資源簡介

2024-2025學年度下學期武漢市重點中學5G聯合體期末考試
高二生物學試卷
考試時間：2025年6月27日 試卷滿分：100分
★祝考試順利★
注意事項：
1.答題前，先將自己的姓名、準考證號填寫在試卷和答題卡上，并將準考證號條形碼粘貼在答題卡上的指定位置。
2.選擇題的作答：每小題選出答案后，用2B鉛筆把答題卡上對應題目的答案標號涂黑。寫在試卷、草稿紙和答題卡上的非答題區域均無效。
3.非選擇題的作答：用黑色簽字筆直接答在答題卡上對應的答題區域內。寫在試卷、草稿紙和答題卡上的非答題區域均無效。
4.考試結束后，請將本試卷和答題卡一并上交。
一、選擇題：本題共18小題，每題2分，共36分。在每小題給出的四個選項中，只有一項是符合題目要求的。
1. 下列四類傳統發酵食品制作，敘述錯誤的是（ ）
A. 制作果酒和果醋可用同一裝置，但需控制不同發酵條件
B. 在泡菜的制作過程中，醋酸菌將葡萄糖分解成醋酸
C. 在腐乳的制作過程中，毛霉等多種微生物參與了豆腐的發酵
D. 制作四類傳統發酵食品的共同點是菌種均可來自于自然環境
2. 空氣中細菌總數的檢測方法主要有沉降法和撞擊法。沉降法是讓空氣中的細菌自然降至瓊脂平板表面，撞擊法是使用吸風機或真空泵使含菌空氣以一定流速穿過狹縫而被吸到瓊脂平板表面。下列敘述正確的是（ ）
A. 兩種方法在瓊脂平板上形成的菌落都是單菌落
B. 兩種方法中所用的固體培養基從功能上都屬于選擇培養基
C. 測定空氣細菌總數時只有沉降法需要對不同方位和高度的空氣進行采樣
D. 撞擊法采樣不受環境氣流影響，對潔凈空氣中細菌總數的測定比沉降法更準確
3. 鮮牛奶容易被金黃色葡萄球菌污染，該菌高度耐鹽，可引起人類肺炎等疾病。該菌在血平板（培養基中添加適量血液）上生長時，會破壞菌落周圍的紅細胞而出現溶血圈。某小組檢測鮮牛奶被金黃色葡萄球菌污染情況的操作流程如圖所示。下列有關敘述錯誤的是（ ）
A. 該實驗采用的是平板劃線法，該方法可用于細菌計數
B. 肉湯培養基中加入NaCl可能會使某些菌滲透失水
C. 振蕩培養可使細菌與營養物質充分接觸，利于其生長
D. 若血平板中菌落出現溶血圈，則初步說明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌
4. 雙層平板法是先在培養皿中倒入底層固體培養基，凝固后形成底層平板；再倒入由宿主細菌、噬菌體以及瓊脂含量較低的培養基組成的混合液，形成上層平板。培養一段時間后，在上層平板上觀察到由于噬菌體侵染周圍細菌，使細菌裂解形成空斑，即噬菌斑（通常一個噬菌斑來自一個噬菌體），根據噬菌斑的數目可計算噬菌體的數量。下列敘述正確的是（ ）
A. 需先調節滅菌后培養基的pH，然后再進行倒平板
B. 需使用滅菌后的涂布器將混合液均勻涂布在底層平板上
C. 可用雙層平板法來檢測噬菌體和細菌間是否存在寄生關系
D. 利用雙層平板法統計出的噬菌體數量往往比實際值偏大
5．某生物活動小組分別用3種不同濃度的食鹽制作泡菜，該活動小組記錄的亞硝酸鹽含量與發酵天數的關系如圖所示。下列正確的是（ ）
A．檢測亞硝酸鹽含量的目的是了解乳酸菌的生長狀況
B．該實驗自變量只有發酵時間，因變量是亞硝酸鹽含量
C．腌制過程中乳酸和亞硝酸鹽的含量均會先增加后減少最后趨于穩定
D．泡菜制作時，發酵液表面會產生一層白膜，該膜可能是由酵母菌繁殖形成的
6．長春新堿是長春花植物體內產生的一種雙吲哚類代謝物，具有顯著的抗癌活性，科學家利用長春花植物的莖尖作為外植體，通過植物細胞培養生產長春新堿。下列相關敘述正確的是（ ）
A．長春新堿是植物產生的初生代謝物，不是植物生命活動所必需的
B．利用植物細胞工程獲得長春新堿的過程中，沒有體現細胞的全能性
C．用纖維素酶和果膠酶處理長春花的莖尖，以獲得單個細胞或細胞團
D．為避免雜菌污染，需要用酒精和鹽酸對長春花的莖尖進行消毒處理
7．黑脛病對甘藍型油菜的危害十分嚴重，黑芥能抗黑脛病，兩者不能直接雜交。為解決該問題，科研人員通過下圖所示過程獲得抗病品系。據圖分析，下列相關敘述正確的是（ ）
A．制備得到的原生質體可用染色法、滲透吸水法等進行活性鑒定
B．融合原生質體細胞壁的再生需要經過內質網的加工
C．過程③將融合的原生質體直接涂布接種于含黑脛病菌致病毒素的選擇培養基中
D．過程④獲得的抗病植株都能通過有性生殖獲得抗病子代植株
8．動物細胞培養時操作不當會造成“黑膠蟲”細菌的污染，該菌對氯霉素敏感。下列敘述正確的是（ ）
A．配制細胞培養基時，加氯霉素后，濕熱滅菌處理
B．考察“黑膠蟲”污染程度時，應取細胞培養液，直接涂布在平板上培養后計數
C．在培養過程中通常要通入5%的CO2，以維持培養液的pH
D．采用更換培養基、胰蛋白酶處理和分瓶培養等操作可清除“黑膠蟲”污染
9．線粒體置換技術是將妻子攜帶突變線粒體的卵子細胞核移植到去核的健康線粒體捐贈者卵胞中獲得的重構卵母細胞，與丈夫精子進行受精，從而獲得重構胚胎也就是通常說的“三親胚胎”，也被稱為“第四代試管嬰兒”。下列有關說法錯誤的是（ ）
A．第四代試管嬰兒可避免線粒體疾病
B．子宮對外來胚胎基本不發生免疫排斥反應是胚胎移植的生理學基礎
C．第四代試管嬰兒的培育還需要經歷早期胚胎培養和胚胎移植等技術
D．培育三親胚胎的過程中運用了核移植技術，屬于無性繁殖
10．AI胚胎分割技術是人工智能與生物技術結合的新興領域，旨在通過自動化、高精度的算法和操作提升胚胎分割的效率與成功率。下列有關胚胎分割的敘述錯誤的是（ ）
A．一般對培養到桑葚胚或囊胚階段的胚胎進行分割
B．均等分割的目的是避免影響分割后胚胎的恢復和發育
C．對囊胚期進行胚胎分割時可選滋養層細胞做性別鑒定
D．胚胎分割能提高胚胎的利用率，增加子代遺傳多樣性
11．豬因其生理特性、器官大小以及胚胎發育過程等方面與人類存在高度相似性，已成為“種植”人類器官極具潛力的動物模型。下圖表示我國科學家利用豬作為載體，培育可供人類移植使用的人源腎臟的相關流程示意圖。下列相關敘述錯誤的是（ ）
A．推測SIX1和SALL1兩種基因是豬腎臟發育必需的基因
B．重構胚需培養至桑葚胚或原腸胚才能植入子宮
C．注入人源干細胞的目的是使人源干細胞分裂分化產生人的器官
D．該實驗流程中涉及了動物細胞培養、核移植、胚胎移植等生物技術
12．某線性DNA分子含有5000個堿基對（bp），先用a酶切割，把得到的產物用b酶切割，得到的DNA片段大小如下表所示。a酶和b酶的識別序列和切割位點如下圖所示。下列有關說法錯誤的是（ ）
a酶切割產物（bp） b酶再次切割產物（bp）
2100；1400；1000；500 1900；200；800；600；1000；300；200
A．在該DNA分子中，a酶與b酶的識別序列均為3個
B．僅用b酶切割該DNA分子需要消耗6個水分子
C．a酶與b酶切出的黏性末端相互連接后的序列不可再被a酶切割
D．用a酶切割與線性DNA分子具有相同堿基序列的質粒，定能得到4種切割產物
13．大腸桿菌經溶菌酶和洗滌劑處理后，擬核DNA 就會纏繞在細胞壁碎片上，靜置一段時間，質粒分布在上清液中，利用上述原理可初步獲得質粒DNA。用三種限制酶處理提取的產物，電泳結果如圖所示。下列關于質粒的粗提取和鑒定的敘述，錯誤的是（ ）
A．DNA溶于NaCl溶液中，可用二苯胺試劑在沸水加熱條件下鑒定DNA
B．電泳鑒定DNA利用了DNA在電場中會向著它所帶電荷相反的電極移動的原理
C．用瓊脂糖凝膠電泳鑒定質粒，被染色的質粒還需要通過紫外燈照射才能看到結果
D．根據電泳結果，質粒上沒有限制酶I和II的切割位點，而有限制酶Ⅲ的切割位點
14．基因工程中的載體包括克隆載體和表達載體等。克隆載體主要用于基因克隆，可復制、擴增和保存插入其中的外源基因。表達載體是一種經過特殊設計的DNA分子，可使攜帶的外源基因在特定的宿主細胞中穩定表達。下列相關敘述正確的是（ ）
A．克隆載體必須具備的元件是復制原點、啟動子和終止子
B．表達載體中攜帶了調控外源基因表達的元件，但無須具備復制能力
C．質粒、動植物病毒、噬菌體均可以作為克隆載體或表達載體
D．克隆載體和表達載體中并不都含有標記基因
15. 乳腺生物反應器是通過轉基因技術，將外源基因導入動物（如牛、羊）基因組中，并使其在乳腺組織特異性表達，利用動物乳腺高效合成、分泌蛋白的能力，在乳汁中生產藥用蛋白或其他高價值產品的生物技術體系。下列說法錯誤的是（ ）
A．在構建基因表達載體時，要在外源基因序列上游加上能在乳腺中特異性表達的基因的啟動子
B．與利用轉基因大腸桿菌生產蛋白相比，乳腺生物反應器得到的蛋白活性更高
C．培育的轉基因動物體內，只有乳腺組織細胞中才含有外源基因
D．乳腺生物反應器具有產量高、成本低、產品質量好和易提取等優點
16. 天然β-淀粉酶耐熱性較差，難以滿足工業化生產需求。通過PCR對天然β-淀粉酶基因進行改造，將其導入大腸桿菌表達后，獲得了一種耐高溫的β-淀粉酶。與天然酶相比，改造后的酶在第476位發生了氨基酸替換，由天冬氨酸改變為天冬酰胺。下列敘述正確的是（ ）
A．蛋白質工程和基因工程的根本區別是操作對象的差異
B．根據新的氨基酸序列只能推測出一種對應的基因編碼序列
C．PCR技術在此過程中實現了對β-淀粉酶基因的定點突變
D．自然界中所有的酶都可以通過蛋白質工程進行改造
17．科學是一把雙刃劍，只有合理應用于生產生活才能造福全人類，下列關于生物技術的安全性及倫理問題的論述不正確的是（ ）
A．基因編輯技術可用于疾病預防領域研究和設計完美嬰兒，以實現優生優育
B．對流感病毒基因進行改造可能會引發大規模流行性疾病
C．“只要有證據表明產品有害，就應該禁止轉基因技術的應用”不屬于理性看待轉基因技術
D．種植轉基因植物可能會因基因擴散而影響野生植物的遺傳多樣性
18．為了培育出抗病毒的優良玉米，研究人員利用基因工程技術進行了相關實驗，其中抗病毒基因、P載體及相關限制酶的切割位點如圖所示。已知P載體上含有綠色熒光蛋白基因（GFP）和抗性基因Kanr/Neor，一般情況下，抗性基因Kanr/Neor在真核細胞中表達時，細胞具有新霉素抗性；在原核細胞中表達時，細胞具有卡那霉素抗性。下列說法錯誤的是（ ）
A．據圖分析，利用PCR技術擴增抗病毒基因時，應選擇的引物是引物1和引物4
B．將抗病毒基因與P載體構建成重組質粒時，不可選擇限制酶HindⅢ和EcoRⅠ
C．構建的基因表達載體中，目的基因轉錄時的模板鏈是A鏈
D．在篩選轉化成功的玉米細胞時，應在培養基中添加新霉素
二、非選擇題：共4小題，共64分
19．（14分）近年來，水環境中發現的不同程度的抗生素殘留，不僅威脅水生生物的生存，還會損害微生物的生態平衡。氧氟沙星(OFL)(C18H20FN3O4)是一種人工合成的廣譜抗菌的氟喹諾酮類藥物，某實驗小組成功地從廢水環境樣品中分離得到能降解OFL的菌株X。篩選分離的操作過程如圖所示。回答下列問題：
(1)利用細菌去除廢水中的抗生素，這種方法的不足之處是________________，因此需要篩選能降解抗生素菌株。
(2)篩選能夠降解OFL的菌株時，富集培養基中需要加入____________作為唯一碳源或氮源。用于培養菌株X的固體培養基含有水、蛋白胨、酵母提取物和瓊脂等成分，其中蛋白胨主要為菌株X提供碳源、氮源和____________。
(3)過程Ⅱ、Ⅲ所利用的接種方法是_________。過程Ⅱ中的總稀釋次數為8次，在過程Ⅲ中，可以每隔24 h統計一次菌落的數目，選取__________時的記錄作為結果，三個培養基中長出的菌落數量分別是145、163、154，故推測A中細菌的數量為________個·mL-1。
(4)該實驗小組欲進一步探究初始OFL濃度對菌株X降解OFL能力的影響，請補充實驗思路：配制等量的含一系列濃度梯度的OFL的液體培養基，將培養基滅菌后，在培養基中接種_______________________________________________，計算出OFL去除率。
20．（16分）雙特異性抗體具有兩個不同的抗原結合位點，能夠同時結合兩種不同的抗原。某些癌細胞表面有高表達的銀蛋白PSMA，CD28是T細胞表面受體，T細胞的有效激活依賴于兩個條件：一是CD28接收激活信號，二是實現癌細胞與T細胞的聚集。圖甲為科研人員嘗試構建以 為抗原的雙特異性抗體；圖乙為該雙特異性抗體的結構及作用機理圖，請據圖分析：
(1)相較于植物體細胞雜交技術中所用的誘導原生質體融合的方法，圖甲中所示的誘導融合所特有的是 法。
(2)為得到雜交瘤細胞A/B需進行兩次篩選。
①第一次篩選目的是得到雜交瘤細胞。核苷酸合成有兩個途徑，如圖丙所示。骨髓瘤細胞只能利用全合成途徑進行無限增殖；B淋巴細胞兩種途徑都能進行。現用加入H、A、T三種物質的“HAT培養基”來篩選未融合的或兩兩融合的細胞時，其中 (選填細胞的簡寫名稱“瘤細胞”，“B細胞”，“瘤瘤細胞”，“BB 細胞”，“B瘤細胞”)會因無法進行圖中途徑而在HAT 培養基上不能增殖。雜交瘤細胞在“HAT 培養基”上可以通過 途徑合成核酸。
②將第一次篩選獲得的細胞進行 和 ，經過多次篩選，就可以獲得 。
(3)以 PSMA×CD28 為抗原的雙特異性抗體，通過與 CD28 結合，為 T 細胞激活提供了關鍵的共刺激信號。結合題干，據圖分析，該雙特異性抗體協助殺傷癌細胞的機理是 。
21. （16分）人血清白蛋白（HSA）是由肝臟細胞合成的，具有重要的醫用價值，原本只能從血清中提取，現利用基因工程的方法生產HSA。圖1為HSA基因（僅列出部分序列），圖2為構建的基因表達載體，甲、乙、丙表示引物，其堿基分別與相近的核苷酸鏈互補配對。
（1）利用PCR擴增技術獲取HSA基因，在PCR體系中，加入的dNTP可提供 ，耐高溫的DNA聚合酶需要 激活，添加引物的序列不能過短，否則會導致其特異性 (填“降低”或“升高”)。為檢測目的基因在PCR擴增時是否發生了基因突變，可對PCR產物進行 （填“電泳”或“測序”）。
（2）根據HSA基因的已知序列，應選用引物________進行PCR擴增。
A．5'-CTGTATGCG-3' B．5'-TACGCGTTA-3'
C．5'-GACATACGC-3' D．5'-ATGCGCAAT-3'
經過4輪擴增，擴增產物中含有的符合要求的HSA基因的數量為________。
（3）為了檢測HSA基因是否正確連接在質粒上，應選擇圖2中的引物_______對構建的載體進行PCR擴增，理論上出現________bp的條帶表明HSA正確連接在了載體上。
22．（18分）L-精氨酸作為一種高附加值氨基酸，在醫藥、食品等領域具有廣泛應用。我國科研人員以大腸桿菌（對抗生素敏感）為材料，構建了能快速檢測L-精氨酸產能的生物傳感器。生物傳感器的原理及其基因表達載體如圖1所示。
回答下列問題：
(1)培養生物傳感器需將 作為目的基因導入天然大腸桿菌，將基因表達載體導入大腸桿菌的方法是 ，需將菌株接種在含有 的培養基進行初步篩選，獲得重組菌株WT-1、WT-2。
(2)將WT-1、WT-2分別接種在含有30g/L的L-精氨酸培養基上，定期檢測菌體的熒光強度，結果如圖2所示：
①根據生物傳感器的原理分析，啟動子 （填“A”“B”或“A和B”）屬于誘導型啟動子。
②重組菌株 （填“WT-1”或“WT-2”）更適合作為生物傳感器，理由是 。
(3)研究發現，胞內L-精氨酸濃度過低時，無法激活熒光蛋白基因的表達。據圖1a提出改造基因表達載體以提高生物傳感器靈敏度的一項措施： 。
(4)研究表明，R基因編碼的蛋白質單獨存在時能抑制C基因的表達，也能與氨芐青霉素結合形成信號分子促進C基因的表達，兩者均通過與啟動子Pc結合實現對C基因表達的調控。現需設計出檢測氨芐青霉素的生物傳感器，請基于圖1a提出改造方案： 。2024-2025學年度下學期武漢市重點中學5G聯合體期末考試
高二生物參考答案（含評分標準）
一、選擇題（每小題2分，共36分）
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.
B D A C D B A C D
10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18.
D B D D C C C A B
二 、非選擇題（共4小題，共64）
19. （共14分，每空2分）
（1）抗生素會抑制細菌的生長繁殖　
（2）OFL(或氧氟沙星)　 維生素　
（3）稀釋涂布平板法 　菌落數目穩定　 1.54×1011
（4）等量的菌株X，培養相同時間后，檢測OFL的降解程度（答出“等量的菌株X”得1分，未強調“等量”不得分；答出“檢測OFL的降解程度”或“檢測培養基中剩余OFL的濃度”得1分）
20. （共16分，除標注外每空2分）
（1）滅活病毒誘導
（2）①瘤細胞、瘤瘤細胞（答全得2分） 補救合成
②克隆化培養 抗體檢測 能產生所需抗體的雜交瘤細胞（答“特異性抗體”不得分，答“能產生抗銀蛋白PSMA或抗CD28抗體的雜交瘤細胞”得2分）
（3）該雙特異性抗體能同時結合PSMA和CD28（1分），使CD28接收激活信號（1分），又實現了癌細胞與T細胞的聚集（1分），最終激活T細胞殺傷癌細胞（1分）
21. （共16分，每空2分）
（1）原料和能量（答出原料即可得2分） Mg2+ 降低 測序
（2）AD（答全得2分） 8
（3）乙、丙（答全得2分） 350
22. （共18分，除標注外每空2分）
（1）arg基因和綠色熒光蛋白基因（答全得2分） Ca 處理法 四環素
（2）B WT-1 在相同條件下，WT-1的熒光強度更高，能更靈敏地反映L-精氨酸的存在和濃度（只要答出WT-1較WT-2能更早更準確檢測出L-精氨酸的存在和濃度即可得2分）
（3）增加啟動子B的數量（或將啟動子B增強）
（4）將熒光蛋白基因與啟動子Pc連接（或答出把啟動子B替換為啟動子Pc即可得2分）
，同時導入R基因（或答出用R基因替換arg基因即可得2分）

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