
故選：C。
【點評】本題主要考查果酒的制作等相關知識點，意在考查學生對相關知識點的理解和熟練應用的能力。
13．（2024 六合區校級二模）將大腸桿菌培養在含有葡萄糖培養液中，在時間0時，將含大腸桿菌的培養液均分為四組，處理見下表。混勻處理6小時后，將經不同處理的培養液分別涂布在四組不同的平板上，每組涂12個，在37℃下培養24小時，計數每組平板中菌落的平均數。結果如下表所示：下列有關說法，正確的是（　　）
組別 組1 組2 組3 組4
培養液處理 只有葡萄糖 葡萄糖+物質A 葡萄糖+物質B 葡萄糖+物質A+物質B
平板的菌落平均數 長滿菌落 2±2 4±1 23±3
A．研究物質A和B對大腸桿菌的共同作用時，組1是對照組，2、3、4組為實驗組
B．物質A和物質B均能抑制大腸桿菌的生長，且物質B的抑制作用強于物質A
C．物質A與物質B同時存在時，有些原來不能存活的大腸桿菌存活下來
D．可在培養液（基）中加入酚紅試劑鑒別大腸桿菌
【考點】微生物的選擇培養（稀釋涂布平板法）．
【專題】數據表格；微生物的分離、培養和應用．
【答案】C
【分析】伊紅﹣亞甲藍瓊脂培養基可用來鑒別大腸桿菌，生長在此培養基上的大腸桿菌菌落呈深紫色，并有金屬光澤。
【解答】解：A、研究物質A和B對大腸桿菌的共同作用時，組1、2、3均為對照組，組4為實驗組，A錯誤；
B、組2、組3與組1對比可知，物質A和物質B均能抑制大腸桿菌的生長，且作用相當，甚至物質A的抑制作用稍強于物質B，B錯誤；
C、組4與組2、組3對比可知，當物質A與物質B同時存在時，菌落要比物質A、物質B單獨存在要多，說當物質A與物質B同時存在時，有些原來不能存活的大腸桿菌存活下來，C正確；
D、鑒別大腸桿菌可使用的試劑是伊紅﹣亞甲藍試劑，D錯誤。
故選：C。
【點評】本題考查了微生物的選擇培養，需要學生掌握選擇培養基的配制。
14．（2024 聊城二模）傳統發酵過程中，控制發酵條件至關重要。下列相關敘述正確的是（　　）
A．葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通入無菌空氣制作葡萄醋
B．泡菜發酵后期，盡管乳酸菌占優勢，但仍有產氣菌繁殖，需定期開蓋放氣
C．制作果酒的葡萄汁不宜超過發酵瓶體積的，制作泡菜的鹽水要淹沒全部菜料
D．果酒與果醋發酵時溫度宜控制在18～25℃，泡菜發酵時溫度宜控制在30～35℃
【考點】果酒、果醋的制作；制作泡菜．
【專題】正推法；微生物的分離、培養和應用．
【答案】C
【分析】果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發酵。故果酒的制作原理是酵母菌無氧呼吸產生酒精。
【解答】解：A、雖然葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，但在制作好葡萄酒后，也不能直接通入無菌空氣制作葡萄醋，這是因為酵母菌和醋酸菌的最適生長溫度不同，要制作果醋還需要升高溫度，A錯誤；
B、制作泡菜利用的是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，在制作過程中必須提供無氧環境，不需要開蓋放氣，B錯誤；
C、制作果酒的葡萄汁不宜超過發酵瓶體積的，這樣既能夠在發酵初期給酵母菌提供氧氣，又能防止發酵液溢出，而制作泡菜的鹽水要淹沒全部菜料，這是因為制作泡菜利用的是乳酸菌，乳酸菌是厭氧菌，用鹽水淹沒全部菜料能夠提供無氧環境，C正確；
D、果酒和果醋制作所需的溫度不同，其中果酒發酵時溫度宜控制在18﹣30℃，果醋發酵時溫度宜控制在30﹣35℃，泡菜的制作溫度要低于30℃，D錯誤。
故選C。
【點評】本題考查發酵技術的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
15．（2024 江西二模）花生的根系在生長過程中會分泌苯甲酸、苯乙酮等物質（這些物質不是花生基本的生命活動所必需的）以抑制某些病菌和其他植物的生長。同一片土地多年連續種植花生會導致這些有毒物質不斷積累，造成花生產量下降。某大學通過“采集根際土壤→選擇培養→分離、純化培養→菌種鑒定”篩選出可將苯甲酸降解為無毒小分子（CO2、H2O等）的根際菌，分離、純化培養的具體操作如圖所示。下列相關敘述錯誤的是（　　）
A．花生根系分泌的苯甲酸、苯乙酮等物質屬于次生代謝物
B．可從多年連續種植花生的土壤中尋找降解苯甲酸的根際菌
C．該實驗需配制以苯甲酸為唯一碳源的選擇培養基進行培養
D．若每次稀釋10倍，圖中的a為18，圖中將土壤稀釋了103倍
【考點】選擇培養基．
【專題】模式圖；微生物的分離、培養和應用．
【答案】D
【分析】1、培養微生物的培養基按照物理性質劃分可分為固體培養基、液體培養基和半固體培養基，固體培養基具有容易觀察和記錄細胞的生長形態和行為；按照功能劃分分為選擇培養基和鑒別培養基，選擇培養基是指根據某種（類）微生物特殊的營養要求或對某些特殊化學、物理因素的抗性而設計的，能選擇性區分這種（類）微生物的培養基。利用選擇性培養基，可使混合菌群中的某種（類）微生物變成優勢種群，從而提高該種（類）微生物的篩選效率。
2、植物代謝會產生一些一般認為不是植物基本的生命活動所必需的產物—次生代謝物。次生代謝物是一類小分子有機化合物（如酚類、萜類和含氮化合物等），在植物抗病、抗蟲等方面發揮作用，也是很多藥物、香料和色素等的重要來源。
【解答】解：A、因為花生根系分泌的苯甲酸、苯乙酮等物質是其生存非必需的物質，所以屬于次生代謝物，A正確；
B、降解苯甲酸的根際菌大多分布在富含苯甲酸的環境中，多年連續種植花生的土壤中苯甲酸含量相對較高，因此從這種土壤中獲得降解苯甲酸的微生物的幾率要高于普通環境，B正確；
C、為確保能夠分離得到苯甲酸分解微生物，常將土壤稀釋液先進行選擇培養，該培養基應以苯甲酸為唯一碳源，其他營養物質適宜，C正確；
D、分離、純化培養時，采用稀釋涂布平板法接種，先進行等濃度梯度稀釋，如果每次稀釋10倍，則取2mL菌液需要添加18mL無菌水，圖中一共稀釋了4次，因此總共稀釋了104倍，D錯誤。
故選：D。
【點評】本題考查微生物培養的相關知識，意在考查學生的識記能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題的能力是解答本題的關鍵。
16．（2024 懷化三模）我國科學家通過轉基因技術使面包酵母在質膜表面表達纖維二糖磷酸化酶和a﹣葡聚糖磷酸化酶，進而可利用農作物秸稈合成人工淀粉和生產單細胞蛋白，助力糧食安全生產，其過程如圖所示。下列分析錯誤的是（　　）
A．纖維素轉化為淀粉的物質基礎是組成兩者的單體相同
B．纖維素與淀粉的轉化途徑說明酶具有專一性和高效性
C．葡萄糖在酵母菌體內轉化為氨基酸才能參與形成蛋白質
D．調控發酵的溫度或pH可改變酶活性以影響終產物生成
【考點】發酵工程在食品、醫藥、農牧業等工業上的應用．
【專題】模式圖；正推法；從生物材料提取特定成分；理解能力．
【答案】B
【分析】酶的特性：
1、高效性：酶的催化效率大約是無機催化劑的107～1013倍；
2、專一性：每一種酶只能催化一種或一類化學反應；
3、作用條件較溫和：高溫、過酸、過堿都會使酶的空間結構遭到破壞，使酶永久失活；在低溫下，酶的活性降低，但不會失活。
【解答】解：A、纖維素轉化為淀粉的物質基礎是兩者的組成單體相同，都是葡萄糖，A正確；
B、酶的高效性是指酶的催化效率與無機催化劑的催化效率相比，故纖維素與淀粉的轉化途徑不能說明酶具有高效性，B錯誤；
C、葡萄糖在酵母細胞內須轉化為氨基酸，氨基酸才能通過脫水縮合形成蛋白質，C正確；
D、酶的活性受到溫度、pH等因素的影響，故調控發酵的溫度或pH可改變酶的活性，從而影響產物的生成速率，D正確。
故選：B。
【點評】本題主要考查發酵過程的內容，要求考生識記相關知識，并結合所學知識準確答題。
二．解答題（共4小題）
17．（2025 云南模擬）中國名茶普洱茶的主要活性成分——茶褐素，具有降脂減肥、抗氧化和提高免疫力等功能，在功能食品領域具有廣闊的應用前景。研究人員在制作普洱熟茶的固體發酵過程中分離得到優勢菌塔賓曲霉，其可在綠茶浸提液（富含茶多酚、可溶性糖、氨基酸、蛋白質和咖啡堿等）中生長繁殖，之后分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度如圖。
回答下列問題：
（1）綠茶浸提液中的氨基酸和蛋白質可為塔賓曲霉生長提供的營養物質為　碳源和氮源　。
（2）塔賓曲霉為好氧微生物，用綠茶浸提液進行液體培養時應采用　搖床　（填“靜置”或“搖床”）培養。培養過程中茶褐素在發酵前兩天均無顯著增加的原因是　塔賓曲霉先進行生長繁殖，之后才分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素　。
（3）為檢測發酵1天時塔賓曲霉的數量，將發酵液稀釋1×103倍后，分別取0.1mL稀釋液均勻涂布于3個培養基平板上，培養后菌落數量分別為48、45和42個，則每毫升發酵液中活菌數量為　4.5×105　個。
（4）從實際生產角度出發，由圖可知在第　6　天結束發酵即可獲得較高濃度的茶褐素。為探索生產茶褐素的最適溫度，需設計下一步實驗，寫出實驗思路　在30℃～42℃之間設置一系列溫度梯度，用同樣的方式培養塔賓曲霉，并檢測不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度，找到生成茶褐素的濃度的溫度即為生產茶褐素的最適溫度　。
【考點】發酵工程在食品、醫藥、農牧業等工業上的應用；微生物的數量測定．
【專題】圖像坐標類簡答題；微生物的分離、培養和應用；理解能力．
【答案】（1）碳源和氮源
（2）搖床 塔賓曲霉先進行生長繁殖，之后才分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素
（3）4.5×105
（4）6 在30℃～42℃之間設置一系列溫度梯度，用同樣的方式培養塔賓曲霉，并檢測不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度，找到生成茶褐素的濃度的溫度即為生產茶褐素的最適溫度
【分析】分析題圖，47℃下曲線不增長，可能是溫度過高，相關酶已經失活；37℃和42℃的增長幾乎同步，最適溫度介于兩者之間。
【解答】解：（1）氨基酸和蛋白質是組成元素為C、H、O、N的有機物，可以為為塔賓曲霉生長提供碳源和氮源。
（2）塔賓曲霉為好氧微生物，用綠茶浸提液進行液體培養時應采用搖床培養，可以為培養液增加溶氧量，有利于塔賓曲霉的繁殖。培養過程中前兩天塔賓曲霉進行生長繁殖，之后才分泌氧化酶催化茶多酚生成茶褐素。
（3）培養后菌落數量分別為48、45和42個，平均值為45，發酵液稀釋1×103倍后，取0.1mL，因此每毫升發酵液中活菌數量為45×103×10＝4.5×105個。
（4）分析題圖可知，發酵效率較高的是37℃和42℃，此時發酵至第6天，結束發酵即可獲得較高濃度的茶褐素。生產茶褐素的最適溫度在30℃～42℃范圍內，進一步探究的思路為：在30℃～42℃之間設置一系列溫度梯度，用同樣的方式培養塔賓曲霉，并檢測不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度，找到生成茶褐素的濃度的溫度即為生產茶褐素的最適溫度。
故答案為：
（1）碳源和氮源
（2）搖床 塔賓曲霉先進行生長繁殖，之后才分泌胞外氧化酶催化茶多酚生成茶褐素
（3）4.5×105
（4）6 在30℃～42℃之間設置一系列溫度梯度，用同樣的方式培養塔賓曲霉，并檢測不同發酵溫度下塔賓曲霉生成茶褐素的濃度，找到生成茶褐素的濃度的溫度即為生產茶褐素的最適溫度
【點評】本題考查微生物培養與分離的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
18．（2024秋 保定期末）大腸桿菌是一類引起人體腹瀉的重要病原菌，為檢測某品牌冰激凌中的大腸桿菌含量是否超標，高二學習興趣小組按圖示方法分離大腸桿菌，在適宜溫度下培養，統計菌落數目。
（1）培養大腸桿菌的培養基中一般都含有 　碳源、氮源　、水、無機鹽等營養成分。為了便于肉眼區分大腸桿菌與其他微生物，需在培養基中添加伊紅—亞甲藍，可觀察到大腸桿菌菌落呈深紫色，并有金屬光澤。從用途上劃分該培養基屬于 　鑒別　培養基。
（2）興趣小組用 　稀釋涂布平板　法將菌種接種到培養基中，1×10﹣1～1×10﹣4每個濃度涂3個平板。運用該方法統計菌落數目時應該設置兩組對照組。一組為陰性對照組，具體做法是不進行涂布或者用無菌水涂布平板，目的是 　檢驗培養基滅菌是否合格，是否被雜菌污染　；另一組為陽性對照組，具體做法是 　接種大腸桿菌　，目的是說明實驗組培養基是否培養出了大腸桿菌。
（3）興趣小組只對一個冰激凌進行了檢測，該做法 　不合理　（填“合理”或“不合理”），理由是 　數據太少，存在偶然性，不具有說服力　。
（4）接種后平板要在適宜溫度下培養，每隔24h統計一次菌落數目，選取 　菌落數目穩定　時的記錄作為結果。如果以菌落數代表樣品中的大腸桿菌數量，則統計結果比實際值 　小　，原因是 　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落　。
【考點】微生物的選擇培養（稀釋涂布平板法）；微生物的數量測定．
【專題】圖文信息類簡答題；微生物的分離、培養和應用；理解能力．
【答案】（1）碳源、氮源 鑒別
（2）稀釋涂布平板 檢驗培養基滅菌是否合格，是否被雜菌污染 接種大腸桿菌
（3）數據太少，存在偶然性，不具有說服力
（4）菌落數目穩定 小 當兩個或多個細胞連在一起平板上看到的只是一個菌落
【分析】培養基是人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質；分為固體培養基和液體培養基，培養基中一般含有水、碳源、氮源和無機鹽，其中碳源和氮源常采用蛋白胨和牛肉膏，因為它們來源于動物原料，含有糖、維生素和有機氮等營養物質。在提供上述幾種主要營養物質的基礎上，培養基還需要滿足微生物生長對特殊營養物質和氧氣的要求。
【解答】解：（1）培養大腸桿菌的培養基中必須含有無機鹽、水以及碳源、氮源等營養物質。伊紅—亞甲藍培養基一般用以鑒定大腸桿菌，這樣的培養基屬于鑒別培養基。
（2）通過稀釋涂布平板法可以對微生物進行計數，操作時將菌液均勻地涂布在培養基上。實驗中，陰性對照不進行涂布或者用無菌水涂布平板，目的是檢驗培養基滅菌是否合格，是否被雜菌污染；陽性對照應涂布大腸桿菌，以更好地鑒別、檢驗該培養基能否培養出大腸桿菌。
（3）不能只對一個冰激凌進行了檢測，這樣操作所得數據太少，存在偶然性，不具有說服力。
（4）用該方法統計微生物數目時，需要每隔一段時間統計一次菌落數目，選取菌落數目穩定時的記錄作為結果，這樣做的目的是防止因培養時間不足而導致遺漏菌落的數目。用這種方法統計的結果往往較實際值小，原因是當兩個或多個細胞連在一起平板上看到的只是一個菌落。
故答案為：
（1）碳源、氮源 鑒別
（2）稀釋涂布平板 檢驗培養基滅菌是否合格，是否被雜菌污染 接種大腸桿菌
（3）數據太少，存在偶然性，不具有說服力
（4）菌落數目穩定 小 當兩個或多個細胞連在一起平板上看到的只是一個菌落
【點評】本題考查微生物培養與分離的相關知識，要求考生理解識記有關技術的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節，能將教材中的知識結合題中信息進行遷移應用。
19．（2024 息縣模擬）（一）某食品公司得到一種高效釀酒的酵母菌菌株，并設計方案獲得發酵產物。
（1）對于酵母菌的培養，比較適合它的培養基為　A　（A．馬鈴薯蔗糖培養基；B．MS培養基；C．LB培養基；D．牛肉湯培養基），除了要選擇合適的培養基成分外，還要考慮培養基中營養物質的　濃度和比例（配比）　。
（2）欲知道這種微生物的繁殖速度，可用涂布分離法或　血細胞計數板（或顯微鏡計數法）　對酵母菌進行計數。對培養到某一時期的培養液制備成10﹣5的稀釋液，每次取0.1mL進行涂布分離，三個培養皿生長的菌落數依次為35個、32個、29個，則培養液中的酵母菌數量為　3.2×107　個/mL。在恒溫培養箱培養時，培養皿的放置方式如圖　a　（填“a”或“b”）。
（3）該酵母菌的發酵食品也會因為發酵時間的長短和　發酵條件、發酵底物　不同，而形成不同的代謝產物，使發酵食品的風味發生變化。釀酒時會因為發酵液放置過久等原因，導致出現酸味，可能是因為產生了　醋酸　（填物質）。
（二）目前我國新冠病毒核酸檢測的方法是RT﹣PCR，如圖為RT﹣PCR（逆轉錄熒光PCR技術）的原理：PCR過程中探針和引物一起與模板結合，探針兩側分別帶有熒光基團和淬滅基團（抑制熒光發出），當酶催化子鏈延伸至探針處時會水解探針，導致熒光基團與淬滅基團分離而發出熒光（熒光強度與探針水解量成正相關）。
請回答下列問題：
（4）PCR技術與DNA體內復制過程相比，兩者的復制方式都是　半保留復制　。RT﹣PCR過程中，需先以RNA為模板合成cDNA，故裝置中需添加　逆轉錄酶　酶。除了加酶，解開cDNA雙螺旋的方法還有　加熱　。
（5）對新冠病毒進行檢測時，探針是一段與　目的基因中特定的核苷酸序列　相同的核苷酸序列。
（6）通過熒光檢測到熒光信號，則可判定該檢測樣本為　陽　性（選填“陽”、“陰”），在相同PCR循環次數條件下，熒光強度與病毒數量呈　正相關　。
（7）為了在沒有條件進行核酸檢測前及早發現新冠病毒，我國于2022年3月11日推出新冠病毒抗原檢測試劑盒作為核酸檢測的補充措施，該試劑盒的檢測原理是　抗原抗體的特異性結合　。試劑盒中的探針應采用　單克隆抗體　技術生產。
【考點】微生物的數量測定；發酵工程在食品、醫藥、農牧業等工業上的應用；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【專題】正推法；微生物的分離、培養和應用；PCR技術；理解能力．
【答案】（1）A 濃度和比例（配比）
（2）血細胞計數板##或顯微鏡計數法 3.2×107 a
（3）發酵條件、發酵底物 醋酸
（4）半保留復制 逆轉錄酶 加熱
（5）目的基因中特定的核苷酸序列
（6）陽 正相關
（7）抗原抗體的特異性結合 單克隆抗體
【分析】1、酵母菌是兼性厭氧微生物，在無氧條件下能進行酒精發酵，其反應式為：C6H12O62C2H5OH+2CO2+能量。溫度是影響酵母菌生長的重要因素，釀酒酵母的最適生長溫度約為28℃，發酵時，將溫度控制在18～30℃進行發酵。
2、人們按照微生物對營養物質的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養基質﹣培養基，培養基中一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質）、氯源（提供氮元素的物質）和無機鹽等營養物質。
3、微生物的計數方法包括稀釋涂布平板法和利用顯微鏡進行直接計數。
4、稀釋涂布平板法需要將樣品進行系列梯度稀釋，為了保證結果準確，一般選擇菌落數為30～300的平板進行計數。通常選用一定稀釋范圍的樣品液進行培養，以保證獲得菌落數為30～300、適于計數的平板。在同一稀釋度下，應至少對3個平板進行重復計數，然后求出平均值。
5、利用顯微鏡進行直接計數是一種常用的、快速直觀的測定微生物數量的方法。該方法利用特定的細菌計數板或血細胞計數板，在顯微鏡下觀察、計數，然后再計算一定體積的樣品中微生物的數量，統計的結果一般是活菌數和死菌數的總和。
6、逆轉錄是指在逆轉錄酶的催化下，以RNA為模板將四種脫氧核苷酸合成為DNA的過程。
7、PCR是聚合酶鏈式反應的縮寫，是一項根據DNA半保留復制的原理，在體外提供參與DNA復制的各種組分與反應條件，對目的基因的核苷酸序列進行大量復制的技術。PCR反應的條件為需要在一定的緩沖溶液中才能進行，需提供DNA模板，分別與兩條模板鏈結合的2種引物，4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶；同時通過控制溫度使DNA復制在體外反復進行。
【解答】解：（1）由分析可知，酵母菌主要以糖類底物進行呼吸作用產生酒精，因此比較適合的培養為以糖類為碳源的培養基，即A馬鈴薯蔗糖培養基。除了要選擇合適的培養基成分外，還要考慮培養基中營養物質的濃度和比例，以確保微生物能正常生存和發酵產品的品質。
（2）由分析可知，微生物的計數方法有稀釋涂布平板法和利用顯微鏡進行直接計數，顯微鏡計數法需要使用血細胞計數板對微生物進行計數。根據題意分析，培養液中酵母菌數量為。利用培養皿培養微生物時，需要將培養皿倒置培養，即a所示狀況。
（3）在發酵過程中，培養液中的微生物數量、產物濃度，培養液的營養組分，以及溫度、pH和溶解氧等發酵條件，不僅會影響微生物的生長繁殖，而且會影響微生物代謝物的形成。因此，發酵食品會因為發酵時間的長短、發酵條件、發酵底物的不同觀使其風味發生變化。釀酒時會因為發酵液放置過久等原因，導致出現酸味，可能是因為醋酸菌繁殖產生了醋酸所致。
（4）由分析可知，PCR技術與DNA體內復制的復制方式都是半保留復制。RT﹣PCR過程為逆轉錄過程，需向裝置中添加逆轉錄酶，以RNA為模板合成cDNA。DNA體內復制中解開DNA雙螺旋的是利用解旋酶，在PCR中則是利用加熱解開雙螺旋。
（5）由圖可知，利用探針對新冠病毒進行檢測的原理是堿基互補配對和DNA復制，當存在病毒時，以病毒的遺傳物質RNA逆轉錄合成cDNA，探針能與該cDNA通過堿基互補配對結合，當cDNA進行復制時，會水解探針，因此探針是一段與目的基因（病毒的基因）中特定核苷酸序列相同的核苷酸序列。
（6）若檢測到熒光信號，說明探針與被檢測物結合后被水解，則可判定該檢測樣本為陽性，在相同PCR循環次數條件下，病毒數量越多，復制時水解的探針越多，則熒光強度越強，即熒光強度與病毒數量呈正相關。
（7）分析題意可知，新冠病毒抗原檢測試劑盒的原理是抗原與抗體的特異性結合。與傳統方法生產的抗體相比，單克隆抗體具有純度高、特異性強的特點，因此試劑盒中的探針應采用單克隆抗體技術生產。
故答案為：
（1）A 濃度和比例（配比）
（2）血細胞計數板##或顯微鏡計數法 3.2×107 a
（3）發酵條件、發酵底物 醋酸
（4）半保留復制 逆轉錄酶 加熱
（5）目的基因中特定的核苷酸序列
（6）陽 正相關
（7）抗原抗體的特異性結合 單克隆抗體
【點評】本題主要考查微生物的培養與計數和PCR技術等知識，意在考查學生知識的掌握情況和理解水平，利用知識分析解決問題能力，要求學生熟練掌握知識點，形成知識網絡，能根據具體題境利用相關知識解決問題。
20．（2024秋 瀘縣校級月考）生物修復技術已變成對生態環境進行保護過程中的一類最有價值的修復手段，如圖為從某植物根際土壤中篩選出高效石油降解菌的部分流程示意圖，請據圖1回答：
（1）用于培養石油降解菌的培養基在接種前需要通過 　高壓蒸汽滅菌　法進行滅菌。步驟Ⅰ為低溫石油降解菌的富集培養。稱取1g土壤樣品加入預先裝有100mL以 　石油　為唯一碳源的培養基的三角瓶中，在15℃、160r/min的恒溫振蕩搖床中培養6d，在相同的培養條件下連續培養四個周期。搖床培 養的目的是 　增加菌體與營養物質的接觸面積，擴大培養　。
（2）在操作Ⅱ、Ⅲ中，采用的接種方法分別是 　稀釋涂布平板法　、　平板劃線法　。
（3）研究人員通常根據菌落的 　大小、形狀、顏色和隆起程度等　特征來初步區分不同種的微生物，統計菌落種類和數量時要 每隔24h觀察統計一次，直到 　菌落數目穩定　時。
（4）目前，已知有200多種微生物能降解石油，但多數微生物的降解速率都很低，現在分離篩選得到三株降解石油能力較強的菌株，請提出鑒定不同菌株降解石油能力大小的方法 　在相同石油濃度、相同體積的培養液中接種相同數量的不同菌株，一定時間后，測定培養液中石油含量　。
（5）石油主要含有烷烴、環烷烴和芳香烴，科研人員已經篩選出分別降解三種烴類的細菌B、C、D（每種菌只含有一種相應的烴類降解酶）探究菌A高效降解石油的原因，凝膠電泳技術分離相關蛋白，結果如圖2。
①檢測微管蛋白的目的是 　作為標準物質，以校準和消除由于細胞培養操作、細胞取樣量和相關的檢測方法等無關變量對實驗結果的影響　。
②依據實驗結果分析菌A降解石油的能力強于菌B、C、D 原因是 　菌A中含有兩種分解經類的酶，即含有酶B和酶D，而細菌B、C、D各有一種降解豎類的酶　。
【考點】微生物的純培養；微生物的選擇培養（稀釋涂布平板法）．
【專題】圖文信息類簡答題；實驗基本操作；微生物的分離、培養和應用．
【答案】（1）高壓蒸汽滅菌 石油 增加菌體與營養物質的接觸面積，擴大培養
（2）稀釋涂布平板法 平板劃線法
（3）大小、形狀、顏色和隆起程度等 菌落數目穩定
（4）在相同石油濃度、相同體積的培養液中接種相同數量的不同菌株，一定時間后，測定培養液中石油含量
（5）①作為標準物質，以校準和消除由于細胞培養操作、細胞取樣量和相關的檢測方法等無關變量對實驗結果的影響
②菌A中含有兩種分解經類的酶，即含有酶B和酶D，而細菌B、C、D各有一種降解豎類的酶
【分析】1、微生物常見的接種的方法：
①平板劃線法：將已經熔化的培養基倒入培養皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養基表面，經培養后可形成單個菌落。
2、在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養基，稱為選擇培養基。雖然各種培養基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物質）、氮源（提供氮元素的物質）和無機鹽。另外還需要滿足微生物生長對pH、特殊營養物質以及氧氣的要求。
3、菌落是指由一個微生物細胞或一堆同種細胞在適宜固體培養基表面或內部生長繁殖到一定程度，形成肉眼可見的子細胞群體。菌落形態包括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質地、顏色和透明程度等，每一種細菌在一定條件下形成固定的菌落特征。不同種或同種在不同的培養條件下，菌落特征是不同的。這些特征對菌種識別、鑒定有一定意義。
【解答】解：（1）用于培養石油降解菌的培養基在接種前需要通過高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。步驟Ⅰ為低溫石油降解菌的富集培養。為獲得石油降解菌，在稱取1g土壤樣品加入預先裝有100mL以石油為唯一碳源的培養基的三角瓶中，在15℃、160r/min的恒溫振蕩搖床中培養6d，在相同的培養條件下連續培養四個周期。搖床培養的目的是增加菌體與營養物質的接觸面積，達到擴大培養。
（2）由圖觀察可知，在操作Ⅱ中，菌落均勻分布在培養基，采用的接種方法是稀釋涂布平板法，在操作Ⅲ中，進行了挑菌純化，故采用的接種方法是平板劃線法。
（3）研究人員通常根據菌落的大小、形狀、顏色和隆起程度等特征來初步區分不同種的微生物，統計菌落種類和數量時要每隔24h觀察統計一次，直到菌落數目穩定，以防止培養時間不足導致遺漏菌落的種類和數目，或培養時間太長導致菌落粘連影響計數、培養基表面干燥脫水等。
（4）鑒定不同菌株降解石油能力大小可采用的方法是在相同石油濃度、相同體積的培養液中接種相同數量的不同菌株，一定時間后，測定培養液中石油含量。
（5）①由于細胞中微管蛋白的表達量相對穩定且豐富，在實驗中可作為標準物質，以校準和消除由于細胞培養操作、細胞取樣量和相關的檢測方法等無關變量對實驗結果的影響。
②由圖2分析可知，菌A中有酶B和酶D兩種酶，而細菌B、C、D都只含有一種相應的烴類降解酶，故菌A降解石油的能力強于菌B、C、D。
故答案為：
（1）高壓蒸汽滅菌 石油 增加菌體與營養物質的接觸面積，擴大培養
（2）稀釋涂布平板法 平板劃線法
（3）大小、形狀、顏色和隆起程度等 菌落數目穩定
（4）在相同石油濃度、相同體積的培養液中接種相同數量的不同菌株，一定時間后，測定培養液中石油含量
（5）①作為標準物質，以校準和消除由于細胞培養操作、細胞取樣量和相關的檢測方法等無關變量對實驗結果的影響
②菌A中含有兩種分解經類的酶，即含有酶B和酶D，而細菌B、C、D各有一種降解豎類的酶
【點評】本題考查微生物的分離與培養，要求考生識記菌落分離、接種和菌落特征等知識，意在考查考生的識圖能力和判斷能力，運用所學知識綜合分析問題和解決問題的能力。
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