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選擇性必修三第一章第2節(jié)
微生物選擇培養(yǎng)和計(jì)數(shù)導(dǎo)學(xué)案
【學(xué)習(xí)目標(biāo)】
1.舉例說明通過調(diào)整培養(yǎng)基的配方可有目的地培養(yǎng)某種微生物。
2概述稀釋涂布平板法和顯微鏡計(jì)數(shù)法是測定微生物數(shù)量的常用方法。
3.討論土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的方法。
【重點(diǎn)難點(diǎn)】
土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)的方法。
【預(yù)習(xí)案】
【預(yù)習(xí)指導(dǎo)】
通讀教材（16頁-21頁）一遍，再依據(jù)導(dǎo)學(xué)案問題提示，進(jìn)一步研讀教材一遍，并用鉛筆標(biāo)記和勾畫問題的答案。
2.在研讀課本的基礎(chǔ)上，獨(dú)立填寫預(yù)習(xí)案，規(guī)范書寫，將疑問寫在疑問欄。
一、選擇培養(yǎng)基
1．水生棲熱菌的篩選：水生棲熱菌能在______ ℃的高溫條件下生存，而絕大多數(shù)微生物在此條件下________。
2．選擇培養(yǎng)基：在微生物學(xué)中，允許______的微生物生長，同時抑制或阻止________微生物生長的培養(yǎng)基。
二、微生物的選擇培養(yǎng)
1．分解尿素的細(xì)菌的分離
分解尿素的細(xì)菌能合成__酶，該酶能催化尿素分解產(chǎn)生___，以此作為細(xì)菌生長的氮源。要將土壤稀釋液中能分解尿素的細(xì)菌分離出來，培養(yǎng)基的配方設(shè)計(jì)思路是__________________________________________________________。
2．稀釋涂布平板法分離分解尿素的細(xì)菌
土壤中細(xì)菌的數(shù)量龐大，要想得到能分解尿素的細(xì)菌的純培養(yǎng)物，必須要對土樣進(jìn)行_______，然后再將菌液涂布到制備好的____________，操作過程如下：
采集土樣→將10 g土樣加入盛有90 mL_____的錐形瓶中，充分___。取1 mL上清液加入盛有__ mL無菌水的試管中，依次______→取___ mL菌液，滴加到________表面→將涂布器浸在盛有___的燒杯中→將涂布器放在___上灼燒，待酒精燃盡、涂布器____后，再進(jìn)行涂布→用涂布器將菌液均勻地涂布在______表面。涂布時可轉(zhuǎn)動_______，使涂布均勻→涂布的菌液被培養(yǎng)基吸收后，將平板___，放入_____ ℃的恒溫箱中培養(yǎng)1～2 d。
三、微生物的數(shù)量測定
1．稀釋涂布平板法
(1)原理：當(dāng)樣品的_____足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個單菌落，來源于樣品稀釋液中的_______。通過___________，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)為__________的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。
(2)注意問題：統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目__。這是因?yàn)開____________。
2．顯微鏡直接計(jì)數(shù)法
(1)方法：利用特定的__________或_____________，在顯微鏡下觀察、計(jì)數(shù)。
(2)注意問題：統(tǒng)計(jì)的結(jié)果一般是_________和________的總和。
【我的疑問】（請把你的疑問寫在下面）



【預(yù)習(xí)自測】
1．下列關(guān)于產(chǎn)纖維素酶菌分離及運(yùn)用的敘述，不合理的是
A．篩選培養(yǎng)基中應(yīng)含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生長營養(yǎng)
B．可從富含腐殖質(zhì)的林下土壤中篩選產(chǎn)纖維素酶菌
C．在分離平板上長出的菌落需進(jìn)一步確定其產(chǎn)纖維素酶的能力
D．用產(chǎn)纖維素酶菌發(fā)酵處理農(nóng)作物秸稈可提高其飼用價值
2．下列有關(guān)土壤中微生物的分離與計(jì)數(shù)的說法中,錯誤的是
A．因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量不同，所以，為獲得不同類型的微生物要按不同的稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離
B．測定土壤中細(xì)菌的總量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同
C．如果得到了3個或3個以上菌落數(shù)目在30~300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)
D．牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯小于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細(xì)菌菌落
3．下圖中甲是稀釋涂布平板法中的部分操作，乙是平板劃線法的操作結(jié)果。下列敘述中錯誤的是
A．甲中涂布前要將涂布器灼燒，冷卻后才能涂菌液
B．甲、乙操作中只有甲可以用于微生物的計(jì)數(shù)
C．乙中接種環(huán)需要灼燒5次
D．乙中的連續(xù)劃線的起點(diǎn)是上一次劃線的末端
4．下列有關(guān)微生物培養(yǎng)的敘述，正確的是
A．培養(yǎng)過微生物的培養(yǎng)基經(jīng)滅菌后仍可用于培養(yǎng)微生物
B．涂布接種時，要待涂布器上酒精燃盡后冷卻再使用
C．對培養(yǎng)皿進(jìn)行編號或?qū)N進(jìn)行標(biāo)注時，應(yīng)使用記號筆在皿蓋標(biāo)記便于觀察
D．長期保存菌種時，可以采用甘油管藏的方法，放在 4℃冰箱中保存
5．稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯誤的是
A．操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋
B．需將不同稀釋濃度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面
C．不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落
D．操作過程中對培養(yǎng)基和涂布器等均需進(jìn)行嚴(yán)格滅菌處理
6．下列有關(guān)細(xì)菌培養(yǎng)的敘述，正確的是（ ）
A．在瓊脂固體培養(yǎng)基上長出的單個菌落含有多種細(xì)菌
B．在培養(yǎng)基中加入青霉素可抑制真菌促進(jìn)破傷風(fēng)桿菌的生長
C．向液體培養(yǎng)基中通入空氣能促進(jìn)厭氧菌的生長
D．可用無氮培養(yǎng)基培養(yǎng)自生固氮菌
7．在做分離分解尿素的細(xì)菌實(shí)驗(yàn)時，甲同學(xué)從對應(yīng)106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。下列有關(guān)敘述，出現(xiàn)科學(xué)性錯誤的是
A．甲同學(xué)出現(xiàn)這種結(jié)果的原因可能是由于土樣不同，也可能是操作過程出了問題
B．可以將甲同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng)作為空白對照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染
C．將其他同學(xué)用與甲同學(xué)一樣的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與甲同學(xué)一致，則可以證明甲同學(xué)無誤
D．B、C選項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)思路都遵循了實(shí)驗(yàn)的對照原則
8．物質(zhì)W是一種含氮有機(jī)物，W在培養(yǎng)基中達(dá)到一定量時培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某小組欲從土壤中篩選出能降解W的細(xì)菌，結(jié)果如圖。下列說法錯誤的是（　　）
A．透明圈的形成是因?yàn)閃物質(zhì)被分解
B．所用的選擇培養(yǎng)基應(yīng)該是以物質(zhì)W為唯一氮源
C．甲菌落中的細(xì)菌可能是利用空氣中的氮?dú)庾鳛榈?
D．乙菌落中的細(xì)菌都能降解W，不需要進(jìn)一步純化
9．下列關(guān)于微生物實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的操作錯誤的是（ ）
A．統(tǒng)計(jì)樣品中的活菌一般使用平板劃線法
B．測定培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量，可選用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)
C．土壤中纖維素分解菌的篩選流程中“選擇培養(yǎng)”是必不可少的
D．消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又避免消毒劑對細(xì)胞的傷害
10．某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，①為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是（ ）
A．圖中②培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源
B．如果要測定②中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法
C．若圖中④為對照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)含除苯酚外的其他碳源
D．⑥上菌落分布均勻，是用平板劃線法獲得的單菌落
參考答案
1．A
2．D
3．C
4．B
5．C
6．D
7．D
8．D
9．A
10．D

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