資源簡介

生物實驗中試劑的作用及實驗方法總結
一．化學物質的檢測方法
①淀粉——碘液 (藍色)
②還原性糖——斐林試劑班氏試劑(磚紅色)
③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復然
⑥蛋白質——被蛋白酶水解 、雙縮脲試劑(紫紅色)
⑦脂肪——蘇丹Ⅲ染液 (橘黃色）、蘇丹Ⅳ染液 (紅色）
⑧DNA——二苯胺(藍色)
⑨染色體——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液
二．實驗條件的控制方法
1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
3、除去容器中CO2——NaOH溶液
4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環境
5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱
6、除去光合對呼吸干擾——給植株遮光
7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光
8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉
9、線粒體提取——細胞勻漿離心
10、骨無機鹽的除去——鹽酸溶液
11、滅菌方法——培養基用高壓蒸汽滅菌；接種環用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒；實驗室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌；整個過程都在實驗室無菌區或酒精燈旁進行。
三．實驗結果的顯示方法
①光合速度——O2釋放量或CO2吸收量或有機物生成量
◆水生植物可依氣泡的產生量或產生速率；
◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時間內上浮的葉片數目；
◆植物體上的葉片可依指示劑（如碘液）處理后葉片顏色深淺。
②呼吸速度——O2吸收量或CO2釋放量或有機物消耗量
③原子或分子轉移途徑——放射性同位素示蹤
④細胞液濃度大小——質壁分離
⑤植物細胞是否死亡——質壁分離
⑥甲狀腺激素—動物耗氧量,發育速度等
⑦生長激素—生長速度(體重、體長變化)
⑧胰島素作用—動物活動狀態
⑨菌量—菌落數，亞甲基藍褪色程度
四．實驗中控制溫度的方法
1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱
2、酶促反應——水浴保溫
3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、
4、細胞和組織培養以及微生物培養——恒溫箱培養
五、實驗中常用器材和藥品的使用
1、NaOH：用于吸收CO2或改變溶液的pH
2、Ca(OH)2：鑒定CO2
3、CaCl2提高細菌細胞壁的通透性
4、HCl：解離或改變溶液的pH
5、NaHCO3：提供CO2
6、NaCl：配制生理鹽水或用于提取DNA
7、瓊脂：激素或其他物質的載體或培養基的凝固劑
8、亞甲基藍：用于檢測污水的細菌含量
9、酒精：用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液
10、蔗糖：測定植物細胞液濃度或觀察質壁分離和復原、作為碳源和能源物質
11、濾紙：過濾或紙層析
12、紗布、尼龍布：過濾，遮光
13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色
14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑
六、一些常見的實驗方法
⑴、根據顏色來確定某種物質的存在：
淀粉+I2(藍色)；還原性糖+斐林試劑(磚紅色)；脂肪+蘇丹Ⅲ(橘黃)或+蘇丹Ⅳ(紅色)；蛋白質+雙縮脲試劑(紫色)；
大腸桿菌+伊紅和美藍(菌落為深紫色，有金屬光澤)
⑵、用顏色標記法來確定原腸胚三個胚層的分化情況。
⑶、用熒光標記法來證明細胞膜具有一定的流動性
⑷、同位素示蹤法：光合作用產生氧氣的來源； 光合作用中二氧化碳的去向；
噬菌體侵染細菌實驗證明DNA是遺傳物質，蛋白質不是遺傳物質；
DNA的復制是半保留復制。
⑸、確定某種元素為植物生長必需的元素的方法:
水培法(完全培養液與缺素完全培養液對照)
⑹、獲得無籽果實的方法:
用適宜濃度的生長素處理花蕾期已去雄的子房，如無籽蕃茄、
誘導染色體變異，如無籽西瓜。
⑺、確定某種激素功能的方法：
飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。
⑻、確定傳入、傳出神經的功能：
刺激+觀察效應器的反應或測定神經上的電位變化。
⑼、植物雜交的方法
雌雄同花：花蕾期去雄+套袋 +開花期人工授粉+套袋
雌雄異花：花蕾期雌花套袋+開花期人工授粉+套袋
⑽、確定某一顯性個體基因型的方法：
測交； 該顯性個體自交。
⑾、確定某一性狀為顯性性狀或隱性性狀的方法：
具有一對相對性狀的純合體的雜交
自交，觀察后代是否有性狀分離。
⑿、確定某一個體是否具有抗性基因的方法：
確定小麥是否具有抗銹病基因，用銹病菌去侵染，一段時間后，觀察有無銹斑出現。
⒀、鑒定血型的方法：
用標準血清與待測血型混合，在顯微鏡下觀察血液的凝集情況。
⒁、育種的方法：
雜交育種；人工誘變育種；單倍體育種；基因工程育種；細胞工程育種;多倍體育種等。
⒂、測定種群密度的方法：樣方法； 標志重捕法
⒃、生態瓶的制作方法；瓶必須透明，且封閉
⒄、分離微生物的方法：
平板劃線法；用選擇培養基培養(如：圓褐固氮菌的分離，金黃色葡萄球菌的分離，細菌和酵母菌的分離)
⒅、測定微生物群體生長的方法：
測定細菌的數目---顯微計數
測定細菌的重量---取一定體積的培養基，經離心分離，反復洗滌后，稱濕重，或烘干后稱干重。
七、實驗研究方法
1、顯微觀察法 如觀察植物細胞有絲分裂的實驗，觀察植物細胞質壁分離和復原的實驗。
2、觀察法 觀察微生物的外在性狀和表現等，如觀察注射了甲狀腺激素的小狗的活動狀況，觀察動物的毛色和植物花色的遺傳實驗等。
3、同位素示蹤法 如噬菌體侵染細菌的實驗，用18O和14C追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉移途徑的實驗等。
4、加法創意 如用飼喂法研究甲狀腺激素的實驗、用注射法研究生長激素的實驗，用移植法研究性激素的實驗等。
5、減法創意 如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素、生長激素的實驗，雌蕊授粉后除去發育著的種子實驗等。
6、雜交實驗法 如孟德爾發現遺傳定律的植物雜交、測交的實驗，小麥的雜交實驗等。
7、化學分析法 如番茄和水稻對Ca 和Si選擇吸收的實驗，葉綠體中色素的提取和分離實驗等。
8、理論分析法 如大小草履蟲競爭的實驗，植物根向地生長、莖背地生長的實驗，植物向光性的實驗等。
9、模擬實驗法 如滲透作用的實驗裝置，分離定律的模擬實驗等。
七、實驗技術
1、光學顯微鏡的使用
適用于觀察生物的微觀結構，如細胞的結構，包括光鏡下可看到的各種細胞器。
2、臨時裝片、切片和涂片的制作技術
適用于顯微觀察，凡需在顯微鏡下觀察的生物材料，必須先制成臨時裝片、切片或涂片。如“觀察植物細胞的質壁分離和復原的實驗”中要制作洋蔥表皮的臨時裝片，在生物組織中脂肪的鑒定中要制作花生種子的切片等。
3、研磨和過濾技術
適用于從生物組織中提取物質，如酶、色素等。研磨時要先將生物材料切碎，然后加入研磨劑〈常用SiO2〉、提取液及其他必要物質，充分研磨后，往往要進行過濾，以除去濾渣，所用過濾器具則根據需要或或根據試題中提供的器材加以選用，如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。
4、解離技術
用于破壞細胞壁，分散植物細胞，制作臨時裝片。
5、恒溫技術
適用于有酶參加的生化反應，一般用水浴或恒溫箱。根據題目要求選用。
6、紙層析技術
適用于溶液中物質分離。重要步驟包括制備濾紙條、畫濾液細線、層析分離。
7、根尖培養技術 觀察植物根尖有絲分裂的實驗
8、溶液培養法 探究植物必需的礦質元素的實驗，〈拓展——微生物生長因子的判斷的實驗〉；植物的無土栽培〈注意溶液濃度和溶解氧〉。

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